黄芪中黄芪甲苷的含量测定技术
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黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较黄芪甲苷为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明,黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来,对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高,适用范围广等优点,已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1.1 HPLC—uv法黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷,紫外末端吸收f max200.8 nm)。
紫外检测灵敏度低,干扰因素多,目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量,色谱柱为YWG—C18柱0.9 mm x250 mm,5 m),流动相为乙腈一水(1:2.3),检测波长为203nm,结果线性范围为0.86—5.27 I,L g/mL,加样回收率为97.52%,RSD为3.10%。
1.2 HPLC一示差折光检测法由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收,溶剂噪音对结果有较大的影响,且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精12I服液中黄芪甲苷的含量,色谱柱为Hypersi|ODS 2(4.6ram X 200ram,5 I,Lm),流动相为甲醇一水(67:33),结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g/ml,回收率为98.1%,RSD为2.02%。
该法简单方便,重现性好,灵敏度高,结果准确、可靠。
1.3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0.9ram xl5Omm,4la,m),流动相为乙腈一水一磷酸(1:2:O.1),检测波长为203nm,柱温为40%。
实验中将样品蒸干,采用水饱和的正丁醇溶解,用氨试液洗涤后蒸干,残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94.7%,RSD为2.6%。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是一种传统的中药材,广泛用于中医临床实践中,具有很高的药用价值。
黄芪中的主要活性成分是黄芪甲苷,它被认为是其药效的主要来源之一。
对于黄芪中黄芪甲苷含量的测定研究一直备受关注。
本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述。
目前,测定黄芪中黄芪甲苷含量的方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、质谱法以及核磁共振波谱法(NMR)等。
HPLC是最常用的方法之一。
高效液相色谱法在实验室中应用广泛,它具有灵敏度高、分离效果好、操作简便等优点。
在测定黄芪中黄芪甲苷含量时,常常采用反相色谱柱,以甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相,通过梯度洗脱的方式进行分离。
通过检测样品中黄芪甲苷的峰面积或峰高与标准品峰面积或峰高之比,可以得到黄芪样品中黄芪甲苷的含量。
除了HPLC方法,质谱法也被广泛应用于黄芪中黄芪甲苷含量的测定。
质谱法可以直接对样品中的化合物进行定性定量分析。
常用的质谱方法包括电喷雾质谱法(ESI-MS)和飞行时间质谱法(TOF-MS)等。
这些方法具有高灵敏度、分离效果好、分析速度快等优点,能够准确测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
近年来,核磁共振波谱法也被用于测定黄芪中黄芪甲苷含量。
核磁共振波谱法是一种非破坏性、无损和准确的分析方法。
通过核磁共振波谱法可以确定黄芪样品中黄芪甲苷的结构和含量。
