免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较-精选文档

mian对比研究免疫透射比浊法及免疫散射比浊法在血清免疫球蛋白检测中的应用效果【摘要】目的：对比应用免疫散射比浊法、免疫透射比浊法实施血清免疫球蛋白检测的效果。

方法：应用透射比浊法、散射比浊法对2013年5月-2014年9月期间在我院接受健康体检的82例健康人员进行血清免疫球蛋白检测，并对2种方法的检测结果进行比较分析。

结果：2组方法的检测结果较为相似，比较未存在显著性（P＞0.05）。

结论：使用透射比浊法、散射比浊法对患者实施血清免疫球蛋白检测均可取到相似的检测结果，但是免疫透射比浊法具有更好的精密度，检测误差更小。

【关键词】散射比浊法；免疫球蛋白；免疫球蛋白【中图分类号】R446.62 【文献标识码】B 【文章编号】1674-8999（2015）9-0671-02血清免疫球蛋白（Ig）为人体内极为重要的免疫蛋白，因此通过对血清免疫球蛋白进行检测可为人体免疫功能评定提高可靠参考依据[1]。

目前，临床上主要应用的血清免疫球蛋白检测方法主要有两种，分别为透射比浊法和散射比浊法。

本次研究主要对比该2中检测方法在临床应用中的效果，现将研究结果报告如下。

1 资料与方法1.1一般资料选择2013年5月-2014年9月期间在我院接受健康体检的82例健康人员作为研究对象，分别应用免疫透射比浊法、免疫散射比浊法对患者实施血清免疫球蛋白检测。

性别：男性49例，女性33例；年龄：最小为19岁，最大为75岁，平均年龄（37.1±2.8）岁。

1.2方法在研究过程中，分别应用免疫散射比浊法、免疫透射比浊法对82位研究对象的血清免疫球蛋白A、血清免疫球蛋白G、血清免疫球蛋白M进行常规性检测。

然后再使用该两种方法对研究对象的免疫球蛋白G进行精确检测。

本次研究的具体检测操作表现如下：在研究对象空腹的状态下进行静脉血抽取，抽取量为3ml。

在本次研究中，实施免疫透射比浊法检测时所应用的仪器主要为Olym pus AU640型全自动生化分析仪（生产企业：上海执诚生物技术有限公司），实施免疫散射比浊法检测时所使用的仪器主要为man lmmage 800蛋白分析仪（生产企业：上海以达进出口有限公司）。

浅谈免疫比浊法技术优势孙立芳;赵静【摘要】目的:了解免疫透射比浊法和免疫散射比浊法的优缺点.方法:通过检测免疫透射比浊法和免疫散射比浊法的灵敏度和精密度及比较两者的优缺点.得知两者的优势.结果:免疫透射比浊法比免疫散射比浊法具有很多优势.结论:免疫透射比浊法比免疫散射比浊法具有很多优势.但免疫透射比浊法存在灵敏度较低的问题,至开发出了胶乳增强技术,抗原抗体结合发生凝聚反应,这种技术变非均相反应为均相反应,大大的提高了灵敏度,这就使该技术有更好的应用优势.【期刊名称】《中国民康医学》【年(卷),期】2012(024)023【总页数】3页(P2870-2872)【关键词】免疫透射比浊;免疫散射比浊;优势【作者】孙立芳;赵静【作者单位】烟台市心理康复医院,山东,烟台,265200;烟台市心理康复医院,山东,烟台,265200【正文语种】中文【中图分类】R446.6比浊法也称浊度法，属于散射光谱分析，是在比色的基础上发展起来的，其测定理论、方法、计算等许多方面和比色法相似，但本质上又有区别［1］。

各种浊度都没有特异(吸收光谱)，只是悬液中的粒子将入射光散射(遮挡)，致使透光度减弱。

浊度法分正免疫透射比浊测定技术和免疫散射比浊测定技术，是目前检测人血清中特定蛋白的2种常用方法。

目前以散射比浊为原理的特定蛋白分析仪已在医学检验领域普遍使用。

人们传统地认为散射比浊法要比透射比浊法更灵敏，准确度高，包括许多教科书也这样述说。

20世纪70年代起出现了微量免疫沉淀测定法，即免疫透射比浊测定和免疫散射比浊［1］，自此免疫比浊测定逐渐被广泛应用于临床体液中蛋白质含量检测的领域。

近几年来，免疫透射比浊测定技术被广泛使用在全自动生化分析仪上，实现高速、灵敏和自动化。

一束光线通过有悬浮质点的胶体溶液时，会产生丁铎尔现象，这是胶体粒子散射光的结果。

粒子被光照射后而发光，同时受到散射和吸收两个因素的影响而使透射光的强度相应减弱，这一现象主要取决于粒子的大小，即当粒子直径大于入射光波波长的一半(半波长)时，就发生散射现象。

