黄芪党参颗粒中黄芪甲苷含量的HPLC测定方法

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展摘要：黄芪是一种常见的中草药材，具有滋补养生、增强免疫力、抗疲劳等多种功效。

黄芪甲苷作为黄芪中的一种主要有效成分，对其含量的测定一直是研究的热点。

本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述，以期为黄芪的质量控制和药用价值的评价提供参考。

一、引言黄芪，又名黄芪、土黄芪，为豆科植物黄芪的根。

黄芪在我国的使用历史非常悠久，被誉为“草中之皇”，在中医药中具有益气健脾、祛痰利水、固表止血等功效。

现代研究表明，黄芪还具有增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生物活性，因此在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用价值。

1. HPLC法HPLC（High Performance Liquid Chromatography）是目前测定黄芪甲苷含量常用的方法之一，其操作简便、分离效果好、重现性高。

常用的色谱柱有C18、C8、C4等，流动相常用乙腈-水、甲醇-水等。

检测波长一般为203nm。

HPLC法在分离和测定黄芪甲苷方面取得了一定的成果，但也存在一定的局限性，例如在样品的制备和前处理过程中易引起黄芪甲苷的流失，影响测定结果的准确性。

2. LC-MS法LC-MS（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry）是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法，可对复杂样品进行快速、准确的分析。

LC-MS法结合了液相色谱和质谱分析的特点，可以直接测定样品中的黄芪甲苷含量，并能对其结构进行进一步的鉴定。

由于其分析灵敏度高、选择性好，因此在黄芪甲苷含量测定中得到了广泛的应用。

LC-MS法的仪器设备和操作技术要求较高，且成本较高，限制了其在一般实验室的应用。

3. UV法UV（Ultraviolet）法是通过样品对紫外光的吸收程度来测定样品中目标成分的含量。

黄芪甲苷在紫外光下有特定的吸收峰，可以通过检测其吸光度来测定其含量。

UV法操作简便、成本低，但其检测灵敏度不高，对样品的前处理要求较高，且容易受杂质的干扰。

流动相 为 乙腈 一水 （ ５ ６ ） 体积 流量 １０ ｍ ／ ｎ ３ ：５ ， ． Ｌ ｍｉ，
柱 温 ３ ＝ 漂 移管 温度 １ ３℃ ， ５ｃ ， 【 ０ 载气 流量 ２ ３Ｌ ｍ ｎ ． ／ ｉ
ｄ ｉ １ ． ９ ９ ｊ ｉｓ ． ０ ｏ ：０ ３ ６ ／ ．ｓｎ １ ０１—６ １ ２ ２． ９ ０ ４ ９ ０．０１ ０ ． ３
０ ９ ９７ 。 芪 甲苷 的平 均 回 收 率 为 ９ ． ％ （ Ｓ ＝１９ ， ．９ ） 黄 ８Ｏ ＲＤ ．％
ｎ＝ ） 结 论 ： 之 薄 层 色 谱 扫 描 法 ， 相 色 谱 法 提 取 方 法 相 ６ 。 比 液
对 简 单 ， 响 因素 少 ， 属 性 强 ， 确 度 高 ， 法 准 确 可 靠 ， 影 专 精 方 可 替 代 原 法 用 于 控 制 参 芪 花 粉 片 中黄 芪 甲 苷 的 质 量 。
要药 物 ， 因此 以黄 芪 中 的黄 芪 甲 苷 为指 标 进 行 含 量 测定 。黄 芪 甲苷 的含 量 测 定 方 法 主 要 有 薄 层 扫 描
精 密 称 取 黄 芪 甲 苷 对 照 品 适 量 ， 甲 醇 制 成 加
芪 甲苷 的 线 性 关 系 为 Ｙ＝１ ４ ５ ７ ９ ＋５ ９ ９ ６ ９ ｇ Ｌ（ ． ０ １ Ｘ ． １ ９ ／ ｒ＝
国药 品 生 物 制 品 检 定 所 提 供 ， 号 １０ ８ 批 １ ７ １— ２０ １ ； ０ ６ ３ 甲醇 、 乙腈 ， Ｍ ｒｋ公 司色谱 纯 ； 为纯 净 为 ｅｃ 水
水 ； 为 高 纯 氮 气 。Ｗａｅｓ ６ ０高 效 液 相 色 谱 仪 ， 气 ｔ ９ ｒ２
美 国 Ｗａ ｒ 公 司产 品 ； ｌｅｈ２ ０ ｔｓ ｅ Ａｈ ｃ ０ ０蒸 发光散 射检 测 器， 成都 奥泰 万谱 科技 有 限公 司产 品 。