与其他方法相比,核磁共振波谱法对样品处理要求较高,操作复杂,但具有高度准确性和重复性。
目前测定黄芪中黄芪甲苷含量的研究主要集中在高效液相色谱法、质谱法和核磁共振波谱法等方法。
这些方法在黄芪甲苷含量测定中具有较高的准确性和重复性。
由于样品的复杂性和分析条件的不同,不同的测定方法可能导致结果的差异。
在今后的研究中,需要进一步优化分析方法,并建立一种标准化的测定方法,以确保测定结果的准确性和可比性。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展摘要:黄芪是一种常见的中草药材,具有滋补养生、增强免疫力、抗疲劳等多种功效。
黄芪甲苷作为黄芪中的一种主要有效成分,对其含量的测定一直是研究的热点。
本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述,以期为黄芪的质量控制和药用价值的评价提供参考。
一、引言黄芪,又名黄芪、土黄芪,为豆科植物黄芪的根。
黄芪在我国的使用历史非常悠久,被誉为“草中之皇”,在中医药中具有益气健脾、祛痰利水、固表止血等功效。
现代研究表明,黄芪还具有增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生物活性,因此在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用价值。
1. HPLC法HPLC(High Performance Liquid Chromatography)是目前测定黄芪甲苷含量常用的方法之一,其操作简便、分离效果好、重现性高。
常用的色谱柱有C18、C8、C4等,流动相常用乙腈-水、甲醇-水等。
检测波长一般为203nm。
HPLC法在分离和测定黄芪甲苷方面取得了一定的成果,但也存在一定的局限性,例如在样品的制备和前处理过程中易引起黄芪甲苷的流失,影响测定结果的准确性。
2. LC-MS法LC-MS(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry)是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法,可对复杂样品进行快速、准确的分析。
LC-MS法结合了液相色谱和质谱分析的特点,可以直接测定样品中的黄芪甲苷含量,并能对其结构进行进一步的鉴定。
由于其分析灵敏度高、选择性好,因此在黄芪甲苷含量测定中得到了广泛的应用。
LC-MS法的仪器设备和操作技术要求较高,且成本较高,限制了其在一般实验室的应用。
3. UV法UV(Ultraviolet)法是通过样品对紫外光的吸收程度来测定样品中目标成分的含量。
黄芪甲苷在紫外光下有特定的吸收峰,可以通过检测其吸光度来测定其含量。
UV法操作简便、成本低,但其检测灵敏度不高,对样品的前处理要求较高,且容易受杂质的干扰。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展【摘要】本文主要探讨了黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的进展。
在介绍了研究背景、研究目的和研究意义。
在分析了黄芪的化学成分及药效、黄芪甲苷的生物学活性、黄芪甲苷含量测定方法以及黄芪甲苷含量测定研究的最新进展。
最后还探讨了黄芪甲苷的药理作用。
结论部分包括对黄芪甲苷含量测定研究的展望、研究结果的意义以及未来研究方向。
本文通过系统的分析和总结,旨在为黄芪甲苷含量测定领域的研究提供参考,推动该领域的发展和进步。
【关键词】黄芪, 黄芪甲苷, 含量测定, 研究进展, 生物活性, 药效, 药理作用, 展望, 结果意义, 研究方向1. 引言1.1 研究背景黄芪是一种常见的中草药,具有补气养血、益气固表的功效,被广泛用于治疗鼻炎、风热感冒、贫血等疾病。
黄芪甲苷作为黄芪中的一种活性成分,被认为具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种生物学活性。
黄芪甲苷含量的测定方法及研究进展仍需要进一步探讨。
随着现代科学技术的发展,越来越多的研究者开始关注黄芪甲苷的含量测定及其药理作用。
通过对黄芪甲苷的生物学活性和化学成分进行深入研究,可以更好地揭示黄芪的药用价值,并为其在临床应用中提供更加科学的依据。
