黄芪甲苷含量计算公式

高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量分析摘要】目的：建立高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量测定体系。

方法：应用高效液相色谱法测定蒙古黄芪和甘肃红芪的黄芪甲苷含量，色谱柱：Agilent Eclipse XBD-C18柱(150×4.6 mm，5μm)；流动相：甲醇-0.2%磷酸水溶液(44∶56)；柱温：26℃；流速：0.5 mL/min；检测波长：335 nm。

结果：黄芪甲苷测定的回归方程为Y=13.614X-1.4897，r=0.9999，线性范围为10.2-102μg/mL-1。

测定蒙古黄芪和甘肃红芪中的黄芪甲苷回收率分别为95.9%与94.5%，在3 d内基本能保持稳定，含量分别为0.289mg/g和0.284mg/g。

结论：高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量方法简便、灵敏度高、重现性好，可作为首选方法之一。

【关键词】高效液相色谱法黄芪黄芪甲苷【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）34-0192-02黄芪是中医临床最常用的大宗药材之一，具有营养和抗氧化等药理活性和药用价值，主要生长在西北干旱地区。

当前由于市场需求量不断增加，其野生资源受到极大威胁[1]。

其含有多糖、甲苷等主要生物活性成分，有抗心肌缺血、缺氧、病毒性心肌炎的作用[2]。

当前黄芪甲苷的测定方法有薄层色谱法与毛细管电泳法等[3]。

本文建立了高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量体系，希望为从天然植物中寻找低毒或无毒的抗氧化活性成分提供参考。

现报告如下。

1 实验仪器与方法1.1 实验仪器日本岛津公司LC-20AT高效液相色谱仪与色谱工作站，十万分之一电子天平XS205DU型，SQ21198B多功能食品加工机，UV-2450型紫外-可见分光光度计，DELTA320型pH计。

黄芪甲苷对照品购自中国药品生物制品鉴定所，石油醚、氯仿、正丁醇为色谱纯，甲醇、甲酸、无水乙醇、冰醋酸为分析纯，水为超纯水。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展摘要：黄芪是一种常见的中草药材，具有滋补养生、增强免疫力、抗疲劳等多种功效。

黄芪甲苷作为黄芪中的一种主要有效成分，对其含量的测定一直是研究的热点。

本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述，以期为黄芪的质量控制和药用价值的评价提供参考。

一、引言黄芪，又名黄芪、土黄芪，为豆科植物黄芪的根。

黄芪在我国的使用历史非常悠久，被誉为“草中之皇”，在中医药中具有益气健脾、祛痰利水、固表止血等功效。

现代研究表明，黄芪还具有增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生物活性，因此在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用价值。

1. HPLC法HPLC（High Performance Liquid Chromatography）是目前测定黄芪甲苷含量常用的方法之一，其操作简便、分离效果好、重现性高。

常用的色谱柱有C18、C8、C4等，流动相常用乙腈-水、甲醇-水等。

检测波长一般为203nm。

HPLC法在分离和测定黄芪甲苷方面取得了一定的成果，但也存在一定的局限性，例如在样品的制备和前处理过程中易引起黄芪甲苷的流失，影响测定结果的准确性。

2. LC-MS法LC-MS（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry）是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法，可对复杂样品进行快速、准确的分析。

LC-MS法结合了液相色谱和质谱分析的特点，可以直接测定样品中的黄芪甲苷含量，并能对其结构进行进一步的鉴定。

由于其分析灵敏度高、选择性好，因此在黄芪甲苷含量测定中得到了广泛的应用。

LC-MS法的仪器设备和操作技术要求较高，且成本较高，限制了其在一般实验室的应用。

3. UV法UV（Ultraviolet）法是通过样品对紫外光的吸收程度来测定样品中目标成分的含量。

黄芪甲苷在紫外光下有特定的吸收峰，可以通过检测其吸光度来测定其含量。

UV法操作简便、成本低，但其检测灵敏度不高，对样品的前处理要求较高，且容易受杂质的干扰。

黄芪甲苷介绍以及提取黄芪性甘，微温；归脾、肺经。

补气养血，益气固表，这是黄芪的主要作用。

同时可以复脉固脱，生津止渴，是恢复元气的良药。

对于身体虚弱、精神萎靡、四肢无力或突发性休克等均有不错的疗效。

黄芪生用可以治疗身体淤血、手脚肿胀、皮肤红肿毒疮等疾病，主要有赖于其益气固表、利水排毒的作用。

蜜炙黄芪可以缓解元气不足、腑脏功能减退、脾虚劳倦、贫血等症状，得益于其补中益气、补血养血的作用。

现代药理学研究发现黄芪有防治感冒，治疗病毒性心肌炎，预防和治疗小儿支气管哮喘，治疗和缓解慢性乙型肝炎，治疗和缓解慢性肾炎，可用于视网膜脱离术后视力恢复，防治高血压、动脉硬化、高血脂等心脑血管疾病。

