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四甲基联苯胺显色原理
联苯胺试验属于可疑血痕预检验中显得相对“老旧且危险”的方法，之所以“危险”，是因为联苯胺（4,4'-二氨基联苯）的致癌性早在上世纪就被发现和证实了，研究者反复强调这个东西有着很高的致突变风险及致癌作用，但在那个技术落后的年代侦查者们缺乏先进的备选检测手段，觉得联苯胺试剂检测血痕很好使，舍不得放弃，于是基于安全性考量，赫兰等研究者在上世纪七十年代合成出了一种联苯胺的替代品——四甲基联苯胺（TMB）。
四甲基联苯胺是一种新型的色原试剂，血痕检测效果极佳，比传统色原试剂联苯胺检测的灵敏度更高、稳定性也更好，赫兰、加纳等人用大鼠进行了持续注射实验，分别证明了这种新合成的物质TMB“不诱发肿瘤”、“无致突变作用”。
一出山就走在取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物的光明大道上，TMB着实称得上色原试剂的后浪。
在刑事侦查方面，不是所有案件现场都是血淋淋的，很多时候凶手会清洗、打扫现场，常说的隐性血痕就在这些地方——原血迹经过清洁洗涤变得极少，肉眼难以辨别，四甲基联苯胺就可以作为隐性血痕检测的预实验试剂起到重要的作用。
1。
tmb分子量
TMB分子量是指4-甲基联苯胺（3,3′,5,5′-四甲基联苯胺）的
分子量。
TMB是一种常用的化学试剂，也是一种常用的酶联免疫检测（ELISA）底物。
本文将围绕TMB分子量开展讨论，分步骤阐述。
1. 确定TMB分子结构：分子量是分子的质量，因此要确定TMB
分子的化学结构。
TMB是一个芳香胺，由两个苯环通过氮原子相连，周围的四个甲基基团使其形成4,4'-二甲基光电效应。
2. 确定TMB分子式：通过确定结构，可以推导出TMB的分子式。
TMB分子式为C16H18N2。
3. 分析分子量的计算方法：分子量可以通过化学式的相对原子
质量之和来计算。
要计算TMB分子量，首先需要根据元素周期表确定
各元素的相对原子质量，然后按照分子式的数目乘以每个元素的相对
原子质量，最后求和。
4. 计算TMB分子量：根据TMB的分子式，可以计算其分子量为244.33g/mol。
通过该计算，可以了解TMB化合物和其他化合物的相对
质量，从而判断其化学性质和物理性质。
总之，TMB分子量是根据化合物的化学结构和分子式计算出来的。
了解TMB分子量可以帮助我们更好地了解该化合物的物理和化学性质，同时也有助于我们更好地理解酶联免疫检测等医学检验中所使用的试剂。
四甲基联苯胺重复显现血手印的影响因素四甲基联苯胺是一种常见的反应型染料，它广泛应用于纸张、纺织品和皮革工业中。
重复显现血手印是指在对血迹进行处理和显现后，经过一段时间后血迹又重新出现的现象。
这种现象在犯罪学和法医学领域中具有重要的意义，可以帮助解决一些复杂的犯罪案件。
下面将探讨四甲基联苯胺重复显现血手印的影响因素。
1.血液组分：不同人的血液组分有所不同，主要包括红细胞、白细胞、血小板和血浆。
这些组分的含量和比例会影响重复显现血手印的情况。
例如，红细胞富含血红蛋白，而血小板富含血小板因子，这些组分在重复显现血手印中起到重要的作用。
2.温度和湿度：环境的温度和湿度会影响四甲基联苯胺的性能和血迹的稳定性。
较高的温度和湿度会加速血液的分解和氧化，从而导致血迹的褪色和消失。
适宜的温度和湿度可以保持血迹的稳定，延长重复显现血手印的时间。
3.应用方法：四甲基联苯胺的应用方法也会影响重复显现血手印的效果。
通常情况下，四甲基联苯胺会与血液中的铁离子反应，生成一种蓝色化合物，用于显现血迹。
但是，四甲基联苯胺的浓度、涂布方式以及显现时间的长短都会影响显现效果。
合适的应用方法可以提高血手印的稳定性和重复显现的效果。
4.储存方式：四甲基联苯胺和显现的血迹都需要适当的储存条件才能保持其稳定性。
不适当的储存条件会导致血迹的褪色和氧化，影响血手印的重复显现。
储存时应避免阳光直射、高温和潮湿环境，以延长血迹的稳定性。
5.其他因素：除以上因素外，还有其他一些因素也可能影响四甲基联苯胺重复显现血手印的效果。
例如，血液中的酸碱度、反应时间、反应液的成分等都可能对血迹显现和稳定性产生影响。
总之，四甲基联苯胺重复显现血手印的影响因素很多，包括血液组分、温度和湿度、应用方法、储存方式等。
研究这些因素可以帮助我们更好地理解重复显现血手印的机制，并提高其在犯罪学和法医学中的应用价值。