薄层扫描法测定黄芪党参颗粒剂中黄芪甲苷的含量
万美伶;岑菲菲;丘琴;韦志英;佟晓乐
【期刊名称】《广西中医药大学学报》
【年(卷),期】2007(010)001
【摘要】[目的]为制定黄芪党参颗粒剂含量测定标准提供依据.[方法]采用薄层扫描法测定黄芪党参颗粒剂中黄芪甲苷的含量测定.采用硅胶G薄层板,以适当的展开剂展开,即可排除干扰.[结果]黄芪党参颗粒剂中黄芪甲苷含量为0.089～0.131%.本法平均回收率为98.0%,RSD=1.87%(n=5).[结论]TLC法简便,易行.可为该样品制定含量测定标准提供科学依据.
【总页数】3页(P59-61)
【作者】万美伶;岑菲菲;丘琴;韦志英;佟晓乐
【作者单位】广西中医学院,广西,南宁,530001;广西中医学院,广西,南宁,530001;广西中医学院,广西,南宁,530001;广西中医学院,广西,南宁,530001;广西中医学院,广西,南宁,530001
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.CAMG薄层扫描法测定不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量 [J], 葛慷艳;张群智
2.薄层扫描法测定华海乙肝泡腾颗粒剂中黄芪甲苷的含量 [J], 王秀冬;张兆旺;孙秀梅;吕青涛;管华诗;徐家敏
3.薄层扫描法测定桂芪颗粒剂中黄芪甲苷的含量 [J], 苟小军;车庆珍
4.薄层扫描法测定黄芪颗粒剂中黄芪甲苷的含量 [J], 朱坤福
5.薄层扫描法测定活血通络颗粒剂中黄芪甲苷的含量 [J], 王秀萍;曾平;孙燕;刘志华;邓武娥;高小霞
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HPLC测定贵州产黄芪中黄芪甲苷的含量彭全材;胡继伟;杨占南;黄先飞;连国奇【期刊名称】《江西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(031)003【摘要】对贵州黄芪药材黄芪甲苷的含量进行了测定,采用甲醇超声提取样品,HPLC梯度洗脱.黄芪甲苷的理论塔板数为5 588,分离度为1.42,拖尾因子为1.01.回归方程y=1.4048 X+16.682,R=0.999 0,在4.400～440.0 μg/mL之间的线性关系良好.日内和日间精密度的RSD均小于1.5%,重复性试验的RSD为0.7%(n=5),最低检测限为0.440 μg/mL,加样回收率为98.9%、96.7%、99.8%,RSD(n=5)分别为2.8%、3.5%、2.5%.黄芪样品中黄芪甲苷的含量均符合《中华人民共和国药典》(2005版)标准.该方法缩减了黄芪药材的前处理步骤,节约了实验时间,适用于黄芪药材中黄芪甲苷含量测定;同时也证明黄芪的质量较好.【总页数】4页(P278-281)【作者】彭全材;胡继伟;杨占南;黄先飞;连国奇【作者单位】贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,分析测试中心,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001;贵州师范大学,贵州省山地环境重点实验室,贵州,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】O657【相关文献】1.UHPLC-MS-MS法同时测定舒筋活血颗粒中葛根素和黄芪甲苷的含量 [J], 陈昭;陈伟韬;胥爱丽;李养学;毕晓黎2.HPLC与比色法测定复方黄芪注射液中总皂苷与黄芪甲苷含量 [J], 李永吉;管庆霞;关延彬;李秋红3.HPLC-ELSD法同时测定益肺清化颗粒中的黄芪甲苷、桔梗皂苷D和麦冬皂苷D 的含量 [J], 王银;邱连建4.UHPLC-MS-MS法同时测定舒筋活血颗粒中葛根素和黄芪甲苷的含量 [J], 陈昭;陈伟韬;胥爱丽;李养学;毕晓黎;;;;;;;;;;5.HPLC法测定黄芪中的黄芪甲苷含量 [J], 田丰;邓英杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪，是一种传统中药材，具有滋补养生、益气固表的功效，被广泛用于治疗疲乏无力、气虚乏力、脾胃虚弱等疾病。

