耐碳青霉烯肺克雷伯菌和大肠埃希菌耐药机制研究

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因检测及分析涂海健;陈淑娟;林群英;许光辉【摘要】目的分析耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)耐药情况与耐药相关基因的关系,了解其耐药机制. 方法采用PCR技术检测29株碳青霉烯类耐药KPN与产碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,β-ESBLs)、ampC酶及喹诺酮类耐药相关基因blaKPC-2、blaIMP-4、blaCTX-M、blaCTX-M-15、blaVIM-1、blaTEM、blaSHV、ampC、gyrA、parC,并对KPC-2、ampC、gyrA基因进行序列分析. 结果用PCR技术证实了29株为产KPC、IMP型碳青霉烯酶的KPN,并且携带TEM、SHV型β-ESBLs,其中18株同时编码ampC基因;29株待测菌均检出喹诺酮类耐药相关gyrA、parC基因.KPC基因片段同源性分析显示,待测菌株之间核苷酸同源性为98％～100％,氨基酸同源性为97％～100％;与肺炎克雷伯氏菌Kpn-1504株之间的核苷酸同源性最高,为99％～100％.gyrA 、parC基因突变率分别为58.6％、62.1％.结论产KPC-2、IMP-4型碳青霉烯酶同时携带多种β-ESBLs、ampC基因及突变的喹诺酮类耐药相关gyrA、parC基因的KPN耐药情况更加严重,同时存在克隆性流行可能.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2016(008)004【总页数】6页(P246-251)【关键词】肺炎克雷伯菌;blaKPC;超广谱β-内酰胺酶;基因;PCR【作者】涂海健;陈淑娟;林群英;许光辉【作者单位】莆田学院附属医院检验科,福建,莆田351100;莆田学院附属医院检验科,福建,莆田351100;莆田学院附属医院呼吸内科,福建,莆田351100;莆田学院附属医院检验科,福建,莆田351100【正文语种】中文随着耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，KPN）出现和临床检出不断增多，给临床抗感染治疗和医院内感染控制带来极大的困难，严重威胁人们的健康［1］。

论著2009年中国CH I N ET大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌耐药性监测卓超1，朱德妹5，张泓9，吴玲”，苏丹虹1，胡付品5，李万华9，胡云建14，倪语星2，蒋晓飞5，单斌Ⅲ，艾效曼“孙景勇2，王传清6，杜艳10，俞云松3，王爱敏6，张朝霞11，杨青3，徐元宏7，季萍¨，孙自镛4，沈继录7，贾蓓12，简翠4，徐英春8，黄文祥”，汪复5，孙宏莉8，魏莲花”，摘要：目的了解2009年中国C H I N ET所属14所医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属的耐药情况。

方法采用纸片扩散法(K-B法)对临床分离株作药敏试验。

结果共收集C H I N E T细菌耐药性监测网14所医院分离的大肠埃希菌7992株，肺炎克雷伯菌4556株和产酸克雷伯菌377株。

其中儿童患者(o～14岁)来源的大肠埃希菌和克雷伯菌属分别占21．3％(1700／7992)和18．5％(915／4933)。

大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESB L s株检出率分别为56．5％(33．3％～78．5％)和41．4％(21．7％～70．8％)。

各医院ESB I。

S检出率存在一定差异。

药敏试验结果显示，大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南等3种碳青霉烯类抗生素的耐药率均小于1％，对头孢哌酮一舒巴坦和哌拉西林一他唑巴坦的耐药率低于6％。

肺炎克雷伯菌对3种碳青霉烯类抗生素耐药率介于2．9％～5．2％，对头孢哌酮舒巴坦和哌拉西林一他唑巴坦的耐药率分别为10．8％和15．1％。

产E SB I。

S菌对上述5种药物的耐药率也低于25％。

50％以上的产E SB I，S株对庆大霉素和环丙沙星耐药。

有10所医院分离出对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株，其中肺炎克雷伯菌132株，大肠埃希菌20株。

83株肺炎克雷伯菌和5株大肠埃希菌为泛耐药株。

主要集中于复旦大学附属华山医院(共73株)。

结论大肠埃希菌和克雷伯菌属对碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮一舒巴坦和哌拉西林一他唑巴坦仍保持高度敏感性。

Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2021Apr 32(8)肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展吴鸿滨(天津市第五中心医院检验科,天津300450)Research Progress in the Treatment of Carbapenem-resistant Enter 鄄obacteriaceaeWU Hong-bin (Department of Clinical Laboratory,Peking University Binhai Hospital,Tianjin 300450,China )Abstract :Enterobacteriaceae are facultative anaerobic or obligate aerobic gram -negative bacilli and coccobacillusthat widely exist in human and in the intestine of most warm-blooded animals,and most of them are normal flora.As one of the most widely distributed pathogenic bacteria,Enterobacteriaceae can be transformed into conditional pathogenic bacteriawhen the immunity of host decreases,which not only causes external acquired infection,but also iatrogenic infection inside the hospital.Carbapenems are β-lactam antibiotics with broadantibacterial spectrum and strong antibacterial property,and is thus often used as the final drug therapyin the treatment of multi-drugresistant gram-negative bacillus infection.However,the unscientific usage and dosage of broad-spectrum antibioticsin recent years has given rise toa large number of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE),the drug resistance rate ofwhich is increasing year by year.Keywords :Enterobacteriaceae ;Drug resistance ;Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae ;Resistance mechanism;Ther ⁃影响,其不同形状大小会对患者治疗效果产生较大影响,在治疗时应根据患者实际情况进行选择。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学和耐药基因分析吕继芳;郑焙文;张静;喻玮;董慧慧;李兰娟;肖永红【摘要】目的了解碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学特征及其碳青霉烯酶基因的携带情况.方法收集我院2014年1月到2014年12月临床标本中分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及药敏检测,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因、多位点序列分型(MLST)和质粒复制子分型.结果共收集138株碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌,细菌对多种临床常用抗菌药物均显著耐药.改良Hodge试验127株结果阳性(92.0％).PCR结果显示125株携带碳青霉烯酶基因,其中124株携带blakpc-2型基因(89.9％),1株携带blaimp-4型基因.MLST分型显示以ST11为主(96株,69.6％).质粒分型以IncF型多见(100株,72.5％).结论产KPC-2型碳青霉烯酶是我院肺炎克雷伯菌碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11为主要克隆菌株.耐药菌株携带的质粒类型以IncF型为主.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2016(041)005【总页数】6页(P356-361)【关键词】肺炎克雷伯菌;耐药性;碳青霉烯酶;分子分型【作者】吕继芳;郑焙文;张静;喻玮;董慧慧;李兰娟;肖永红【作者单位】浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003【正文语种】中文【中图分类】R978;R378碳青霉烯类抗菌药物是临床上治疗产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌引起的感染最有效的药物。

碳青霉烯类抗生素耐药机制介绍碳青霉烯类抗生素一种非典型beta-内酰胺类抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性强以及对beta-内酰胺酶稳定以及毒性低等特点，对控制耐药菌、产酶菌感染及免疫缺陷者感染发挥着重要作用。

其结构与青霉素类的青霉环相似，不同之处在于噻唑环上的硫原子为碳所替代，且C2与C3之间存在不饱和双键；另外，其6位羟乙基侧链为反式构象。

研究证明，正是这个构型特殊的基团，使该类化合物与通常青霉烯的顺式构象显著不同，具有超广谱的、极强的抗菌活性，以及对beta-内酰胺酶高度的稳定性。

碳青霉烯类抗生素作用方式都是抑制胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白（PBPs），从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀致使细菌胞浆渗透压改变和细胞溶解而杀灭细菌。

哺乳动物无细胞壁，不受此类药物的影响，因而本类药具有对细菌的选择性杀菌作用，对宿主毒性小。

青霉素结合蛋白（PBPs）是存在于细胞浆膜上的蛋白，分两类，一类具有转肽酶和转糖基酶的活性，参与细胞壁的合成，另一类具有羧肽酶活性，与细菌细胞分裂和维持形态有关。

近十多年来已证实细菌胞浆膜上特殊蛋白PBPs是此药的作用靶位，亚胺培南与PBP2的亲和力很强，结合后阻碍细胞壁的合成，可使细菌迅速肿胀、溶解，而且其作用很少受接种菌量（PH5.5～8.5）的影响。

美罗培南能迅速渗透入肠杆菌科和铜绿假单孢菌靶位，主要是与PBP2和PBP3紧密结合。

国内已经上市的品种有亚胺培南，美罗培南，帕尼培南，法罗培南，厄他培南，比阿培南。

抗菌药物出现，总是伴随着细菌耐药性的产生，碳青霉烯类抗生素虽然刚开始使用时，细菌的耐药性相当低，对常见病原菌的敏感率很高，但碳青霉烯类与其他抗菌药物一样，在临床应用后即出现耐药菌株。

目前临床上已出现亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类药物的耐药菌株。

细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的机制主要有以下几种：1.外膜孔蛋白减少或丢失伴高水平beta-内酰胺酶的持续产生外膜的通透性对药物进入菌体至关重要，抗生素可以通过通道蛋白直接扩散进入胞内，并到达菌体内的相应作用部位，从而达到抑菌或杀菌的作用。