葡萄籽原花青素综述报告

葡萄籽中原花青素的提取及应用现状李豆;王珊珊【摘要】原花青素（ proanthocyanidins，PC）是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，广泛分布于多种天然植物中。

阐述了葡萄废弃物中原花青素的功能，分析了其应用开发现状。

结合常用的提取方法，并综合国内外关于原花青素的研究进展，对葡萄籽中原花青素提取的工艺参数进行优化，从而得出葡萄籽中原花青素最优提取方案。

以期为葡萄籽的全面利用和原花青素的工业化生产提供科学依据，使原花青素拥有更广泛的应用。

%Currently, proanthocyanidins is internationally recognized as the most effective natural antioxidants which can scavenge free radicals in thebody.Proanthocyanidins is widely distributed in natural plants.This paper described the function of proanthocyanidins in the grape waste, and analyzed its application development bined with common extraction method, and the progress of proanthocyanidins at home and abroad, the process parameters of extracting the anthocyanin from grape seed was optimized, and the best extraction method of proanthocyanidins from grape seeds was get.The paper was expected to provide scientific basis for industrialized production and comprehensive utilization of proanthocyanidins from grape seed, so as to the proanthocyanidins has a wider application.【期刊名称】《生物技术进展》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P335-339)【关键词】葡萄籽;原花青素;提取方法【作者】李豆;王珊珊【作者单位】沈阳工学院生命工程学院，辽宁抚顺113122;沈阳工学院生命工程学院，辽宁抚顺113122【正文语种】中文葡萄籽中富含多酚类物质，经过大量研究显示，葡萄中虽然葡萄籽占的比重极少，但是其中的多酚类物质的含量和种类均比皮和果肉丰富得多[1]，而且这些多酚类物质具有极强的抗氧化能力。

葡萄籽的有效成分及药理作用研究进展李志丽赤峰学院化学系；赤峰024000摘要本文参考近几年来国内外关于葡萄籽的开发、利用研究资料，比较完整地介绍了葡萄籽的化学成分及其药效。

葡萄籽提取物原花青素<GSPE）是其中最有效的成分，具有广泛的药理保健作用，可用于防治心脑血管疾病、抗糖尿病、抗癌、抗衰老、防辐射、改善免疫功能等。

葡萄籽在美国、日本等国家被广泛研究，并开发成保健食品和药品。

在我国葡萄籽作为保健品和植物性药物也将有广阔发展前景。

关键词葡萄籽；有效成分；原花青素(GSPE>；药理作用葡萄籽为葡萄科葡萄属葡萄、俪流的种子，是生产葡萄糖的废料。

但近些年来，随着对其研究的不断深人，发现葡萄籽有较高的营养价值和药用价值。

目前，葡萄籽在美国、日本等许多国家被广泛研究，开发成保健食品和药品。

其中，葡萄籽提取物原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE>因其具有多种保健功能并且安全性好的特性而倍受人们青睐。

本文就葡萄籽有效成分及药理作用研究进展作一综述。

1 有效成分到目前为止 ,从葡萄籽中已分离出多种化学成份 ,其中主要涉及脂肪油类、黄酮及多元酚类和蛋白质类成分等。

1.1 脂肪油类成分葡萄籽油中含有大量不饱和脂肪酸，而饱和脂肪酸含量较低。

焦勇等[1]从新疆葡萄籽油中分离出15种化合物：11,14-二十碳二烯酸甲酯、亚油酸、α-庚烯醛、2,4-癸二烯醛、3,4-二甲基-2-己醇、2-癸烯醛、十一酸乙酯、辛酸乙酯、庚醛、千酸乙酯、苯乙醇、3,4-二甲基-1-戊醇、4-甲基-1-己醇、癸酸乙酯、β-庚烯醛。

李盛钰等[2]从山葡萄籽中分离出10个化合物：9,11-十八碳二烯酸甲酯、8,11-十八碳二烯酸甲酯、10,13-十八碳二烯酸甲酯、9-十八碳烯酸甲酯-12-乙酸、16-十七碳酸甲酯、千二酸单甲酯、壬二酸二甲酯、13-炔-十四碳炔酸甲酯、1,1-二苯基-2-<2,4,6-三硝基）-联氨、9,12-十六碳二烯酸甲酯。

原花青素酸奶的制备 脱脂乳粉加入纯净水复原乳 加入白砂糖、葡萄籽浸提液均 质 95 ℃ ，5min灭菌冷却至大 约 40℃ 接种在2℃恒温培养 4h 置于 4—6℃冰箱 中后熟 24h

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谢谢！
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低聚原花青素(Oligmeric Proantho Cyanidins）
原
花
原花青素的二、三、四聚体在抗氧化、酶抑制、抗 突变等方面表现出良好的生物活性，其中原花青素
青
二聚体的活性最佳。低聚原花青素的水溶性较好， 可以用于对水溶性要求较高的食品、药品及化妆品
素
行业。高聚原花青素水溶性差，难以被人体吸收利 用，且由于空间位阻的影响，酚羟基的活性受到影
超临界二氧化碳萃取法
Supercritical carbon dioxide extraction
绿色环保，无化学残留 昂贵

