鲁米诺化学发光体系的应用

鲁米诺化学发光体系的构建及其在二苯甲酮类物质检测中的应用鲁米诺化学发光体系的构建及其在二苯甲酮类物质检测中的应用近年来，化学发光在生物医学和分析化学领域中扮演着重要的角色。

其中，鲁米诺化学发光体系由于其高灵敏度、广泛的应用范围和简单的操作流程而引起了研究人员的广泛关注。

本文将对鲁米诺化学发光体系的构建以及其在二苯甲酮类物质检测中的应用进行详细探讨。

首先，我们需要了解鲁米诺化学发光体系的构建原理。

鲁米诺是一种产生化学发光的物质，它在存在过氧化氢和碱性条件下，通过与鲁米诺酸酯反应生成激发态的鲁米诺根离子，从而产生可见光发射。

在实际应用中，我们可以通过调节过氧化氢和碱性的浓度来控制发光强度，从而实现对目标物质的检测与分析。

二苯甲酮类物质作为重要的有机化合物，在药物合成、有机合成和环境污染检测中具有重要地位。

例如，苯甲酮作为一种常见的酮类化合物，具有广泛的应用前景。

因此，研究鲁米诺化学发光体系在二苯甲酮类物质检测中的应用具有重要的理论和实际意义。

在鲁米诺化学发光体系中，选择合适的过氧化氢和碱性条件是非常重要的。

过氧化氢的浓度可以通过添加酶来调节，酶将催化鲁米诺酸酯与过氧化氢反应生成鲁米诺根离子。

此外，碱性的选择也是重要的因素。

碱性条件下，鲁米诺酸酯可以与过氧化氢迅速反应，生成发光物质。

因此，选择合适的酶和适当的碱性条件可以实现对二苯甲酮类物质的高效检测。

在实验过程中，我们可以利用紫外可见光谱仪来监测发光强度的变化。

通过比较样品和对照组的发光强度差异，我们可以确定目标物质的存在及其浓度。

此外，还可以利用荧光寿命测定法进行鲁米诺化学发光体系的研究。

荧光寿命测定法可以通过测量发光物质的寿命来确定目标物质的浓度，具有高灵敏度和高选择性的优点。

在实际应用中，鲁米诺化学发光体系已经成功应用于二苯甲酮类物质的检测。

例如，一些研究者利用鲁米诺化学发光体系成功检测了苯甲酮和其相似物质的存在。

这些实验结果表明，鲁米诺化学发光体系具有较高的灵敏度和选择性，可以应用于二苯甲酮类物质的快速检测与定量分析。

增强化学发光法(ECL)Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。

在Ecl 底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。

试验步骤：1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。

2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。

3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。

4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。

5）显影、定影。

6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到最佳结果。

注意：荧光在一段时间后会越来越弱。

记得全程手套操作，一则避免手印污染影响结果，二则保护自己（未交联的丙烯酰胺、甲醛等等虽不立即致命但都会慢慢毒害你的身体）1.如果WB前没有可参考的资料--比如不知道是否有表达，比如抗体少还要摸条件（稀释度），可以用剪膜剩下的边角料来先做几组点杂交摸条件，省点时间省点试剂；2.去掉积层胶后，预染的Marker可用以识别胶上下方向和膜的正反面（预染Marker如果照着说明书用量，有可能在电泳时看不到条带，但转膜时有浓缩效应而且背景白就可以看到了。

如果要电泳能看到就要参考电泳的那个用量，或者多加1-2倍的量）；如果目标蛋白小，指示剂也可以指示方向，但是如果蛋白大，指示剂已经跑出去了，就要留意分清胶上下方向，切个小角是常用的方法。

膜和滤纸一起裁最好（不过滤纸上下叠多了膜不好剪，硝纤膜容易裂，用利刀+尺子+垫厚报纸划比较容易）尽量和胶一样大小，胶用纯水冲洗一下后用电泳缓冲液平衡过再量。

我自己通常剪的时候会故意长宽各比胶少1mm，保证膜和胶不会碰到对方背后的滤纸就好。

3.对于特别小的蛋白，tricine SDS-PAGE电泳有助于提高蛋白大小在1KD-20KD间的分辨率，不用甘氨酸，丙烯酰胺的浓度也不用太高（可参考2004年中国生物工程杂志上有一篇文章（有效分离1kD小肽的Tricine-SDS-PAGE方法）4.转膜前胶要在转移缓冲液里平衡一下防止胶变形，也有助于进一步去掉可能有碍转膜的杂质。