黄芪甲苷是黄芪中的一种重要活性成分，具有抗氧化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。

对黄芪中黄芪甲苷含量进行测定研究，对于黄芪的质量评价、产品开发及临床应用具有重要意义。

一、测定方法的研究进展针对黄芪中黄芪甲苷的测定，目前主要采用的方法包括高效液相色谱法、超高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法、酶联免疫吸附测定法等。

高效液相色谱法是目前应用较为广泛、准确性较高的一种测定方法，主要包括经典的反相色谱法、离子交换色谱法、手性色谱法等。

近年来，超高效液相色谱法的应用也逐渐得到了推广，其具有分离效率高、分析时间短、灵敏度高等优点，对于黄芪中黄芪甲苷的测定具有一定的优势。

二、影响因素的研究进展黄芪中黄芪甲苷含量受多种因素的影响，包括生长环境、采收季节、制备工艺等因素。

生长环境是影响黄芪中黄芪甲苷含量的重要因素之一。

有研究表明，黄芪生长的土壤类型、水分、温度等因素都会对黄芪中黄芪甲苷的含量产生一定的影响。

采收季节也是影响黄芪中黄芪甲苷含量的重要因素之一。

研究表明，黄芪的采收季节不同，其黄芪甲苷含量也会有所差异。

通过研究影响因素，可以更好地掌握黄芪中黄芪甲苷含量的变化规律，为其质量评价提供科学依据。

三、质量评价标准的研究进展针对黄芪中黄芪甲苷含量的质量评价，国家药典对其含量进行了规定，但是现有标准中存在一些不足之处，例如对于不同生长环境、不同采收季节的黄芪，其含量差异较大，当前的质量评价标准并不能完全覆盖。

建立更为科学、合理的质量评价标准，对于规范黄芪的生产加工、保障产品质量具有重要意义。

近年来，一些研究机构对此进行了系统研究，探讨了不同影响因素下的黄芪甲苷含量变化规律，并试图建立更为科学的质量评价标准，为黄芪的质量评价提供了更为系统的依据。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展取得了一定的成果，但仍存在一些挑战和机遇。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪（Astragalus membranaceus）是一种重要的中草药材，被广泛应用于中医药领域。

黄芪甲苷（astragaloside IV）是黄芪的主要活性成分之一。

黄芪甲苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗心肌缺血、抗心肌纤维化等多种药理活性，因此成为黄芪药效的重要指标之一。

1. 简介黄芪甲苷的理化性质：黄芪甲苷是一种三萜甾醇类化合物，化学结构中含有多个糖苷键。

黄芪甲苷的糖基部分可以通过酶解反应裂解得到黄芪甲硷（astragaloside I）和黄芪甲醇（astragaloside II），因此研究黄芪甲苷的含量也间接反映了黄芪甲硷和黄芪甲醇的含量。

2. 提取和纯化方法黄芪甲苷的提取和纯化方法主要有溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取、正相和反相SPE（固相萃取法）等。

溶剂提取是最常用的方法，可以使用水、乙醇、乙醚等溶剂进行提取。

超声波和微波辅助提取可以提高黄芪甲苷的提取效率。

SPE法则是通过固相吸附剂对样品进行富集和洗脱，进而得到纯化的黄芪甲苷。

3. 分析方法黄芪甲苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、毛细管电泳法、液质联用法（LC-MS/MS）、红外光谱法等。