散射比浊法和透射比浊法测定血浆免疫蛋白的比较标签：散射比浊法；透射比浊法；血浆蛋白散射比浊分析（nephelometry assay）是一种微量、快速、自动化检测体液中特定蛋白质成分的免疫化学分析技术。

该技术是将免疫测定与散射比浊法的原理相結合而设计的一种快速免疫测定方法，主要用于对体液中单蛋白成分的测定。

免疫透射比浊分析（turbidimetry）是一种比较老的方法，最常用于生化指标的测定。

我们应用散射比浊法和透射比浊法测定血浆免疫蛋白并对结果进行分析，现报道如下：1 材料与方法透射比浊法采用日本OLYMPUS生产的AU640全自动生化仪与配套试剂及校准品。

散射比浊法用贝克曼公司生产的IMMAGE全自动比浊仪与配套试剂及校准品。

质控品使用省临检中心的质控样品。

检验样品为68份健康人混合血清。

2 仪器性能评价2.1批内精密度测定透射比浊法的CV值：IgG 1.50%、IgA 0.95%、IgM 1.95%、C3 2.98%、C4 3.98%。

仪器标明为CV≤5%。

散射比浊法的CV值分别为IgG 1.30%、IgA 0.80%、IgM 1.75%、C3 2.08%、C4 3.14%。

2.2批间精密度测定透射比浊法的CV值：IgG 3.15%、IgA 1.24%、IgM 2.36%、C3 3.66 %、C4 4.28%。

仪器标明为CV≤5%。

散射比浊法的CV值分别为IgG 1.52%、IgA 0.96%、IgM 1.96%、C3 2.37%、C4 3.56%。

2.3准确度的检测2批6份质控样品结果见表1，透射比浊法测定与靶值的偏差分别为0.1、0.12、0.1、0.1、0.1、0.1。

散射比浊法测定与靶值的偏差分别为0.1、0.12、0.1、0.1、0.1、0.1。

结果显示，两种方法都有较高的准确性，见表1。

3 讨论从以上结果看出，透射比浊法测定法用于血浆免疫蛋白测定有一些缺陷：①溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大，分子太小则阻挡不了光线的通过；②溶液中的抗原－抗体复合物的数量要足够多，如果数量太小，溶液浊度变化太小，对光通量影响不大；③透光比浊采用光电池直接接收光通量，即光度计的灵敏度不高，微小的浊度变化不易影响透光率的改变；④透光比浊是依据透射光减弱的原理来定量的，因此只能测定抗原－抗体反应的第二阶段，检测仍需抗原－抗体温育反应时间，但检测时间速度快、重复性好。

作者简介：贾珂珂，女，1976年生，硕士，副主任技师，主要从事临床生化检验工作。

通信作者：崔丽艳，E-mail ：。

免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略贾珂珂， 孙文苑， 聂　睿， 崔丽艳（北京大学第三医院检验科，北京 100191）摘要：免疫透射比浊法检测结果的准确性常受到一些干扰因素的影响，如样本性状、内源性干扰、钩状效应和携带污染等，这些干扰因素可使检测结果假性升高或降低，影响临床诊断和治疗监测等。

文章对免疫透射比浊法常见的干扰因素及机制进行综述，以帮助检验人员识别和确认可能存在的干扰，及时纠正检测结果，尽可能减少不良后果的发生。

关键词：免疫透射比浊法；样本性状；内源性干扰；钩状效应；携带污染；干扰Detection and prevention of common interference in turbidimetric immunoassay JIA Keke ，SUN Wenyuan ，NIE Rui ，CUI Liyan.（Department of Clinical Laboratory ，Peking University Third Hospital ，Beijing 100191，China ）Abstract ：The accuracy of turbidimetric immunoassay is affected by a few interference factors ，such as sample appearance ，endogenous interference ，hook effect and carry-over contamination. These interference factors may cause the results increasing or decreasing falsely and further affect clinical diagnosis and treatment monitoring. The laboratory staff should be familiar with common interference factors and mechanisms ，communicate with doctors in time and identify ，confirm and prevent possible interference ，in order to reduce the occurrence of adverse events.Key words ：Turbidimetric immunoassay ；Sample appearance ；Endogenous interference ；Hook effect ；Carry-over contamination ；Interference文章编号：1673-8640（2021）04-0362-07 中图分类号：R446.1 文献标志码：A DOI ：10.3969/j.issn.1673-8640.2021.04.002免疫比浊法是将液相内的沉淀反应与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一种分析技术，常用方法为免疫散射比浊法和免疫透射比浊法。