【分析】Anal.Chem.：3,3,5,5-四甲基联苯胺（TMB）作为⽐⾊分析中⽣⾊底物的原理由于具有简单的⽐⾊读数，基于过氧化物酶的检测⽅法备受关注，例如辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体⽤于免疫组织化学和ELISA、纳⽶酶和DNA酶。
⾃从3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）⾸次在基于HRP的免疫分析中应⽤以来，TMB是迄今为⽌最常⽤的⽣⾊底物，其显⾊反应基于H2O2存在下HRP催化氧化TMB。
在TMB出现之后，逐渐取代了其他联苯胺衍⽣物在⽐⾊测定中的使⽤。
在研究和评估纳⽶酶的过氧化物酶和氧化酶样活性的过程中，TMB在⼤多数情况下被⽤作标准底物。
取代其他联苯胺衍⽣物的⼀个重要原因是它们的⾼致癌性。
联苯胺衍⽣物的发⾊敏感性是分析化学最重要的参数之⼀，但从化学⾓度明确阐述TMB的变⾊原理优于其他联苯胺底物具有重要意义。
近期，四川⼤学吴鹏教授课题组报道了联苯胺类底物的化学性质与显⾊反应的分析性能之间的关联。
该体系选择了九种具有不同特性（不同取代基和不同取代数）的联苯胺衍⽣物，并⽤四个典型的TMB⽣⾊系统（HRP，纳⽶酶，DNAzyme，光敏氧化⽅案）进⾏了研究。
在现有联苯胺底物⽤于过氧化物酶的测定中，TMB表现出最⾼的灵敏度，更好的有⾊产物⾊纯度和合理的氧化产物稳定性。
与TMB以外的两种四取代的联苯胺衍⽣物进⾏⽐较，TMB的性能（灵敏度，⾊纯度和有⾊产物的稳定性）具有很⼤优势，在⽐⾊测定中证实了其“选定底物”的状态。
相关成果以“The Rationale of 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB) as the Chromogenic Substrate inColorimetric Analysis”为题发表在国际分析化学权威杂志Analytical Chemistry上（DOI:10.1021/acs.analchem.0c02149）。
3,3',5,5'-四甲基联苯胺是一种常见的有机化合物，其化学式为C16H19N。
在该分子中，有四个甲基基团分别连接在苯环的3号和5号位以及苯胺的3'号和5'号位上。
底物的选择对氧化过程非常重要，因为不同的底物可能导致不同的氧化产物。
在3,3',5,5'-四甲基联苯胺的氧化过程中，产生的氧化产物可能会受到配体的影响，产物的结构式可能会发生变化。
下面将对3,3',5,5'-四甲基联苯胺氧化后的结构式进行分析。
1. 氧化反应3,3',5,5'-四甲基联苯胺在氧化反应中可能会发生苯环的氧化，也可能发生苯胺的氧化。
这取决于氧化剂和反应条件。
常见的氧化剂包括过氧化氢、高锰酸钾、三氧化二碘等。
在不同的氧化条件下，3,3',5,5'-四甲基联苯胺可能出现不同的氧化产物，包括亚甲基苯酮、联苯二酮、双肟酮等。
不同的产物具有不同的结构式，对氧化条件进行优化可以选择出理想的产物。
2. 结构式分析对于3,3',5,5'-四甲基联苯胺氧化后的产物，可以通过质谱、核磁共振等手段对其进行结构鉴定。
通过这些手段可以确定氧化产物的结构式，包括碳骨架的结构以及官能团的位置。
通过结构式分析可以进一步确定3,3',5,5'-四甲基联苯胺氧化反应的机理，为该反应的优化提供理论依据。
3. 氧化反应优化针对3,3',5,5'-四甲基联苯胺的氧化反应，可以通过调整反应条件、改变氧化剂和催化剂等手段来优化反应条件，以获取高产率和高选择性的氧化产物。
优化反应条件需要进行多次实验，通过不断调整反应条件，逐步确定最佳反应参数。
在优化反应条件的过程中，结构式分析是必不可少的手段，可以通过结构式分析来确认氧化产物的结构，确定氧化反应的方向。
4. 应用前景3,3',5,5'-四甲基联苯胺及其氧化产物在有机合成、药物合成等领域具有重要的应用前景。
四甲基联苯胺盐酸盐化学方程英文回答：The chemical equation for the formation of tetramethylbenzidine hydrochloride is as follows:C6H5N(CH3)4 + HCl → C6H5N(CH3)4Cl + H2O.In this reaction, tetramethylbenzidine (C6H5N(CH3)4) reacts with hydrochloric acid (HCl) to form tetramethylbenzidine hydrochloride (C6H5N(CH3)4Cl) and