HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展摘要：黄芪是一种常见的中草药材，具有滋补养生、增强免疫力、抗疲劳等多种功效。

黄芪甲苷作为黄芪中的一种主要有效成分，对其含量的测定一直是研究的热点。

本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述，以期为黄芪的质量控制和药用价值的评价提供参考。

一、引言黄芪，又名黄芪、土黄芪，为豆科植物黄芪的根。

黄芪在我国的使用历史非常悠久，被誉为“草中之皇”，在中医药中具有益气健脾、祛痰利水、固表止血等功效。

现代研究表明，黄芪还具有增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生物活性，因此在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用价值。

1. HPLC法HPLC（High Performance Liquid Chromatography）是目前测定黄芪甲苷含量常用的方法之一，其操作简便、分离效果好、重现性高。

常用的色谱柱有C18、C8、C4等，流动相常用乙腈-水、甲醇-水等。

检测波长一般为203nm。

HPLC法在分离和测定黄芪甲苷方面取得了一定的成果，但也存在一定的局限性，例如在样品的制备和前处理过程中易引起黄芪甲苷的流失，影响测定结果的准确性。

2. LC-MS法LC-MS（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry）是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法，可对复杂样品进行快速、准确的分析。

LC-MS法结合了液相色谱和质谱分析的特点，可以直接测定样品中的黄芪甲苷含量，并能对其结构进行进一步的鉴定。

由于其分析灵敏度高、选择性好，因此在黄芪甲苷含量测定中得到了广泛的应用。

LC-MS法的仪器设备和操作技术要求较高，且成本较高，限制了其在一般实验室的应用。

3. UV法UV（Ultraviolet）法是通过样品对紫外光的吸收程度来测定样品中目标成分的含量。

黄芪甲苷在紫外光下有特定的吸收峰，可以通过检测其吸光度来测定其含量。

UV法操作简便、成本低，但其检测灵敏度不高，对样品的前处理要求较高，且容易受杂质的干扰。

HPL C-EL SD测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量毛文彬　相　莉　冯　伟【摘要】　目的　建立HPL C-EL SD方法测定黄芪药材及其炮制品中黄芪甲苷的含量,论证黄芪炮制方法对炮制品中黄芪甲苷含量的影响。

方法　采用Kromasil-C(18)柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(25∶75);体积流量:1.0ml/min;漂移管温度105℃、空气流量2.5L/min。

结果　黄芪甲苷在2.39～14.34μg范围内具有良好的线性关系,r=0.9993,样品平均回收率为105.8%, RSD为2.34%。

结论　本方法简便、准确、专属性强,可用于黄芪药材及其制剂的质量控制,炮制品中黄芪甲苷含量明显低于黄芪药材,以黄芪甲苷为主要治疗成分时,使用生品为宜。

【关键词】　HPL C-EL SD　黄芪　黄芪甲苷 黄芪为豆科植物蒙古黃芪[Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]或夹膜黃芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.]的干燥根。

炙黄芪为黄芪的炮制加工品。

我们在采用《中国药典》2005年版黄芪含量测定方法[1]测定时,发现回收率较低,不符合分析方法验证要求,出峰时间较晚,影响实验进度及成本。

故本文对《中国药典》2005年版黄芪含量测定方法进行了改进,提高了回收率,缩短了分析时间,并对其炮制品进行含量测定,评价其质量,为黄芪药材炮制品规范化加工提供重要参考。

1　仪器与试药1.1　药品与试剂　Waters Alliance H T型高效液相色谱仪, Alltech EL SD2000型蒸发光散射检测器;黄芪对照药材、黄芪甲苷对照品均购自中国药品生物制品检定所;硅胶G为青岛海洋化工厂生产;所用试剂均为分析纯。