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MARCULA®Business
超声提取法
Ultrasonic extraction
提取时不受极性和相对分子质量限制
肿瘤和癌症的化学预防剂
老年痴呆症、心血管疾病等的化 学预防剂
多存在于植物种皮中
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5 原花青素
原花青素是一种极其常见的多酚类物质，葡萄籽中原花青素低廉且易获取。 最强有效的自由基清除剂之一
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5 原花青素
原花青素根据缩合键位的不同可将这些原花青素寡聚物分为 A 、B 、C 、D 、T 等几类,葡萄籽中的原花青素主要是 B 型、 C型和T 型。 无论是B型、C 型或 T型,其分子结构中的结构单元是由儿茶素、表儿茶素或没食子酸组成只是结构单元间缩合连接的位 置不同而构成不同类型的寡聚物。

葡萄籽中的原花青素能延缓衰老众所周知，氧在生命活动中至关重要，但是氧化问题也会给我们带来一些困扰。

在自然界中，它与铁发生反应会形成铁锈，与此相类似，机体内部也会氧化产生大量的自由基，最终导致身体也开始“生锈”衰老。

据研究表明，自由基是造成机体器官老化及诸多疾病的重要原因之一，据估计大约80%～90%的老化性、退化性疾病都与自由基有关。

现代研究发现，葡萄籽提取物中有一种叫原花青素的物质，具有超强的抗自由基的氧化功能，是维生素E的50倍、维生素C的20倍，有延缓衰老、预防动脉血管硬化的作用，被誉为体内自由基清除剂。

强大的抗衰老作用污浊的空气、紫外线、化学制剂等因素活化了自由基。

自由基攻击细胞，摧毁细胞膜，导致细胞死亡和细胞膜变性，使细胞不能从外部吸收营养，也排泄不出细胞内的代谢废物，长期积累人体就会加速衰老。

葡萄籽的提取物原花青素能清除人体内有害的自由基，保护人体细胞组织免于被自由基的氧化损伤，从而达到延缓衰老的功效。

正是基于这一作用，葡萄籽又被誉为“皮肤维生素”和“口服化妆品”。

它能恢复胶原蛋白活力具有美白、保湿、祛斑功效，改善皮肤弹性与光泽，清除痤疮、愈合疤痕。

葡萄籽还是天然的“防晒霜”，能够阻止紫外线侵害皮肤，增强皮肤抵抗力、免疫力，防治皮肤过敏及各类皮肤病。

在阳光充沛的地方，宜多摄入这类产品，以预防皮肤癌的发生。

食用 ...目前，葡萄籽常见的食用 ... 一般都是采用新科技“超临界流体萃取法”，再 ... 成胶囊，温水送服。

其实，日常生活中，酿完葡萄酒或者吃完葡萄剩下的葡萄籽可以放在一起洗净晾乾，炒熟，磨粉冲水喝，每天喝1次，美容保健效果也较好;另外，葡萄籽还可以榨油，其营养价值和医疗作用均得到国内外医学界及营养学家的充分肯定。

需要注意的是，有出血倾向者，或者凝血功能有障碍者不能食用这类产品;孕妇或准备怀孕者，以及正在进行母乳喂养者，还有儿童，也最好不要吃。

葡萄籽原花青素的药理学研究进展段国平;刘晓利;赵丕文【摘要】Proanthocyanidins is a collective name of a class of polyphenolic compounds widely found in the plant kingdom, of which the richest content is the grape seed. The research shows that GSPE has the pathological functions like scavenging free radicals, antioxidation, antitumor, anti atherosclerosis and resistance to radiation and therapeutical functions to diseases of many systems. As a natural antioxidant. GSPE conforms to modern people’s demand for high efficient and low-toxicity drugs, which has wide devel-opment prospects. This essay makes a review of the research advances of GSPE in Cardiovascular system diseases, cancer, and male reproductive system diseases and eye disease and discusses its mechanisms re-lated to resisting oxidation and free radicals so that it can provide reference for its further development and utilization.%原花青素是一类广泛存在于植物界的多酚化合物的总称，其中以葡萄籽的含量最为丰富。

