下载文档原格式
免疫组织化学染色技术实际应用体会孟庆媛,刘东璞,郭梦凡,林明华,王 抒(佳木斯大学基础医学院病理教研室,黑龙江佳木斯154003)关键词:免疫组织化学染色技术;病理学;显微镜技术中图分类号:R 446 文献标识码:B 文章编号:1008-0104(2006)01-0082-01 随免疫组织化学染色技术的广泛应用,病理学研究产生了划时代的飞跃。
根据标记物的不同,免疫组织化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术、免疫酶细胞化学技术、免疫铁蛋白技术、免疫金-银细胞化学技术、亲和免疫细胞化学技术、免疫电子显微镜技术等。
不同的免疫细胞化学技术各具有独特的试剂和方法,但其基本技术方法是相似的,都包括抗体的制备,组织材料的处理,免疫染色,对照试验,显微镜观察等步骤。
下面以美国Zym ed 公司CS A 试剂盒免疫组化染色步骤为例谈几点体会。
1 免疫组化染色步骤①石蜡切片脱蜡至水;②3%H 2O 2室温孵育20m in ;③PBS 法切片的前处理后,PBS 法3×2m in ;④特异性一抗37℃60m in ;⑤PBS 冲洗,3m in ×3次;⑥生物素化二抗37℃30m in ,Strep tavidin -HR P ,37℃20m in ;⑦PBS 冲洗,3m in ×3次;⑧生物素化酪胺基团分子37℃20m in ⑨PBS 冲洗,3m in ×3次;βκStrep tavidin -HR P ,37℃20m in ;βλPBS 冲洗,3m in ×3次;βµ0.05%DAB +0.03%H 2O 2,显色8～15m in ;βν流水洗终止反应,苏木素衬染30m in ,微波蓝化1m in ,树脂封片。
2 染色结果2.1 合适的抗体稀释度抗体浓度是免疫染色的关键。
如果抗体浓度过高,抗体分子过多于抗原决定簇,可导致抗体结合减少,产生阴性结果。
只有高稀释度时才能防止其非特异性背景染色。
DNA染色与免疫组织化学双重染色技术
应李雄;丁伟
【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》
【年(卷),期】2003(012)002
【摘要】@@ 随着计算机技术的普及和图象定量分析方法的发展,病理学已经开始应用计算机图象分析技术来定量研究有关病变形态结构特点,探讨其在诊断、分型、分类、预后判断中的应用等问题.我们采用Feulgen-Rossenbeck改良DNA染色
法[1]和免疫组织化学EnVision法结合的双重染色方法,在石蜡切片中同时显示乳
腺癌细胞DNA和癌基因CerbB-2的蛋白表达产物,该法对应用病理学图象分析技
术研究肿瘤细胞DNA及癌基因蛋白的表达及其两者关系提供了一种简便、准确的方法.