water (H2O). The hydrochloric acid donates a proton (H+) to the tetramethylbenzidine molecule, resulting in the formation of the hydrochloride salt.Let me explain this reaction in simpler terms. Imagine you have a molecule called tetramethylbenzidine, which is like a big family with four methyl groups attached to a benzene ring. Now, let's say this molecule meets hydrochloric acid, which is like a strong acid. Thehydrochloric acid gives away a hydrogen ion (H+), which is like a proton, to the tetramethylbenzidine molecule. This proton attaches to one of the nitrogen atoms in the tetramethylbenzidine, forming a bond. As a result, the tetramethylbenzidine molecule becomes tetramethylbenzidine hydrochloride, and a water molecule is also produced in the process.中文回答：四甲基联苯胺盐酸盐的化学方程式如下：C6H5N(CH3)4 + HCl → C6H5N(CH3)4Cl + H2O.在这个反应中，四甲基联苯胺（C6H5N(CH3)4）与盐酸（HCl）发生反应，生成四甲基联苯胺盐酸盐（C6H5N(CH3)4Cl）和水（H2O）。
研究报告科技创新导报Science and Technology Innovation Herald241 显现原理1.1 考马斯亮蓝R-250显现原理人体血液中的血细胞、血浆蛋白等含有大量的蛋白质化合物,考马斯亮蓝R-250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。
它和蛋白质会通过范德华力结合,而在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料的结合符合比尔定律，因此有血痕的手印纹线会被显现出蓝色。
1.2 四甲基联苯胺显现原理新鲜的血手印经四甲基联苯胺显现、褪色（四甲基联苯胺蓝易褪色）之后，形成陈旧的血手印。
陈旧的血手印的血液中的过氧化酶失去活性，不能参与反应，而在血红蛋白分子内卟啉环中的铁离子可以起触媒作用，从而使过氧化氢释放出初生态氧，将无色的四甲基联苯胺氧化成四甲基联苯胺蓝，显出蓝绿色血手印[1]。
2 实验部分2.1 检材选择渗透性客体：报纸、A4打印纸；选择非渗透性客体：载玻片、白色瓷砖。
以上每个客体均用相同手指捺印血手印，并将捺印完的血手印分为两组，一个是考马斯亮蓝染色组，一个是四甲基联苯胺染色组，分别记为Blu e、T M B。
将制作好的检材放置在温度适当且通风的环境中以促进血手印与客体间的结合固定。
2.2 考马斯亮蓝R-250的配置显现液配方：0.1 g 考马斯亮蓝R-250 +10 m L 醋酸+90 m L无水乙醇；三种物质充分搅拌混合，直至考马斯亮蓝溶解。
该溶液体系稳定，密闭可长期保存。
漂洗液的配置：10 m L 乙酸+90 m L 无水乙醇。
2.3 四甲基联苯胺的配置甲液：四甲基联苯胺（TM B）1-1.2 g，无水乙醇：100 m L。
乙液：30%过氧化氢2 m L～3 m L。
配置的甲液和乙液可以长期保存，使用时将甲液与乙液以5∶1的体积混合，即可制得显现工作液[2]。
2.4 实验注意事项在四甲基联苯胺配置中，过氧化氢的浓度会随时间而分解，所以配置过程中可以适当增大过氧化氢的用量。
用考马斯亮蓝染色后的漂洗过程也尤为重要，如果漂洗不当，会造成指纹纹线缺失，或者存在背景干扰[3]。
3 , 3 ′, 5 , 5 ′-四甲基联苯胺| 54827-17-7|显现法及应用注意事项