对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究具有重要的意义。
本文旨在系统总结黄芪甲苷含量测定的研究进展,探讨其在药理学上的作用机制,为今后的研究提供参考。
通过对黄芪甲苷的研究背景、生物学活性和含量测定方法进行分析,有助于更深入地了解黄芪在中医药领域中的作用机制和应用前景。
1.2 研究目的本文旨在探讨黄芪中黄芪甲苷含量测定研究的最新进展,通过系统地总结文献资料,归纳整理相关研究结果,为进一步深入研究黄芪甲苷在中药材中的含量提供参考。
具体目的包括:1. 探究黄芪甲苷在黄芪中的分布情况及含量变化规律,揭示其在黄芪中的重要地位;2. 分析不同提取方法、分析技术对黄芪甲苷含量测定结果的影响,为准确测定提供方法学支持;3. 探讨黄芪甲苷的生物学活性及药理作用,为深入理解其药效机制提供依据;4. 展望黄芪甲苷含量测定研究的未来发展方向,提出改进和完善的建议,促进该领域的研究进展。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪(Radix Astragali)是中国传统草药中的一种,也被称为“北茵蒿”、“黄金钱草”、“黄金银草”等。
黄芪具有滋补强壮、提高免疫力、抗疲劳等多种药理活性,因此在中医药学中被广泛应用。
黄芪甲苷(Astragaloside IV,简称AS-IV)是黄芪中的一种主要活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生理活性。
测定黄芪中黄芪甲苷的含量对黄芪的质量评价和合理应用具有重要意义。
随着现代化仪器设备和分析技术的发展,对黄芪中黄芪甲苷含量测定方法的研究也日益深入。
下面将介绍几种常用的黄芪甲苷含量测定方法及其研究进展:1. 高效液相色谱法(HPLC):HPLC是一种常用的分离和检测技术,广泛应用于药物分析领域。
对于黄芪中黄芪甲苷的测定,可以使用反相HPLC或离子对交换柱进行分离。
可以通过选择适当的检测波长和优化方法条件,如流动相组成、流速等,确保测定结果的准确性和灵敏度。
近年来,还有研究对HPLC方法进行改进,如引入内标物法和紫外二维检测法,提高测定精确度和分析效率。
2. 气相色谱法(GC):GC是一种将挥发性物质分离和检测的技术,在黄芪中黄芪甲苷含量测定中也得到了应用。
由于黄芪甲苷在常规条件下不易挥发,因此需要将其进行酸水解或酶解,将产生的挥发性产物用GC进行分离和检测。
这种方法要求样品预处理和操作条件较为复杂,但可实现对黄芪甲苷的准确测定和定量分析。
3. 毛细管电泳法(CE):CE是一种基于电泳原理的微柱层析技术,具有分离速度快、灵敏度高、耗样量少等特点,因此在黄芪甲苷的含量测定中也得到了广泛应用。
研究表明,利用CE进行黄芪甲苷的分离和检测可获得满意的结果,并且还可以在测定中引入很多改进的因素,如在线固相萃取、二维电泳和运用特殊电泳介质等。
目前已有多种方法可用于测定黄芪中黄芪甲苷的含量。
各种方法都有其适应的优势和应用条件,具体选择哪种方法需根据实际需要和研究目的进行判断。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪,是一种传统中药材,具有滋补养生、益气固表的功效,被广泛用于治疗疲乏无力、气虚乏力、脾胃虚弱等疾病。
黄芪甲苷是黄芪中的一种重要活性成分,具有抗氧化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。
对黄芪中黄芪甲苷含量进行测定研究,对于黄芪的质量评价、产品开发及临床应用具有重要意义。
一、测定方法的研究进展针对黄芪中黄芪甲苷的测定,目前主要采用的方法包括高效液相色谱法、超高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法、酶联免疫吸附测定法等。
高效液相色谱法是目前应用较为广泛、准确性较高的一种测定方法,主要包括经典的反相色谱法、离子交换色谱法、手性色谱法等。
近年来,超高效液相色谱法的应用也逐渐得到了推广,其具有分离效率高、分析时间短、灵敏度高等优点,对于黄芪中黄芪甲苷的测定具有一定的优势。
二、影响因素的研究进展黄芪中黄芪甲苷含量受多种因素的影响,包括生长环境、采收季节、制备工艺等因素。
生长环境是影响黄芪中黄芪甲苷含量的重要因素之一。
有研究表明,黄芪生长的土壤类型、水分、温度等因素都会对黄芪中黄芪甲苷的含量产生一定的影响。
采收季节也是影响黄芪中黄芪甲苷含量的重要因素之一。
