生物化学实验实验基本操作及要求
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生物化学的基本操作与血清尿素测定实验报告
一、实验原理:
二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的二甲基氧咪唑化合物,颜色深浅与尿素含量成正比。
因二乙酰不稳定,故由试剂中二乙酰与强酸作用产生二乙酰。
二、实验试剂:
1、酸性试剂:在三角烧瓶中加去离子水约100ml,然后加入浓硫酸
44ml、85%磷酸66ml。
冷至室温,加入氨基硫脲50mg及硫酸镉2g,溶解后用去离子水稀释至IL。
置棕色瓶中,4℃可保存半年。
三、基本操作及注意事项:
1、试剂中加入氨基硫脲和镉离子,可增进显色强度和色泽稳定性,但仍有轻度褪色现象,(每小时小于5%)。
煮沸显色经冷却后,应及时比色。
2、尿液中尿素也可用此法测定,但因浓度高,需先用去离子水作50倍以上稀释。
四、评价:
1、本法试剂单一,方法简便,但试剂毒性和腐蚀性。
在标本数量多时加热开始难以达到100℃,各管间受热温度也可能不一致,因而本法重复性不佳。
生物化学实验基本操作在生物化学研究中,实验操作是非常关键和基础的环节。
正确的实验操作能够确保实验结果的准确性和可重复性。
本文将介绍生物化学实验的基本操作步骤,以及注意事项和常见错误,旨在帮助读者进行高质量的实验。
1. 实验室准备实验前需要充分准备实验室和实验设备。
确保实验室环境整洁,无杂物和污染物。
检查实验设备的完整性和正常运行状态,如酶标仪、离心机、超低温冰箱等。
检查试剂的标签和耐期,确保试剂无污染、完整密封。
准备所需的试剂和溶液,按照实验要求正确称量和稀释。
2. 安全措施生物化学实验涉及到一些有害物质和有毒试剂,因此必须采取相应的安全措施。
佩戴实验手套、眼镜和口罩,避免直接接触化学物质。
对于具有刺激性和致敏性的试剂,应采取适当的通风和排放措施。
在实验操作过程中,注意实验室的安全出口和紧急出口,以应对突发情况。
3. 实验记录实验过程中的记录是非常重要的部分,确保实验结果的可靠性和重复性。
在实验前,准备好实验记录表格,包括实验步骤、试剂使用量、反应时间和实验结果等。
实验过程中,实验人员应及时、准确地记录各项数据和观察结果,不漏一步、一项。
同时,注意记录实验中的异常情况和发现的问题。
4. 实验步骤生物化学实验的步骤根据具体实验目的和方法而定,但一般包括样品处理、试剂制备、反应或分离、结果检测等。
在进行每一步操作之前,确保实验器材和试剂已经准备好,操作空间整洁无杂质。
按照实验步骤的要求依次进行操作,注意操作的顺序和时间控制。
严格按照实验方法和条件要求操作,避免人为因素对实验结果的影响。
5. 清洁和废弃物处理实验完成后,要及时清洁实验器材和实验台面,避免试剂残留和交叉污染。
使用正规的清洗剂和方法进行清洗,定期对实验室进行无菌处理和消毒。
对于废液和废弃物的处理,要按照实验室的规定和环保要求进行集中收集、处理和处置。
总之,生物化学实验的基本操作包括实验室准备、安全措施、实验记录、实验步骤和清洁处理等环节。
生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。
3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
2. 实验报告的要求:内容完整、条理清晰、数据准确、分析深入、讨论充分、结论明确。
五、实验拓展1. 结合实验内容,查阅相关文献,了解生物化学领域的最新研究进展。
2. 尝试设计新的实验方案,对生物化学现象进行深入探究。
