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高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定仙芪眩宁颗粒中黄芪甲苷含量庞兴寿;牟晓崟【摘要】Objective To establish a method to determine astragaloside in Xianqixuanning Granules. Methods HPLC - ELSD was used to directly determine astragaloside on Phenomenex Gemini C18 ( 250 mm ×4. 6mm,5 μm) column. Using methanol -water (80 ∶ 20) as mobile phase,the flow rate was 1.0 mL/min. The temperature of drift tuhe for ELSD was 45 ℃ and the flow rate of gas was 3.0 L/min. Results Good linear relation oflogA with log W was achieved when the sample size of astragaloside ranged at 25. 52 - 127. 6 μg, r = 0. 999 3. The average recovery of astragaloside was 96. 89％ , RSD was 1. 44％ ( n =6). Conclusion The method is simple, accurate and reproducihle. It can be used as thequality control method of Xianqixuanning Granules.%目的建立仙芪眩宁颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法.方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法,色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇一水(80:20),流速1.0mL/min,柱温30℃,进样量10μL;蒸发光散射检测器漂移管温度为45℃,栽气(空气)流速3.0 L/min.结果黄芪甲苷进样量在25.52～127.6μg 范围内的对数值与峰面积的对数值线性关系良好,r=0.999 3,平均回收率为96.89%,RSD为1.44%(n=6).结论该方法无干扰,准确、重现性良好,可作为产品的质量控制方法.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)017【总页数】2页(P32-33)【关键词】仙芪眩宁颗粒;高效液相色谱-蒸发光散射检测器法;黄芪甲苷;含量测定【作者】庞兴寿;牟晓崟【作者单位】广西壮族自治区玉林食品药品检验所,广西,玉林,537000;广西壮族自治区玉林食品药品检验所,广西,玉林,537000【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0仙芪眩宁颗粒是由仙鹤草、黄芪、白术、泽泻、生姜5味药材制成的中药复方制剂，具有健脾燥湿、升清降浊、利水除痰的功效，用于痰湿中阻型美尼尔氏病的辅助治疗。
HPLC-ELSD测定舒筋通络颗粒中黄芪甲苷含量陈光辉;赵志强;张久胜;陈进钱;彭新华【摘要】目的:建立舒筋通络颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD),色谱柱为DIONEX C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(38∶ 62),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,载气流速为2.5 L·min-1,漂移管温度为105℃.结果:黄芪甲苷的线性范围为0.968 8～9.688 μg,平均回收率为98.9％,RSD=1.2％.结论:该方法重现性好、灵敏、准确,可作为舒络通络颗粒的质量控制方法.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2013(015)012【总页数】3页(P1086-1088)【关键词】HPLC-ELSD;舒筋通络颗粒;黄芪甲苷;含量测定【作者】陈光辉;赵志强;张久胜;陈进钱;彭新华【作者单位】神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430【正文语种】中文舒筋通络颗粒是由牛膝、骨碎补、川芎、天麻、黄芪、葛根、威灵仙等9味中药组成，具有补肝益肾、活血舒筋功效[1]，是神威药业集团研制的国家二类中药保护品种。
