动物组织氧化应激活性氧鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒产
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小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)快速检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E11897m检测范围:0.8 ng /ml -200ng /ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的GSH,且与其他相关蛋白基本无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃避光保存)预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清,血浆及其它相关生物液体中GSH含量。
说明1.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
2.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理采用竞争酶联免疫法法检测GSH含量。
首先用一株单抗体包被微孔板,制备成固相抗体,然后加入待测标本及辣根过氧化物酶标记的另一株单抗,使之形成包被抗体-GSH-酶标记抗体的复合物。
经显色后在酶标仪测定吸光值(OD 值),通过计算机或作图拟合浓度-吸光度曲线,反算出待测标本中GSH含量。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):5瓶(冻干品)。
标准品为冻干品,使用前分别用0.5ml蒸馏水溶解,溶解后浓度分别为:3.酶结合物(HRP-conjugated antibody):1×6ml/瓶。
4.显色剂A(Substrate A):1×7ml/瓶。
5.显色剂B(Substrate B):1×7ml/瓶。
6.浓洗涤液(Wash Buffer):1×15ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释20倍。
7.终止液(Stop Solution):1×7ml/瓶需要而未提供的试剂和器材1.标准规格酶标仪2.高速离心机3.电热恒温培养箱4.干净的试管和Eppendof管5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器6. 蒸馏水,容量瓶等标本的采集及保存1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
货号:QS1804 规格:50管/24样一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量测定试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。
它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理:NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。
为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器:天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制:提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体12mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理:1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。
10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。
3.体液和培养液等其它液态样品:直接测定。
NO含量计算:标准曲线回归方程为:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 99861、组织样品:NO含量定义:25℃时,每克样品或每毫克蛋白15min生成1μmoL NO2—,相当于1μmoL NO。
体外诊断试剂产品分类分类目录按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂一、临床血液学和体液学检验试剂 1.1 血液学检验试剂(盒)1.1.1血液一般检验试剂(盒) 1.1.2溶血试验试剂(盒)1.1.3血栓与止血检验试剂(盒) 1.2 组织配型类试剂(盒)1.3尿液检验试剂(盒)、试纸1.4 粪便检验试剂(盒)、试纸 1.5其他体液及排泄物检验试剂(盒)二、临床化学检验试剂2.1无机离子检验试剂(盒)2.2蛋白质检验试剂(盒)2.3 糖类检验试剂(盒)、试纸 2.4 酶类检验试剂(盒)2.4.1 肝脏疾病诊断试剂(盒) 2.4.2 肾脏疾病诊断试剂(盒) 2.4.3 心肌疾病诊断试剂(盒) 2.4.4 体液和其他酶测定试剂(盒) 2.5 非蛋白含氮类化合物检测试剂(盒) 2.6 脂类检验试剂(盒)2.7血气与电解质分析试剂(盒) 2.8内分泌检验试剂(盒)2.8.1 下丘脑垂体激素测定试剂(盒) 2.8.2 甲状腺激素测定试剂(盒) 2.8.3 肾上腺激素测定试剂(盒) 2.8.4 性腺激素测定试剂(盒) 2.8.5 胰腺和肠胃激素测定试剂(盒)2.8.6 其他激素测定试剂(盒)2.9维生素和药物及代谢物类检验试剂(盒) 2.9.1维生素测定类试剂(盒)2.9.2药物和药物代谢物检测试剂(盒)三、临床免疫学检验试剂3.1 传染病免疫学诊断检验试剂(盒) 3.1.1 肝炎病毒血清学标志物检验试剂(盒) 3.1.2 其他病毒血清学标志物检验试剂(盒) 3.1.3 细菌血清学检验试剂(盒)3.1.4其他微生物血清学检验试剂(盒) 3.2肿瘤标志物类试剂(盒)3.3细胞免疫检验测定试剂(盒)四、微生物学检验试剂4.1 培养基4.2微生物学检验类试剂(盒)4.3微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂(盒) 4.4药敏试剂4.5生化鉴定培养基4.6染色液五、组织细胞学检验试剂5.1 细胞、组织化学染色剂类试剂5.2 免疫组化与人体组织细胞类试剂(盒)六、变态反应、自身免疫诊断检验试剂(盒)七、遗传性疾病检验试剂八、分子生物学检验试剂8.1分子诊断试剂(盒)8.1.1 分子杂交诊断试剂(盒)8.1.2 PCR试剂(盒)8.2人类基因检测类试剂(盒)8.3 生物芯片类试剂(盒)8.3.1 基因芯片类检测试剂(盒)8.3.2 蛋白质芯片类检测试剂(盒) 8.3.3 其他生物芯片类检测试剂(盒)九、其它检验试剂(盒)按药品受理和审评的体外诊断试剂*1.ABO血型定型试剂(盒)*2.