鲁米诺在化学发光分析中的应用
鲁米诺发光分析法是一种常用的化学分析方法，它可以用于分析各种物质的含量，经常用于痕量分析或可见光光谱分析等。

1920年初，意大利化学家Lumino率先将荧光分析和绿色发光技术应用于化学分析，开始了鲁米诺发光分析法的时代。

鲁米诺发光分析法可以以不同波长的光谱作为探测器获得对试样反应的光谱数据，因此可以准确测定非常稀少的特定晶体，例如金属、元素和活性物质，以及做出精确的测定结果。

此外，由于采用透射光进行测量，通常不需要大量试样，而且测量时间很短，因此十分适合在实验室采用。

鲁米诺发光分析法的精密及可靠的检测性能，一直被应用于各个领域，尤其是分析痕量元素或医药研究，以及电子、计算机、汽车和食品制造业等等。

例如，鲁米诺发光分析在成像电子显微镜和有机晶体谱学研究中，可检测痕量元素，估计杂质含量，用于抑菌活性测试、血液检验等检测，亦可用于环境污染的检测和分析。

另外，鲁米诺发光分析也可以追踪毒性材料，这在医药和食品制造行业中更是重要。

由于以上众多应用，鲁米诺发光分析法被世界各国认可为独立的科学技术，广泛应用于研究和技术领域，在化学试验室中得到了广泛应用。

随着分析技术的不断发展，新的发展将更好地满足实验室需求，促进在不同领域的技术发展。

学校代号***** 学号************ 分类号O657.3密级硕士学位论文硫化镉量子点增敏鲁米诺化学发光体系的研究与应用学位申请人谭新梅指导教师陈效兰副教授学院名称化学学院学科专业分析化学研究方向光分析化学二〇一一年五月十五日The Research and Application on the Enhancement of CdS Quantum Dots to the Luminol Chemiluminescence SystemCandidate Xinmei TanSuperviso r Assoc. Prof. Xiaolan ChenCollege College of ChemistryProgram Analytical ChemistrySpecialization Photoanalytical ChemistryDegree Master of ScienceUniversity Xiangtan UniversityDate May, 2011湘潭大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。

除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。

对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。

本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。

作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。

本人授权湘潭大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。

涉密论文按学校规定处理。

作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日摘要量子点又称半导体纳米晶体，是一种发光纳米颗粒。

量子点是纳米科学与技术研究重要的组成部分。

鲁米诺化学发光体系的应用鲁米诺（5-氨基-2，3-二氢-1，4-二杂氮萘二酮，也称3-氨基邻苯二甲酰肼）俗名发光氨luminol，因其结构简单、易合成、水溶性好，以及发光量子效率高等特点，常温下是一种黄色晶体或者米黄色粉末，是一种比较稳定的化学试剂,化学式C8H7N3O2 。

鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一。

自从1928年albrecht首次报道了鲁米诺与氧化剂在碱性溶液中的化学发光反应以来，人们对该化学发光体系的研究就一直十分活跃，使得该化学发光体系被应用于许多领域之中。

通常用于酶促化学发光实验以及刑侦上的微量血迹检测。

由于其结构简单、易合成、发光量子效率高的特点，现也被用于蛋白质印迹试验western blot中。

鲁米诺化学发光体系的分析应用主要基于以下几个方面。

一、鲁米诺-过氧化氢化学发光体系应用最为广泛。

许多过渡金属离子对鲁米诺-过氧化氢化学发光反应具有很好的催化作用。

李正平等发现铁蛋白催化，产生很强的化学发光信号，建立简便灵敏的检测铁蛋白的化学发光方法。

方法的线性范围为0.5～10μg/l，检出限为0.36μg/l，为铁蛋白作为纳米粒子标记物及直接检测提供一种新的途径。

戴路等报道了一种新的测定雌性激素的流动注射化学发光方法。

在碱性条件下，金银复合纳米粒子能显著地增强鲁米诺-过氧化氢化学发光，而雌性激素能明显地抑制该体系的化学发光强度，建立了测定天然雌激素（雌酮、雌二醇和雌三醇）的化学发光方法。