现代药理学研究表明，舒筋通络颗粒组方中的黄芪，主要含皂苷类、黄酮类、多糖类及氨基酸类成分等，黄芪总皂苷(AST)具有免疫调节、护肝作用[2]，其中黄芪甲苷(AST-Ⅳ)为活性指标成分。
现行的舒筋通络颗粒标准[3]要求测定骨碎补的含量，未对其他成分进行定量测定。
为了更好地控制本品质量，保证临床疗效，笔者研究建立并验证了HPLC-ELSD检测黄芪甲苷含量的方法。
1.1 仪器DIONEX Ultimate 3000高效液相色谱系统(Ultimate 3000四元泵，Ultimate 3000自动进样器，变色龙色谱工作站)，Alltech 2000 ES蒸发光散射检测器。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是我国传统中药材之一，被广泛应用于治疗贫血、疲乏乏力、食欲不振等症状。
其中，黄芪甲苷是黄芪的主要有效成分之一，具有抗菌、抗氧化、免疫调节等多种药理作用。
因此，明确黄芪中黄芪甲苷的含量对于黄芪的质量控制和临床应用具有重要意义。
本文将综述黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展。
一、黄芪甲苷的生物学活性黄芪甲苷是黄芪中的一种单体化合物，其化学结构为3,6-二葡萄糖基芪苷-7-葡萄糖基芪苷，分子量为782。
研究表明，黄芪甲苷具有多种生物学活性，如抗菌、抗氧化、免疫调节、保护神经细胞等作用。
其中，黄芪甲苷的抗菌作用主要表现在对多种细菌、真菌和病毒的抑制作用。
抗氧化作用表现在黄芪甲苷能够清除自由基，降低氧化损伤。
免疫调节作用表现在黄芪甲苷能够激活巨噬细胞和自然杀伤细胞，增强免疫功能。
保护神经细胞的作用表现在黄芪甲苷能够减轻中枢神经系统的氧化损伤和炎症反应，防止神经细胞的死亡。
二、黄芪甲苷的含量测定方法黄芪甲苷的含量测定是对黄芪质量的评价和控制的重要手段，常用的测定方法包括高效液相色谱法、超高效液相色谱法、荧光法、紫外分光光度法、质谱法等。
1. 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是目前最为常用的黄芪甲苷含量测定方法之一，该方法具有快速、灵敏、准确的优点。
其中，一般采用C18反相柱为分析柱，流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（25:75，体积比），检测波长为254nm。
该方法能够实现对黄芪甲苷的同时定量，其检测限低至0.82ug/mL。
3. 荧光法荧光法是一种基于黄芪甲苷的分子结构与物理性质的检测方法，该方法具有高灵敏度、高选择性、快速等特点。
该方法采用黄芪甲苷在荧光素（FL）存在下，通过化学反应生成荧光产物，再利用荧光光谱仪检测荧光强度进行测定。
该方法的灵敏度高，能够检测到0.128ug/mL的黄芪甲苷。
4. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种简单、快速、准确的检测方法，该方法基于黄芪甲苷在紫外光下吸收特定波长的原理进行测定。
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黄芪甲苷检测
黄芪甲苷即黄芪皂苷IV（astragaloside IV），是黄芪中的一种皂苷类代表性成分。
具有强心、增强免疫功能等多种药理作用。
黄芪甲苷也被用作评价黄芪药材质量优劣的标准。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱（HPLC）和液质联用（LC-MS）技术，可高效、
精准的检测黄芪甲苷的含量变化。
此外，迪信泰检测平台还提供其他多种中药成分检测服务，方法成熟，可高效处理大批量样本。
HPLC和LC-MS测定黄芪甲苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. 黄芪甲苷含量信息。
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高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定消渴丸中黄芪甲苷的含量李培【摘要】目的：建立消渴丸中黄芪甲苷的含量测定方法。
方法用高效液相色谱法，以蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷的含量。
色谱柱为 Thermo - C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流动相为乙腈-水（32：68），流速为：1.0 mL·min -1；ELSD 参数气体流速为1.60 mL·min -1，漂移管温度为80℃；进样量为20μL。