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂(盒) *3.丙型肝炎病毒(HCV)抗体试剂(盒) *4.人类免疫缺陷病毒HIV(1,2型)抗体试剂(盒)人类免疫缺陷病毒抗原/抗体诊断试剂(盒) *5.梅毒螺旋体抗体试剂(盒) *6.放免试剂(盒)注:以上带*号的五个品种,预期用途为血源筛查时按药品受理和审评,为临床诊断时,按第三类医疗器械进行管理。
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®一氧化氮(NO)比色法测试盒Nitric Oxide (NO) Colorimetric Assay Kit产品货号:E-BC-K035-S产品规格:50 assays(48 samples)/100 assays(96 samples)检测仪器:紫外-可见光分光光度计(550 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测血清、血浆、及动植物组织样本中的NO含量。
检测原理NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2-,与显色剂生成淡红色偶氮化合物(如下图),生成偶氮化合物的浓度与NO的浓度具有线性关系,通过比色可以间接计算NO的浓度。
试剂一和试剂二的作用,为除去样本有色物质的干扰。
本试剂盒检测组织样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用本公司BCA试剂盒(货号E-BC-K318-M)进行测定。
提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器:紫外-可见光分光光度计(550nm)、涡旋混匀仪、磁力搅拌器、分析天平、微量移液器(1000 μL,200 μL,100 μL,10 μL)、离心机、烧杯(50 mL,25 mL)。
耗材:枪头(1000 μL,200 μL,10 μL)、EP管(5 mL,2 mL)、吸水纸、擦镜纸、磁力搅拌子。
试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl)或PBS(0.01 M,pH 7.4)。
试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。
②试剂四工作液:将试剂四加入37.5 mL双蒸水溶解,混匀即可,2-8℃避光保存2个月。
纳米金催化鲁米诺化学发光体系测定甲巯咪唑慕苗;张琰图;齐广才;刘珍叶【摘要】在碱性介质中,甲巯咪唑能强烈增敏纳米金-鲁米诺-硝酸银化学发光体系产生较强的化学发光信号,据此建立了一种流动注射化学发光测定甲巯咪唑的新方法.在优化实验条件下,该方法对甲巯咪唑的检测线性范围为1.0×10-9~1.0 × 10-8、1.0×10-8~1.0 × 10-7、1.0×10-7~1.0×10-6 g/mL,检出限(S/N=3)为3.0×10-10 g/mL,相对标准偏差为1.2%(n=11,ρ=1.0×10-8g/mL).将该法用于药物中甲巯咪唑含量的测定,结果满意.同时,采用化学发光光谱表征技术对该体系的化学发光反应机理进行了初步探讨.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2014(033)005【总页数】4页(P557-560)【关键词】甲巯咪唑;化学发光;纳米金【作者】慕苗;张琰图;齐广才;刘珍叶【作者单位】榆林学院化学与化工学院,陕西榆林 719000;延安大学化学与化工学院,陕西延安716000;延安大学化学与化工学院,陕西延安716000;延安大学化学与化工学院,陕西延安716000【正文语种】中文【中图分类】O657.3;TQ460.72甲巯咪唑(Methimazole,2-mercapto-1-methylimidazole,MMI) 是一种硫脲类抗甲状腺药,临床上主要用于治疗各种类型的甲状腺功能亢进症等[1]。
由于抗甲状腺治疗需要长期用药,且药物不良反应较多,因而建立快速、准确、灵敏的MMI 检测方法在临床医学及药理学研究方面具有重要意义。
目前,用于MMI含量测定的方法主要有紫外分光光度法[2]、高效液相色谱法[3-5]、电化学法[6-8]及其与毛细管电泳[9]和分子印迹[10-11]等技术联用的方法。
而化学发光法对MMI的测定是基于Cu(Ⅱ)催化鲁米诺-过氧化氢和高锰酸钾的化学发光反应[12-14]。
请在使用前仔细阅读说明书微生物活性检测试剂盒-W S T————比色法微生物代谢活性检测概述:微生物活性检测试剂盒-WS是一种全新的通过比色法检测微生物代谢活性的试剂盒。
本试剂盒采用WST®-8作为比色指示剂。
WST®-8通过电子载体被细胞内的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜染料。
(如下图所示),生成的甲臜量与活细胞数量成正比。
本试剂盒包含所有所需的试剂。
可以简单,快速的进行检测。
试剂内含:- WST溶液: 1 ml x 5 tubes- 电子载体溶液(DMSO溶液):0.5ml x 1 tube贮藏条件:4℃保存。
所需设备和材料:z酶标仪(450-490nm滤光片)z 96孔培养板z培养箱µl,200 µl单枪和200 µl排枪z 10tubez 1.5ml操作说明书:染色溶液的配制:在无菌的1.5ml tube内,按9:1的比例混合WST溶液和电子载体溶液。
(该配制好的染色溶液可以在4℃保存1个月)*在96孔板中,每孔需加入10 µl染色溶液,请提前计算并准备好适当提及的染色溶液。