花青素的研究进展及其应用一、本文概述花青素是一类广泛存在于自然界中的天然色素，因其独特的色彩和生物活性，在食品、医药、化妆品等多个领域具有广泛的应用前景。

近年来，随着科学技术的不断发展，花青素的研究逐渐深入，其在抗氧化、抗炎、抗肿瘤等方面的生物活性得到了广泛关注。

本文旨在综述花青素的研究进展，包括其提取工艺、生物活性、作用机制等方面的最新研究成果，同时探讨花青素在各个领域的应用现状及其未来发展趋势。

通过本文的阐述，旨在为花青素的研究与应用提供全面的参考，为相关领域的研究者和从业人员提供有价值的指导和帮助。

二、花青素的结构与性质花青素是一类广泛存在于自然界中的天然色素，其化学结构属于黄酮类化合物，主要存在于植物的花、果实、茎和叶等部位。

花青素的基本结构是由两个苯环通过一个吡喃环连接而成，呈现出独特的蓝色或紫色。

这些色彩不仅使植物呈现出五彩斑斓的外观，而且赋予了植物诸多生物活性。

花青素的主要性质包括其稳定性、水溶性以及抗氧化性等。

花青素在水溶液中呈现鲜艳的色泽，且其颜色随pH值的变化而变化，这一特性使其在食品工业中具有广泛的应用前景。

花青素具有较强的抗氧化性，能够有效清除体内的自由基，从而起到延缓衰老、预防疾病的作用。

在结构上，花青素具有多种类型，如黄酮醇、黄酮、黄烷酮等，不同类型的花青素在结构和性质上存在一定的差异。

这些差异使得花青素在生物活性方面表现出多样性，如抗炎、抗癌、抗心血管疾病等。

花青素的结构与性质使其成为一类具有重要研究价值的天然色素。

通过深入研究花青素的结构与性质，不仅可以揭示其在植物生长发育和逆境响应中的生物学功能，还可以为花青素在食品、医药等领域的应用提供理论依据和技术支持。

三、花青素的提取与分离花青素作为一类具有丰富生物活性的天然色素，其提取与分离技术在近年来得到了广泛的研究与发展。

花青素的提取主要依赖于其溶于有机溶剂的特性，常用的提取方法包括溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法以及超临界流体萃取法等。

葡萄籽中原花青素研究现状摘要：葡萄籽中富含多酚物质，具有很强的抗氧化能力，原花青素就是多酚类物质的主要成分。

目前在葡萄籽中提取的原花青素，能够被人体吸收利用的大多为低聚物原花青素，而高聚物原花青素不能被人体吸收利用。

本文对葡萄籽利用现状及其原花青素提取工艺方法进行综述，进一步明确葡萄籽活性成分的抑菌机理，也可以为开展葡萄籽皮综合利用，提升产品附加值提供新的思路。

关键词：葡萄籽；原花青素；多酚1.葡萄籽的研究现状中国是世界葡萄种植面积最大的国家，其中80%用来酿酒，13%被生食，7%用于果汁以及其他葡萄制品的生产[1]。

葡萄籽占鲜果重量的4%到6%，作为葡萄酒和葡萄饮料加工中产生的资源副产物，很少用于研究使用，资源浪费现象很严重。

然而葡萄籽中含有多种人体需要的营养物质，其中多酚类物质是葡萄籽中的主要成分，具有很强的抗氧化能力。

我国对于葡萄籽的整体利用不够全面，而且在我国一般葡萄籽都直接被丢弃或者当作动物食物，造成资源浪费。

因此，我国葡萄籽的研究开发利用迫在眉睫。

目前国内学者开始关注葡萄籽提取物研究，许多企业也开始进行产品研发与上市。

2.葡萄籽中原花青素的研究现状原花青素(Proantho cyanidin,简称PC)又称缩合单宁。

它是广泛存在于植物中的天然聚多酚类化合物，这种多酚类化合物在酸性介质中加热均可产生花青素(Cyanidin)，故将这类多酚化合物命名为原花青素[2]。

原花青素根据其聚合度大小，通常分为低聚体（简称OPC）和高聚体（简称PPC）。

因为其聚合度有差别的原因，使其生物活性也不同。

其中低聚体更容易被人体吸收，能够更有效的发挥其生物功能。

葡萄籽中原花青素的研究应用主要集中在化妆品，保健品以及营养补充等方面，但在药品研究方面却涉猎甚少。

原花青素作为一种高效的抗氧化剂和自由基清除剂，能够提高超氧化物歧化酶的活性。

从而达到抗缺血再灌注损伤的作用。

原花青素有抗氧化、抗炎、免疫调节等作用。

这些作用对眼科多种疾病具有一定的疗效。

葡萄籽原花青素混合物抗氧化能力综述报告汇报人：江凯一、葡萄籽原花青素与几个重要组分●葡萄籽原花青素是多酚类化合物的集合体，这些酚类化合物是由四种单体聚合而成的，分别为儿茶素、表儿茶素、没食子酸和表儿茶素没食子酸酯，其中主要是儿茶素和表儿茶素。

●上述单体的二、三、四聚合体被称作低聚原花青素（opc）；五聚体以上被称作高聚体原花青素（ppc）●二聚体由于两个单体构象即缩合键位的不同，有多重异构体，现已鉴定的有8种，分别是原花青素B1~B8。

而在这八个异构体中原花青素B2是活性最强的一个二聚体，由两个单体（儿茶素或表儿茶素）聚合而成单体也是酚类化合物但它不属于原花青素，用原花青素来标定葡萄籽提取物的有效成分不能包含单体含量。

所以国际目前通用的做法是，提取物原花青素含量为总多酚减去单体的含量二、葡萄籽原花青素不同聚合度抗氧化能力比较及机理分析：1、葡萄籽原花青素组分抗氧化能力对比前提：葡萄籽原花青素是不同聚合度的聚合体组成的复杂化合物，每个聚合体都存在着繁多的异构体形式，而且聚合体之间还会交叉重叠。