特定蛋白测定仪简介及应用特种蛋白分析仪（special protein analyzer）是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的一种检测方法。

其最大特点是特异性好，即某一特定抗原只与其相应的抗体反应。

蛋白质具有抗原性，可制备其相应特异性抗体。

以此抗体作为试剂，可以在不需分离的条件下，定量检测存在于复杂蛋白质混合物中的此种蛋白质。

因此免疫测定将血浆蛋白质的测定大大推进了一步，使血清中数十种具有临床意义的微量蛋白质可以简便地进行单个定量测定。

免疫测定的另一特点是敏感性高，可测出纳克（ng）水平的量。

将反应物进行标记而做免疫测定，如放射免疫测定和酶免疫测定，其敏感度可达皮克（pg）水平。

因有临床意义的多种血浆蛋白质含量一般均高于纳克（ng）水平，用简便快速的浊度法已可满足要求。

一、特定蛋白仪简介Grabar和Willams在1953年报道了免疫电泳（对流免疫电泳、火箭免疫电泳和免疫固定电泳）。

上述为经典免疫沉淀试验，测定范围窄10～100μg/ml，灵敏度低，繁琐费时，不能自动化。

1959年Schultze等报道了透射比浊法；1967年Ritchie等提出用激光散射测定补体和触珠蛋白形成的抗原抗体复合物，并称为散射比浊法。

特种蛋白分析仪根据监测散射光角度不同，分为免疫透射浊度（transmission turbidimetry）分析仪和免疫散射浊度（nephelometry）分析仪。

二、透射比浊法其基本原理是一定波长光线通过含抗原-抗体复合物溶液时，被其中的免疫复合物（IC）反射或遮挡、吸收而减弱。

在一定范围内，透射光被吸收的量与IC量成正比，后者又与相应抗原和抗体的量呈函数关系。

抗体量合适，即可从标准曲线获知抗原的量。

由于要求IC的数量足够，并且颗粒要足够大（35～100nm），本法的测定灵敏度和准确度相对较低。

三、散射比浊法散射比浊是指一定波长的光沿水平照射，光线通过检测溶液时，被其中所含的IC等微粒折射而部分偏转，产生散射光。

免疫比浊法和免疫投射比浊法1.定义：（1）免疫比浊法：在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原，经一定时间后形成抗原抗体复合物，用浊度计测量反应液体的浊度，并由此推算样品中的抗原含量。

（2）免疫投射比浊法：当光线通过一个浑浊介质溶液时，由于溶液中存在混浊颗粒，光线被吸收一部分，吸收的多少与混浊颗粒的量成正比，这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。

一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法，称为免疫透射比浊法。

2.原理（1）免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。

其基本原理是：当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂（聚乙二醇等）的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。

当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。

通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。

（2）免疫透射比浊法是抗原抗体结合后，形成免疫复合物，在一定时间内复合物聚合出现浊度。

当光线通过溶液时，可被免疫复合物吸收。

免疫复合物量越多，光线吸收越多。

光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。

利用比浊计测定光密度值，复合物的含量与光密度值成正比，同样当抗体量一定时，光密度值也与抗原含量成正比。

本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便，但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度，否则就难以测出。

3.关系4．免疫比浊法适用的仪器紫外可见分光光度计全自动生化仪全自动生化仪常见的检测方法终点法连续检测法比浊法均相酶免疫分析。

免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较刘少华;邓文平;李燕【摘要】目的探讨免疫透射比浊法和免疫散射比浊法测定免疫球蛋白(Ig)水平的关系.方法用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测252例健康体检人群的血清Ig,同时测定IgG高、低值水平,分析两种方法测定结果之间的关系.结果健康体检人群中血清IgG水平免疫透射比浊法[(11.46±4.92)g/L]测定与免疫散射比浊法[(11.85±3.72)g/L]测定相比,差异无统计学意义(P>0.05);免疫透射比浊法IgM[(1.51±1.06)g/L],免疫散射比浊法IgM[(1.60±0.91)g/L]和免疫透射比浊法IgA[(2.08±1.51)g/L],免疫散射比浊法IgA[(2.15±1.19)g/L]水平差异均无统计学意义(P>0.01).高、低值IgG用两种方法均可以测定.结论了解免疫功能水平时,测定Ig用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法均可,但免疫散射比浊法更有利于病情的监测.%Objective To compare transmission turbidity and scatter turbidity method on measuration of serum immunoglobulin (Ig) levels. Methods Serum Ig concentration was measured by transmission turbidity and scatter turbidity method in 252 healthy people. The high level and low level of IgG were also measured. The relationship between the two methods was analyzed. Results The results showed that the levels ofIgG[(11. 46 ±4. 92)g/L,(11. 85 ± 3. 72)g/L] ,IgM[(l. 51 ± 1. 06)g/L,(l. 60 ± 0.91)g/L] and IgA [(2. 08± 1. 51)g/L, (2. 15 ± 1. 19)g/L] had no significant difference in healthy people(P>0. 05) measured by transmission turbidity and scatter turbidity method. High and low level of IgG can detect by transmission turbidity and scatter turbidity method. Conclusion Transmission turbidity and scatter turbidity method can both be used fordetermination of IgG, while immune scatter turbidity method could be beneficial for evaluation of the disease condition.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)020【总页数】2页(P2034-2035)【关键词】散射测浊法和比浊法;免疫球蛋白【作者】刘少华;邓文平;李燕【作者单位】重庆市涪陵中心医院检验科,408000;重庆市涪陵中心医院检验科,408000;重庆市涪陵中心医院检验科,408000【正文语种】中文人体免疫球蛋白(Ig)测定，是检查人体免疫功能状态最直接而简单的方法，只有选择好的检测方法才能保证检验结果的准确性。