HPLC法是最常用的方法，可以使用紫外检测器、荧光检测器等进行检测。

GC法则适用于含量较低的黄芪甲苷的测定。

液质联用法结合了LC和MS的优势，可以提高黄芪甲苷的分析敏感性和准确性。

4. 含量测定影响因素黄芪甲苷的含量测定受到多种因素的影响，包括黄芪的生长环境、不同采收时间、存储条件等。

黄芪生长环境中土壤的pH值、养分含量和水分等对黄芪甲苷的生物合成和积累有一定影响。

采收时间对黄芪甲苷的含量也有重要影响，一般来说，黄芪的地上部分含量高于根部。

黄芪的存储条件也会导致黄芪甲苷的降低，因此在储存过程中需要注意保鲜处理。

5. 品种和产地差异黄芪的品种和产地对黄芪甲苷的含量也有一定影响。

HPLC-ELSD测定芪黄颗粒中的黄芪甲苷崔春利;王梅;郭东艳;唐志书【摘要】@@%目的:建立HPLC-ELSD测定芪黄颗粒中黄芪甲苷的含量.方法:色谱柱为依利特Hypersil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(32∶68),流速1.0 mL·min-1,漂移管温度为36 ℃,气体流速为2.5 L·min-1,增益125;进样量为10 μL.结果:黄芪甲苷进样量在1.036～5.18 μg范围内常用对数值与峰面积积分值的常用对数值呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为98.58 %(n=6),RSD为0.82 %.结论:本方法快速简便,准确灵敏,可作为芪黄颗粒的质量控制方法.【期刊名称】《陕西中医》【年(卷),期】2013(034)002【总页数】2页(P236-237)【关键词】复方/标准;黄芪/化学;黄芪甲苷/分析;色谱法,高压液相;芪黄颗粒【作者】崔春利;王梅;郭东艳;唐志书【作者单位】陕西中医学院,咸阳,712046;陕西中医学院附属医院,咸阳 712000;陕西中医学院,咸阳,712046;陕西中医学院,咸阳,712046【正文语种】中文【中图分类】R289芪黄颗粒为陕西中医学院附属医院运用现代中西医结合理论在总结历代名家治疗的基础上，结合多年临床实践经验而研制的中药复方颗粒，处方由黄芪、川芎、桑寄生、牛膝、牡丹皮、黄连、天麻等16味中药组成，具有益气养阴、化瘀清热之功效，用于气阴两虚、瘀热内阻所致的疲乏气短、心悸失眠、胸胁闷痛、腰膝酸软、手足麻木、二便不调等症，高血压、冠心病、心功能不全、心律失常、高血脂等症。

方中黄芪补脾肺之气，以益生血之源，为方中君药。

现代研究表明，黄芪主含黄酮，皂苷及多糖类成分，具有提高免疫、促进胃肠运动、利尿与抗肾损伤、促进造血、延缓衰老、抗肝损伤、降血糖、降血脂、降血压等作用［1］。

呈 良好 的 线性 关 系 ， 均 回 收 率 为 １０ ， Ｓ 值 为 ２ ７ 。结 论 该 法 可 用 于灵 芪加 颗 粒 中黄 芪 甲苷 的 含 量 测 定 。 平 ０％ Ｒ Ｄ ．２
关 键 词 ： 芪 加 颗 粒 ； 芪 甲苷 ； 灵 黄 高效 液 相 色谱 法
中 图分 类 号 ： ９ ７２ 文 献 标 识 码 ： 文 章 编 号 ：６ ２ ７ ８ ２ １ ）７ ３ ３ ２ Ｒ ２． Ａ １ ７ —７３ （０ ０ ０ —０ 设 的 问题 。 ２ ４严厉查 处 违 法违 规行 为 ， 立退 出 淘 汰 机 制 ． 建
目前 ， 医疗器 械监 督 管理 条例 》 一些 违 法 违 规 行 《 对
２ ３将 质量 管理人 在 职在 岗情 况纳 入 诚 信 考评 现 ．
行 医疗 器械管 理法 规规章 对企 业质 量 管理人 员 不在 职在 岗问题 没有 做 出 相 应 的强 制 要 求 和 处 罚 。为
为作 出了 明确 的 处罚 ， 对 经 营 行 为 多项 不 符 合 要 但
求 的企业 ， 没有 建 立 强 制 注 销 的退 出机 制 。建 议监
此 ， 层监 管部 门可 结合 日常监督 检 查 ， 基 将质 量管 理 人员 在 职在 岗情 况 纳 人诚 信 考 评 内容 ， 续 两 次 以 连 上检查 时质量管 理人 员不 在 岗的直接 将 考评 等级 降 低 一个 级别 。在 企业 申请 开 办 时 ， 求 企 业 必须 与 要
ｐ ａｅＲ Ｓ Ｌ Ｓ Ｔｈ ｎａ ａ ｇ ｆａｔ ｇ ｌｓ ｅｗａ ． ４ １ ． ４ ｇ ｔｅａｅａｅｒｃｖｒ ｆｔｉ ｍｅ ｏ ａ ｏ ％ ，ｈ ｈｓ． Ｅ Ｕ Ｔ ｅｌ ｅｒ ｎ ｅｏ ｓｒ ａ ｉ ｓ２ ４ ～ ４ ６ ／ 。ｈ ｖｒｇ ｅｏ ｅｙｏ ｈｓ ｔ ｄ ｗ ｓ１ｏ ｔｅ ｉ ｒ ａ ｏｄ ￣ ｈ