黄芪的主要成分有皂苷类、多糖类、黄酮类物质及有机酸，其中皂苷类和黄芪多糖是其主要活性物质，黄芪皂苷I、II、III、Ⅳ、V、VI、VII、VIII是主要的皂苷类物质。

《中国药典》(2015版)规定，黄芪甲苷的含量是黄芪质量控制的主要指标[41。

黄芪甲苷是正品黄芪三萜皂苷中的黄芪皂苷Ⅳ，在黄芪药材中含量极低，一般在千分之一左右，而且黄芪中药材成分复杂，提取比较困难，并且现代药学的发展及新剂型新产品的不断出现，要求有效地提取黄芪中的黄芪甲苷，对于产品研发和创新有着关键性的作用。

现阶段对于黄芪甲苷的提取方法和工艺研究有了一定的进展，在传统提取基础上，出现了超临界二氧化碳萃取、微波辅助萃取、超声波辅助提取技术，所以研究高效快速提取黄芪中黄芪甲苷的方法和技术就显得尤为重要。

现代医学研究证明，黄芪甲苷可以减少血栓形成、降低血压、保护心脏、增强机体免疫力等作用，黄芪的化学成分众多，主要有皂苷类、黄酮类和多糖等，其中皂苷类化合物有黄芪皂苷及其大豆皂苷，黄酮类化合物有黄酮、异黄酮、异黄烷和紫檀烷四大类。

另外尚含单糖、氨基酸、蛋白质、核黄素、叶酸、尼克酸、维生素D、驱油酸、亚麻酸、微量元素、香草酸、阿魏酸、异阿魏酸、对羟苯基丙烯酸、咖啡酸、绿原酸、棕榈酸、B一谷甾醇、胡萝卜苷、羽扇豆醇，正十六醇等成分口。

高效液相色谱法测定血安颗粒中黄芪甲苷的含量【摘要】目的建立以高效液相色谱法测定血安片中黄芪甲苷含量的方法。

方法色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：乙腈-水（32∶68）为流动相；蒸发光散射检测器，流速为1．0 ml/min，柱温：40℃，进样量10 μl。

结果黄芪甲苷在2．72～13．60 μg（r=0．999 5）之间呈良好的线性关系。

黄芪甲苷平均回收率:100．1%（RSD=1．26%,6例）。

结论本方法简便、准确、重现性好。

【Abstract】Objective To establish a method of HPLC determination of Asragloside in tablet of Xuean.Methods SHIM-PACK-C18 column was used with a mobile phase of acetonitrile－water（32∶68）;flow rate 1．0 ml/min; column temperature at 40℃;injecting volume 10 μg．Results Asragloside showed the good linear relationship at the range of 2．72～13．60 μg（r=0．999 5）respectively；It average recoveries was: 100．1%（RSD=1．26%,6例）respectively.Conclusion The methods is simple, accurate and reproducible.【Key words】Tablet of Xuean；Asragloside；HPLC血安片是由当归、川芎、黄益母草等组成的中药复方制剂，有益气活血、祛淤止血的功能。

用于妇人气虚血瘀之恶露不绝症。

建立以高效液相色谱法测定血安片中黄芪甲苷含量的方法，对提高中药制剂质量监控，完善质量标准体系具有实际应用意义。

外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELS D）进行药物分析时的含量计算方法。

大家都知道在用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）的定量用外标两点法对数方程，并且药典也要求如此！比如银杏叶、知母、黄芪、人参、署预、（中药含有皂苷的），化药也有一些。

但对数方程的列法却各不相同，有很多人是3楼的列法：峰面积和进样量同时去对数。

但就药典的文字理解：“对数方程”是指在方程里有一个对数，而同时取对数列出来的方程叫双对数方程。

根据最小二乘法应该是进样量(ug)与峰面积的对数的线性方程。

我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSd的工作原理，进样质量和ELSD检测响应值（峰面积）一般不呈现良好的线性。

因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程，在中国药典20 00版2002增补本以及2005版、2010版中，凡采用HPLC-ELSD方法进行含量测定时，均有“采用外标两点法对数方程计算含量”一句。

进两个不同浓度的对照品, 将进样量和对应的峰面积取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入直线方程：y=Kx+b，即可求出式中的K和b。