因此，以现代纯化分离工艺，除单体及几种含量较高的二、三聚体外，还无法针对单一多聚体进行抗氧化活性的定性研究。

所以，目前我们比较不同聚合度抗氧化能力，主要是针对以下几个对象：单体、原花青素B2、低聚原花青素（opc）与高聚原花青素（ppc）。

2、原花青素B2与低聚原花青素DPPH抗氧化能力比较：参考文献：《葡萄籽低聚原花青素化学成分及抗氧化研究》辛立波等小结：在清除DPPH自由基能力上，原花青素B2表现出比低聚体OPCs更强的抗氧化能力3、单体、二聚体与多聚体原花青素混合物抗脂质过氧化能力的比较：参考文献：《葡萄籽原花青素的聚合度与抗氧化活性关系》孙芸等上图：FM为儿茶素与表儿茶素单体混合物FD 为二聚体各异构体混合物FT 为聚合度大于2的原花青素混合物三个组分抗氧化能力为FD ＞FT ＞FM，原花青素二聚体对脂质体体系的抗氧化效果优于单体。

本项目利用超声波的机械效应、空化效应和热效应，将其应用在葡萄原花青素的提取过程中，通过反复实验，确定了超声波的功率及提取时间，与原有的溶剂浸提提取工艺相比，利用超声波提取，可以减少提取时间从而提高生产效率，可以降低加热温度从而减少了有效成分的损失并节约了能源，可以降低溶剂用量从而节约了溶剂，还可以提高产物的得率。在确定了溶剂后，结合超声波技术，经反复试验，确定了合适的超声波。
（2）在相同的条件下，选择水、石油醚、乙醇三种不同溶剂对原花青素提取效果进行实验对比，取相同量的提取液定容，于500nm波长下测定吸光值，石油醚提取液的吸光值0.002，水提取液的吸光值0.413，乙醇提取液的吸光值0.523。
通过3种不同溶剂对原花青素提取效果影响的研究，选择了乙醇作为提取原花青素的溶剂。
自2022年11月成立以来，建立了天然植物活性成分多功能提取纯化研究、加工生产基地，对枸杞多糖、葡萄原花青素、番茄红素产品进行了开发，其中番茄红素获国家发明专利，并获得自治区科技进步二等奖；枸杞多糖通过了自治区科技成果鉴定，番茄红素粉、葡萄原花青素产品通过了自治区新产品鉴定，技术达到国内先进水平。
公司现有一套工业化生产设备，具有年产2吨植物活性产品的生产能力，产品有天然番茄红素、枸杞多糖、葡萄原花青素和叶黄素产品，产品已进入国际市场。2022年，实现销售收入810万元，公司资产由创业初期的30万元，增加到了2205万元，新增就业30人。因2022年新疆“七.五”事件的影响，企业的国外市场受到毁灭性打击，效益严重下滑，经过公司努力，现已逐步改变了市场形势。
葡萄原花青素提取与纯化技术的研究及应用研究总结报告
Masquelier通过对葡萄籽的提取物中OPC的深入研究发现，OPC是当今医学界发现的最安全高效的纯天然抗氧化剂，其抗氧化能力是维生素E的50倍、维生素C的20倍，它能有效清除体内多余的自由基，保护人体细胞组织免受自由基的氧化损伤，同时，还具有改善人体微血管的通透性，使严重静脉曲张病人的静脉增加弹性，提高皮肤抗氧化技能，加强和保护人体活性组织、稳定细胞膜以及抗酶活性（组胺脱羧酶）等生物特性。