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是一种重要的中药材，被广泛用于中医药领域。

其中一种主要的活性成分是黄芪甲苷，它具有抗炎、抗疲劳、抗氧化等多种生物活性。

准确测定黄芪中黄芪甲苷的含量对于评价其药效和质量具有重要意义。

本文将综述近年来关于黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的进展。

传统的黄芪甲苷含量测定方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）和紫外-可见分光光度法（UV-Vis）。

这些方法在黄芪甲苷的定性和定量上具有很好的精确性和准确性。

这些方法在操作步骤繁琐、时间耗时长、设备成本高等方面存在一定的不足。

近年来，一些新的测定方法被开发出来，以提高黄芪中黄芪甲苷含量的检测速度和准确性。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）可以通过蒸馏浓缩技术，直接从黄芪中提取黄芪甲苷，并通过质谱进行定性和定量分析。

这种方法具有操作简便、准确度高的优点，但对于样品准备的要求较高。

近年来还有一些基于免疫学原理的测定方法被提出。

酶联免疫吸附测定法（ELISA）可以通过特异性抗体与黄芪甲苷结合，形成抗原-抗体复合物，再通过颜色反应测定黄芪甲苷的含量。

这种方法具有灵敏度高、操作简便的特点，但需要特异性抗体的制备，且可能存在交叉反应的问题。

近年来还有一些基于分子生物学技术的测定方法得到了发展。

实时荧光定量PCR（qPCR）可以通过黄芪甲苷特异性引物和探针进行扩增和检测，并通过标准曲线法计算黄芪甲苷的浓度。

这种方法具有高灵敏度、高特异性和高重复性的优势，但需要标准品的制备和PCR仪器的支持。

近年来关于黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究主要集中在改进传统方法、开发新方法以及应用新技术。

这些研究不仅丰富了黄芪甲苷含量测定方法的选择，而且提高了检测的速度和准确性。

未来的研究还可以进一步探索其他的测定方法，并开展黄芪甲苷与其他成分之间的相互作用研究，以提高黄芪的药效和质量评价。

一、实验目的1. 掌握黄芪中有效成分的提取方法。

2. 学习并掌握高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪中黄芪甲苷含量的原理和方法。

3. 通过实验，了解黄芪的质量控制方法。

二、实验原理黄芪为豆科植物Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气固表、利水消肿、托毒生肌的功效。

黄芪甲苷（Astragaloside IV）是黄芪中的主要有效成分，具有显著的抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。

本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量。

三、实验材料与仪器1. 试剂：黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所提供），甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水。

2. 仪器：高效液相色谱仪、超声波清洗器、电子天平、旋转蒸发仪、离心机、恒温水浴锅等。

四、实验方法1. 样品前处理（1）样品制备：准确称取黄芪粉末0.1g，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）5ml，超声提取30min，取出，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

（2）对照品溶液制备：准确称取黄芪甲苷对照品10mg，置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液（80%）溶解并定容至刻度，摇匀，过滤，作为对照品溶液。

2. 色谱条件（1）色谱柱：C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；（2）流动相：甲醇-水（80：20）；（3）流速：1.0ml/min；（4）检测波长：210nm；（5）柱温：30℃。