摘要：血手印是有色的手印,经常出现于杀人、抢劫、强奸等重特大暴力性案件中,通常情况下清晰的血手印是无须再行显现处理的,但有些潜血手印则需要进行处理,增强反差和显现。
实际工作中我们常用的是四甲基联苯胺。
关键词：3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB），3 , 3 ′, 5 , 5 ′- 四甲基联苯胺显现法，应用注意事项
前言
3,3′,5,5′-四甲基联苯胺，白色或浅黄色结晶，熔点168.0-171.0℃，CAS：54827-17-7，[1]是一种新型安全的色原试剂,与传统的色原试剂如联苯胺、邻联甲苯胺及邻苯二胺等相比较,具有检测灵敏度高、稳定性好等优点,而且使用安全,无致癌、致突变作用。
目前3,3′,5,5′-四甲基联苯胺已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测领域。
尤其在临床生化检验方面,3,3′,5,5′-四甲基联苯胺作为过氧化酶的新底物,在酶免疫分析法(EIA)和酶联免疫吸附检验法(ELISA)中获得了广泛的应用。
1 3 , 3 ′, 5 , 5 ′- 四甲基联苯胺显现法[2]
刑事案件现场上经常遇到因盗窃、强奸、抢劫、绑架等原因发生的行凶杀人案, 在这些手段残忍、性质恶劣、影响极坏的杀人命案中, 在被害人的常用品、衣物、周围环境以及作案工具上经常会遗留下犯罪嫌疑人的血手印或潜血手印,这就给我们在现场勘查中提取血手印提供了可能。
近年来, 各地在重、特大案件现场进行潜血手印的显现处理时, 都普遍采用了低毒安全的四甲基联苯胺显现法。
通常我们大都采用无水乙醇作为溶剂配制四甲基联苯胺显现液, 通常的配方为: 甲液: 四甲基联苯胺1- 1.2g, 无水乙醇100ml; 乙液: 3%过氧化氢(H2O2)。
配制浓度: 甲: 乙= 5: 1, 即甲液100ml, 乙液20ml。
对渗透性客体显现前, 如各种纺织品、本色木、浅色纸张等物体上的潜血手印, 传统的操作是在疑有潜血手印的部位用无水乙醇多次固定, 然后用四甲基联苯胺显现液进行显现, 但是在实际操作中经常发现显现出的手印只有轮廓, 纹线模糊不清等现象, 显现效果不够理想。
笔者经反复试验摸索, 发现用无水甲醇替代无水乙醇对潜血手印进行固定, 改进潜血手印的固定剂, 显现效果较好。
这种方法经多次验证, 与传统固定剂无水乙醇相比, 用无水甲醇固定显现出的手印有纹线清晰、不易扩散等优点。
( 一) 无水甲醇是一种蛋白质变性剂, 且易挥发, 可使潜血手印中蛋白质快速凝固变性, 减少药液与潜血手印作用时间, 避免长时间浸泡使潜血手印扩散而造成显出的手印模糊不清, 同时提高手印显现速度, 并易于操作, 适合在实际工作中应用。
( 二) 过氧化氢极易挥发, 所以新购的过氧化氢配制药液时的浓度可小些, 放置很久的过氧化氢配制药液时的浓度可大些。
同时, 其浓度的大小要按检材上的潜血部位血清的多少与承痕体的性质而定。
一般来说, 渗透性的客体使用过氧化氢溶液的浓度要小些, 非渗透性客体使用的过氧化氢溶液浓度要大些。
( 三) 在显现出手印的部位, 往往潜血血痕较多, 影响显出手印的反差。
直接拍照有时得不到满意效果, 可采用透明胶带纸直接沾取, 贴于光滑的白纸上, 使手印反差增大。
( 四) 对于尸体皮肤显出的潜血手印, 用直接照相方法固定提取。
潜血手印底色有影响时,往往是反差小, 效果差, 而且, 拍照常常受到现场环境的影响, 极不方便。
用透明胶纸沾取后,贴于光滑白纸上, 可以减轻手印底色影响, 增大反差。
但用透明胶纸提取时, 必须要等显现出的手印处的皮肤干燥后, 方可使用, 且在沾取时,要防止皮肤伸缩变形, 影响特征。
2 应用四甲基联苯胺应注意的两个问题[3]
(一)要注意区别血手印是人血还是动物血形成
四甲基联苯胺的反应原理是利用血液中含有的过氧化氢酶和血卟啉,而动物血和人血一样,都
含有这两样成分,也和四甲基联苯胺反应成蓝色。
特别是在广大的农村,出现动物血手印的几率是比较大的,要引起足够的重视,要注意区别血手印是人血还是动物血形成。
血手印使用前必须进行种属试验,确定人血后方可使用。
(二)要注意区别是和血还是和其它物质反应
配置溶液过氧化氢的浓度不能太高;使用血手印要长时间观察稳定程度;注意纹线颜色有何异常。
参考文献
[1] 亚科产品详细信息
[2] 王成,季瑞洲, 使用四甲基联苯胺应注意的两个问题, 徐州工程学院学报,2005,12,
[3] 张向东,李军,刘晓, 潜血手印四甲基联苯胺显现法的改进, 河北公安警察职业学院学报,2007
苏州亚科化学试剂技术部编辑整理。