该方法已用于孕妇尿样中雌激素总量的测定。

刘振波等基于人的血清白蛋白对鲁米诺-过氧化氢-叶绿素铜钠化学发光体系的抑制作用，采用流动注射技术建立了一种简单、快速、可连续测定人的血清白蛋白的新方法。

二、鲁米诺-高碘酸钾化学发光体系。

王瑞琪等发现在碱性介质中，镧（iii）对鲁米诺-高碘酸钾体系的化学发光反应有显著的增敏作用。

据此，建立了测定镧（iii）的反相流动注射化学发光新方法，并将此法用于合成样品的测定。

鲁米诺电化学发光用于生物分子分析的研究进展屠一锋苏州大学化学化工学院分析化学研究所，215123本课题组开展电化学发光分析研究工作的主要目标是应用于生物分子分析：一、对鲁米诺电化学发光行为及机理的理解：文献报道鲁米诺的电化学发光原理类似于其化学发光原理，是基于鲁米诺的两步氧化反应，在第二步氧化开环时生成激发态而产生光辐射，是不可逆过程，我们的研究表明，鲁米诺的电化学发光可能更主要是涉及自由基的过程，其氧化还原过程中形成自由基并在相应的条件下可在未氧化开环的条件下辐射光信号，从而不需要氧化至第二步开环反应，因此鲁米诺分子可以提供可逆的电化学发光反应，从而为研制电化学发光传感器和检测器提供了重要的基础。

多种纳米粒子可以促进鲁米诺在低电位下的可逆电化学发光反应。

二、中性介质中鲁米诺的电化学发光行为：绝大部分文献报道均强调鲁米诺的电化学发光必须在强碱性介质中实施，而我们的研究主要瞄准中性介质中鲁米诺的电化学发光，经过长期研究，我们发现完全可以在中性介质中实施其电化学发光分析，这对开展生物分子的分析是十分有利的。

研究中采用的主要技术措施是多种增敏技术来提高中性介质中鲁米诺电化学发光的效率，如使用增敏剂和电极表面修饰等。

实现中性介质中的电化学发光对生物分子的研究具有重要价值。

三、生物分子分析研究：已探讨了对多种类型生物分子进行分析测定的性能，其主要机理是基于自由基之间的能量转移及自由基湮灭作用等，表现在信号响应上为电化学发光的增强或猝灭，研究对象包括生物小分子如谷胱甘肽、黄酮、维生素、尿酸等，灵敏度高，检测下限可达皮摩尔以下，生物大分子如酶、DNA等，已研究了葡萄糖氧化酶、尿酸氧化酶、谷丙转氨酶等及其催化体系均有响应，对DNA的响应亦已实现，并可用于研究DNA与小分子之间的作用。

四、电化学发光检测与流动分析及分离技术的联用：生物样品大多组成复杂，电化学发光检测池的研制可实现电化学发光检测与分离技术的联用，我们目前已经构建了结构合理、性能优良的电化学发光检测池，与流动分析成功联用，目前正开展毛细管电泳、芯片电泳与电化学发光检测联用的研究。