研究表明,黄芪的采收季节不同,其黄芪甲苷含量也会有所差异。
通过研究影响因素,可以更好地掌握黄芪中黄芪甲苷含量的变化规律,为其质量评价提供科学依据。
三、质量评价标准的研究进展针对黄芪中黄芪甲苷含量的质量评价,国家药典对其含量进行了规定,但是现有标准中存在一些不足之处,例如对于不同生长环境、不同采收季节的黄芪,其含量差异较大,当前的质量评价标准并不能完全覆盖。
建立更为科学、合理的质量评价标准,对于规范黄芪的生产加工、保障产品质量具有重要意义。
近年来,一些研究机构对此进行了系统研究,探讨了不同影响因素下的黄芪甲苷含量变化规律,并试图建立更为科学的质量评价标准,为黄芪的质量评价提供了更为系统的依据。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展取得了一定的成果,但仍存在一些挑战和机遇。
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黄芪甲苷检测
黄芪甲苷即黄芪皂苷IV(astragaloside IV),是黄芪中的一种皂苷类代表性成分。
具有强心、增强免疫功能等多种药理作用。
黄芪甲苷也被用作评价黄芪药材质量优劣的标准。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)技术,可高效、
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黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较为黄芪的主要活性成分之一。
能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。
现代药理研究表明,黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。
近年来,对的含量测定方法的研究很多。
本人就几种常用方法作一比较。
1高效液相色谱法(I-R_C法)HPLC法因其分离度好、灵敏性高,适用范围广等优点,已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。
1.1 HPLC—uv法属于四环三萜类皂苷,紫外末端吸收f max200.8 nm)。
紫外检测灵敏度低,干扰因素多,目前 HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。
苏瑞强Ⅲ等采用 HPLC法测定黄芪甲苷的含量,色谱柱为YWG—C18柱0.9 mm x250 mm,5 m),流动相为乙腈一水(1:2.3),检测波长为 203nm,结果线性范围为0.86—5.27 I,L g/mL,加样回收率为 97.52%,RSD为3.10%。
1.2 HPLC一示差折光检测法由于在紫外区仅有微弱的末端吸收,溶剂噪音对结果有较大的影响,且其前处理繁杂。
池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精 12I服液中黄芪甲苷的含量,色谱柱为Hypersi|ODS 2(4.6ram X 200ram,5 I,Lm),流动相为甲醇一水(67:33),结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g/ml,回收率为98.1%,RSD为2.02%。
该法简单方便,重现性好,灵敏度高,结果准确、可靠。
1.3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中的含量。
色谱柱为Nova—PakC18柱0.9ram xl5Omm,4la,m),流动相为乙腈一水一磷酸(1:2:O.1),检测波长为203nm,柱温为40%。
实验中将样品蒸干,采用水饱和的正丁醇溶解,用氨试液洗涤后蒸干,残渣用甲醇溶解。
结果加样回收率为94.7%,RSD为2.6%。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪(Astragalus membranaceus)是一种重要的中草药材,被广泛应用于中医药领域。
黄芪甲苷(astragaloside IV)是黄芪的主要活性成分之一。
黄芪甲苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗心肌缺血、抗心肌纤维化等多种药理活性,因此成为黄芪药效的重要指标之一。