关键词葡萄籽原花青素药理作用研究现状 葡萄籽原花青素（Ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｓ，ＧＳＰＥ）是从葡萄籽 中提取出的一大类多酚化合物的总称，属于生物黄酮类，主要由儿茶素和表儿茶 素为单体聚合而成。近年来的研究表明葡萄籽原花青素具有抗氧化、抗肿瘤、抗 衰老、降血糖、抗动脉粥样硬化等多种药理作用，涉及到心血管、内分泌、呼吸 等多个系统的疾病。本文就葡萄籽原花青素的药理学研究现状做一综述。 １、抗氧化，清除自由基 Ｈｅｒｍａｎ自由基衰老理论认为，自由基随机破坏性作用引发脂质过氧化造成 对生物膜损伤，使生命大分子交联聚合、脂褐素累积，破坏或减少器官组织细胞， 降低免疫功能，造成机体衰老，也导致一些退行性病变的发生。ＧＳＰＥ是一种高效 抗氧化剂，具有非常强的体内活性，其抗自由基氧化能力是维生素Ｅ的５０倍、 维生素Ｃ的２０倍ｒｔ］。Ｂａｇｃｈｉ等研究发现ＧＳＰＥｎ－Ｉ抑制ＴＰＡ诱导的腹腔巨噬细胞活性 氧的产生，并具有剂量反应关系，这是其他抗氧化剂所不能比拟的伽。高峰等 研究ＧＰＳＥ在人体中的抗氧化作用，结果表明ＧＰＳＥ能降低血清中ＭＤＡ的含量，同 时升高ＳＯＤ和ＰＳＨ．Ｐｘ的含量嘲。此外，适量的ＧＳＰＥ可以使维生素Ｅ再生并延缓 其消耗，是维生素Ｅ的生理再生剂。 ２、心血管系统
葡萄籽原花青素的药理学研究现状
段国平指导老师：赵丕文 （北京中医药大学基础医学院，北京１０００２９）
摘要葡萄籽原花青素是一种新型高效抗氧化剂，同时具有保护心血管、抗 肿瘤、免疫调节等药理作用，研究表明其对多个系统的疾病具有一定的预防和治 疗作用。本文就葡萄籽原花青素的药理作用及药理学研究现状进行综述，为其进 一步的研究提供参考。
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４、抗肿瘤 现代研究表明ＧＳＰＥ对多种癌细胞如卵巢癌、宫颈癌、肝癌、前列腺癌细胞 都具有不同程度的抑制作用。何佳声等发现ＧＳＰＥ在体外可呈浓度依赖性抑制人 结肠癌细胞株ＳＷ６２０的增殖并通过Ｃａｓｐａｓｅ．３通路促进其凋亡Ｉ圳。史志勇等研究 ＧＳＰＥ对人胰腺癌细胞株ＢＸＰＣ一３细胞体外生长的影响，发现ＧＳＰＥ以时间剂量关 系抑制ＢｘＰＣ一３的增殖并下调ＣＯＸ－２的表达，且诱导细胞停滞在Ｇ０／Ｇ１期，其机 制可能与ＣＯＸ－２的表达有关ＩｌＳｌ。 ５、在眼科的应用 研究表明ＧＳＰＥ对眼科多种疾病具有防治作用。在老年性白内障方面，而 ＧＳＰＥ可以抑制晶状体氧自由基的生成和脂质过氧化，从而有效地抑制白内障的 发生。如Ｏｕｒｕｋａｌｌ等在用亚硒酸钠致大鼠白内障模型的研究中，发现服用ＧＳＰＥ 可以升高晶状体中的谷胱甘肽含量，降低丙二醛的含量，且大鼠食物中加入ＧＳＰＥ 亦可延缓白内障进展［１６１。在青光眼方面，Ｚｈａｎｑ等研究发现原花青素在大鼠脑 缺血模型中可抑制前脑皮质及海马神经细胞表达Ｂｃｌ．２蛋白和Ｂａｘ蛋白，从而有效 抑制神经细胞的凋亡０７１。在葡萄膜炎方面，ＧＳＰＥ以其良好的抗炎作用和免疫调 节功能，可防止炎症引起的组织破坏和并发症的发生。此外，ＧＳＰＥＪ丕具有良好的 保护角膜基质细胞的作用。 ６、免疫调节和抗炎作用 Ｓｈａｒｍａ等发现ＧＳＰＥ可改善ＬＷＢ诱导的小鼠免疫抑制，这可能是ＧＳＰＥ抑制小 鼠光致癌的机制之一ｌｌａｌ。亦有研究表明ＧＳＰＥ对喂食甲醇或感染鼠逆转录病毒引 起的小鼠免疫功能不全具有动态调节的作用，能促进小鼠体内ＩＬ－２的产生，减少 感染逆转录病毒的小鼠细胞中ＩＬ－２６的产生，降低食用甲醇小鼠脾细胞所产生 也．１０的高水平，同时还可增加自然杀伤细胞的细胞毒性。周丹阳等发现ＧＳＰＥ通 过减少肺内ｉＮＯＳ的表达而减轻哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性｜１９１。ＧＳＰＥ对 大鼠乙酸性结肠炎也有明显的治疗作用，且呈剂量依赖性１２们。 ７、其它作用 ＧＳＰＥ还有抗疲劳、抗衰老、抗辐射和突变、抗抑郁、抗感染、保护肝肾、 改善记忆能力障碍等多种作用。如Ｎａｉｒ等发现ＧＳＰＥ能抑制ＨⅣ．１病毒在外周血单 核细胞中的复制和表达，分子机制的研究显示，其能够剂量依赖性地显著降低趋化 受体的表达，为ＨＩＶ．１病毒的防治研究提供一定的思路Ｉｚｌｉ。江蓓等发现ＧＳＰＥ能

葡萄籽原花青素的提取技术研究概况葡萄籽原花青素的提取技术研究概况摘要：原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物，葡萄籽被认为是提取原花青素的最正确原料。

随着科技的开展和进步，提取技术不断被突破，本文分析和整理近年来国内外期刊有关的文献，对葡萄籽原花青素的提取技术进行综述，为葡萄籽原花青素的工业生产研究提供参考。

关键词：葡萄籽，原花青素，提取原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物。

葡萄籽作为葡萄酒及葡萄汁生产的下脚料，是原花青素的主要来源，具有明显的本钱优势，被认为是提取原花青素的最正确原料。

原花青素由不同数量的单体黄烷-3-醇缩合而成，黄烷醇结构上可以连接不同的酰基或糖酰基，最常见的是没食子酸与-表儿茶素C3羟基缩合形成的酯。

由于单体组成及单体间连接键的不同，每种聚合体还可能包含许多同聚异构体，形成复杂的混合物。

通常将聚合度2～4的称为低聚体，将聚合度5以上的称为高聚体。

随着科学技术的快速开展和进步，传统提取方法不断被突破，超临界流体萃取、微波辅助提取以及动态罐组式连续逆流提取等新的提取方法和技术不断完善。

这些新技术具有提取率高、提取物纯度高、提取速度快等优点，具有十分广阔的应用前景。

1 提取技术1.1 超临界流体萃取超临界流体萃取是以超临界流体代替常规有机溶剂，对中草药中有效成分进行萃取和别离的新技术。

气体在超临界状态下兼有气液两相的双重特点，既具有与气体相当的高扩散系数和低黏度，又具有与液体相近的密度和对物质良好的溶解能力。

将处于超临界状态下的流体与待别离的中药材接触，选择性地溶解其中的某种成分，然后通过减压，使超临界流体迅速挥发，被溶解的物质以固态或液态形式析出，从而实现所需组分的提取与别离。