结果黄芪甲苷进样量在1.016~4.064μg 范围内呈现良好的线性关系，r =0.9998（n =5）；平均回收率为97.03%，RSD =1.8%（n =9）。
结论所建立的含量测定方法操作简便、快速、准确、重现性好，可作为消渴丸的质量控制。
%Objective To establish a method for the determination of astragaloside in Xiaoke Pills. Methods The HPLC - ELSD was conducted on a Thermo - C18 column(4. 6 mm × 250 mm,5 μm)with acet onitrile -water(32:68)as mobile phase,the flow rate was 1. 0 mL·min - 1 . The gas flow rate of ELSD parameter was 1. 60 mL·min - 1 . The drift tube temperature was 80 ℃,the injection volume was 20 μL. Results The linear range of astragaloside was 1. 016 ~ 4. 064μg,r = 0. 999 8(n = 5),the recovery rate was 97. 03% ,RSD = 1. 8%(n = 9). Conclusion The established HPLC - ELSD was simple,rapid,accurate,reproducible,and can be used for the quality control of Xiaoke Pills.【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】3页(P267-268,271)【关键词】高效液相色谱-蒸发光散射检测法;消渴丸;黄芪甲苷【作者】李培【作者单位】聊城市药品检验所，山东聊城 252000【正文语种】中文【中图分类】R927.2消渴丸是由葛根、黄芪、地黄、天花粉等八味药组成，滋肾养阴，益气生津。
含黄芪制剂中黄芪甲苷的含量测定作者：沈小玲来源：《科技创新导报》 2015年第2期沈小玲（广东省轻工业高级技工学校广东广州 510000）摘要：该文旨在建立某黄芪制剂中黄芪甲苷的高效液相色谱法测定含量。
所采用方法：采用蒸发光散射检测器（ELSD）以黄芪甲苷为对照品对黄芪中黄芪甲苷进行HPLC-分析，色谱柱为C18柱，甲醇－水（75∶25）为流动相，流速1.0 mL/min，柱温40 ℃；漂移管温度83.8 ℃，载气（空气）流速2.0 L/min。
结果：所建立的含量测定方法结果准确，便捷，专属性强，无干扰，可用于控制该制剂的质量。
关键词：黄芪甲苷 HPLC-ELSD 含量测定含黄芪制剂中图分类号：R284文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2015）01（b）-0036-02中药黄芪含有黄芪甲苷、黄芪多糖等多种成份，其中黄芪甲苷为主要活性成分，具有降压、保护心肌、减轻心肌缺血和增强免疫力等作用［1-2］。
该研究建立某黄芪制剂（六类新药，研发中。
主要含黄芪、砂仁等）中黄芪甲苷的含量测定方法，为该制剂的质量控制提供方案。
1 仪器、试药与样品1.1 仪器Agilent1100高效液相色谱议；Alltech2000蒸发光散射检测器； AB250D十万分之一电子天平。
1.2 试药黄芪甲苷标准品（中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯和分析纯；其余所用试剂均为分析纯；黄芪等药材购自广州致信药业有限公司。
1.3 样品的制备按制剂处方称取黄芪30 g和其他药材。
将除黄芪外的其他药材置圆底烧瓶中，加12倍量水，接挥发油提取器，提取1 h，所得挥发油弃去，水提液过滤，保留待用；药渣加入黄芪，加8倍量水，加热回流提取1 h，所得水提液过滤，保留待用；再加6倍量水，加热回流提取0.5 h，水提液过滤，与前两次水提液合并，浓缩至每毫升药液中含药材1 g，搅拌加入95%的乙醇至含醇量为60%，放置过夜，抽滤取滤液，即样品液。
高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定黄七胶囊中黄芪甲苷的含量发表时间：2018-07-27T12:30:32.437Z 来源：《中国蒙医药》2018年第5期作者：胡雪来1 刘水平2[导读] 黄七胶囊是一种中成药，现代医学证实其用于缺血性疾病如脑卒中的治疗。
1.湖南中医药高等专科学校附属第一医院湖南株洲 412000；2.株洲市食品药品检验所湖南株洲 412000【摘要】目的：采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定黄七胶囊中黄芪甲苷的含量，评价胶囊质量。