*如果您检测的样品是革兰氏阳性菌、真菌、低响应菌种(如副溶血弧菌),请先用DMSO或无菌水8倍稀释电子载体溶液,将WST溶液和稀释后的电子载体溶液按照9:1的比例配制成染色溶液。
微生物代谢检测:1. 制备适当浓度微生物细胞的悬液,在96孔板内每孔接种190µl该悬液2. 每孔加入10µl的染色溶液3. 将培养板在培养箱中培养(37℃或合适的温度)4. 用酶标仪测定在450nm处的吸光度经本试剂盒测试过的微生物种类:真菌:Candida utilis, Saccharomyces cerevisiae, Zygos accharomyces rouxii, Candida albicans, Candida krusei, Candida parapsilosis革兰氏阳性菌:Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Corynebacterium glutamicum, Enterococcus faecalis,Lactobacillus casei, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Staphylococcusaureus, Staphylococcus epidermidis革兰氏阴性菌:Acetobacter sp., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Serratia marcescens, Vibrioparahaemolyticus, Yersinia enterocolitica药物敏感性测试:革兰氏阴性菌:1. 根据McFarland比浊法制备107CFU/ml的微生物细胞悬液。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-1683301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号一氧化氮检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0021S 一氧化氮检测试剂盒 500次 S0021M一氧化氮检测试剂盒2500次产品简介:碧云天生产的一氧化氮检测试剂盒采用了经典的Griess Reagent ,并对其测定的溶液体系进行了优化,使检测下限达到1µM ,在1-100µM 范围内有非常完美的线性关系。
检测速度极快,完成一条标准曲线或5-10个样品的测定只需3分钟。
样品范围广,可以检测细胞或组织及其培养液中的一氧化氮的含量,酚红和10%血清均对测定无明显干扰,也可以检测血清、血浆和尿液中一氧化氮的含量。
包装清单:产品编号 产品名称 包装 S0021S-1 1M NaNO 2 1ml S0021S-2 Griess Reagent I 25ml S0021S-3 Griess Reagent II25ml —说明书1份产品编号 产品名称 包装 S0021M-1 1M NaNO 2 1ml S0021M-2 Griess Reagent I 125ml S0021M-3Griess Reagent II125ml —说明书1份保存条件:-20ºC 避光保存,一年有效。
4ºC 避光保存,半年有效。
注意事项:本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
如保存不当导致溶液变色或沉淀,则说明该溶液已经失效,请购买新的试剂盒。
不建议使用RIPA 裂解液对细胞或者组织进行裂解,使用RIPA 裂解液可能在后续反应中产生沉淀,影响测试。
推荐使用碧云天的细胞与组织裂解液(一氧化氮检测用)(S3090)或Western 及IP 细胞裂解液(P0013)。
线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途线粒体呼吸链复合物I(NADH-辅酶Q还原酶)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物和特异性抑制剂,通过反应系统测定样品中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适合于各种纯化线粒体样品(动物、人体、酵母)以及细胞或组织裂解悬液样品的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-辅酶Q还原酶的特异性活性检测。
其用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。
产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。
技术背景线粒体呼吸链复合物I,通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶Q还原酶(reduced nicotinamide adenine dinucleotide coenzyme Q reductase;NADH-CoQ reductase),又称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(reduced nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase;NADH dehydrogenase),是线粒体电子传递链中最大的结构成分:含有30至40多个多肽结构。
其特征性的酶活性是鱼藤酮敏感的NADH-辅酶Q还原酶(NADH:Q Reductase)。
复合物I催化线粒体内电子由供体NADH传递到内膜上辅酶Q受体(泛醌;ubiquinone)的能量转移反应,为整个呼吸链反应系统的第一步。
基于辅酶Q底物,在鱼藤酮存在与否的情况下,通过NADH-辅酶Q还原酶的催化,转化成还原型泛醌(CoQH2),同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD),在分光光度仪下产生吸收峰值的变化(340nm 波长),由此定量测定NADH -辅酶Q还原酶的特异活性。
动物组织氧化应激活性氧鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒产品说明书
(中文版)
主要用途
动物组织氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂是一种旨在通过自由基探针鲁米诺和强
