组织化学技术教程

生物化学简明教程第一章绪论1.生物化学顾名思义是研究生物体的化学，是研究生物体分子组成及变化规律的基础学科。

其研究范畴主要包括:①生物体的化学组成，生物分子的结构、性质及功能；②生物分子的分解与合成，反应过程中的能量变化，及新陈代谢的调节与控制；③生物信息分子的合成及其调控，也就是遗传信息的贮存、传递和表达。

2.在蛋白质的结构领域，最值得珍视的是F.Sanger对胰岛素氨基酸顺序的测定结果。

F.Sanger 设计了一个巧妙的实验，用2，4—二硝基甲苯（DNFB）标记蛋白质N端的氨基酸，该蛋白质经水解生成黄色的DNP—氨基酸和游离氨基酸，可以利用纸层析加以分离。

终于在1953年，准确描述出含有51个氨基酸的胰岛素的一级结构。

3.蛋白质组:基因组所表达出的全部蛋白质。

4.蛋白质组学:对基因组所表达出的全部蛋白质进行分析建立的新技术体系。

5.常量元素（含量＞0.01%）:如C、H、O、N、P、S 6种主要元素约占机体的97.3%,Ca、K、Na、Cl、Mg在机体也占有较大的比例，这些元素被称为常见元素。

6.微量元素（含量＜0.01%）:如V、Ni、B、Sn、Si等及Fe、I、Zn、Mn、Co、Mo、Cu、Se 、Cr、F 10种元素为人体不可缺少的必需微量元素7.生物分子均是含碳的有机化合物。

生物在长期进化过程中之所以选择碳作为主要的生命元素，是由于碳原子具有特殊的成键性质。

碳原子最外层的4个电子可使碳形成4个共价键。

生物分子之所以复杂多变，种类繁多，正是由于碳骨架的复杂多变决定的。

8.因为功能基团都是极性基团而具有亲水性。

（功能基团如:氨基、羟基、羰基、羧基、基、磷酸基等）9.生物大分子组成的共同规律:生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。

如:构成蛋白质的构件分子是20种基本氨基酸，氨基酸之间通过肽键相连，肽链具有方向性（N端→C端），蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复；构成核酸的构件分子是核苷酸，核苷酸通过3',5'—磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性（5'→3'），核酸的主链骨架呈“磷酸—核糖（或脱氧核糖）”重复；构成脂质的构件分子是甘油、脂肪酸和一些其他取代基；构成多糖的构件分子是单糖，单糖间通过糖苷键相连。

医用化学实验教程
一、临床诊断反应
1. 临床化学反应：[1] 用于测定机体组织、液体和体液中各种成分的浓度，有利于诊断疾病并检测疗效。

2. 血液分析：[2] 通过测定血液中机能分析以及血液的化学成分，了解机体的健康状况，对临床上的疾病诊断有重要的意义。

3. 尿液分析：[3] 通过检测尿液中的物质，了解肾脏和排尿系统功能得状况，进一步诊断病理、病毒感染。

二、试剂及其操作
1. 碱性有机溶液：[4] 可以用来溶解体内各种蛋白质，糖和酸等物质，提取样品中的成分，以便后续的分析。

2. 离子选择膜：[5] 可以针对不同的物质，实现有效的离子分离、离子检测，进一步收集样品的信息。

3. 光谱仪：[6] 通过观测和分析样品的光谱数据，可以精确地检测样品中的成分，了解它们的来源、种类等。

四、安全措施
1. 手术室：[11] 操作者需要穿实验服，并使用洁净手套和眼镜等安全措施，以确保操作安全。

2. 风柜：[12] 为了减少操作室内污染，使用风柜给出物质，并使用空气过滤器对室内空气进行净化。

3. 处理有毒物质：[13] 当操作者处理有毒物质或有害物质时，应该采取必要的预防措施，避免受到有害物质伤害。

第一章免疫细胞化学基本概念及发展简史一．免疫细胞化学的基本概念免疫细胞化学（immunocytochemistry）是利用特异性抗原抗体反应，观察和研究组织细胞特定抗原（或抗体）的定位和定量的技术。