鲁米诺-Cu(Ⅱ)-盐酸二甲双胍化学发光体系的研究李红;杜建修【摘要】在Cu(Ⅱ)存在下,研究了luminol-Cu(Ⅱ)-盐酸二甲双胍化学发光体系,建立了测定盐酸二甲双胍的流动注射化学发光新方法.结果表明,在优化的实验条件下,化学发光强度与盐酸二甲双胍浓度在1.0×10~(-9)～1.0×10~(-7) g/mL范围内呈线性关系.该方法测定盐酸二甲双胍的检出限为5×10~(-10)g/mL,相对标准偏差为1.1%(1.0×10~(-8)g/mL盐酸二甲双胍溶液,n=11).该方法已用于片剂中盐酸二甲双胍含量的测定.【期刊名称】《陕西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(038)001【总页数】3页(P54-56)【关键词】盐酸二甲双胍;化学发光;流动注射;luminol;Cu(Ⅱ)【作者】李红;杜建修【作者单位】陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062;渭南职业技术学院,陕西,渭南,714000;陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062【正文语种】中文【中图分类】O657.3盐酸二甲双胍(Metformin hydrochloride),化学名称为1,1-二甲基双胍盐酸盐,是目前临床广泛使用的双胍类降糖药[1],其常见不良反应为胃肠道反应,严重者会引起乳酸中毒、低血糖昏迷以及过敏性休克等,可威胁用药者的生命安全[2].目前文献报道的测定盐酸二甲双胍的方法主要有光度法[3]、电化学法[4]、液相色谱法[5]以及毛细管电泳法[6]等.利用化学发光分析法测定盐酸二甲双胍已有文献报道[7-9],这些方法分别基于盐酸二甲双胍对N-溴代丁亚酰二胺-荧光素体系[7]和Cu(Ⅱ)-H2 O2-罗丹明B体系[8]的增敏作用或对luminol-H2 O2-Cu(Ⅱ)体系[9]的抑制作用.鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一.在碱性介质中,鲁米诺可被许多氧化剂氧化产生化学发光.许多无机物或有机物对这些反应具有催化、增敏或抑制作用,据此,建立了这些物质相应的化学发光分析法[10].但是由于鲁米诺自身与这些氧化剂反应产生了较强的发光信号,方法遭遇了较高的背景信号,这在一定程度上限制了方法灵敏度的进一步提高.本文发现,在Cu(Ⅱ)存在条件下,盐酸二甲双胍与鲁米诺反应可检测到强的化学发光信号.基于此发现,结合流动注射技术,对影响化学发光反应的各种因素进行了考察,建立了测定盐酸二甲双胍的流动注射化学发光新方法.由于无需外加氧化剂,该方法的背景信号很低,测定盐酸二甲双胍的检出限达5×10-10 g/m L.该方法已用于片剂中盐酸二甲双胍含量的测定,结果与药典方法——分光光度法[11]的测定值无显著性差异.IFFL-D型流动注射化学发光仪和IFFS-A型多功能化学发光检测器(西安瑞迈电子科技有限公司);TU-1901型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);p HS-3C(A)型精密酸度计(上海大普仪器有限公司).盐酸二甲双胍标准溶液(1.0×10-3 g/m L):准确称取0.050 0 g盐酸二甲双胍对照品(中国药品生物制品检定所,批号100664-200401),用二次蒸馏水溶解后,定容于50 mL容量瓶中.冰箱中避光保存,使用时用水逐级稀释至所需浓度.鲁米诺工作液(2.5×10-4 mol/L):移取1.0×10-2 mol/L鲁米诺储备液(配制于0.01 mol/L NaOH中)2.50 m L于烧杯中,加入 0.5 mol/L NaHCO3溶液20.0 m L和水60 m L,用1.0 mol/L NaOH溶液调节p H为12.5后,转入100 mL容量瓶中,加水至标线.Cu(Ⅱ)溶液(5.0×10-5 mol/L):称取CuSO4·5H2 O(西安化学试剂厂)0.0125 g,用水溶解并定容于1 000 m L容量瓶中.本实验所有试剂除鲁米诺外均为分析纯,水为二次蒸馏水.流通管分别连接鲁米诺溶液、Cu(Ⅱ)溶液和盐酸二甲双胍标准或样品溶液.启动蠕动泵,泵入溶液,待基线稳定后,通过进样阀将50μL鲁米诺溶液注入到Cu(Ⅱ)溶液和盐酸二甲双胍溶液的合并流中,引发化学发光反应,记录化学发光信号.以相对峰高(ΔI=Is-Ib)对盐酸二甲双胍进行定量,其中Is为样品的化学发光信号;Ib为空白信号. 分别试验了Cu(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)等过渡金属离子对鲁米诺-盐酸二甲双胍化学发光反应的影响.结果表明,只有Cu(Ⅱ)存在时,才可以检测到强的化学发光信号.进一步考察了Cu(Ⅱ)浓度在1.0×10-5～1.0×10-4 mol/L 范围内对化学发光反应的影响.如图1所示,相对化学发光强度随着Cu(Ⅱ)浓度的增大而增大,当Cu(Ⅱ)浓度增大到5.0×10-5 mol/L时,相对化学发光强度达到最大值.本文选择Cu(Ⅱ)浓度为5.0×10-5 mol/L.在5.0×10-5～1.0×10-3 mol/L范围内考察了鲁米诺浓度与化学发光强度的关系.实验表明,化学发光强度随着鲁米诺浓度的增大而增大,但空白信号亦增大.当鲁米诺浓度为2.5×10-4 mol/L,反应有较高的相对化学发光强度和较低的空白信号.实验选择鲁米诺浓度为2.5×10-4 mol/L.实验以NaHCO3-Na2 CO3缓冲溶液为反应介质,考察了鲁米诺溶液的p H值在10.5～13.0范围内对化学发光反应的影响.相对化学发光强度随鲁米诺溶液p H值的增大而增大,当鲁米诺溶液的p H值为12.5时,相对化学发光强度有最大值.故本文选择鲁米诺溶液的p H值为12.5.