3. 实验步骤（1）将高效液相色谱仪开启，预热至色谱柱平衡；（2）将供试品溶液和对照品溶液分别进样，记录色谱图；（3）根据峰面积计算供试品中黄芪甲苷的含量。

五、结果与分析1. 色谱图供试品溶液和对照品溶液的色谱图如图1所示。

从图中可以看出，供试品溶液中黄芪甲苷峰与对照品峰保留时间一致，且峰形良好。

2. 结果计算根据色谱图，计算供试品中黄芪甲苷的含量为0.082mg/g。

3. 讨论本实验采用高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，结果表明，本方法操作简便、准确可靠，适用于黄芪的质量控制。

HPLC法测定消栓颗粒剂中黄芪甲苷的含量作者：王法宇吴迪赵凤明袁家欣来源：《中国民族民间医药·上半月》2021年第01期【摘要】目的：建立在消栓颗粒剂中有效成份黄芪甲苷的HPLC-ELSD含量测定方法。

方法：用Nanologica SVEA C18色谱柱（250mm×4.6mm，5m）采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷，蒸发光散射检测器（SEDEX-55型），柱温箱为25℃，流动相为乙腈∶[KG-*3/5]水（35∶[KG-*3/5]65），流速为1.0mL/min。

结果：黄芪甲苷在0.2742～1.1492g内有良好的线性关系R=0.9994（n=6），平均回收率为99.16%，RSD为1.21%。

结论：本方法操作简单快捷，结果准确可靠，重复性好，可用于消栓颗粒剂的质量控制。

【关键词】黄芪甲苷;高效液相色谱法;蒸发光散射检测器;含量测定【中图分类号】R284 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2021）1-0031-03Determination of Astragaloside in Xiaoshuan Granules by HPLCWANG Fayu1 WU Di2 ZHAO Fengming3 YUANJiaxin31.Beijing Pharmaceutical Group staff University， Beijing 100079，China;2.Baicheng food and Drug Inspection Institute， Baicheng 137000， China;3.Jilin Aodong Deer Industry Co.， Ltd. Changchun 130021， ChinaAbstract：Objective To establish an HPLC-ELSD method for determining the effective component of astragaloside A in Xiaoshuan Granules. MethodNanologica SVEA C18 column（4.6mm×250mm， 5m） HPLC-ELSD determination of astragaloside， SEDEX-55 type evaporative light scattering detector， column temperature box is 25℃， mobile phase is acetonitrile： water （35∶[KG-*3/5]65 ）， Flow rate∶[KG-*3/5]1.0mL/ min. ResultsAstragaloside A is in the range of 0.2742～1.1492g， the linear relationship between the injection volume and the peak area integral value is good， the average recovery rate of R2 =0.9994 （n=6） is 99.16%， and the RSD is 1.21%.ConclusionThe method is simple， accurate， reliable and reproducible for the quality control of Xiaoshuan granule.Keywords：Astragaloside A;HPLC;ELSD;Assay消栓顆粒剂出自清朝名医王清任的《医林改错》卷下瘫痿论方[1]。

研究报告科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald36中药黄芪含有黄芪甲苷、黄芪多糖等多种成份，其中黄芪甲苷为主要活性成分，具有降压、保护心肌、减轻心肌缺血和增强免疫力等作用［1-2］。

该研究建立某黄芪制剂（六类新药，研发中。

主要含黄芪、砂仁等）中黄芪甲苷的含量测定方法，为该制剂的质量控制提供方案。

1 仪器、试药与样品1.1 仪器A g i l e n t 1100高效液相色谱议；A l l t e c h 2000蒸发光散射检测器； AB250D十万分之一电子天平。

1.2 试药黄芪甲苷标准品（中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯和分析纯；其余所用试剂均为分析纯；黄芪等药材购自广州致信药业有限公司。

1.3 样品的制备按制剂处方称取黄芪30 g 和其他药材。

将除黄芪外的其他药材置圆底烧瓶中，加12倍量水，接挥发油提取器，提取1 h，所得挥发油弃去，水提液过滤，保留待用；药渣加入黄芪，加8倍量水，加热回流提取1 h，所得水提液过滤，保留待用；再加6倍量水，加热回流提取0.5 h，水提液过滤，与前两次水提液合并，浓缩至每毫升药液中含药材1 g，搅拌加入95%的乙醇至含醇量为60%，放置过夜，抽滤取滤液，即样品液。

2 方法与结果2.1 溶液的制备2.1.1 对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的黄芪甲苷对照品15 m g 置100 m L量瓶中，加甲醇适量使溶解，并加甲醇稀释至刻度，摇匀。

