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+采集发育中后期及成熟种子并用FAA 固定保存。
用滑走切片机冰冻切片法制片，爱尔新蓝一番红染色，甘油胶封藏。
具体组织化学方法：（1）用氯化汞一溴酚蓝鉴定蛋白质。
（2）高碘酸一锡夫试剂鉴定多糖。
（3）碘一碘化钾鉴定淀粉。
（4）苏丹黑B鉴定脂类物质。
（5）PAS法进行可溶性糖鉴定。
（6）含浓硫酸或高氯酸的显色剂能使人参皂甙产生从淡红到紫红的系列颜色反应=颜色的深浅与人参皂甙的含量成正相关![绞股蓝龙须茶的人参皂甙组织定位及皂甙含量的季节变化8-10]（7）组织化学方法冰冻切片法P将干燥的龙须茶在40温水中浸泡0.5小时，取顶芽下第2`3节的茎和叶投入醋酸铅饱和水溶液中处理24小时，Leicac-CM1850冷冻切片机冰冻切片,厚度30um。
组织化学定位：以等量的5％香草醛－冰醋酸和高氯酸混合试剂对冰冻切片显色，临时装片。
Leica－DMLB显微镜观察照相。
(8)组织化学分析结果表明，其分泌细胞团经5％NaOH水溶液处理，由黑色或红色变成绿色，而分泌囊则未变色；分泌囊经苏丹黑染色，变成灰黑色，而分泌细胞团不变色，说明分泌细胞团含金丝桃素类物质，而分泌囊则含挥发油。
Some methods of foreign papers as follows.（1）The various plant materials were treated with Toluidin Blue as a general purpose stain (O'Brien and McCully,1981), and with the following histochemical stains : 各种植物用Toluidin Blue 作为一个总体的染色,具体的组化反应见以下:（2）lipids, Alkanna tincture (Faure, 1914); 安娜酊剂鉴定脂类.（3）pectic substances果胶物质, Ruthenium Red (Jensen, 1962)钌红鉴定果胶类物质; essential oils, Sudan III with glacial acetic acid as control (Johansen, 1940); 冰醋酸的Sudan三溶液作为一个控制鉴定挥发油.（4）alkaloids, Wagner reagent (Furr and Mahlberg, 1981), Dragendorff reagent (Yoder and Mahlberg, 1976), 1% picricacid(Faure, 1914), Phosphomolybdic acid (Faure, 1914) and Iodine-potassium iodide solution (Lugol: Johansen, 1940).All histochemical stains were matched by controls.（5）Toluidine Blue (O'Brien and McCully,1981) as a generic dye for DNA, cytoplasm and some components of the cell wall; 甲苯氨蓝作为一般的染料鉴定DNA,细胞质和一些细胞壁的成分.（6）PAS (O'Brien and McCully,1981) for non-cellulosic polysaccharides.PAS反应鉴定非纤维素多糖.（7）Alkanna tincture(Faure, 1914) and Nile blue (Cain, 1947) for total lipids;安娜酊剂和尼罗兰鉴定总的脂类或油脂.