阀池距过短或过长都会影响混合溶液进入检测器的时间.为了检测到最大的化学发光强度,固定试剂流速为0.83 mL/min,在5～50 cm范围内,考察了阀池距对化学发光强度的影响.结果表明,当阀池距为20 cm时,反应有最大的化学发光强度.在选择实验条件下,盐酸二甲双胍浓度在1.0×10-9～1.0×10-7 g/mL范围内与相对化学发光强度呈线性关系,线性回归方程为ΔI=3.17c+6.22(c:10-8 g/mL),r=0.997 7.对浓度为1.0×10-8 g/mL盐酸二甲双胍溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为1.1%.按照 IUPAC建议,计算得该方法检出限为5×10-10 g/m L 盐酸二甲双胍.在选定的实验条件下,对5.0×10-8 g/m L盐酸二甲双胍溶液进行了干扰试验.结果表明,在保持相对测量误差在±5%范围内,1 000倍的乳糖、葡萄糖、倍的淀粉、M g2+;同量的 Cr3+、A l3+、Pb2+、Cd2+对测定无干扰.取市售不同生产厂家的盐酸二甲双胍片剂各5片,准确称量后研细混匀,求得每片的平均质量.从中称取适量粉末,约相当于50 mg盐酸二甲双胍,加水溶解后,过滤,滤液定容于100 mL容量瓶中.按照实验方法进行含量测定,并与药典方法[11]进行对照,结果列于表1.经t检验,本方法与药典方法的测定结果在95%的置信水平上无显著性差异.据文献报道,二甲双胍可以与Cu(Ⅱ)形成配合物,在这一过程中,Cu(Ⅱ)被还原为Cu(Ⅰ).Cu(Ⅰ)极不稳定,具有很低的还原电位[E(Cu(Ⅱ)/Cu(I))=0.16V),在水溶液中可以将溶解氧还原为超氧阴离子自由基自身被氧化为Cu(Ⅱ)(Cu(Ⅰ)+O2→Cu(Ⅱ)+·).生成的超氧阴离子自由基在碱性介质中氧化鲁米诺产生化学发光[12].在Cu(Ⅱ)存在下,无需加入任何氧化剂,盐酸二甲双胍与碱性鲁米诺间反应可产生强的化学发光.对影响化学发光反应的各种因素进行了考察,建立了测定盐酸二甲双胍的流动注射化学发光新方法.该方法简单,灵敏,已被成功用于片剂中盐酸二甲双胍含量的测定.【相关文献】[1]王敬先,康晨霞.降血糖新药——盐酸二甲双胍[J].中国药理学通报,1996,12(4):335.[2]梁莉,乔华,王婷,等.盐酸二甲双胍的不良反应[J].中国药事,2007,21(8):652-654.[3]Ashour S,Kabbani R.Direct spectrophotometric determination of metfo rmin hydrochlo ride in pure fo rm and in drug formulations[J].Analytical Letters,2003,36(2):361-370. [4]Tian X J,Song J F.Catalytic action of copper(Ⅱ)ion on electrochemical oxidation of metformine and voltammetric determination of metformine in pharmaceuticals[J].Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2007,44(5):1 192-1 196.[5]来晓红.HPLC法测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍的含量[J].药物分析杂志,2001,21(3):195.[6]Yardimci C,Ozaltin N.Method development and validation fo r the simultaneous determination of rosiglitazone and metformin in pharmaceutical p reparations by capillary zone electrophoresis[J].Analytica Chimica Acta,2005,549(1-2):88-95.[7]Wang Z P,Zhang ZJ,Fu Z F,et al.Sensitive flowinjection chemiluminescence determination of metfo rmin based on N-bromosuccinimide-fluoresceinsystem[J].Analytical Letters,2003,36(12):2 683-2 697.[8]He C,Zhang Z J,He D Y,et al.Chemiluminescence determination of metfo rmin based on hydroxyl radical reaction and molecularly imp rinted polymer on-lineenrichment[J].Analytical and Bioanalytical Chemistry,2006,385(1):128-133.[9]Marques K L,Santos J L M,Lima J L F C.A catalytic multi-pumping flow system for the chemiluminometric determination of metformin [J]. 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鲁米诺化学发光反应在液相色谱检测技术中的应用
武竟存;吕九如;章竹君
【期刊名称】《化学试剂》
【年(卷),期】1992(14)2
【摘要】液相色谱-化学发光检测法是近年来引起人们极大兴趣并获得迅速发展的一种灵敏检测方法。