应用免疫细胞化学技术可以在光镜和电镜水平观察细胞膜及细胞内某种抗原物质的存在。

从而为生物医学研究生命大分子，特别是那些对细胞化学方法来说尚无作用物或作用物特异性不强的酶、蛋白质、激素及受体蛋白等在组织内分布、细胞内定位以及代谢状态等，提供了特异性强、灵敏度高而又直观化的原位分析细胞组成物质的细胞化学手段。

二．免疫细胞化学的发展简史1941年，Coons等创立了荧光抗体法1959年，Singer创立了铁蛋白法1966年，Nakane等创立了免疫酶技术1971年，Faulk和Taylor 创立了免疫胶体金法1976年，Bayer等提出了亲合组织化学法第二章免疫细胞化学相关的组织学和细胞学技术一．取材（一）组织标本的取材1.活检钳的刃口锋利，以免组织受挤压。

2.取所需组织：主要病变区、病灶与正常组织交界区。

必要时取远离病变区的正常组织作为对照。

3.为充分保存组织的抗原性, 取材要快，尽量保持组织新鲜。

（二）细胞标本的取材1．印片法应用：活检标本、手术切除的标本。

方法：新鲜标本以最大面剖开暴露病区，载玻片轻压病区，脱落细胞黏附于载玻片上，立即浸入固定液中5－10分钟，取出自然干燥，低温保存。

优点：简便省时，细胞抗原保存较好。

缺点：细胞分布不均重叠，影响标记效果。

2．穿刺吸取涂片法应用：实质器官的病变区。

方法：①穿刺液较少时直接涂片，力求均匀。

②穿刺液较多时，穿刺液滴入1－2毫升Hanks液（RPMI 1640液）内，轻搅，500rpm离心5－10分钟，弃上清，制成细胞悬液（2x106细胞/ml）,吸一滴于载玻片上，轻涂，干后固定。

优点：细胞均匀。

缺点：细胞易变形。

3．体液沉淀涂片法①细胞数多，取一滴直接涂片。

phast教程在第⼀章中，您将打开程序提供的⽰例分析，探索其主要功能，运⾏计算并查看结果，⽽⽆需输⼊或更改任何输⼊数据。

第⼆章将指导您完成设置新⼯作区和设置新⼯作区的过程⼯作区并设置⽤于结果分析的背景图在第三章中，您定义了⼀系列常见类型的危险事件，并执⾏结果分析以获得效果区的⼤⼩。