（8）Sudan III with glacial acetic acid as a control (Johansen,1940) and Nadi reagent (David and Carde, 1964) for essential oils;冰醋酸的苏丹三作为控制,Nadi reagent鉴定挥发油.（9）Nadi reagent (David and Carde, 1964) for resins;（10）Wagner and Dittmar reagents (Furr and Mahlberg,1981) and iodine iodide solution (Lugol) (Johansen, 1940) for alkaloids;（11）potassium bichromate (Faure, 1914) for tannins; 重铬酸钾鉴定丹宁.（12）Dela®eld hematoxylin (Faure, 1914) and Ruthe-nium Red (Jensen, 1962) for pectic-like substances类似果胶的物质;（13）anti-mony trichloride (Hardman and Sofowora, 1972) for steroids; 三氯化锑鉴定类固醇,(14)brilliant blue Coomassie R250 (Fisher, 1968) for proteins; 库码西R250亮兰鉴定蛋白质.（15）concentrated sulfuric acid (Geissmann and Gri n, 1971) for sesquiterpene lactones.浓硫酸鉴定蓓半萜内酯.（16）分根、根茎、茎、叶四部分进行冰冻切片；于横切面上滴加新配制的99 乙醇一硫酸混合液(1：1)在显色反应l0～30rain之间，以显微镜观察颜色变化。
组织化学技术切片染色方法可以显示不同细胞和组织形态，以及细胞和组织中某些化学成分含量的变化。
一、染色的目的任何冰冻切片、石蜡切片等如果不经过染色，在显微镜下只能看到细胞及其它组织成分的轮廓，即使由于组织内部各种物质的折射指数不同，从光线的明暗上能观察到一些组织结构，但也是极其简单有限的，远不能满足观察和借以诊断的目的。
染色的目的，是将染料配制成溶液，将组织切片浸入染色剂内，经过一定的时间，使组织或细胞及其他异常的成分染上不同深浅的颜色，产生不同的折射率，便于在光学显微镜下进行观察。
因此，染色在组织形态学，特别是病理形态诊断、科研和教学工作中，都具有非常重要的意义和实用价值。
二、染色的原理染色就是染色剂和组织细胞相结合的过程。
有关两者结合的原理，有不同的学说，一般认为其过程是化学反应和物理现象。
（一）染色的化学反应在组织细胞内，一般有酸性和碱性区别，酸性物质部分能与溶液中的阳离子结合，碱性物质部分能与溶液中的阴离子结合。
在细胞核中，特别是核内染色质，一般有酸性物质组成（其中主要有核酸），故与碱性染料的亲和力很强，易于染色，以氧化苏木素代表的碱性染料中有染色作用的是阳离子。
在细胞浆中则由碱性物质组成，所以胞浆与酸性染料有较强的亲和力，以伊红染料为代表的酸性染料中有染色作用的是阴离子。
(二) 染色的物理作用1. 毛细作用及渗透作用组织有许多小孔，染料因渗透作用进入组织，它与组织没有牢固的结合，所以是单纯的物理作用，不能称为直接染色作用。
因所谓染色必需是染料留贮于组织内与组织有较稳固的结合。
2. 吸收或溶液作用组织吸收染料，作牢固的结合，组织的着色与溶液颜色相同，但不是和干燥染料的颜色相同。
如复红溶液为红色，所染组织也为红色，而干燥的复红带绿色。
3. 吸附作用吸附作用是固体物理的特性，它能从周围溶液中吸住一些细小的物质微粒，这些微粒可能是溶于溶液中的化合物，也可能是只在溶液中单独存在的离子，如染液中分散的色素粒子进入被染物质的间隙内，由于分子的引力作用，色素粒子被吸附而染色。
免疫组织化学技术名词解释免疫组织化学技术是一种应用于组织学研究和病理诊断中的实验技术，用于检测和定位特定抗原在组织中的表达和分布。