【总页数】2页(P226-227)
【作者】应李雄;丁伟
【作者单位】浙江大学医学院附属第一医院病理科,杭州,310003;浙江大学医学院
附属第一医院病理科,杭州,310003
【正文语种】中文
【中图分类】R329.33
【相关文献】
1.CD34与D2-40双重免疫组织化学染色技术在鉴别血管与淋巴管中的应用 [J], 盖文君;姚宏
2.弹力纤维染色与免疫组织化学双重染色技术在先天性心脏病肺动脉高压研究中的应用 [J], 沈萍;郭林林;徐卓明
3.醋酸氨银染色法网状纤维染色与免疫组织化学双重染色技术 [J], 张晓波;姚海涛;卢凤美;孟庆媛
4.骨髓标本中免疫组织化学及DNA原位末端标记双重染色技术的应用 [J], 李晓;浦权
5.免疫组织化学和天狼猩红双重染色技术在病理诊断中的应用 [J], 刘亚敏;张诗武;魏焕萍
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
医疗技术分类卫生部已刻录机红素临床应用管理方法，将医疗技术分为三类，即第一类、第二类，第三类。
第一类医疗技术是指平安性、有效性确切，医疗机构通过常规管理在临床应用中能确保其平安性、有效性的技术。
第二类医疗技术是指平安性、有效性确切，涉及一定伦理问题或者风险较高，卫生行政部门应加以控制管理的医疗技术。
第三类医疗技术是指具体有以下情形之一，需要卫生行政部门加以严格控制管理的医疗技术。
〔一〕涉及重大伦理问题〔二〕高风险〔三〕平安性、有效性尚需经规的临床试验研究进一步验证；〔四〕需要使用稀缺资源。
〔五〕卫生行政部门规定的其他需要特殊管理的医疗技术。
乌市人民医院第一类医疗技术目录：一影像：X 线检查X 线透视普通透视食管钡餐透视床旁透视与术中透视X 线射片牙片数字化摄影(DR) X 线造影T 管造影静脉泌尿系造影逆行泌尿系造影肾孟穿刺造影膀胱造影阴茎海绵体造影输精管造影窦道及瘘管造影X 线计算机体层(CT)扫描X 线计算机体层((CT)平扫X 线算机体层(CT)增强扫描临床操作CT 引导(二)超声检查B 超各部位一般B 超检查B 超常规检查胸、腹水B 超检查及穿刺定位胃肠充盈造B 超检查浅表组织器官B 超检查床旁检查术中B 超检查临床操作的B超引导B超脏器功能评估胃充盈及排空功能检查胆囊和胆道收缩功能检查膀胱剩余尿量测定彩色多普勒超声检查普通彩色多普勒超声检查彩色多普勒超声常规检查颈部血管彩色多普勒超声浅表器官彩色多普勒超声检查彩色多普勒超声特殊检查四肢血管彩色多普勒超声门静脉系彩色多普勒超声腹部大血管彩色多普勒超声临床操作的彩色多普双肾及肾血管彩色多普勒超声左肾静脉“胡桃夹〞综合征检查勒超声引导多普勒检查四肢多普勒血流图心脏彩超普通心脏M 形超声检查普通二维超声心动图床旁超声心动图心脏彩色多普勒超声左心功能测定图像记录附加收费工程黑白热敏打印照片彩色打印照片〔三〕检验血红蛋白测定(Hb) 红细胞计数(RBC) 红细胞比积测定(HCT) 网织红细胞计数(Ret) 异常红细胞形态检查红细胞沉降率测定(ESR) 白细胞计数(WBC) 白细胞分类计数(DC) 嗜酸性粒细胞直接计数嗜碱性粒细胞直接计数淋巴细胞直接计数单核细胞直接计数血小板计数血细胞分析或血常规红斑狼疮细胞检查(LEC) 尿常规检查尿酸碱度测定尿比重测定尿蛋白定性尿蛋白定量尿本-周氏蛋白定性检查尿肌红蛋白定性检查尿糖定性试验尿糖定量测定尿酮体定性试验尿三胆检查尿含铁血黄素定性试验尿乳糜定性检查尿浓缩稀释试验尿妊娠试验尿沉渣镜检尿三杯试验尿沉渣白细胞分类尿液分析+镜检粪便检查粪便常规粪便隐血试验(OB) 