3. 参加学术讲座、研讨会等活动,拓宽生物化学知识面。
生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。
3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
生物化学实验基本操作一、实验目的1、熟悉化学类实验室的基本常识、规则、安全及防护知识。
2、掌握基本实验操作及常用仪器的使用方法。
3、通过实际操作,进一步掌握理论知识,能独立完成真个实验的设计、操作及计算。
二、实验仪器与试剂1、实验器材仪器名称型号厂家PH计Sartorius PB-10干燥箱101EXB-3型电热鼓风干燥箱上海树立仪器仪表有限公司酶标仪DNM-9602酶标分析仪北京普朗新技术有限公司2、实验试剂试剂名称生产厂家生产批号质量(g)Na2HPO4北京化工厂201007017.16NaH2PO4北京益利精细化学品有限公司20110313 3.12NaCl天津市塘沽化学试剂厂850328 0.9BCA蛋白定量试剂盒北京普利莱基因技术有限公001107三、实验内容(一)蛋白质的定量测定1、实验原理Bicinchoninic acid (BCA)法是近来广为应用的蛋白质测定方法。
即在碱性环境下,蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。
BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562nm处有高的光吸收值,并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。
2、实验方法(1)、工作溶液(Working Reagent,WR)的配制:将50体积BCA Reagent 与1体积Cu Reagent 混合即为WR工作试剂,呈嫩绿色。
(2)、标准蛋白溶液配制:用双蒸水与待测蛋白样品匹配之缓冲液进行倍比稀释:40μl 4000μg/ml BSA+60μl 稀释溶液(H2O)=100μl(BSA=1600μg/ml),从中取出50μl连续倍比稀释,得到BSA标准溶液1600、800、400、200、100、50、25μg/ml,各50μl。
(3)、蛋白测定蛋白质浓度线性检测范围为10-2000μg/ml。
微板测定用96孔板,反应终体积225μl,用酶标仪测定。
a.微板测定:用加样器将25μl标准品与200μl WR工作液混合于微板孔中。
《生物化学》实验评分标准(供参考)一、基本操作(供实验操作考核参考):1、玻璃仪器的洗涤①用毛刷蘸去污粉、肥皂粉或去污剂将器皿内外两面彻底刷洗干净(30分)②用自来水将仪器冲洗干净。
洗干净的玻璃仪器应该表面光洁,淋洗的水成片的从仪器上流下来,不应该有水珠(水线)附着在内壁。
(40分)③用少量的蒸馏水淋洗内壁三次(20分)④将洗干净的器皿倒置放在干净的滤纸上或相应的器皿架上(10分)2、刻度吸管①左手控制吸耳球,右手控制吸管,用右手食指控制吸管上口,右手拇指和中指夹持管身。
(30分,左手优势者酌情考虑)②操作者眼睛与要观察的刻度线应该处于同一水平,应该观察液面凹陷处的最低点与刻度线平齐。
(30分)③吸管下方如有液滴附着应该处理掉(20分)④操作是否规范和熟练、善后工作是否做好(20分)3、移液器①更换并安装好移液器头,右手控制移液器,调节移液器上方的罗盘到需要的刻度。
(30分)②按移液器上方活塞到遇到明显阻挡的位置时停止,插入试剂中慢慢吸取溶液。
不应该有气泡或断层出现。
(30分)③移液器头如有液滴附着应该处理掉。