免疫组织化学技术结合了免疫学和组织学的原理和方法，使得我们能够在组织切片中检测到特定抗原，并通过染色的方式将其可视化。
1. 免疫染色：免疫组织化学技术的核心是免疫染色。
免疫染色是通过将特异性的抗体与待检测物质结合，并标记上染色物质，从而实现对抗原的检测和定位。
常用的染色物质包括标记着色剂如酶、荧光物质和金颗粒等。
2. 抗原：抗原是一类能够诱导机体产生抗体的物质。
在免疫组织化学技术中，抗原可以是蛋白质、多肽或者是其他小分子化合物。
通过特异性的抗体和抗原的结合来实现对抗原的检测和定位。
3. 抗体：抗体是机体特异性免疫应答产生的一类蛋白质分子。
抗体能够与特定抗原结合，并通过诱导免疫反应来清除抗原。
在免疫组织化学技术中，通过标记抗体对待检测抗原进行检测和定位。
4. 免疫组织化学染色法：免疫组织化学染色法是一种检测并定位抗原的方法。
根据标记抗体的不同，可以分为酶标法、免疫荧光染色法和免疫金染色法等。
其中，酶标法是最常用的方法之一，通过将酶标记的抗体与待检测抗原结合，然后通过酶的催化作用使染色物质可视化。
5. 免疫组织化学实验步骤：免疫组织化学技术包括多个实验步骤，一般包括组织固定、切片、抗原恢复、阻断、一抗和二抗结合、洗涤、染色和显微镜观察等。
每个步骤都需要严格的操作和控制条件，以保证实验的可靠性和准确性。
6. 免疫组织化学应用：免疫组织化学技术广泛应用于医学研究和病理诊断中。
在医学研究领域，免疫组织化学技术可以用于研究疾病的发生和发展机制、寻找新的生物标志物以及评估药物的疗效等。
在病理诊断中，免疫组织化学技术可以用于帮助确定肿瘤类型、检测特定蛋白的异常表达以及判断预后等。
7. 免疫组织化学技术的优点和局限性：免疫组织化学技术具有高度的特异性和灵敏度，可以实现对细胞和组织水平上抗原的定量和定位。
金免疫组织化学染色技术简介2016-05-24 13:01来源：内江洛伯尔材料科技有限公司作者：研发部免疫胶体金技术金免疫组织化学染色技术包括免疫金(银)光镜染色技术和免疫金电镜染色技术。
一、免疫金(银)光镜染色技术原理：通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用，用对苯二酚还原剂将银离子还原成银原子，被还原的银原子围绕金颗粒形成一个银壳，银壳一旦形成本身亦具有催化作用，从而使更多银离子还原并促使银壳越长越大，最终使抗原位置得到清楚放大。
技术要点：1、配制银染色液；2、染色注意事项：1、此法具有分辨率高、定位精确的优点；2、所用玻璃器皿应洁净，所用蒸馏水必须双蒸或三蒸；3、配制胶体金溶液时，调整各试剂的比例可获直径不同的金颗粒。
直径>l0nm的金粒子不易穿透组织，故作细胞内抗原定位时，以配制直径5nm的金溶胶为宜；4、硝酸银、对苯二酚溶液应避光保存并临用时现配；5、被检血清中有其他自身抗体，如抗平滑肌抗体、抗心肌抗体、抗线粒体抗体等时，其抗原片应根据专门试验的要求制备。
二、免疫金电镜染色技术原理：胶体金标记物与镍网上待检标本的相应蛋白质发生结合反应,由于胶体金颗粒具有高电子密度的特性，故金标蛋白结合处，电镜下可见黑褐色颗粒，从而对细胞膜上或细胞内的蛋白质进行定性与定位。
技术要点：1、标本包理用戊二醛对标本进行固定，后行锇酸固定(固定膜结构)，丙酮或乙醇逐级脱水，包埋(Epon812树脂)，超薄切片(80nm)置300目镍网上；2、免疫组化染色白蛋白封闭，加第一抗体，孵育，PBS冲洗，卵白蛋白封闭，加第二抗体(胶体金标记IgG )，孵育，PBS冲洗，蒸馏水冲洗，醋酸双氧铀、枸橼酸铅复染，电镜观察。
注意事项：1、以上染色步骤除清洗外，皆在滴于蜡膜（封口膜）上的各种液体小滴上进行。
应注意始终保持镍网湿润，不得让任何一种液体干于网上，并要吸去镊子尖部夹起的多余液体；2、用于电镜观察的免疫金法可分为包埋前染色和包埋后染色两大类，包埋后染色具有简便可靠，结果重复性好，能在同一组织切片上进行多重免疫染色的优点，但会使某些抗原失活，不易保持细胞膜结构完整。