1. 简介黄芪甲苷的理化性质:黄芪甲苷是一种三萜甾醇类化合物,化学结构中含有多个糖苷键。
黄芪甲苷的糖基部分可以通过酶解反应裂解得到黄芪甲硷(astragaloside I)和黄芪甲醇(astragaloside II),因此研究黄芪甲苷的含量也间接反映了黄芪甲硷和黄芪甲醇的含量。
2. 提取和纯化方法黄芪甲苷的提取和纯化方法主要有溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取、正相和反相SPE(固相萃取法)等。
溶剂提取是最常用的方法,可以使用水、乙醇、乙醚等溶剂进行提取。
超声波和微波辅助提取可以提高黄芪甲苷的提取效率。
SPE法则是通过固相吸附剂对样品进行富集和洗脱,进而得到纯化的黄芪甲苷。
3. 分析方法黄芪甲苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳法、液质联用法(LC-MS/MS)、红外光谱法等。
HPLC法是最常用的方法,可以使用紫外检测器、荧光检测器等进行检测。
GC法则适用于含量较低的黄芪甲苷的测定。
液质联用法结合了LC和MS的优势,可以提高黄芪甲苷的分析敏感性和准确性。
4. 含量测定影响因素黄芪甲苷的含量测定受到多种因素的影响,包括黄芪的生长环境、不同采收时间、存储条件等。
黄芪生长环境中土壤的pH值、养分含量和水分等对黄芪甲苷的生物合成和积累有一定影响。
采收时间对黄芪甲苷的含量也有重要影响,一般来说,黄芪的地上部分含量高于根部。
黄芪的存储条件也会导致黄芪甲苷的降低,因此在储存过程中需要注意保鲜处理。
5. 品种和产地差异黄芪的品种和产地对黄芪甲苷的含量也有一定影响。
黄芪中黄芪甲苷的含量测定技术
作者:刘伟
来源:《中国科技博览》2013年第33期
论文摘要:目的建立荧光分析法测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量方法。
方法利用大茴香酸在硫酸介质中与黄芪甲苷反应产生强烈荧光的特性进行测定黄芪中黄芪甲苷含量。
结果最大激发波长Ex为320 nm,最大发射波长Em为387nm。
测定样品的平均回收率为97.22%,RSD=2.31%(n=5)。
结论该方法灵敏度高,选择性好,结果无干扰,可广泛应用于黄芪药材的质量控制。
主题词:黄芪黄芪甲苷
中图分类号:R927.2
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicu(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪A.membranaceus(Fisch.)Bge的干燥根,具有补气固表、利尿脱毒,排脓,敛疮生肌等功效。
黄芪为常用中药,在中药制剂中以黄芪为君药的产品非常多,因此如何控制黄芪的质量至关重要。
黄芪甲苷是黄芪主要有效成分之一,也是黄芪皂苷中具有代表性的单体,在抗衰老、调节免疫功能、保护心肌和大脑缺血等多方面具有显著作用。
黄芪甲苷仅在200 nm处有末端吸收,对HPLC色谱法紫外检测器检测不利,噪音对结果影响较大,灵敏度也较低。
2005年版《中国药典》采用蒸发光散射检测器测定,具有分离度好,应用范围宽,流动相无干扰等优点,但操作繁琐,价格昂贵,不利于制药公司及基层医疗单位普及。
本文根据浓硫酸条件下黄芪甲苷与大茴香酸反应产物具有荧光的特性,采用荧光分光光度法测定不同产地、不同生长年限黄芪药材中黄芪甲苷的含量,以期为黄芪的质量控制提供客观的定量评价依据。
1 仪器与试药
Perkin Elmer instruments LS45 Luminesence Spectrometer(美国PerkinElmer 公司LS45型荧光分光光度计),HX-200A型高速中药粉碎机,万分之一电子天平 FA/JA 1004型。
72%的硫酸溶液,2%大茴香酸的无水乙醇溶液,石油醚、氯仿、正丁醇(三者均为天津市东丽区天大化学试剂厂产品),甲醇(天津市科密欧化学试剂开发中心产品),无水乙醇(天津市耀华化学试剂有限责任公司产品),以上试剂均为分析纯。
黄芪甲苷对照品购于中国药品生物制品检定所(批号110781-200613)。
黄芪药材采集或购于山西,内蒙两省,经山西中医学院中药鉴定教研室牛燕珍副教授鉴定为蒙古黄芪。
2 方法和结果