1.2　药材　黄芪生品和蜜炙黄芪均购自陕西省药材公司,西安市万寿路药材市场。

HPLC测定贵州产黄芪中黄芪甲苷的含量彭全材;胡继伟;杨占南;黄先飞;连国奇【期刊名称】《江西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(031)003【摘要】对贵州黄芪药材黄芪甲苷的含量进行了测定,采用甲醇超声提取样品,HPLC梯度洗脱.黄芪甲苷的理论塔板数为5 588,分离度为1.42,拖尾因子为1.01.回归方程y=1.4048 X+16.682,R=0.999 0,在4.400～440.0 μg/mL之间的线性关系良好.日内和日间精密度的RSD均小于1.5%,重复性试验的RSD为0.7%(n=5),最低检测限为0.440 μg/mL,加样回收率为98.9%、96.7%、99.8%,RSD(n=5)分别为2.8%、3.5%、2.5%.黄芪样品中黄芪甲苷的含量均符合《中华人民共和国药典》(2005版)标准.该方法缩减了黄芪药材的前处理步骤,节约了实验时间,适用于黄芪药材中黄芪甲苷含量测定;同时也证明黄芪的质量较好.【总页数】4页(P278-281)【作者】彭全材;胡继伟;杨占南;黄先飞;连国奇【作者单位】贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,分析测试中心,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】O657【相关文献】1.UHPLC-MS-MS法同时测定舒筋活血颗粒中葛根素和黄芪甲苷的含量 [J], 陈昭;陈伟韬;胥爱丽;李养学;毕晓黎2.HPLC与比色法测定复方黄芪注射液中总皂苷与黄芪甲苷含量 [J], 李永吉;管庆霞;关延彬;李秋红3.HPLC-ELSD法同时测定益肺清化颗粒中的黄芪甲苷、桔梗皂苷D和麦冬皂苷D 的含量 [J], 王银;邱连建4.UHPLC-MS-MS法同时测定舒筋活血颗粒中葛根素和黄芪甲苷的含量 [J], 陈昭;陈伟韬;胥爱丽;李养学;毕晓黎;;;;;;;;;;5.HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量 [J], 田丰;邓英杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Astragalus membranaceus）是一种重要的中草药材，被广泛应用于中医药领域。

黄芪甲苷（astragaloside IV）是黄芪的主要活性成分之一。

黄芪甲苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗心肌缺血、抗心肌纤维化等多种药理活性，因此成为黄芪药效的重要指标之一。

1. 简介黄芪甲苷的理化性质：黄芪甲苷是一种三萜甾醇类化合物，化学结构中含有多个糖苷键。

黄芪甲苷的糖基部分可以通过酶解反应裂解得到黄芪甲硷（astragaloside I）和黄芪甲醇（astragaloside II），因此研究黄芪甲苷的含量也间接反映了黄芪甲硷和黄芪甲醇的含量。

2. 提取和纯化方法黄芪甲苷的提取和纯化方法主要有溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取、正相和反相SPE（固相萃取法）等。

溶剂提取是最常用的方法，可以使用水、乙醇、乙醚等溶剂进行提取。

超声波和微波辅助提取可以提高黄芪甲苷的提取效率。

SPE法则是通过固相吸附剂对样品进行富集和洗脱，进而得到纯化的黄芪甲苷。

3. 分析方法黄芪甲苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、毛细管电泳法、液质联用法（LC-MS/MS）、红外光谱法等。

HPLC法是最常用的方法，可以使用紫外检测器、荧光检测器等进行检测。

GC法则适用于含量较低的黄芪甲苷的测定。

液质联用法结合了LC和MS的优势，可以提高黄芪甲苷的分析敏感性和准确性。

4. 含量测定影响因素黄芪甲苷的含量测定受到多种因素的影响，包括黄芪的生长环境、不同采收时间、存储条件等。

黄芪生长环境中土壤的pH值、养分含量和水分等对黄芪甲苷的生物合成和积累有一定影响。

采收时间对黄芪甲苷的含量也有重要影响，一般来说，黄芪的地上部分含量高于根部。

黄芪的存储条件也会导致黄芪甲苷的降低，因此在储存过程中需要注意保鲜处理。

5. 品种和产地差异黄芪的品种和产地对黄芪甲苷的含量也有一定影响。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，又称黄芪补中益气汤，为豆科植物黄芪的干燥根。