国内外均有运用CO2超临界流体萃取法制备葡萄籽原花青素的报道。

胡佳兴【1】利用甲醇为夹带剂的超临界萃取法提取葡萄籽中的原花青素；Chafer等【2】也是采用乙醇作为夹带剂提取原花青素，并用HPLC法测定提取物中的成分；Pinelo等【3】比较了超临界流体萃取法与固液萃取法，发现前者提取的原花青素具有更好的抗氧化性。

葡萄籽中分离提取原花青素的研究花青素是一类多酚类化合物，其具有高效的清除自由基的功能，是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。

本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。

研究结果表明：本项目产品投资费用少，操作费用低，产品附加值高；原料为废物利用，变废为宝符合国家相关产业政策；几乎没有“三废”排放，使用的溶剂全部回收利用，废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。

标签：花青素；葡萄籽；提取；正交实验1 概述原花青素是广泛存在于植物中的一类天然多酚类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。

属于缩合鞣质或黄烷醇类。

最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红。

它于1879年在意大利上市。

由于原花青素的多种功效，由葡萄籽提取的原花青素已被我国卫生部批准为保健原料。

目前对原花青素的提取研究及保健作用研究已非常成熟。

已经将其应用到工业化产业，开发出多种原花青素的保健产品和化妆产品。

原花青素的产品已被广大消费者普遍接受。

2 葡萄籽中花青素的提取本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。

并通过设计正交实验，得出原花青素提取最佳工艺条件。

2.1 实验方法2.1.1 葡萄籽中原花青素的提取本实验采用甘肃紫轩酒业葡萄酒厂生产葡萄酒产生的葡萄籽下脚料作为本实验的原材料。

在生产葡萄酒压榨葡萄汁的糟粕和葡萄酒生产前和发酵后压榨的榨粕，所得的这些榨渣中，以换成干品计，约有50%的葡萄皮，45%的葡萄籽和少量的梗等，将该榨渣经粗选分离出葡萄籽，作为提取的原料。

所得的葡萄籽用粉碎机粉碎后，过20目筛，于磨口三角瓶中，经石油醚脱脂脱水份，得脱脂葡萄籽粉，用一浸提液在50℃的恒温水浴中回流浸提，离心后取上清液，反复提取若干次，最后洗涤残渣，将上清液和洗涤液合并，加入固体无水硫酸钠脱水，倾出上层溶液，在真空度为0.095MPa，温度为40℃的条件下真空浓缩，浓缩液冷却至室温，得到原花青素粗提液，干燥，制得粗提物。

葡萄籽原花青素的抗氧化作用及市场应用原花青素，简称OPC，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。

一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多有机溶剂。

原花青素（葡萄籽提取物）是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。

实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。

一、葡萄籽原花青素的主要作用原花青素具有极强的抗氧化、消除自由基的作用，可有效消除超氧阴离子自由基和羟基自由基，也参与磷酸、花生四烯酸的代谢和蛋白质磷酸化，保护脂质不发生过氧化损伤；是强有力的金属螯合剂，可螯合金属离子，在体内形成惰性化合物；保护和稳定维生素C，有助于维生素C的吸收和利用。

原花青素分布广泛，存在于许多植物的皮、壳、籽、核、花、叶中，葡萄籽中原花青素含量最高，种类丰富。

1、血液循环在欧洲，为了改善血液循环、治疗糖尿病性视网膜病、减轻水肿和抑制静脉曲张等，原花青素己用于临床治疗几十年。

原花青素可以强化毛细血管、动脉与静脉血管，因此，它有消肿化淤的功效。

毛细血管的阻力减少和渗透性改善，使细胞更容易吸收养分与排除废物。

输送养分与运出废物这是血液循环系统的功能。

心脏负责抽压血液；动脉与静脉血管输送血液；而负责运送营养给细胞，又运出废物的是毛细血管。

原花青素可以清除细胞膜中水溶性和脂溶性的自由基，因此，抑制了释放某些酶去伤害毛细血管壁的过程。

原花青素的滋补功效可以在很短的时间内观察到。

法国波尔多大学的HenriChoussat 教授做了一次试验，试验者有47人，年龄从37岁到85岁，每人服用100毫克花青素。

27小时后发现，毛细血管的阻力减少了40%。

2、视力保护糖尿病性视网膜病是糖尿病的征兆，它是眼睛毛细血管微出血引起的，是成年盲人的常见病因。

葡萄籽中原花青素的功效成分及保健功能机理(轻工与食品工程学院徐晓辉学号: 1216392011摘要:葡萄籽中原花青素含量也极其丰富，其中低聚原花青素(--聚体～四聚体，OPC’s)有强抗氧化能力，花青素（Proanthocyanidin,简称PC）是葡萄籽中含量最大的酚类物质，其优越的抗氧化剂活性、抗弹性酶活性和血管活性使之成为在治疗眼科疾病、改善外周微循环、清除氧自由基、化妆品等领域中深受公众青睐和具有广阔发展前景的植物药。