方法：取10个批次的黄七胶囊，高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定，乙醇-水（38：62）为流动相，漂移管温度105℃，流速2.7L/min，关闭撞击器，理论塔板数按照黄芪甲苷计算不低于4000，进样量10μl。
配置供试品溶液、对照品溶液，建立回归方程、有效性考察。
标准曲线法测定各个批次黄七胶囊剂中黄芪甲苷的含量。
结果：线性回归：Y=1.8835X＋1.0633，r=0.9995，线性范围0.0966～0.4852mg/ml，精密度试验RSD%（n=10）＜1.5%，重复性检测RSD%（n=10）=0.715%＜2%，稳定性考察RAD%（n=8）=0.052%，平均加样回收率为100.02%，RSD%（n=8）=0.07%。
10个批次黄七胶囊的黄芪甲苷的含量在0.622～0.642mg/粒，均达到胶囊质量评价标准限定范围，均值（0.631±0.005）mg/粒，变异系数为0.8%，符合国家标准，黄七胶囊的黄芪甲苷的含量稳定。
结论：黄七胶囊的质量较好，其中主要有效成分黄芪甲苷的含量稳定。
【关键词】黄七胶囊；黄芪甲苷；高效液相色谱；蒸发光散射法黄七胶囊是一种中成药，现代医学证实其用于缺血性疾病如脑卒中的治疗，可有效的减轻缺血缺氧损伤[1]。
黄七胶囊的主要成分为黄芪、三七，黄芪甲苷是其主要有效成分，药物的剂量直接影响胶囊的功效的发挥[2]。
本文采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定黄七胶囊中黄芪甲苷的含量，评价胶囊质量。
29Journal of China Prescription Drug Vol.19 No.5·实验研究·中药配方颗粒与传统煎煮工艺提取成分一致，便于携带，服用方便，在临床上逐渐推广使用[1-3]。
黄芪配方颗粒是由黄芪饮片为原料，经过提取、浓缩、制粒而成，具有补气升阳，利水消肿，托毒排脓的功效[4-9]。
黄芪甲苷是黄芪配方颗粒的有效成分[10-12]。
目前为止，黄芪配方颗粒没有国家统一的质量标准[13-15]，生产企业均采用各自的企业标准。
本研究采用高效液相色谱法测定5个厂家黄芪配方颗粒中黄芪甲苷含量，以此作为黄芪配方颗粒质量评价的依据。
1 仪器与试药1.1仪器岛津LC-20AT 高效液相色谱仪，ELSD-LT Ⅱ检测器，紫外检测器（SPD-20A ），Agilent C 18（250×4.6 mm ，5 μm ） 色谱柱； XSE204电子分析天平（梅特勒公司）。
1.2 试药黄芪甲苷对照品（批号：110781-201717，含量96.9%，购自中国药品生物制品检定所），黄芪配方颗粒（来自风险监测抽样），甲醇、乙腈均为色谱级，正丁醇、氨水为分析纯，水为蒸馏水。
2方法与结果2.1 色谱条件黄芪甲苷： Agilent C 18（250×4.6 mm ，5 μm ） 色谱柱；乙腈-水（32∶68）流动相；流速1.0 ml/min ；柱温40℃；ELSD 检测器流动气体压力为350 kPa 。
2.2 溶液制备 2.2.1黄芪甲苷对照品溶液的制备：精密称取黄芪甲苷对照品14.59 mg 置于25 ml 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1 ml 含黄芪甲苷0.565 5 mg 的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品内容物，置研钵中研细，精密称取1.00 g ，置具塞锥形瓶中，用移液管加入50 ml 甲醇，密塞，称重，超声处理30 min ，放冷，再称定重量，补重，摇匀，过滤。
HPLC 法鉴别黄芪与红芪中黄芪甲苷含量的研究刘翠华;昌畅【摘要】目的：探讨采用高效液相色谱法鉴别黄芪与红芪中黄芪甲苷含量的价值。
方法：根据高效液相色谱法，色谱柱（150 mm ×4.4mm，5μm）；流动相：乙腈－水（32∶68）；流速1 ml ／min；柱温：25℃。
分别对黄芪与红芪中的黄芪甲苷进行含量测定。
结果：在2.024～10.120μg 范围内，黄芪甲苷的线性关系良好。
结论：该方法具有准确、稳定、可重复的特点。
黄芪中明显含有黄芪甲苷，而红芪中黄芪甲苷的含量十分微少，可提供此法鉴别黄芪与红芪。
【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2016(025)009【总页数】2页(P24-25)【关键词】黄芪;红芪;黄芪甲苷;高效液相色谱法【作者】刘翠华;昌畅【作者单位】南方医科大学南方医院药材科，广东广州 510515;南方医科大学南方医院药材科，广东广州 510515【正文语种】中文【中图分类】R284.1黄芪是临床常用的补益药，其味甘，性温，具有利尿排毒、敛疮生肌、补气固表的功效。
研究发现，黄芪所含的皂苷具有提高免疫的功能，而皂苷中的主要有效成分为黄芪甲苷，并具有降压、消炎镇痛的活性。