(10分)④将移液器上方活塞按到最低点,排尽移液器头内所有液体(20分)⑤善后工作(10分)4、离心机①将调节转数旋钮归零,时间旋钮应该自然归零。
(10分)②将离心管放入离心套管中,置于天平上加水配平后,对称放入离心机内。
(30分)③接通电源,调节时间选钮(应该比规定时间多1-2分钟,20分)④慢慢调节转数选钮到规定转数停止(20分,依照不同的离心机规格要求可略有不同)⑤善后工作(20分)5、分光光度计①接通电源→预热30分钟(教师预先做好,必要时询问下即可)②调节波长→将空白液、测定液倒入比色杯(液面距杯口约1cm)→擦镜纸擦干净比色杯→置于比色槽中(30分,注意放置的方向及拿比色杯的姿势)③空白管对准光路→开盖调节透光度“0”,闭盖调节透光度“100%”→反复校对一次→关闭盖子情况下将模式调节到“吸光度”→空白管吸光度应该为“0”→拉动拉杆→依次读出各测定管吸光度→每打开盖都要重新调节“0”和“100%”。
生化实验室的一般规则1. 进入实验室应穿着工作服。
留长发的同学应挽短、戴帽。
2. 整洁。
实验台必须洁净,各种仪器放置要有秩序。
实验完毕,必须将仪器洗净、放好,拭净台面,方可离开实验室。
3. 安静。
实验时不可谈笑,如有问题可以小声请教师解答。
4. 废物及废液处理。
实验完的废液应倾入水槽中,并用水冲净。
但浓酸、浓碱及氰化物等不可倒入水槽,应倾入预先准备的废液盆或污物桶中。
少量浓酸、浓碱可直接倾入水槽,然后以大量流水冲净。
火柴梗、废滤纸、棉花等不可扔入水槽,应弃入废物盆或垃圾箱中,以免堵塞水管。
5. 试剂与标准溶液。
取用试剂后,应立即将瓶塞盖好;放回原处。
取用有毒试剂时,须用滴定管或滴管。
取样时,应注意用多少取多少。
如未用完只可弃去,不可倒回瓶中;6. 凡可产生烟雾或有毒气体的实验必须在通风橱中操作。
7. 在用恒温水浴箱保温时,应注意随时盖好箱盖。
调节温度到所需温度后,即不再旋动调温旋扭。
8. 贵重仪器如分光光度计、离心机等必须爱护,使用前应熟读使用方法,记住操作要点,按操作规程工作。
如有问题应请教师帮助,不得自行拆卸检修。
9. 防火。
勿使酒精、乙醚或其它易燃试剂靠近火焰。
若蒸发此类溶液时,应用水浴,不得直火加热,以免发生火灾。
10. 实验前应熟读实验指导,记住要点。
实验时应仔细操作并注意观察现象及结果,及时记录。
生化实验的基本操作-1-一、玻璃器皿的洗涤玻璃器皿的洗涤在生物化学实验中是一项重要的工作。
实验性质不同所采取的洗涤方法也不同。
例如研究酶制备的反应时,组织匀浆对金属的污染是非常敏感的,至于细菌的悬浮液对少量的金属可能不敏感,但少量的维生素和其它有机物质则有较大的影响。
一般氧化剂洗液如重铬酸洗液不能有效地除去油脂、硫酸钡等污迹。
因此污迹不同所应采用的洗涤试剂和方法也不同。
如可用汽油或洗涤剂(洗衣粉液或洗洁净)除去油脂,用酸性硫代硫酸钠溶液或热草酸除去氧化性污迹MnO2等,用40%尿素除去附着管内壁的血凝块等。
生物化学实验教案一、实验目的1.学习生物化学实验的基本操作技能;2.掌握生物化学实验中的常用仪器和试剂;3.熟悉生物化学实验的实验流程和数据分析方法。
二、实验设备和试剂1.设备:显微镜、恒温水浴、酶标仪等;2.试剂:无水乙醇、苯酚、硫酸、甲醛、五氯酚、硫化碳等。
三、实验内容与步骤1.实验一:蛋白质定性实验步骤:(1)取一定量的未知蛋白质溶液;(2)在试管中加入Biuret试剂;(3)观察溶液颜色变化,如果出现紫色,则说明蛋白质存在。
2.实验二:酶的活性测定步骤:(1)将一定量的酶溶液和底物溶液分别加入试管中;(2)将试管放入恒温水浴中保持固定温度;(3)根据一定时间内底物消耗量的测定结果,计算酶的活性。