免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较目的对免疫透射比浊法测定血清胱抑素C的方法学性能行初步评价，并与免疫散射比浊法进行比较。

方法应用Rohe Modular P全自动生化分析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪分别对血清胱抑素C进行初步的方法学评价，包括精密度、线性回归试验、回收试验、干扰试验。

结果免疫透射比浊法和免疫散射比浊法无论是批内还是批间精密度均符合要求，CV均0.95；免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的回收率均>96%；干扰物试验结果显示血红蛋白、三酰甘油及胆红素均对测定无明显影响。

结论免疫透射检验的灵敏度较高，检测范围广，与免疫散射试验的结果基本一致，系统误差小、抗干扰能力强，且更加快速、实用和便利。

[Abstract] Objective To initially evaluate the methodological properties of serum cystatin C by transmitted immunoturbidimetric assay and compare it with scatter turbidimetric assay. Methods Methodological evaluation was carried out for the serum cystatin C by Rohe Modular P automatic biochemical analyzer and SIEMENS BN ProSpec specific protein instrument，including precision，linear regression test，recovery test and interference test. Results Transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay both conformed to the requirements of intra-or inter-batch precision，and CV was 0.95；the recovery rates of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay were both>96%；interferent test results showed that hemoglobin，triglyceride and bilirubin had no significant effects on the determination. Conclusion The sensitivity of immune transmission test is high，the detection range is wide，which is consistent with the result of scatter turbidimetric assay. The system error is small，the anti-interference ability is strong，and it is more rapid，practical and convenient.[Key words] Transmitted immunoturbidimetric assay；Scatter turbidimetric assay；Serum cystatin C；Methodology；Test胱抑素C（CysC）又稱為半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。

【摘要】目的：评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性。

方法：用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP 浓度。

结果：两种方法在8—20mg／L、20～40mg／L、40～80mg／L、80～160mg／L、160～300mg／L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0．990、0．996、0．995、0．992、0．997．说明两种方法的相关性是良好的，而在低值1～8mg／L的测定中两方法的相关系数为0．928．结论：速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中可以得到较为准确的CRP检测结果。

【关键词】透射免疫比浊法散射免疫比浊法C反应蛋白在急性应急性疾病时如大手术、重度创伤、心肌梗死、严重感染、肿瘤等，血浆中某些蛋白浓度可明显增高或降低，这种现象称为急性时相反应，这些蛋白统称为急性时相反应蛋白。

最具有代表性的急性时相蛋白首推C反应蛋白(CRP)，CRP是目前临床上最有用的急性时相反应的一个敏感指标。

CRP作为炎症标志物，本身尽管为非特异性的，但对于细菌感染、各种炎症过程及组织坏死与损伤及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效判断，都具有重要的意义J。

CRP的检测方法目前使用比较多的有胶乳凝集试验、免疫沉淀法、免疫浊度法和标记免疫测定法等，而其中的透射免疫比浊法和速率散射比浊法是目前公认为检测CRP较为精确的两种方法。

为了评估两种方法的灵敏度和特异性，我们收集了80份血清，用免疫透射比浊法和速率散射比浊法分别进行CRP的检测，并作了结果比较。

一、材料与方法1、标本来源样本血清来源于80例本院门诊和住院病人，其中骨折病员21例，确诊的恶性肿瘤病人15例，急性肺炎病员22例，冠心病病人10例，外科手术病员12例。

采集空腹血后及时分离血清，并置-20℃保存备用。

2、仪器日立7170型自动生化分析仪，BeckmanArray 360特定蛋白检测系统。

3、试剂透射免疫比浊法试剂盒及配套的校准品由上海基恩科技有限公司提供，批号为ISEP03。