本教程提供了完成分析所需的所有输⼊值。

第1章Phast介绍本指南的期望本教程的⽬的是让您熟悉使⽤Phast执⾏结果分析中涉及的想法和技术，并让您练习定义⼀系列常见类型的危险事件。

它不包括Phast的多组件和3D爆炸功能。

当你完成了教程，你应该对所涉及的问题有⼀个坚定的了解，并准备开始分析你⾃⼰的⼯作。

本教程分为三个章节。

在第⼀章中，您将打开程序提供的⽰例分析，探索其主要功能，运⾏计算和查看结果，⽽⽆需输⼊或更改任何输⼊数据。

在第⼆章中，您将创建⼀个新的分析。

⾸先，您将设置背景数据，然后在第三章中，您将定义⼀系列危险事件并对其执⾏结果分析。

教程需要1-2⼩时才能完成。

你不必在⼀次坐下完成它，如果你喜欢，可以在章节之间休息。

启动程序运⾏安装程序时，安装过程会在开始菜单中的程序下放置⼀个DNV GL软件⽂件夹，并在您的桌⾯上添加⼀个Phast 7.11快捷⽅式。

您可以使⽤任⼀⽅法启动程序。

级别1：⼯作区⼯作空间节点显⽰在树的顶部，位于“研究树”的每个选项卡部分。

如果双击该图标，将出现⼀个对话框，允许您设置将在整个⼯作区应⽤的选项。

设置将与⼯作空间⽂件⼀起保存，因此您可以为不同的⼯作空间设置不同的选项。

⼯作空间对话框包括影响程序⾏为的设置（例如消息中给出的信息级别），但不包括危险事件定义的任何⽅⾯。

危险事件的详细信息在较低级别定义，节点仅出现在“研究树”的“模型”选项卡部分中。

2级：研究研究级别是⼯作空间节点下⾯的级别。

每个新⼯作区都使⽤已在模型选项卡中定义的“研究”创建，准备好开始在“研究”下插⼊设备项⽬研究的输⼊数据包括两种类型的设置：⽤作研究下设备项⽬的默认值的值。

基础医学实验教程
基础医学实验教程是为医学专业学生和相关从业人员提供的实验教学教材，旨在帮助他们掌握基础医学实验技术和实验研究方法。

基础医学实验教程通常包括以下内容：
1. 实验室安全和实验道德：介绍实验室安全和道德规范，包括遵守实验室操作规程、正确使用实验仪器和设备，以及保护动物和人体样本的权益。