粪便隐血试验(OB)〔化学法〕粪便隐血试验(OB)〔免疫法〕体液与分泌物检查胸、腹水常规检查胸、腹水特殊检查脑脊液常规检查(CSF) 精液常规检查精子畸形率测定前列腺液常规检查阴道分泌物检查羊水结晶检查胃液常规检查十二指肠引流液及胆汁检查痰液常规检查各种穿刺液常规检查临床血液学检查凝血检查血浆凝血酶原时间测定(PT) 活化局部凝血活酶时间测定(APTT) 临床化学检查蛋白质测定血清总蛋白测定血清白蛋白测定超敏C 反响蛋白测定超敏C 反响蛋白测定(定性〕超敏C 反响蛋白测定〔定量〕糖及其代物测定葡萄糖测定糖化血红蛋白测定血脂及脂蛋白测定血清总胆固醇测定血清甘油三酯测定血清高密度脂蛋白胆固醇测定血清低密度脂蛋白胆固醇测定血清β-羟基丁酸测定无机元素测定钾测定钠测定氯测定钙测定无机磷测定血清碳酸氢盐(HCO3)测定肝病的实验诊断血清总胆红素测定血清直接胆红素测定血清间接胆红素测定血清总胆汁酸测定血浆氨测定血清丙氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清γ-谷氨酰基转移酶测定血清碱性磷酸酶测定血清胆碱脂酶测定心肌疾病的实验诊断血清肌酸激酶测定血清肌酸激酶－MB同工酶活性测定乳酸脱氢酶测定血清乳酸脱氢酶同工酶电泳分血清α羟基丁酸脱氢酶测定血清肌钙蛋白T 测定血清肌钙蛋白Ⅰ测定血清肌红蛋白测定前脑利尿钠钛--心衰标志物肾脏疾病的实验诊断尿素测定肌酐测定生肌酐去除率试验血清尿酸测定尿微量白蛋白测定尿蛋白电泳分析尿N-酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定尿γ-谷氨酰转移酶测定尿碱性磷酶测定尿碳酸氢盐(HCO3)测定其它血清酶类测定淀粉酶测定血清脂肪酶测定激素测定血清促甲状腺激素测定血清游离甲状腺素〔FT4〕测定血清游离甲状腺素〔FT4〕测定血清游离三碘甲状原氨酸(FT3)测定血清游离三碘甲状原氨酸(FT3)测定人绒毛膜促性腺激素测定人绒毛膜促性腺激素测定血清胰岛素测定血清胰岛素测定血清C 肽测定血清C肽测定自身免疫病的实验诊断抗核抗体测定(ANA) 抗核提取物抗体测定(抗ENA 抗体) 抗双链DNA 测定(抗dsDNA) 类风湿因子(RF)测定〔定性〕类风湿因子(RF)测定〔定量〕感染免疫学检测甲型肝炎抗体测定(HAV) 乙型肝炎五项乙型肝炎外表抗体测定(Anti-HBs) 乙型肝炎e 抗原测定(HBeAg) 乙型肝炎 e 抗体测定(Anti-HBe) 乙型肝炎核心抗原测定(HBcAg) 乙型肝炎核心抗体测定(Anti-HBc) 丙型肝炎抗体测定(Anti-HCV) 人免疫缺陷病毒抗体测定(Anti-HIV) 人免疫缺陷病毒抗体测定(Anti-HIV) 人免疫缺陷病毒抗体测定(Anti-HIV) 弓形体抗体测定风疹病毒抗体测定巨细胞病毒抗体测定单纯疱疹病毒抗体测定单纯疱疹病毒抗体测定细菌抗体测定抗链球菌溶血素O 测定(ASO) 抗链球菌溶血素O 测定(ASO)〔定性〕抗链球菌溶血素O 测定(ASO)〔定量〕肺炎支原体血清学试验立克次体血清学试验梅毒螺旋体特异抗体测定快速血浆反响素试验(RPR) 不加热血清反响素试验肿瘤相关抗原测定癌胚抗原测定(CEA) 甲胎蛋白测定(AFP) 总前列腺特异性抗原测定(TPSA) 糖类抗原测定肿瘤标志物临床微生物学检查病原微生物镜检、培养与鉴定一般细菌涂片检查结核菌涂片检查特殊细菌涂片检查耐甲氧西林葡萄球菌检测(MRSA、MRS) 一般细菌培养及鉴定血培养及鉴定沙门菌、志贺菌培养及鉴定真菌涂片检查真菌培养及鉴定念珠菌镜检念珠菌培养念珠菌系统鉴定衣原体检查衣原体培养支原体检查支原体培养及药敏药物敏感试验常规药敏定性试验常规药敏定量试验(MIC) 