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产志贺毒素大肠埃希菌的分子生物学鉴定和耐药性分析1李咏梅，李凡吉林大学基础医学院病原生物学教研室, 1320011E-mail：mayflower380@摘 要：本文采用多重PCR（multiplex PCR, mPCR）法对产志贺毒素大肠埃希菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC）分离株进行毒力基因的分子生物学鉴定；用WHO 推荐的K-B法对分离株进行抗生素的敏感性测定，以了解stx1、stx2、eaeA、hlyA 4种毒力基因的分布情况，以及分离株对18种抗生素的敏感性。
结果显示产志贺毒素的大肠埃希菌共有46株，其中两种毒素均产生的有22株（47.8%）；单纯产生stx1的有16株（36.9%），stx2的有8株（17.4%）；四种毒力基因均存在的有19株（41.3%），血清型为O157:H7，而非O157:H7血清型的菌株（23/46）中，4种毒力基因同时存在的仅有3株（6.6%），但有13株（56.9%）hlyA基因阳性。
全部STEC对复方新诺明耐药，对链霉素耐药率为28.3%，氨苄西林为30.4%，红霉素为69.6%，而且有5株对至少4种以上抗生素多重耐药，耐药谱为复方新诺明-链霉素-红霉素-氨苄西林。
非O157型 STEC耐药菌次为122， 而O157 型为63。
实验结果证明mPCR法可以快速检测STEC特征性毒力基因，以判定其致病性能。
非O157型STEC对抗生素较易形成耐药性。
关键词：STEC；鉴定; 耐药性1．引言STEC是世界上人类食物中毒的重要致病因子，也是引起大规模食源性食物中毒的主要病原菌[1]。
STEC中有100余个血清型的致病性大肠杆菌可以致病，主要血清型是O157H7，可引起非出血性腹泻，出血性结肠炎（haemorrhagic colitis, HC），溶血性尿毒综合症(haemolytic uraemic syndrome, HUC)。
我院产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析(一)摘要]目的：了解我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药情况，指导临床合理用药。
方法：对我院2005年7月～2007年12月的临床标本分离的大肠埃希菌218株，肺炎克雷伯菌195株，采用纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测，用K-B法做药敏试验。
结果：在413株菌中共检出产ESBLs菌株106株，总检出率为25.7%；产ESBLs 细菌对所有青霉素类抗生素产生耐药，对三代头孢类抗生素耐药率也达到90%以上，对磺胺类、喹诺酮类耐药率为50%～90%，对亚胺培南均敏感。
结论：产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌逐年上升，应根据药敏结果结合临床合理使用抗生素。
关键词]ESBLs；大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐药性Abstract]Objective：Tostudythedistributionandcharacteristicaboutantibioticresistanceofextend ed-s pectrumβ-lactamases(ESBLs)producingKlebsiellapneumoniaeandEsche richiacoliforguidingtheclinicaldrugusing.Methods：218isolatesofE.coliand195isolatesofK.pneumoniaestrainswerecollectedfro mJuly2005toDecember2007.ESBLs-producingisolatesweredetectedbyinhibi tor-potentiateddiscdiffusiontest.Thebacterialsusceptibilitytestingwasdone byK-Bargrdiffusionmethod.Results：Among413E.coliandK.pneumoniaeisolates,106wereESBLs-producingstrains ,theratiowas25.7%.AlloftheESBLsproducingstrainwereresistanttopenicillins,theresistantrateof3rdcephalosporinwereabove90%,theresisitantrateofsulfo namidesandquinoloneswere50%～90%,allisolatesweresusceptbletoimipenem.Conclusion:TheprevalenceofES BLs-producingE.coliandK.pneumoniaeseemsincreasing,itisveryimportantto useantibioticsreasonablyandadopteffcitivemeasureinclinical. Keywords]ESBLs;Escherichiacoli;Klebsiellapneumoniae;Antibioticresistance 目前，随着三代抗生素的应用，产ESBLs的细菌越来越多，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是最常见的产ESBLs细菌。
・７２４・ 检验医学与临床２０１３年３月第１０卷第６期Ｌａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｍａｒｃｈ ２０１３，Ｖｏ１．１０，Ｎｏ．６ 种ＧＧＴ试剂组成的检测系统间的系统误差能为临床所接受。 当实验室用两种以上的试剂检测同一项目或者一种试剂 替代另一种试剂时，应用ＮＣＣＬＳ ＥＰ９一Ａ２文件对不同试剂测 定同一项目进行可比性及偏倚评估研究＿３ ］，以实现实验室内 同一患者用不同生化试剂所测得结果具有可比性。 参考文献 ［１］ＮＣＣＬＳ．Ｍｅｔｈｏｄ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ｂｉａｓ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ Ｐａｔｉｅｎｔ Ｓａｍｐｌｅｓ；ＮＣＣＬＳ Ｄｏｃｕｍｅｎｔ ＥＰ９～Ａ２［Ｍ］．Ｗａｙｎｅ， ＰＡ，ＵＳＡ：ＮＣＣＬＳ，２００２． ［２３张秀明，庄俊华，徐宁．不同检测系统４种心肌酶测定结 果的比对与临床可接受性评价［Ｊ］．临床检验杂志，２００５， ２３（６）：４０４—４Ｏ７． ［３］ Ｉ－４］ ［５］ ［６］ 林向阳，王忠永，周武，等．不同检测系统甲胎蛋白测定结 果的可比性及偏倚评估研究［Ｊ］．中华检验医学杂志， ２００８，３１（８）：９０８～９０９． 刘月芳，刘正洁．国产与进口生化试剂的分析和比较ＥＪ］． 中国医药导刊，２００９，１１（２）：２８６—２８７． 王治国．临床检验质量控制技术［Ｍ］．北京：人民卫生出 版社，２００４． 邱玲，程歆琦，刘荔，等．多台生化分析仪多项目同时进行 比对的实验研究设计及应用［Ｊ］．中华检验医学杂志， ２００７，３０（９）：１００１—１００４．
（收稿日期：２０１２—０９—２Ｏ修回日期：２０１３－０１－０４）
大肠埃希菌１ ２１２株临床分布及耐药性分析 黄慧艳，刘春明，马兴璇，唐石伏，朱胜波，覃夏青（广西壮族自治区柳州市中医院检验科 ５４５００１） 【摘要】 目的 了解该院２００８￣２０１０年大肠埃希茵临床分布特征及耐药性变迁，为其院内、外感染控制及临 床合理用药提供科学依据。方法 按照《全国临床检验操作规程》第３版临床微生物标本收集方法，２００８￣２０１０年 临床科室送检各类细茵培养标本３２ ５３１份，分离出１ ２１２株大肠埃希菌，按统一的方法和判断标准进行药敏试验。 结果 大肠埃希茵在尿、痰标本中检出率高；该茵广泛分布于院内各科室，以门诊、呼吸内科、重症监护室（ＩＣＵ）检 出构成比高；产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌对常用的青霉素类、三代头孢菌素、氟喹诺酮类、复方磺胺甲嗯唑耐药率较高，呈 逐年上升趋势；对美洛培南、呋喃妥因、磷霉素、哌拉西林一他唑巴坦耐药率较低，但呈逐年上升趋势。结论 大肠埃 希茵广泛分布于院内各科室，产超广谱８一内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）大肠埃希茵检出率逐年升高，对多数抗茵药物耐药，临 床治疗应根据药敏试验结果合理使用抗茵药物。 【关键词】 大肠埃希菌； 超广谱Ｂ一内酰胺酶； 耐药性 ＤＯＩ：ｌ０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－９４５５．２０１３．０６．０４４ 文献标志码：Ｂ 文章编号：１６７２—９４５５（２０１３）０６—０７２４—０３