2. 基础实验技术：涵盖基础实验技术的原理和操作方法，包括离心、冻存、融解、显微镜观察、细胞培养、DNA提取、PCR等。

3. 生化实验：介绍常见的生化实验技术，如蛋白质电泳、酶动力学实验、免疫沉淀、放射免疫测定等，帮助学生掌握生化指标的检测和分析方法。

4. 细胞和组织学实验：涵盖细胞和组织学实验技术的原理和操作方法，如细胞培养、细胞染色、免疫组织化学等，帮助学生观察和研究细胞和组织的结构和功能。

5. 分子生物学实验：介绍常见的分子生物学实验技术，如PCR、DNA测序、基因克隆、原位杂交等，帮助学生进行基因的检测、定位和功能研究。

6. 实验数据分析和结果解读：教授学生如何正确记录、分析和解读实验数据，培养科学研究的思维和能力。

基础医学实验教程一般会配有实验操作指导、实验报告模板和实验案例分析，帮助学生理解和运用实验技术，并培养他们的实验设计和数据分析能力。

拉曼光谱技术使用教程引言拉曼光谱技术是一项重要的分析方法，它可以用于研究样品的化学结构和组成。

本文将介绍如何使用拉曼光谱技术进行样品分析，并探讨其在不同领域的应用。

一、什么是拉曼光谱技术拉曼光谱技术是一种非破坏性的光谱分析方法，它基于拉曼散射现象。

当样品受到激光的照射时，其中的分子会发生振动，从而产生散射光。

拉曼光谱通过测量散射光的频率和强度来分析样品中的分子结构及其组成。

二、使用拉曼光谱技术的步骤1. 准备样品：首先需要准备样品，并确保其适合进行拉曼光谱分析。

样品应具有透明度，避免强烈吸收激光光源。

对于固体样品，可以使用显微镜将其放在透明的载玻片上进行分析。

对于液体样品，可以使用透明的玻璃容器。

2. 调整仪器：根据样品的特点和需求，调整拉曼光谱仪的参数。

包括选择适当的激光波长、调整激光功率和选择合适的光谱范围等。

同时，还要确保仪器的正常运行和校准。

3. 采集光谱：将样品放置在拉曼光谱仪的样品台上，确保样品与激光光源相互作用。

用适当的时间来采集散射光的光谱图。

为了提高样品信号的强度，可以使用累积多个光谱的方法。

4. 数据分析：将采集到的光谱数据进行分析，可以使用各种软件和算法。

通常，拉曼光谱数据会被转换成图形或谱峰来解释化学结构或进行定量分析。

三、拉曼光谱技术的应用1. 药物研发：拉曼光谱技术可以用于研究药物的结构和成分。

通过比较药物原料与制剂的拉曼光谱，可以确定其纯度和稳定性，从而提高药物品质。

2. 食品分析：拉曼光谱技术可以用于食品成分的分析和鉴别。

通过测量食品样品的拉曼光谱，可以确定其成分、添加剂和质量。

3. 生物医学领域：拉曼光谱技术在生物医学领域中有广泛的应用。

它可以用于检测细胞和组织的变化，诊断疾病，监测药物在体内的分布等。

4. 环境监测：拉曼光谱技术可用于环境样品的分析，如水质分析、空气中污染物的检测等。

它具有非侵入性和快速响应的特点，适用于现场的环境监测。

结论拉曼光谱技术是一项重要的分析工具，它在多个领域中有广泛的应用。

生物化学简明教程最精简重点复习资料(一)名词解释1.等电点：调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的—+NH3基和—COO-基的解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）。

2.蛋白质的变性：蛋白质受理化因素的影响，其原有的高级规律性结构受到破坏，使其理化性质改变，生物功能丧失，但一级结构不变的现象。

3.前导链：复制时，DNA中按与复制叉移动的方向一致的方向，沿5’至3”方向连续合成的一条链。

4.生物氧化：有机物在生物体内氧的作用下，生成二氧化碳和水并释放能量的过程。

又称呼吸作用或组织呼吸/细胞呼吸。

5.呼吸链:底物上的H经脱氢酶激活脱落后，经过一系列的中间传递体，传递给被氧化酶激活了的氧，从而生成H2O的全部体系，称为呼吸链（又叫电子传递链或电子传递体系）。

6.领头链:复制时，亲代DNA双链解链为模版，顺解链方向连续复制下去的链为领头链7.同工酶:因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。

8.变构效应：某些蛋白质在表现其生物功能时，构象改变，从而改变整个分子的性质，这种现象称为变构效应。

从而其生物活性也改变的蛋白质称变构蛋白。

意义：能使蛋白质更充分、更协调地发挥其复杂的生物功能。

9.变构酶：可通过改变酶分子的构象来改变酶的活性，从而控制代谢速度.10.变性：蛋白质受理化因素的影响，其原有的高级规律性结构受到破坏，使其理化性质改变，生物功能丧失，但一级结构不变的现象。

11.透析:由于蛋白质分子体积很大,不能透过半透膜,而小分子物质能透过半透膜,这样可把蛋白质分子与小分子物质分开,这个过程叫透析.12.增色效应：核酸水解为核苷酸，紫外吸收值增加30%~40%的现象。