黄芪性味甘苦微温，归脾肺经，具有益气固表、益血统阴、利水除湿、化瘀散结的功效。

黄芪中含有一种特殊的活性成分——黄芪甲苷，具有抗氧化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

黄芪甲苷的含量测定对于黄芪的质量评价和药理研究具有非常重要的意义。

目前，黄芪甲苷含量的测定方法有很多种，主要包括高效液相色谱法（HPLC）、紫外分光光度法（UV）、液相色谱串联质谱法（LC-MS）、超高效液相色谱法（UPLC）等。

下面，将对这些方法的研究进展进行介绍。

一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是测定黄芪甲苷含量的常用方法之一。

该方法主要利用色谱柱对样品进行分离，然后利用紫外检测器进行检测。

HPLC法在测定黄芪甲苷含量上具有灵敏度高、分离效果好、重现性好的优点。

目前已经有多种不同的HPLC法用于测定黄芪甲苷含量，比如采用保留时间法、峰面积法、标准曲线法等。

这些方法对样品的前处理要求不同，但都有较好的准确性和重现性。

二、紫外分光光度法（UV）紫外分光光度法是一种简便、快速的测定方法，主要利用样品中黄芪甲苷特有的吸收峰进行定量分析。

该方法操作简单，仪器设备不复杂，因此在一些实验室中得到了广泛应用。

紫外分光光度法对样品的前处理要求较高，同时在测定复杂样品时准确性和灵敏度可能会受到一定的限制。

液相色谱串联质谱法是一种更加高级的分析技术，它结合了液相色谱和质谱的优点，能够对样品进行更加准确和灵敏的分析。

该方法在测定黄芪甲苷含量时能够获得更加详细的信息，对样品中其他杂质的干扰较小。

LC-MS法在黄芪甲苷含量的测定和结构鉴定方面具有较大优势，但是仪器的成本和维护成本也相对较高。

超高效液相色谱法是近年来发展起来的一种新型色谱技术，其分离效果和分析速度均更加出色。

UPLC法在测定黄芪甲苷含量时能够获得更高的分辨率和灵敏度，同时也节约了试剂和溶剂的用量。

反相高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
蔡进章;王增寿;章晓东
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2003(012)012
【摘要】目的:用反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定黄芪中黄芪甲苷的含量.方法:采用RP-HPLC法,流动相为乙腈-水-磷酸(1:2:0.1),检测波长为203 nm.结果:黄芪甲苷浓度在1.28～12.8ug 范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为
96.8%,RSD为1. 17%(n=6).结论:RP-HPLC法操作简便,测定结果可靠,适用于黄芪中黄芪甲苷的含量测定.
【总页数】2页(P36-37)
【作者】蔡进章;王增寿;章晓东
【作者单位】温州医学院附属第二医院,浙江,温州,325027;温州医学院附属第二医院,浙江,温州,325027;浙江省兰溪市药品检验所,浙江,兰溪,321100
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法测定消渴平片中黄芪甲苷的含量Δ [J], 周颖仪;刘潇潇
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4.反相高效液相色谱法测定复方黄芪口服液黄芪甲苷的含量 [J], 吴清华
5.反相高效液相色谱法测定益气生血胶囊中黄芪甲苷含量的方法学研究 [J], 孙宾娟
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黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展引言黄芪，即中药材黄芪，是一种常用的中药材，被用于治疗肝肾不足、气虚乏力、风寒感冒等疾病。