真菌药敏试验其它检验试验超广谱β－酰胺酶试验血型与配血ABO 红细胞定型ABO 血型鉴定ABO 血型鉴定Rh 血型鉴定Rh 血型鉴定盐水介质穿插配血特殊介质穿插配血不规那么抗体筛查(四)病理检查细胞病理学检查与诊断体液细胞学检查与诊断拉网细胞学检查与诊断细针穿刺细胞学检查与诊断脱落细胞学检查与诊断细胞学计数组织病理学检查与诊断穿刺组织活检检查与诊断镜组织活检检查与诊断局部切除活检检查与诊断骨髓组织活检检查与诊断乌市人民医院第二类医疗技术目录一、呼吸科1、经支气管镜介入技术2、经科胸腔镜胸膜固定术二、骨科1、半骨盆切除术2、人工关节置换术3、骶管肿瘤综合治理术4、人工关节微创术及翻修术5、腰椎间盼微创手术治疗6、颈椎间盘前路椎体次全切固定术7、椎管肿瘤纤维外科治疗8、关节骨折缩创治疗9、脊柱侧弯前路胸腹联合手术10、颈椎病后路、前路减压椎骨固定术11、髋臼造盖及骨盆截骨术12、臂丛神经损伤神经移位术13、颈、胸、腰椎骨盆骨折脱位前、后路复位固定减压植骨术14、复杂骨盆及髋臼骨折15、断肢〔指、趾〕再植术16、周围神经、血管修复术17、复合组织移植修复术〔肌腱、肌皮瓣、骨瓣、足拇趾拇甲瓣或第二足趾游离移植拇指再造术等〕18、拇指再造及局部再造术19、脊髓损伤后膀胱功能重建术20、先天髋脱位矫正手术三、介入放射1.冠脉介入诊疗技术〔1〕冠状动脉造影术〔2〕经皮冠装动脉介入治疗术〔3〕IABP 应用术应2.起搏治疗相关医疗技术〔1〕临时心脏起搏器安置术〔2〕永久性心脏起搏器安置术3.电生理相关医疗技术〔1〕心电生理检查术4.先天性心脏病介入治疗术〔1〕左右心导管术〔2〕经皮房间隔穿刺术5.外周血管介入诊疗技术〔1〕主动脉、外周血管提囊扩术，支架和滤器植入术〔2〕肾动脉支架植入术五、烧伤整形科：1.复杂性游离皮瓣、皮瓣、肌皮瓣超薄皮瓣修复术2.特大面积烧伤切〔削〕皮痂植皮术六、耳鼻喉-头颈外伤1.玻璃体置换术2.框肿瘤切除术六、妇产科1.妇科镜诊疗技术七、医院高压氧科1.医用高压氧治疗八、眼科1、准分子激光角膜屈光手术九、泌尿外科1.输尿管镜技术2.经皮肾镜技术十一、肾科血液透析技术十二新技术。
MS19 力化学耦合问题研讨会（负责人：冯雪、申胜平、孟松鹤）8月27日下午 地点：2层新闻发布厅C时间 编号 报告题目报告人 单位 主持人16:30 MS19-1295-I 高温CMAS 腐蚀热障涂层渗透与非弹性变形耦合的破坏研究周益春 湘潭大学 陈浩森 锁要红16:50 MS19-0354-O 粘接剂约束对锂离子电池硅负极稳定性的影响 张兴玉 南京航空航天大学 17:00 MS19-0312-O 从力学角度提升锂离子电池性能吕浡 上海大学17:10 MS19-3401-O ZrB 2-SiC 陶瓷温度相关断裂强度及氧化反应的影响 王海龙 长安大学 17:20 MS19-1525-O 电化学过程中电极材料模量与双层应力演化的原位实验研究谢海妹 天津大学 17:30 MS19-2344-O 化力耦合球对称问题的理论解王星泉 北京工业大学 17:40 MS19-2951-O 氯盐热腐蚀环境下DD5镍基单晶高温合金元素再分布及力学性能的研究刘鹏 西北工业大学17:50 MS19-3115-O 锂离子电池电极形状依赖的面内非均匀锂化过程：静电场的影响宋亦诚 上海大学 18:00 18:10MS19-0497-O洛伦兹力在消除锂金属电极尖端枝晶的作用邓齐波 天津理工大学8月28日下午 地点：2层新闻发布厅B时间 编号 报告题目报告人 单位 主持人13:30 