13.减色效应：复性后，核酸的紫外吸收降低14.一碳单位：指具有一个碳原子的基团。

15.生物化学：研究生物体组成及变化规律的基础学科16.Tm值：即溶解温度，即紫外线吸收的增加量达到最大增量的一半时的温度17.酶活性部位：在整个酶分子中，参与对底物的结合与催化作用的一小部分区域的氨基酸残基18.氧化磷酸化：伴随放能的氧化作用而进行的磷酸化作用19.呼吸链：代谢物上的氢原子被脱氢酶激活脱落后，经过一系列的传递体，最后传递给被激活的氧化分子，并与之结合生成水的全部体系20.糖酵解：1mol葡萄糖变成2mol丙酮酸并伴随ATP生成的过程21.底物磷酸化：直接利用代谢中间物氧化释放的能量产生ATP的磷酸化类型22.脂类：是一类低溶于水而高溶于非极性溶剂的生物有机分子23.β-氧化：脂肪酸氧化是发生在β原子上的，逐步将碳原子成对地从脂肪酸键上切下，即β-氧化24.氨基酸代谢库：体内氨基酸的总量25.从头合成途径:不经过碱基，核苷的中间阶段的途径26.补救途径：利用体内游离的碱基或核苷直接合成核苷酸27.半保留复制：DNA的两条链彼此分开各自作为模板，按碱基配对规则合成互补链，由此产生的子代DNA的一条链来自亲代，另一条链则是以这条亲代为模板合成的新链28.不对称转录：一、指双链DNA只有一股单链用作模板；二，指同一单链上可以交错出现模板链和编码链29.前导链：复制时，DNA中按与复制叉移动的方向一致的方向，沿5’至3”方向连续合成的一条链30.后随链：在已经形成一段单链区后，先按与复制叉移动方向相反的方向，沿5’至3”方向合成冈崎片段连在一起构成完整的链的一条链31.密码子：mRNA上所含A,U.G,C决定一个氨基酸的相邻的三个碱基32.反密码子：指tRNA上的一端的三个碱基排列顺序33.起始密码子：特定起始点的密码子(AUG34.终止密码子：mRNA中终止蛋白质合成的密码子（UAG,UAA,UGA）35.脂类：是一类低溶于水而高溶于非极性溶剂的生物有机分子(二)各部分重点一、蛋白质1.两性离子：指在同一个氨基酸分子上带有能放出质子的-NH3+正离子和能接受质子的-COO-负离子,2.等电点（PI）：调节氨基酸溶液的PH，使氨基酸分子上的-NH3+，-COO-解离度完全相等，此时溶液的PH。

病理学中的免疫组织化学技术使用教程免疫组织化学技术是一种常见且广泛应用于病理学研究的分析方法。

它通过将特定的抗体与组织标本中的抗原相互作用，从而提供关于细胞或组织中蛋白质表达和定位的信息。

本文将为您介绍免疫组织化学技术的使用方法和注意事项。

一、实验所需材料和试剂在进行免疫组织化学实验之前，准备好以下材料和试剂是必要的：1. 抗体：选择特异性强、经过验证的一抗，可以有多种来源如商业供应商或自制。

2. 血液清晰剂：例如牛血清白蛋白（BSA）或牛血浆等。

3. 缓冲液：常用的有生理盐水、Tris缓冲液等。

4. 清洗液：例如磷酸盐缓冲液、Tween-20等。

5. 可可粉末或3,3'-二氨基联萘（DAB）显色底物。

6. 高质量的显微镜玻璃片、载玻片和封片剂。

二、步骤以下是进行免疫组织化学实验的通用步骤：1. 组织样本准备：采集病理标本并固定在适当的组织固定剂中，如4%的中性缓冲甲醛。

确保标本大小适宜，以便于透明度好和抗体能够充分作用。

2. 标本处理：将固定的组织样本进行去水和石蜡包埋等处理。

3. 反应抗原修复：使用热蒸汽或酶解剂（例如胰蛋白酶）进行抗原修复以恢复抗原的活性。

根据不同抗原的性质选择适当的修复方法。

4. 抗体染色：将组织样本与目标抗体进行孵育。

将抗体稀释到推荐浓度中，根据实验要求选择合适的时间和温度进行孵育。

5. 清洗：用缓冲液或PBS清洗标本，以去除未结合的抗体。

6. 二抗处理：加入适用于一抗的二抗，例如抗IgG。

二抗通常与标记物（如酶或荧光染料）结合，以便于检测。

7. 清洗：再次用缓冲液或PBS清洗标本，以去除未结合的二抗。

8. 显色：接下来加入可可粉末或DAB等显色底物，观察标本是否出现所需的显色反应。

9. 染色修复：在显色后，如果需要的话，可以执行染色修复以增强显色效果。

10. 去水和挂片：用梯度酒精进行去水，然后将样本挂片，以便于后续显微镜观察。

三、注意事项在进行免疫组织化学实验时，需要注意以下几点：1. 实验室安全：实验时应遵守实验室安全操作规范，戴上手套和口罩，避免接触到可能有害的试剂和组织样本。