3.实验三:核酸磷酸化实验步骤:(1)将一定量的核酸溶液加入试管中;(2)加入适量的磷酸和反应媒介;(3)通过显微镜观察核酸的磷酸化程度变化。
4.实验四:脂质酯化实验步骤:(1)将一定量的脂质溶液和酸性催化剂加入试管中;(2)加热试管,在高温下反应一定时间;(3)观察产物和溶液颜色的变化,判断酯化反应的进行程度。
四、实验注意事项1.实验过程中要注意实验室的安全,操作时佩戴实验手套、护目镜等个人防护用具;2.注意使用实验设备和试剂的正确使用方法;3.在操作中要细心、准确,按照实验步骤进行操作;4.实验完成后要及时清理实验器材,保持实验室卫生。
五、实验数据分析1.对于蛋白质定性实验,根据试剂对蛋白质溶液的反应结果来判断蛋白质的存在;2.酶的活性测定可以根据底物的消耗量来计算酶的活性;3.核酸磷酸化实验可以通过显微镜观察核酸的磷酸化程度变化来判断实验结果;4.脂质酯化实验可以通过产物和反应溶液的颜色变化来判断酯化反应的进行程度。
六、实验总结与体会通过完成这些生物化学实验,我学习到了生物化学实验的基本操作技能和常用仪器试剂的使用方法。
在实验中,我注意了安全操作,遵循了实验步骤,得到了准确的实验数据。
通过数据分析,我得出了正确的实验结果,并从中深化了对实验原理的理解。
生物化学实验第一节基本要求一、内容提要基础生物化学实验内容,主要以植物材料为研究对象。
实验项目包括糖类、脂类、蛋白质和氨基酸、核酸、酶、维生素的测定,既有定性又有定量。
实验内容编排不求齐全,而力求原理阐述简明扼要,通俗易懂,方法可靠,操作具体详尽,重复性好,灵敏度高。
实验方法涉及传统的滴定法以及分光光度法、层析法和电泳等现代生物化学实验技术。
本实验指导可供高等农业院校农学类、生物技术以及相关专业的本、专科学生使用,也可供从事与生物科学有关的科研工作者阅读与参考。
在以惊人速度发展的生物科学中,生物化学是其中最活跃的分支学科之一,它已成为发展生命科学各分支学科和生物工程技术的重要基础。
作为一门研究生命活动基本规律的科学,它又是一门实验科学。
工业、农业、医药、食品、能源、环境科学等越来越多的研究领域都以生物化学理论为依据,以其实验技术为手段,生物化学已成为高等院校许多相关专业学生必修的专业基础课程。
根据高等农业院校农学类专业教学计划,基础生物化学课程是一门重要的专业基础课;并且又是实践性极强的应用学科。
只有掌握扎实而广泛的基础知识和熟练的操作技能才算真正掌握好这门应用科学。
因此,我们组织编写这本基础生物化学实验指导。
本实验指导主要是配合基础生物化学教材,供高等农业院校农学类、生物技术以及相关专业的学生使用。
实验多以植物材料为主要研究对象;以生物大分子——碳水化合物、核酸、蛋白质和酶等为主要研究内容。
实验方法涉及到分光光度法、层析、电泳等现代生物化学实验技术。
在实验内容编排上,既有定性的又有定量的;实验教材由基础生物化学实验和附录两部分组成。
实验部分列出的实验项目包括糖类、脂类、蛋白质和氨基酸、核酸、酶、维生素的测定,有些项目包括几种不同方法,每一实验方法分为目的、原理、实验材料、仪器和试剂、操作步骤、结果计算、注意事项、思考题及参考答案。
本实验指导从一定角度反映了我国生物化学研究技术目前的水平和状况,内容不求全,而力求其可靠性和方法性。
生物化学实验指导生物化学实验是探索生命奥秘的重要手段,通过实验操作,我们能够更深入地理解生物体内的化学反应和物质代谢过程。
本实验指导将帮助您顺利完成生物化学实验,提高实验技能和科学素养。
一、实验前的准备(一)了解实验目的在进行每个实验之前,务必清楚地知道实验的目的是什么。