化剂的参与下,植物样品中的活性氧族使发光物氧化降解并发光,在化学发光仪(Luminometer)的帮助下
定量检测样品中活性氧族(过氧化氢)的生成和数量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成
功实验证明的。适用于各种动物和人体组织的活性氧族的检测。可以被用于细胞凋亡、衰老、代谢和营养
学,以及发育生物学(男性不育)等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定,检测敏感。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基
(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷
氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)
次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等
细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,甚而导致诸如男性不育、冠心病、风湿
性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。鲁米诺(luminol),又称氨基邻苯二甲酰肼
(luminol;3-aminophthalic hydrazide 5-amino-2,3-dihvdro- 1,4-phthalazinedione),是一种脂溶性的发光剂,氧
化后生成鲁米诺自由基而化学发光,具有460nm左右峰值的带状光谱,肉眼可观察到鲜明的紫蓝色。鲁米
诺以单价氧化形式与超氧自由基阴离子反应,产生不稳定性内过氧化物或二氧环丁烷(Dioxetane),由此分
解成电激发状态,通过释放光子,回复到基态。鲁米诺作为探针,可以检测植物中过氧化氢、超氧自由基
阴离子和羟自由基,其中过氧化氢最强,其发光强度与过氧化氢水平成正相关。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
强化液(Reagent B) 毫升
发光液(Reagent C) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存 强化液(Reagent B)和 发光液(Reagent C)在-20℃冰箱里,严格避免光照;其余的保存在4℃冰
箱里,有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于样品操作的容器
微型台式离心机:用于去除样品杂质
DOUNCE匀浆器:用于裂解组织样品
超声仪:用于裂解组织样品
测试管:用于发光检测用的专用试管
化学发光仪:用于检测化学发光
实验步骤
一、 样品预处理
1. 手术取出动物组织,并秤重以确定组织重量
2. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管(200毫克组织)
3. (选择步骤)加入xx毫升 清理液(Reagent A)
4. (选择步骤)小心抽去 清理液(Reagent A)
5. 放进一个15毫升锥形离心管
6. 加入置于冰槽里的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
8. 在冰槽里用研磨棒匀化组织(约80下)
9. 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
10.强力涡旋震荡5秒,充分混匀
11.(选择步骤)在冰槽里,置于200瓦超声仪下,功率50%,猝击5秒
12.转移到预冷的1.5毫升离心管
13.放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为3000g(或6000RPM,例如eppendorf 5415)
14.小心移取1毫升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管
15.(选择步骤)移取5微升进行蛋白定量测定,并调整蛋白浓度为20毫克/毫升(注意:建议使用 Bradford
蛋白质浓度定量试剂盒-
GMS30030.1)
16.置于冰槽里继续后续操作(1小时内)
二、 测读
测读开始前,打开化学发光仪,设定仪器内温度为37℃预热和整合测读10秒或 15分钟;然后关掉实验室
的灯光。将-20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化,严格置于暗室里。然后进行下列操作。
1. 准备好测试管,做好标记:阴性对照、样品本底和样品活性
2. 移取xx微升 清理液(Reagent A)到阴性对照测试管
3. 移取400微升上述预处理的待测样品到样品本底测试管
4. 移取400微升上述预处理的待测样品到样品活性测试管
5. 分别加入xx微升 强化液(Reagent B)到上述测试管,除样品本底测试管外
6. 分别加入xx微升 发光液(Reagent C)到上述测试管,除样品本底测试管外
7. 轻轻涡旋混匀
8. 即刻放进37℃化学发光仪里测读
9. 整合测读10秒,获得相对发光单位(relative light unit;RLU)
10.或者整合测读15分钟,获得光电子读数:X 106 CPM(counted photon per minute)(注意:可以使用液
体闪烁仪替代)
11.计算ROS水平:
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 如果测定体系变化,则试剂用量相应变化
3. 操作时,须戴手套
4. 测试前,动物组织须新鲜收集,1小时内为最佳
5. 组织裂解悬液制备后即刻测读,不宜过夜保存
6. 组织裂解悬液须清澈
7. 测读的所有步骤均须在暗室里进行
8. 根据活性氧值浓度高低,用户可以调整样品量
9. 必要时,例如活性氧族过低,可以浓缩样品处理
10.如果是注射式化学发光仪,建议测试前后使用无离子水冲洗化学发光仪注射(injector)管道
11.本公司提供系列活性氧分析试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感