再将求出的K和b代入公式：InA=KInC+b ，即可求出对数方程。

公式为：InA=KInC+bA：峰面积K：为公式y=Kx+b中的KC：进样量b：为公式y=Kx+b中的b计算时将样品峰面积（A）代入方程InA=KInC+b，计算出InC后，再取反对数就可以计算出C了．再电子表格计算较为方便．在Excel中进行直线回归，可得出该方程，最后求出带入计算，就OK了！解析外标两点对数方程计算黄芪药材含量方法：照高效液相色谱法，ODS柱，以乙腈-水（32：68）为流动相，流速1ml/min，经蒸发光检测器检测，用外标两点对数方程计算黄芪药材中黄芪甲苷的含量。

黄芪中黄芪甲苷的含量测定技术作者：刘伟来源：《中国科技博览》2013年第33期论文摘要：目的建立荧光分析法测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量方法。

方法利用大茴香酸在硫酸介质中与黄芪甲苷反应产生强烈荧光的特性进行测定黄芪中黄芪甲苷含量。

结果最大激发波长Ex为320 nm，最大发射波长Em为387nm。

测定样品的平均回收率为97.22%，RSD=2.31%（n=5）。

结论该方法灵敏度高，选择性好，结果无干扰，可广泛应用于黄芪药材的质量控制。

主题词：黄芪黄芪甲苷中图分类号：R927.2黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicu（Bge.）Hsiao或膜荚黄芪A.membranaceus（Fisch.）Bge的干燥根，具有补气固表、利尿脱毒，排脓，敛疮生肌等功效。

黄芪为常用中药，在中药制剂中以黄芪为君药的产品非常多，因此如何控制黄芪的质量至关重要。

黄芪甲苷是黄芪主要有效成分之一，也是黄芪皂苷中具有代表性的单体，在抗衰老、调节免疫功能、保护心肌和大脑缺血等多方面具有显著作用。

黄芪甲苷仅在200 nm处有末端吸收，对HPLC色谱法紫外检测器检测不利，噪音对结果影响较大，灵敏度也较低。

2005年版《中国药典》采用蒸发光散射检测器测定，具有分离度好，应用范围宽，流动相无干扰等优点，但操作繁琐，价格昂贵，不利于制药公司及基层医疗单位普及。

本文根据浓硫酸条件下黄芪甲苷与大茴香酸反应产物具有荧光的特性，采用荧光分光光度法测定不同产地、不同生长年限黄芪药材中黄芪甲苷的含量，以期为黄芪的质量控制提供客观的定量评价依据。

1 仪器与试药Perkin Elmer instruments LS45 Luminesence Spectrometer（美国PerkinElmer 公司LS45型荧光分光光度计），HX-200A型高速中药粉碎机，万分之一电子天平 FA/JA 1004型。

脉络通颗粒中黄芪甲苷的含量测定目的：建立脉络通颗粒中黄芪甲苷的测定方法。

方法：在λS=530 nm，λR=700 nm用薄层色谱扫描法测定黄芪甲苷的含量。

结果：黄芪甲苷在1.02～5.10 μg范围内线性关系良好（r=0.9995），平均回收率为96.1%，RSD=1.9%(n=5)。

结论：该法准确、可靠、灵敏度高、重现性好，可用于该制剂中黄芪甲苷的含量测定及质量控制。

标签：脉络通颗粒；黄芪甲苷；含量脉络通颗粒是纯中药制剂，由黄芪、元参、西洋参、葛根等十几味中药经科学组方，结合传统工艺，用现代中药提取技术精制而成。

具有滋阴补气，健脾益胃，生津止渴，润燥除烦，调整上、中、下三焦阴阳平衡之功效，对于非胰岛素依赖型糖尿病有良好的疗效。

黄芪为方中的主要成分之一，本文参考有关资料[1,2]建立了薄层扫描法测定其黄芪甲苷的含量，方法准确、可靠、灵敏度高、重现性好，为保证其制剂质量提供了可靠的依倨。

1 材料与方法1.1 仪器与试药CS-9301PC薄层扫描仪（日本岛津CS－9301PC）；定量毛细管（美国Drum-mond厂出品）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所）；甲醇、氯仿、正丁醇等试剂均为分析纯；脉络通络颗粒为市售，批号：030417，030521，030829。

1.2 方法1.2.1 对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品10.2 mg置10 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。

1.2.2 供试品溶液的制备取装量差异项下的脉络通颗粒1 g精密称定，加水20 ml微热使溶解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次15 ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水使溶解，放冷，通过D101大孔树脂柱（内径1 cm,长15 cm），以水50 ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30 ml洗脱，弃去40%的乙醇液，继续用70%的乙醇80 ml洗脱，收集洗脱液，挥干溶剂，残渣用甲醇溶解并转移至1 ml容量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。