红芪具有补气升阳、固表止汗、敛疮生肌的功效。
与黄芪相比，红芪的抗菌、降压作用较强。
研究采用效液相色谱法对黄芪与红芪中黄芪甲苷进行鉴别，进而为黄芪、红芪中药制剂的质量控制提供实验依据。
1.1 仪器Agilent 1260型高效液相色谱仪(蒸发光散射检测器，美国安捷伦科技有限公司)；ABS135-S型分析天平(美国梅特勒-托利多公司)。
1.2 材料黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品鉴定所)；红芪(购自郑州药材市场)；黄芪(购自甘肃兰州药材市场)；高纯氮气(纯度为99.999%，济南尧天仪器有限公司)。
甲醇、乙醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。
2.1 色谱条件日本岛津C18色谱柱(150mm × 4.4mm，5μm)；流动相：乙腈-水(32∶68)；流速1ml/min；柱温：25℃。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是一种常见的中药材，具有补气、养血、益精等功效，被广泛应用于临床治疗中。
其中，黄芪甲苷是一种具有重要药效的成分，具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等作用。
因此，精确测定黄芪中黄芪甲苷含量对开发黄芪的药用价值、提高黄芪的配伍效应具有重要意义。
本文对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行了综述。
一、传统黄芪甲苷的提取方法传统的黄芪甲苷提取方法主要包括醇提法、水提法、酸提法、超声波辅助提取法等。
其中，醇提法和水提法是最为常用的两种提取方法，但存在提取物中杂质含量高、回收率低等问题。
为了提高黄芪甲苷的提取率和纯度，研究者不断进行改进和探索，推出了许多新的黄芪甲苷提取方法。
下面我们分别介绍其中一些方法。
1.超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种利用超临界流体作为溶剂进行提取的方法。
该方法具有提取效率高、环保等优势，对黄芪甲苷的提取效果显著。
实验中发现，当萃取温度为50~60℃时，黄芪甲苷的提取率可达到1.72%。
2.离子液体-超声波辅助提取法3.相转移催化提取法相转移催化提取法是一种利用相转移催化剂提高提取效率，并结合其他辅助技术的方法。
该方法具有提取率高、纯度高等优点，对黄芪甲苷的提取率可达到2.86%。
黄芪甲苷含量的测定方法有许多种，如高效液相色谱法、气相色谱法、电化学法、生物法等。
下面我们主要介绍高效液相色谱法和生物法。
1.高效液相色谱法高效液相色谱法已经成为测定黄芪甲苷含量的主要方法。
该方法具有灵敏度高、分离度好、检测快速等优点。
使用TPY-D抗体偶联填充柱对黄芪甲苷进行测定，测定结果准确可靠。
2.生物法生物法即利用生物改良技术，将黄芪甲苷转化为其他物质，通过比较转化前后的反应物质的差异，进而计算出黄芪甲苷的含量。
该方法具有灵敏度高、检测快速等优点，但存在误差较大的缺点。
三、结论黄芪甲苷提取及含量测定是黄芪研究的重点和难点之一。
传统的提取和测定方法存在着许多局限性，但近年来不断涌现出新的提取和测定方法，具有更高的精准度和准确性。
HPLC法测定健腰通颗粒中黄芪甲苷的含量目的建立健腰通颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法。
方法以高效液相色谱法测定健腰通颗粒中黄芪甲苷的含量，采用Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；流动相为乙腈-水（30∶70）；流速：1.0 ml/min；柱温：40℃；蒸发光散射检测器参数中氮气流量：2.5 L/min；漂移管温度：105℃。
结果黄芪甲苷进样量在0.56～4.20 μg（r=0.9994）范围内线性关系良好。
加样回收率为95.83%（RSD为1.39%，n=5）。
结论本含量测定法重复性和精密度良好，结果可靠准确，可作为该制剂质量的检测方法。
[Abstract]Objective To establish the method for the determination of astragaloside Ⅳin Jianyaotong Granules.Methods HPLC was used the quality of astragaloside Ⅳin Jianyaotong Granules，analytical column was Diamonsil C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）.Mobile phase was Acetonitrile-Water（30∶70）.Flow rate was 1.0 