这将有助于您在实验过程中保持专注,并理解实验结果的意义。
(二)预习实验内容认真阅读实验教材和相关的参考资料,熟悉实验的原理、步骤和注意事项。
如果有不明白的地方,可以向老师或同学请教。
(三)准备实验用品根据实验要求,准备好所需的仪器、试剂和材料。
检查仪器是否完好,试剂是否过期,并确保材料的质量和数量符合实验要求。
二、实验安全(一)个人防护在实验过程中,要穿戴好实验服、手套和护目镜等防护用品,以保护自己免受化学试剂和生物样本的伤害。
了解所使用化学试剂的性质和危险特性,遵守化学品的储存、使用和处理规定。
避免直接接触有毒、有害和腐蚀性试剂,如果不慎接触,应立即用大量清水冲洗,并寻求医疗帮助。
(三)生物安全对于涉及生物样本的实验,要遵循生物安全操作规范,防止感染和交叉污染。
在处理微生物、细胞和组织样本时,要在无菌条件下进行,并妥善处理废弃物。
(四)防火防爆实验室中严禁烟火,要熟悉灭火器和紧急喷淋装置的位置和使用方法。
对于易燃易爆的试剂和气体,要严格按照操作规程使用和储存。
三、常用仪器的使用(一)移液器移液器是定量移取液体的常用工具。
使用前要根据所需移液量选择合适的移液器和吸头,并进行校准。
移液时要保持垂直,缓慢按下和释放按钮,避免产生气泡。
(二)离心机离心机用于分离不同密度的物质。
使用前要平衡样品,选择合适的转速和离心时间。
离心结束后,要等离心机完全停止转动后再打开盖子,以免发生危险。
分光光度计用于测定溶液中物质的浓度。
使用前要进行仪器校准,选择合适的波长和比色皿。
测量时要确保比色皿清洁,溶液无气泡和杂质。
(四)pH 计pH 计用于测量溶液的酸碱度。
生化实验的基本操作(一)搅拌和振荡1.配制溶液时,必须随时搅拌或振荡混合。
配制完了时,必须充分搅拌或振荡混合。
2.搅拌使用的玻璃搅棒,必须两头都烧圆滑。
3.搅棒的粗细长短,必须与容器的大小和所配制的溶液的多少呈适当比例关系。
不能用长而粗的搅棒去搅拌小离心管中的少量溶液。
4.搅拌时,尽量使搅棒沿着器壁运动,不搅入空气,不使溶液飞溅。
5.倾入液体时,必须沿器壁慢慢倾人以免有大量空气混入。
倾倒表面张力低的液体(如蛋白质溶液)时,更需缓慢仔细。
6.振荡溶液时,应沿着圆圈转动容器,不应上下振荡。
7.振荡混合小离心管中液体时,可将离心管握在手中,以手腕、肘或肩作轴来旋转离心管; 也可由一手持离心管上端用另一手弹动离心管;也可用一手大拇指和食指持管的上端,用其余三个手指弹动离心管。
手指持管的松紧要随着振动的幅度变化。
还可以把双手掌心相对合拢,住离心管,来回挫动。
8.在容量瓶中,混合液体时,应倒持容量瓶摇动,用食指或手心顶住瓶塞,并不时翻转容量瓶。
9.在分液漏斗中振荡液体时,应用一手在适当斜度下倒持漏斗,用食指或手心顶住瓶塞,并用另一手控制漏斗的活塞。
一边振荡,一边开动活塞,使气体可以随时由漏斗泄出。
10.研磨配制肢体溶液时,要使杵棒沿着研钵的单方向进行,不要来回研磨。
(二)沉淀的过滤和洗涤1.过滤沉淀一般使用滤纸。
2.应根据沉淀的性质选择不同的滤纸.胶状沉淀,应使用质松孔大的滤纸.一般大小颗粒的结晶形成沉淀,应使用致密孔小的滤纸。
而极细的沉淀,则应使用致密孔最小的滤纸。
滤纸越致密,过滤就越慢。
3.滤纸的大小要由沉淀量来决定,并不是由溶液的体积来决定。
沉淀量应装到滤纸高度的1/3左右。
最多不应超过1/2,通常使用直径为7-9厘米的圆形滤纸。
4.折叠滤纸应先整齐的对折,错开一点再对折,打开后形成一边一层,一边三层的圆锥体。
折叠尖端时不可过于用力,以免容易出洞。
放入漏斗中时,滤纸边缘应完全吻合。
撕去三层一边的外面两层部分的尖端,使滤纸上缘能更好的贴在漏斗的壁上,不留缝隙。