本文就鲁米诺化学发光反应在液相色谱检测技术中的应用作了详细评述。

引用文献42篇。

【总页数】4页(P95-98)
【关键词】液相色谱;鲁米诺;化学发光反应
【作者】武竟存;吕九如;章竹君
【作者单位】陕西师范大学实验中心
【正文语种】中文
【中图分类】O657.72
【相关文献】
1.鲁米诺化学发光体系在液相色谱检测中的应用 [J], 朱智甲;何书美
2.高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用 [J], 谢瑶;石萌萌;庞欣
3.基于鲁米诺电生化学发光的液相色谱间接测定法 [J],
4.过氧草酸酯化学发光反应及其在液相色谱检测技术中的应用 [J], 武竟存;耿征;吕九如
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鲁米诺化学发光分析在药物分析中的研究化学教育 2000级3班梁斐指导老师：张成孝教授摘要:化学发光分析法是根据化学反应产生的光辐射的强度来确定物质含量的分析方法。

该分析方法具有灵敏度高、线性范围宽、仪器简单、分析速度快、容易实现自动化等优点，受到人们的广泛关注。

本论文利用鲁米诺体系流动注射化学发光法，建立了双嘧达莫和异烟肼的化学发光分析法。

我们在实验中发现，将含氮杂环的嘧啶类合成药物双嘧达莫溶液注入鲁米诺与铁氰化钾化学发光反应结束后的混合溶液中可产生强的化学发光信号。

根据此实验现象并结合流动注射分析技术，建立了测定双嘧达莫的化学发光分析法。

在优化的实验条件下，化学发光分析信号与双嘧达莫的浓度在1×10-10 ~ 4×10-7g/mL 之间呈良好的线性关系。

根据IUPAC规定，计算得该方法的检出限为6×10-11g/mL。

对1×10-8g/mL的双嘧达莫进行7次平行测量，相对标准偏差为1.1%。

该方法用于双嘧达莫片剂中双嘧达莫含量的测定，并与药典中标准方法进行对照，没有显著性差异。

实验发现将异烟肼溶液注入鲁米诺与高锰酸钾化学发光反应结束后的混合溶液中可产生强的化学发光信号。

根据此实验现象并结合流动注射分析技术，建立了测定异烟肼的化学发光分析法。

在优化的实验条件下，化学发光分析信号与异烟肼的浓度在5×10-8 ~ 1×10-4g/mL之间呈良好的线性关系。

根据IUPAC规定，计算得该方法的检出限为1×10-8g/mL 。

对1×10-6g/mL的异烟肼进行7次平行测量，相对标准偏差为1.1%。

该方法用于异烟肼片剂中异烟肼含量的测定，结果令人满意。

关键词：流动注射分析化学发光反应鲁米诺双嘧达莫异烟肼The analytical application of luminol chemiluminescence inPharmaceutical assayLiang Fei ZhangChengxiao professorAbstract：Chemiluminescence (CL) analysis promises high sensitivity with simple instrumentation (no monochromator required) and rapidly in signal detection (normally 0.1-10s). When coupled with flow injection analysis (FIA), CL-based FIA methods provide cheap, rapid, simple and reproducible means of detection and therefore, it has been extensively used in many fields, such as biological, clinical, environmental.When dipyridamole(DIP) was injected into the reaction mixture after the finish of the reaction between luminol and K3Fe(CN)6, a new CL reaction was initiated to produce strong CL emission. Based on this phenomenon, a novel CL system for DIP combined with flow injection analysis was presented in this paper. The CL intensity responded linearly to the concentration of DIP in the range of 1×10-10 ~ 4×10-7 g/mL with a detection limit of 6×10-11g/mL. The relative standard deviation was 1.1% for 1×10-8 g/mL DIP solution( n=7). The method has been applied to determine DIP in tablets and the results are in agreement with traditional method using UV spectrometry.It was found that a strong CL signal was produced when isoniazid was injected into the reaction mixture after the finish of the reaction between luminol and KMnO4. Based on this finding, a simple flow injection CL method was established for determination of isoniazid. Under the optimized condition, the CL signals responded linearly to the concentration of isoniazid from 5×10-8 g/mL to 1×10-4g/mL with the detection limit of 1×10-8 g/mL isoniazid. The relative standard deviation was 1.1% for 1×10-6 g/mL isoniazid (n=7). This method developed has been applied to determine isoniazid in tablets with satisfactory results.Keywords: Flow-injection analysis; Chemiluminescence reaction; Luminol; Dipyridamole；Isoniazid一引言化学发光是在化学反应的中间体或反应产物吸收了化学反应释放出的化学能由基态跃迁至电子激发态，并由电子激发态返回基态时所产生的光辐射。