精密量取上述溶液2 m L，置10 m L量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1 m L中含黄芪甲苷30 μg）。

2.1.2 供试品溶液的制备精密称取样品液3 g，置蒸发皿中水浴上蒸干，加水20 m L 使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20 m L，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次10 m L，取正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次10 m L，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至5 m L量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

黄芪甲苷含量测定方法
本方法用于检测黄芪提取物中黄芪甲苷的含量检测，照高效液相色谱法（2010版《中国药典》附录ⅥD测定）。

色谱条件
色谱柱： C18柱（Shodex, 4.6×250mm,）
流动相：乙腈-水=40-60
柱温：30℃
流速：1.0ml/min
检测器：ELSD检测器（75℃，2.5L/min）
对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定后加入25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声10min后静置待用。

供试品溶液的制备取供试样品适量，精密称定，加入25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声10min后静置待用。

测定法分别精密吸取经微孔滤膜过滤的对照品溶液和供试品溶液各
20μl，注入液相色谱仪，测定后根据外标法计算即得。

HPLC法测定归芪补血口服液中黄芪甲苷的含量发布时间：2021-12-30T08:33:12.767Z 来源：《中国科技人才》2021年第25期作者：王頔[导读] 归芪补血口服液是广西医科大学制药厂生产的中成药产品，由黄芪、党参、当归、三七、丹参、茯苓多种中药材组方炮制而成的中药口服液，主要用于气血不足、气虚血瘀之少气懒言，神疲乏力，心悸失眠，头晕目眩等症。

哈药集团三精制药有限公司黑龙江省哈尔滨市 150069摘要：随着我国医药事业的发展，在我国很多的常见药物中，有很多时具有营养机制和抗氧化价值的，其药理活性和药用价值都是十分值得研究的，这些药物在我们的实际生活中跟人体健康密切相关。

黄芪中富含有很多的黄芪皂苷、黄酮等化合物，这些化合物自身有十分强的生物活性，归芪补血口服液能够用在治疗细胞免疫功能低下的慢性肝炎，也可以用于慢性活动性肝炎，在临床中治疗的效果十分的有效。

不仅如此，归芪补血口服液还可以用来治疗白细胞减少症及和血小板减少性紫癜。

关键词：HPLC法；测定；归芪补血口服液；黄芪甲苷；含量前言归芪补血口服液是广西医科大学制药厂生产的中成药产品，由黄芪、党参、当归、三七、丹参、茯苓多种中药材组方炮制而成的中药口服液，主要用于气血不足、气虚血瘀之少气懒言，神疲乏力，心悸失眠，头晕目眩等症。

黄芪为组方的主药，黄芪甲苷为主要活性成份之一，因此其含量的高低直接影响归芪补血口服液的质量。

黄芪甲苷的测定方法有薄层色谱法和HPLC法。

为有效控制归芪补血口服液的质量，本文采用HPLC法测定归芪补血口服液中黄芪甲苷的含量，方法简便、准确，为该制剂的质量控制提供可靠的检测方法。

1仪器与试药高效液相色谱系统包括515型泵和2487型紫外检测器，N2000色谱数据工作站(浙江大学智能信息工作研究所);BP211D电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。

C18固相萃取小柱，规格:3mL250mg，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(江苏汉邦科技有限公司);归芪补血口服液，规格:10mL支(广西医科大学制药厂，批号:20040301、20040302、20040303);黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所);乙腈(色谱纯，美国TEDIA公司);甲醇(色谱纯，德国MercK公司)。

HPLC法测定四年生黄芪中黄芪甲苷的含量摘要：目的：建立一种准确、简便测定黄芪甲苷含量的分析方法。

方法：色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8ml/min；检测波长为205nm；速度为0.4mm/min。

灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量.平均回收率为96.73%，RSD为2.14%。

结果：样品浓度在0.01～0.2mg\ml之间与峰面积成良好的线性关系。

结论：本方法的重复性好、精密度高、稳定性强。

关键词： HPLC；四年生黄芪；黄芪甲苷中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2010）08-0211-020 引言黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿托毒等功效。

黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病。

黄芪甲苷作为黄芪成分之一，其化学结构如图1所示，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆CAMP含量，促进小鼠再生肝DNA合成和增强免疫功能等多种作用.因此在研究黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究，本文用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，其样品浓度的范围在0.01～0.2 mg\ml之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定黄芪甲苷的含量。

1 仪器与试剂Waters高效液相色谱仪：包括510型泵，991光电二极管阵列型检测器，U6K型进样器；NEC Power Mate型计算机，黄芪甲苷标准品购自辽宁省药品检验所。

甲醇、正丁醇为分析纯，乙腈为色谱纯、水为去离子水。

试验用黄芪采自沈阳医学院草药园。

2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6 mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8 ml/min；检测波长为205nm；速度为0.4mm/min。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是一种常见的中药材，具有补气、养血、益精等功效，被广泛应用于临床治疗中。

其中，黄芪甲苷是一种具有重要药效的成分，具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等作用。

因此，精确测定黄芪中黄芪甲苷含量对开发黄芪的药用价值、提高黄芪的配伍效应具有重要意义。

本文对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行了综述。

一、传统黄芪甲苷的提取方法传统的黄芪甲苷提取方法主要包括醇提法、水提法、酸提法、超声波辅助提取法等。

其中，醇提法和水提法是最为常用的两种提取方法，但存在提取物中杂质含量高、回收率低等问题。

为了提高黄芪甲苷的提取率和纯度，研究者不断进行改进和探索，推出了许多新的黄芪甲苷提取方法。

下面我们分别介绍其中一些方法。

1.超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种利用超临界流体作为溶剂进行提取的方法。

该方法具有提取效率高、环保等优势，对黄芪甲苷的提取效果显著。

实验中发现，当萃取温度为50~60℃时，黄芪甲苷的提取率可达到1.72%。

2.离子液体-超声波辅助提取法3.相转移催化提取法相转移催化提取法是一种利用相转移催化剂提高提取效率，并结合其他辅助技术的方法。

该方法具有提取率高、纯度高等优点，对黄芪甲苷的提取率可达到2.86%。

黄芪甲苷含量的测定方法有许多种，如高效液相色谱法、气相色谱法、电化学法、生物法等。

下面我们主要介绍高效液相色谱法和生物法。

1.高效液相色谱法高效液相色谱法已经成为测定黄芪甲苷含量的主要方法。

该方法具有灵敏度高、分离度好、检测快速等优点。

使用TPY-D抗体偶联填充柱对黄芪甲苷进行测定，测定结果准确可靠。

2.生物法生物法即利用生物改良技术，将黄芪甲苷转化为其他物质，通过比较转化前后的反应物质的差异，进而计算出黄芪甲苷的含量。

该方法具有灵敏度高、检测快速等优点，但存在误差较大的缺点。

三、结论黄芪甲苷提取及含量测定是黄芪研究的重点和难点之一。

传统的提取和测定方法存在着许多局限性，但近年来不断涌现出新的提取和测定方法，具有更高的精准度和准确性。

实验室应用案例高效液相色谱仪测定黄芪中的黄芪甲苷含量2018年3月版权所有© sainaer Corporation保留所有权利1摘要本文建立了一种根据《中国药典》2015版要求，测定中药饮片黄芪中黄芪甲苷苷含量的高效液相色谱方法，按中国药典条件，适当调整柱温，苦杏仁苷保留时间RSD%在0.17%，峰面积RSD%为1.64%。

关键词：中药饮片黄芪黄芪甲苷 E800型蒸发光散射检测器高效液相色谱黄芪甲苷是一种从黄芪上提取出来的高纯度药物，有“超级黄芪多糖”之称。

黄芪甲苷能增强机体免疫力、提高机体的抗病能力。

黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。

黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。

其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。

黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。

由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。

图1 黄芪甲苷结构式2检测部分2.1仪器本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。

具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。

2.2 分析条件色谱柱：岛津WondaSil C18 Superb 5um流动相：乙腈：水=32:68（V/V）流速：1ml/min柱温：35℃气体流量：2.8L/min蒸发温度：75℃进样量：10μL等度洗脱2.3 标准品溶液的配制和样品处理标准品品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

样品溶液的制备取干燥的黄芪切片，粉碎后，取中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即制得黄芪样品溶液。