2.1 对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品5 mg置5 ml量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇匀,即得。
2.2 供试品溶液的制备黄芪药材用高速中药粉碎机粉碎(细粉过60目筛),精密称定
0.2g,水煎煮3次(40,30,20 min)共1.5 h,合并水煎液。
分别用石油醚,氯仿,正丁醇萃取4次,每次萃取剂用量为水煎液体积的50%,合并正丁醇相,总体积为30 ml,正丁醇相挥干,用甲醇溶解备用。
测定时,移取供试品溶液1 ml置10 ml容量瓶中,加入2%大茴香酸溶液0.6 ml,72%硫酸溶液0.8 ml,60℃水浴中反应20 min,迅速冷却后用无水乙醇定容至刻度,摇匀,在荧光分光光度计下测定荧光强度,黄芪甲苷反应产物最大激发波长Ex=320 nm,最大发射波长Em=387 nm,同时测定无黄芪甲苷对照品的试剂空白的荧光强度。
2.3 线性关系的考察精密量取对照品溶液(1.0 mg·ml-1)10,25,50,75,80 μl,照“2.2”项下制备方法操作,以对照品溶液浓度为横坐标,以荧光强度为纵坐标,得回归方程为
Y=91.465X+5.702 4,r=0.999 7,结果表明黄芪甲苷在1.0~8.0 μg·ml-1,其浓度与荧光强度呈良好的线性关系。
2.4 精密度实验精密量取同一供试品溶液,照“2.2”项下制备方法操作,连续6次测定其荧光强度,RSD为0.10%,表明仪器精密度良好。
2.5 稳定性实验取同一对照品溶液,照“2.2”项下制备方法操作,分别在0.0,0.5,1.0,1.5,2.0,
3.0 ,6.0 h检测,测得黄芪甲苷荧光强度分别为308.2,308.5,303.3,30
4.7,304.1,302.9,289.1,RSD为2.15%,结果表明对照品溶液在室温下放置6h内稳定性良好。
2.6 重复性实验取同一批药材,精密称取平行样品6份,每份0.2 g,照“2.2”项下制备方法操作,连续6次平行测定,RSD为1.41%,表明方法重复性良好。
2.7 回收率实验采取加样回收法,精密称取5份已知含量的同一批样品0.2 g,精密加入黄芪甲苷对照品溶液20μl(1.0 mg·ml-1),照“2.2”项下处理并测定。
结果见表1。
表1 回收率实验结果(略)
2.8 样品的含量测定取不同产地的黄芪药粉各0.2 g,精密称定,照“2.2”项下处理并测定。
测定结果见表2。
表2 不同产地不同生长年限黄芪药材中黄芪甲苷含量比较(略)
由表2可以看出,不同产地的黄芪药材生长年限对药材中黄芪甲苷含量的影响是不同的,生长年限对黄芪药材中黄芪甲苷含量的影响很有限,而产地对其影响则是主要的。
由此说明,道地药材对于中药的质量多么重要。
从总体看,山西应县和内蒙古固阳县下湿壕乡的黄芪药材中黄芪甲苷含量最高;2年生的黄芪药材中黄芪甲苷含量最高,5年生的最少。
所以黄芪药材以2年生为宜,不用栽培5年再采集药用。
3 讨论
笔者对黄芪甲苷的提取方法和溶剂进行了考察。
比较煎煮法,回流法,超声法提取3种方法,结果表明煎煮法提取含量最高,黄芪甲苷的荧光强度最强。
同一提取方法,不同提取溶剂对黄芪甲苷的荧光强度有影响,颜色变化显著。
采用超声法,分别用水,甲醇,正丁醇做提取溶剂,提取完毕后测定荧光强度,结果表明,水做提取溶剂时荧光强度最高,甲醇次之,正丁醇的荧光强度最低。
由此可见,同一物质在不同溶剂中其荧光光谱的形状和强度都有差别,荧光波长随着溶剂极性的增强而长移,荧光强度也增强。
黄芪中的主要化学成分包括皂苷类,黄酮类及多糖类等,由于黄芪所含成分复杂,对样品纯化要求很高,用正丁醇提取液经5%碳酸氢钠洗涤,可除去大量含酚羟基的成分如黄酮和其他酚性干扰物质。
有研究表明,采用KOH碱化,正丁醇提取,再用Na2HPO4溶液提取去杂质,也可使测定结果符合分析要求。
《中国药典》2005版中黄芪药材的制备方法较繁琐且加入了氨试液,使黄芪甲苷的总量明显增加。
分析原因,用氨试液处理样品的主要作用是将黄芪醇类皂苷酯氨解为黄芪甲苷,从而明显增加药材中黄芪甲苷含量。
此外,加同量的氨试液,不同的静置时间,黄芪甲苷的转化量也有差别。
有研究表明,用氨试液处理,当pH≥11,静置时间为30 min时,药材中黄芪甲苷的含量最高。
由此可见,碱液类别不同,所起的作用也有差别,有待进一步研究。
考虑到上述原因,本实验中未加入氨试液洗涤,测定的是黄芪药材中原有的黄芪甲苷含量,不包括任何转化的黄芪甲苷含量。