本论文重点介绍了葡萄籽中花青素的性质、结构、功能及其作用的研究。

关键词：葡萄籽原花青素功效成分保健功能机理葡萄是世界上经济价值较高的一种水果，为葡萄科（Vitaceae）葡萄属（Vitis）植物。

葡萄果实中含有大量的酚类物质，其中30-40%存在于葡萄皮中，60-70%存在于葡萄籽中。

葡萄籽中含有13％~~15％的油脂，其中不饱和脂肪酸含量达90％，是一种营养保健性食用油(王洪新等，2002)。

葡萄籽油的主要成分是亚油酸，含量76％以上。

亚油酸是一种必需脂肪酸，是合成花生四烯酸的重要原料，而花生四烯酸是人体合成前列腺素的主要前体物质，具有防止血栓形成、扩张血管等作用。

另外葡萄籽油中还含有20多种矿物元素和维生素A、维生素D、维生素E、维生素PP、维生素K等多种维生素，特别是VE含量较高，VE可以定位于细胞膜上，防止过氧化脂质的产生，优于花生油、玉米胚芽油等，它和红花油的营养价值相当。

葡萄籽油还具有营养脑神经细胞，调节植物神经、清除血清胆固醇、治疗心血管疾病的作用。

可用于高血压患者的辅助治疗及防止脑溢血等。

一、葡萄籽的组成成分其中，前六项都是以干葡萄籽为基准，最后一项以湿葡萄籽为基准。

目前对葡萄籽研究最多的主要是原花青素和油脂，油脂常称为葡萄籽油。

研究结果表明，葡萄籽油的成分主要有月桂酸、豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸等，其中亚油酸和油酸的含量占列了约百分之九十甚至以上。

目前，随着老年人口的迅速增加[1]，衰老相关疾病发病率也在不断增长[2]。

生物体的衰老过程主要表现为机体组织和细胞中自由基累积。

自由基是正常代谢的中间产物，其反应能力强，可使细胞中多种物质发生氧化，损害生物膜，还可引发DNA 的损伤，进一步诱发肿瘤等疾病。

随着年龄的增长，人体的自由基防御能力减弱。

葡萄籽的提取物葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extract，GSPE）具有增强心血管活性、抗氧化、抗衰老等多种生物活性和药理作用[3]。

GSPE用于食品中能有效清除体内自由基，防治与自由基相关的心血管等疾病[4]；在化妆品中使用也可使皮肤老化减慢[5]。

研究显示模拟自然衰老过程公认的研究方法是持续注射一定量D-半乳糖[6]。

本研究采用D-半乳糖建立小鼠衰老模型，检测葡萄籽原花青素对衰老小鼠的抗氧化功效，探讨葡萄籽原花青素的抗衰老作用，为其在抗衰老方面的应用提供依据。

1 仪器与材料1.1 仪器AE224电子天平（上海恒平）；SG-4054恒温水浴锅（上海硕光）；JJ-2高速组织捣碎机（上海净信科技）；XSP-9CA光学显微镜（上海光学仪器一厂）；Varioskan Flash全波长扫描多功能读数仪（美国Thermo Scientific公司）。

1.2 材料葡萄籽原花青素提取物（GSPE，陕西惠科植物有限公司，纯度大于95 %）；D-半乳糖粉剂（上海国药集团，批号：20061025）；维生素C注射液[华润双鹤利民药业（济南）有限公司，批号：H20023350]；超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒，丙二醛（MDA）检测试剂盒，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）检测试剂盒，羟脯氨酸（HYP）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所，生产批号：20190514）。

1.3 实验动物雄性昆明种小鼠60只，20～22 g，购自西安交通大学医学实验动物中心，动物质量合格证号：SCXK（陕）2010-001，动物使用许可证号：SYXK （陕）2018-001。

葡萄籽原花青素提取物对衰老模型小鼠抗氧化作用一、本文概述本文旨在探讨葡萄籽原花青素提取物对衰老模型小鼠的抗氧化作用。

随着生活节奏的加快和人口老龄化趋势的加剧，抗衰老研究已成为生物医学领域的热点之一。

葡萄籽原花青素作为一种天然抗氧化剂，具有出色的抗氧化性能，因此在抗衰老领域具有广阔的应用前景。

本研究通过构建衰老模型小鼠，观察葡萄籽原花青素提取物对小鼠抗氧化能力的影响，以期为抗衰老药物的研发提供新的思路和方法。

本文将对葡萄籽原花青素提取物的成分和抗氧化机制进行简要介绍，为后续实验提供理论基础。

通过文献综述，梳理目前关于葡萄籽原花青素抗衰老作用的研究进展，分析其在抗衰老领域的潜在应用价值。

接着，本文将详细描述实验方法，包括衰老模型小鼠的构建、葡萄籽原花青素提取物的制备及给药方式、抗氧化指标的检测等。

在实验结果部分，将呈现葡萄籽原花青素提取物对衰老模型小鼠抗氧化作用的具体数据和分析。

本文将对实验结果进行讨论和总结，探讨葡萄籽原花青素提取物在抗衰老领域的应用前景及潜在机制。

本研究旨在为葡萄籽原花青素提取物的抗氧化作用提供科学依据，为开发新型抗衰老药物提供参考。

也希望通过本研究引起更多学者对葡萄籽原花青素在抗衰老领域的关注和研究兴趣。

二、材料与方法选用健康雄性小鼠，年龄为24月龄，体重25-30g，购自[动物实验中心]。

所有小鼠在实验开始前均进行健康检查，确保无重大疾病。

葡萄籽原花青素提取物（纯度≥95%，购自[生物科技公司]）；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、丙二醛（MDA）试剂盒，均购自[生物试剂公司]。