ml/min，the parameter of ELSD detector：the flow rate of N2 was 2.5 L/min；the temperature of drift tube was 105℃.Results The linear range of astragaloside Ⅳwas from 0.56 to 4.20 μg（r=0.9994）.The average recovery was 95.83%（RSD=1.39%，n=5）.Conclusion This method is proved to be sensitive and reliable.It can be the quality detection method of Jianyaotong Granules.[Key words]Jianyaotong Granules；Astragaloside Ⅳ；HPLC；Content determination健腰通颗粒是由黄芪、鸡血藤、骨碎补、桑寄生、牛蒡子、补骨脂、三七、淫羊霍、水蛭、鹿茸等多种中药组成的复方制剂。
实验室应用案例高效液相色谱仪测定黄芪中的黄芪甲苷含量
2018年3月
版权所有© sainaer Corporation
保留所有权利
1摘要
本文建立了一种根据《中国药典》2015版要求，测定中药饮片黄芪中黄芪甲苷苷含量的高效液相色谱方法，按中国药典条件，适当调整柱温，苦杏仁苷保留时间RSD%在0.17%，峰面积RSD%为1.64%。
关键词：中药饮片黄芪黄芪甲苷 E800型蒸发光散射检测器高效液相色谱黄芪甲苷是一种从黄芪上提取出来的高纯度药物，有“超级黄芪多糖”之称。
黄芪甲苷能增强
机体免疫力、提高机体的抗病能力。
黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。
黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。
其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。
黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。
由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。
图1 黄芪甲苷结构式
2检测部分
2.1仪器
本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。
具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。
2.2 分析条件
色谱柱：岛津WondaSil C18 Superb 5um
流动相：乙腈：水=32:68（V/V）
流速：1ml/min
柱温：35℃
气体流量：2.8L/min
蒸发温度：75℃
进样量：10μL
等度洗脱
2.3 标准品溶液的配制和样品处理
标准品品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
样品溶液的制备取干燥的黄芪切片，粉碎后，取中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即制得黄芪样品溶液。
3结果
3.1 标样的色谱图
图2 0.5mg/ml标准品色谱图
3.2 线性关系
将配制浓度为0.5mg/ml的标准溶液，分别精密吸取对照品溶液2.5μL、5μL、10μL、15μL、20μL，供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，测定，以峰面积对数为横坐标，已进样量对数为纵坐标绘制工作曲线，所得曲线良好，R达到0.999以上。
标准品的浓度及峰
面积的结果见表1。
图3 黄芪甲苷的标准曲线表1 黄芪甲苷进样量及峰面积
3.3 精密度试验
50mg/ml的苦杏仁苷标准品连续测定6次，考察方法的精密度，保留时间和峰面积的RSD%结果
如表2所示：
序号保留峰面积
1 11.591 142152
2 11.542 145212
3 11.458 144879
4 11.523 148721
5 11.542 148524
6 11.554 144258
平均11.535 145624
RSD% 0.381 1.750
表2 黄芪甲苷重复性数据（n=6）
3.4 样品测试
使用2.3配制好的黄芪甲苷样品溶液得出图4图谱：
图4 黄芪样品图谱
表3 黄芪中黄芪甲苷测定结果
4结论
经方法有效性测试，本方法的工作曲线好R=0.999以上。
数据重现性好，保留时间RSD%=0.38%（n=6），小于国家要求0.5%以内，峰面积RSD%=1.75%（n=6），小于国家要求2.0%以内。
并且峰形完好，拖尾因子为1.02。
说明此方法适用于检测黄芪中黄芪甲苷的含量。
5客户现场照片。