MS19-1715-I 基于内能分解的力-热-化耦合理论及变分原理 仲政 哈尔滨工业大学(深圳)郁汶山 袁泉子13:50 MS19-1337-O 溶解润湿中的界面演化和失稳 袁泉子 中国科学院力学研究所 14:00 MS19-0384-O 钙钛矿太阳能电池力电光多场耦合效应 赵晋津 石家庄铁道大学 14:10 MS19-0051-O 含硅锂离子电池多尺度多物理场数值模型 刘冰河 北京航空航天大学 14:20 MS19-2373-O 纳米铝颗粒燃烧的反应分子动力学模拟伍鲍 中国科学技术大学 14:30 MS19-2493-O 水凝胶在恶性肿瘤治疗和关节软骨损伤修复中应用研究张伟 大连理工大学14:40 MS19-1803-O 镁合金的多轴腐蚀疲劳行为研究胡佳其 天津大学 14:50 MS19-0974-O 原位测量硅-核壳复合电极的三维形貌及变形 齐志凤 天津大学 15:00 MS19-1611-O 钠离子电池红磷阳极的结构设计与力学分析 贾铮 浙江大学15:10 MS19-0961-O 基于超声导波的软包锂离子电池SOC/SOH 评估 郝文峰 江苏大学 15:20 15:30MS19-2867-O基于力化学耦合的涂层/基体界面氧化层应力分析张功喜 西安交通大学8月28日下午 地点：2层新闻发布厅B时间 编号 报告题目报告人 单位 主持人16:30 MS19-2845-I 二氧化钛电击穿过程中的局部还原与结晶 洪伟 南方科技大学董雪林 梁旭16:50 MS19-2976-O 二氧化碳封存中的水泥力化学耦合行为董雪林 中国石油大学(北京) 17:00 MS19-2477-O 锂离子电池纳米电极在充放电过程中的力学行为研究 贾宁 北京理工大学17:10 MS19-2919-O 充放电过程中锂离子电池电极力化性能原位表征分析 毛卫国 湘潭大学 17:20 MS19-2134-O 磷掺杂硅纳米线放电过程中孔洞形成机理的研究 朱家昆 华中科技大学 17:30 MS19-1453-O 应力对硅纳米线自限制锂化现象的影响研究 张锴 同济大学17:40 MS19-1771-O 锂离子电池电极材料纳米尺度力-化学耦合分析 李奥林 湘潭大学 17:50 MS19-0920-O 单质炸药在宽温度范围下进行落锤撞击的实验分析 段宏正 北京理工大学 18:00 18:10MS19-0429-O细观特征对三维四向碳纤维编织复合材料热化学烧蚀行为的影响李伟 哈尔滨工业大学墙报 8月27日下午和8月28日下午 地点：3层序厅时间编号 报告题目报告人 单位15:30-16:30MS19-0473-P 金属薄膜材料电催化反应过程表面力学与电化学性能的耦合关系邓齐波 天津理工大学 墙报 交流 MS19-0685-P 生物软组织生长的力-化-生耦合理论与有限元模拟 尹思凡 清华大学 MS19-0936-P烧蚀防隔热方案综合评价王宏越 哈尔滨工业大学 MS19-1131-P 全固态薄膜锂离子电池力-电-化耦合模型 宋旭 西北工业大学MS19-1303-P CMAS 高温腐蚀热障涂层力-化耦合下涂层的剥落失效研究徐光楠 湘潭大学 MS19-2088-P 颤振模式下压电纤维复合材料MFC 俘能实验研究 刘建军 西安交通大学 MS19-2587-PConfine sulfur in sandwich structure of bamboo charcoal and aluminum fluoride (BC@S@AlF 3) as a long cycle performance cathode for Li-S batteries雷维新 湘潭大学。