将小鼠随机分为四组：对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组10只。

对照组小鼠给予等量生理盐水，低、中、高剂量组小鼠分别给予50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg的葡萄籽原花青素提取物，连续灌胃30天。

实验结束后，小鼠禁食不禁水12小时，然后称重并记录。

采用摘眼球取血法收集小鼠血液，离心分离血清，保存于-80℃冰箱待测。

作 者 简 介 ： 吴 英 俊 （1970－ ）， 男 ， 实 验 师 ， 研 究 方 向 为 医 药 实 验 技 术。
成 ，并 对 CCl4、H2O2 和 铁 离 子 — 抗 坏 血 酸 等 自 由 基 引 发 剂 诱 导的肝脂质过氧化具有明显的拮抗作用， 可减轻肝组织 GSH 耗 竭 ，具 有 明 显 的 抗 脂 质 过 氧 化 作 用 与 清 除 自 由 基 的 效 应 。 朱 振 勤 ［4］研 究 了 GSPE 的 抗 氧 化 和 对 DNA 氧 化 损 伤 的保护作用，结果证明 GSPE 能有效地清除 O2·－、·OH、H2O2、 ONOO－和 全 血 嗜 中 性 白 细 胞 “ 呼 吸 爆 发 ” 产 生 的 多 种 活 性 氧 ，有 效 地 抑 制 脂 质 过 氧 化 ，并 能 保 护 DNA 免 受·OH 引 起 的氧化损伤，防止肿瘤的发生、发展。 实验进一步说明了 GSPE 是 一 种 良 好 的 抗 氧 化 剂 及 DNA 保 护 剂 ，为 其 在 医 药 和保健品等行业的应用提供了自由基生物学的理论依据。 1．2 抗心血管疾病的作用 1．2．1 抗高血压作用 高血压是心血管疾病的源头 ，血管 紧 张 素 转 换 酶 （ACE） 能 够 将 无 升 压 作 用 的 血 管 紧 张 素 Ⅰ 降 解 为 具 有 强 烈 收 缩 血 管 作 用 的 血 管 紧 张 素 Ⅱ，ACE 活 性 失 调 是 导 致 高 血 压 的 一 个 重 要 因 素 。 GSPE 在 体 外 明 显 抑 制 ACE 活 性 （IC50 为 0．08 mg ／ ml）， 兔 静 注 5 mg ／ kg GSPE 可 减 轻 血 压 对 血 管 紧 张 素 Ⅰ 和 Ⅱ 的 应 答 ， 提 示 GSPE 对 高 血 压 有 治 疗 作 用 ［5］。 1．2．2 调 节 血 脂 血 清 胆 固 醇 （TC）、甘 油 三 酯 （TG）、高 密 度 脂 蛋 白 （HDL）、低 密 度 脂 蛋 白 （LDL）和 肝 脏 TC、TG 水 平 是 反 映 机 体 脂 质 代 谢 的 常 用 指 标 。 闫 少 芳［6］研 究 了 GSPE对 高 脂 血 症 大 鼠 血 清 脂 质 的 影 响 ， 结 果 表 明 GSPE 具 有 降 低 血 清 TC、TG、LDL-C、 肝 脏 胆 固 醇 、 甘 油 三 酯 的 作 用 ， 而 且 能 增 加 高 脂 血 症 大 鼠 卵 磷 脂 胆 固 醇 酰 基 转 移 酶 （LCAT） 活 性，有助于加速胆固醇逆向转运，促进胆固醇的肝脏代谢， 增 加 高 脂 大 鼠 粪 胆 汁 酸 的 排 泄 ， 提 示 GSPE 有 降 低 高 脂 大 鼠血脂水平的作用。 1．2．3 抗 动 脉 粥 样 硬 化 近 年 来 研 究 认 为 血 脂 代 谢 紊 乱 和 TC、LDL、TG 过 高 等 可 能 是 动 脉 粥 样 硬 化 发 生 的 危 险 因 子 。 马 亚 兵 ［7］研 究 了 GSPE 对 高 血 脂 兔 动 脉 粥 样 硬 化 的 影 响 ，研 究 发 现 血 脂 升 高 的 确 可 以 引 起 动 脉 粥 样 硬 化 ，GSPE 可 能 通 过 降 低 血 清 TC、LDL-C、TG、TG ／ HDL-C 和 升 高 HDL-C 的 作 用 以 及 抑 制 LDL 的 氧 化 而 发 挥 抗 动 脉 粥 样 硬 化作用，其机制还在进一步的研究中。