黄芪中含有丰富的活性成分，其中黄芪甲苷是一种重要的化学成分，具有抗氧化、抗炎、免疫调节等多种生物活性。

测定黄芪中黄芪甲苷的含量对其药效和质量的评估具有重要的意义。

本文将介绍目前黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的最新进展。

一、黄芪甲苷的药理作用二、黄芪中黄芪甲苷含量测定方法目前，研究人员已经开发出多种方法来测定黄芪中黄芪甲苷的含量，主要包括色谱法、质谱法和光谱法等。

（一）色谱法高效液相色谱(HPLC)是目前测定黄芪中黄芪甲苷含量最常用的方法之一。

该方法具有分离效果好、准确性高、重现性好的特点。

研究人员通常采用C18色谱柱，以乙腈-水为流动相，在不同波长下进行检测，可以实现对黄芪中黄芪甲苷的准确测定。

近年来，研究人员还开发了一种基于光谱技术的测定黄芪甲苷含量的方法。

该方法具有简便、快速的特点，可以实现对黄芪中黄芪甲苷的快速测定。

研究人员通常通过建立黄芪甲苷与特定试剂在特定波长下的光谱特征，来进行黄芪甲苷含量的测定。

近年来，研究人员对于黄芪中黄芪甲苷含量的测定方法进行了进一步的研究和改进，主要体现在以下几个方面：（一）方法的改进研究人员针对目前存在的色谱法、质谱法和光谱法的一些局限性，如检测灵敏度不够高、操作复杂等问题，进行了一系列的改进。

他们通过优化色谱柱、流动相组成、检测波长等条件，改进了色谱法和光谱法的分析方法，使其具有更高的分析灵敏度和准确性。

他们还通过改进萃取和预处理方法，提高了质谱法的检测灵敏度和准确性。

（二）新技术的应用随着科技的发展，研究人员还引入了一些新技术来测定黄芪中黄芪甲苷的含量。

他们利用人工智能算法对色谱图谱进行分析和处理，提高了测定的准确性和稳定性。

他们还探索了一些新型的色谱柱和检测方法，提高了分析的效率和灵敏度。

（三）标准物质的建立为了提高测定方法的准确性和可靠性，研究人员建立了一套完善的黄芪甲苷标准物质体系。

一、实验目的1. 掌握黄芪中有效成分的提取方法。

2. 学习并掌握高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪中黄芪甲苷含量的原理和方法。

3. 通过实验，了解黄芪的质量控制方法。

二、实验原理黄芪为豆科植物Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气固表、利水消肿、托毒生肌的功效。

黄芪甲苷（Astragaloside IV）是黄芪中的主要有效成分，具有显著的抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。

本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。

三、实验材料与仪器1. 试剂：黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所提供），甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水。

2. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、旋转蒸发仪、离心机、恒温水浴锅等。

四、实验方法1. 样品前处理（1）样品制备：准确称取黄芪粉末0.1g，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）5ml，超声提取30min，取出，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

（2）对照品溶液制备：准确称取黄芪甲苷对照品10mg，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）溶解并定容至刻度，摇匀，过滤，作为对照品溶液。

2. 色谱条件（1）色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；（2）流动相：甲醇-水（80：20）；（3）流速：1.0ml/min；（4）检测波长：210nm；（5）柱温：30℃。

3. 实验步骤（1）将高效液相色谱仪开启，预热至色谱柱平衡；（2）将供试品溶液和对照品溶液分别进样，记录色谱图；（3）根据峰面积计算供试品中黄芪甲苷的含量。

五、结果与分析1. 色谱图供试品溶液和对照品溶液的色谱图如图1所示。

从图中可以看出，供试品溶液中黄芪甲苷峰与对照品峰保留时间一致，且峰形良好。

2. 结果计算根据色谱图，计算供试品中黄芪甲苷的含量为0.082mg/g。

3. 讨论本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，结果表明，本方法操作简便、准确可靠，适用于黄芪的质量控制。