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3邯郸地区新生儿听力与药物性耳聋易感基因突变联合筛查研究_陈丁莉

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通信作者：要跟东 电子信箱：yaogd2000@
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临床儿科杂志 第 31 卷第 2 期 2013 年 2 月 J Clin Pediatr Vol.31 No.2 Feb.2013
1 对象与方法
1.1 研究对象 以2010年11月至2011年10月出生于邯郸市中心医院
的全部 1 007 名活产新生儿作为研究对象，剔除其中因 病死亡病例，最后共 1 000 例新生儿纳入研究，其中男 532例、女468例。研究对象中存在各种高危因素 (高胆 红素血症、胎粪吸入、败血症、乙肝病毒感染、巨细胞 病毒感染、畸形等) 的新生儿23例，男11例、女12例，出 生体质量1.45~4.03 kg，出生胎龄27~40周；研究对象中 无高危因素新生儿977例，男521例、女456例，出生体质 量1.88~5.97 kg，出生胎龄28~42周。每名新生儿均在出 生当日，由产科医师在胎盘未娩出前从脐静脉采集脐血 2 ml置于EDTA抗凝真空采血管中，当天分离血细胞， 于－80℃保存，用于耳聋基因筛查。由新生儿父母填写 知情同意书和遗传信息登记表。 1.2 方法 1. 2 .1 听力 筛 查 新生 儿听力 筛 查 使 用的床旁仪器 为瞬态诱发耳声发射 (transient evoked otoacoustic emission，TEOAE)。按照2005年卫生部制定的《新生 儿疾病筛查技术规范》要求，UNHS在产科病房进行， 在新生儿安静自然睡眠状态下，环境噪音<30 dB，采用 Accuscreen型耳声发射仪 (MADSEN公司，丹麦)，在出 生第3天对新生儿进行测试，如单耳或双耳未能通过， 则在出生后 42 d复查TEOAE。如果1名新生儿经过2次 筛查均未通过，则须作进一步的听力学检测鉴定是否 为永久性听力损失。 1.2.2 基因组DNA提取 所有样本统一用AXYGEN生 物技术有限公司的AxyPrep血基因组DNA试剂盒提取基 因组DNA，提取过程严格按照试剂盒操作说明书进行。 DNA抽提后其浓度和纯度用Thermo NANODROP 1 000 测定。待所有提取过程完成之后，在384孔板上将所有样 本基因组DNA稀释至终浓度10 ng/μl，－20 ℃保存。 1.2.3 基因测序 将线粒体12SrRNA 基因的A1555G 和 C149 4T 两位 点结合 起 来 使 用在线 软件P r i m e r3 (/cgi-bin /primer/ p r i m e r 3 . c g i / ) 设 计 扩 增 引 物。正 向引 物序 列： 5'-CAACCTCACCACCTCTTGCT-3'，反向引物序列： 5'-GTAAGGTGGAGTGGGTTTGG-3'。片段长度497 bp。 引物由上海英骏生物技术有限公司 (中国) 合成。PCR 反应条件：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，60℃退 火30 s，72℃延伸35 s，35个循环；72℃延长5 min。以
Handan 056001, Hebei, China) Abstract: Objectives To evaluate the feasibility and significance of universal neonatal hearing screening combined
with mitochondria deafness genes screening using newborn cord blood. Methods One thousand newborns were enrolled
Results In hearing screening, 141 (14.1%) of the 1000 newborns were identified to be at risk, of whom 11 (1.1%) were
confirmed to have hearing loss. In gene screening, A1555G mutation was found in 4 (0.4%) of the 1000 newborns and
临床儿科杂志 第 31 卷第 2 期 2013 年 2 月 J Clin Pediatr Vol.31 No.2 Feb.2013
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doi:10.3969 j.issn.1000-3606.2013.02.011
·论 著·
邯郸地区新生儿听力与药物性耳聋易感基因突变联合筛查研究
陈丁莉1 李守霞1 要跟东1 冯海芹2 郭丽丽1 孙彩霞1 杨志明1 张晓芳1 邯郸市中心医院 1.检验科，2.产科 (河北邯郸 056001)
in the study. Routine hearing screening was carried out and meanwhile the cord bloods were collected for mitochondria
DNA screening. Mutations of A1555G and C1494T on mitochondria gene 12S rRNA were screened using Sanger sequencer.
关键词： 线粒体12SrRNA； 药物性耳聋； 听力； 筛查； 新生儿 中图分类号： R722 文献标识码： A 文章编号： 1000-3606 (2013) 03-0137-04
Neonatal hearing screening combined with drug-induced deafness susceptibility genes mutation screening in Handan area CHEN Dingli1, LI Shouxia1, YAO Gendong1, FENG Haiqin2, GUO Lili1 SUN Caixia1, YANG Zhiming1, ZHANG Xiaofang1 (1. Department of Clinical Laboratory, 2. Department of Obstetrics, Central Hospital of Handan City,
先天性耳聋是困扰人类的常见出生缺陷之一，大 约每1 000名新生儿中就有1例重度先天性耳聋患儿[1]。 目前 我国大 多 数 地 区已 广泛 地 开展 新生 儿听力 筛 查 (universal newborn hearing screening，UNHS)，以便早 期发现新生儿听力损伤，并通过早期干预，使听力障碍 儿童的言语得到正常发展[2]。随着U N HS的开展，在 对 其效果的评估和反思中发现，新生儿听力筛查仍存在 局限性，有些新生儿通过了出生时的听力筛查，但之后 仍出现耳聋。2011年Young等[3]报道，在108例人工耳蜗 植入的耳聋患儿中，有32例 (29.6%) 曾通过UNHS，证 明目前常规的U N HS在识别迟发型耳聋方面存在局限
性。发达国家研究发现，2/3语前感音神经性耳聋与遗 传因素有关 [4]，特 别是 线 粒体基因与氨 基 糖 苷类 抗 生
素致聋 (aminoglycoside antibiotic-induced deafness， AAID) 密切相关[5]。线粒体基因12S rRNA突变可引 起A A I D和非综合征性耳聋，最常见的突变位 点是 A1555G和C1494T[6]。由于携带此2种突变的个体对氨 基糖苷类抗生素 (aminoglycoside antibiotics，AmAn) 敏 感 性 增强，使用A m A n后极 易造成感 音神经性听力 下降。本研究拟通过对邯郸地区1 000名新生儿同时进 行听力和线粒体基因12SrR NA 突变检测，以早期发现 AmAn敏感个体，为早期预防AAID提供依据。
1 000名新生儿中，23名有高危因素的新生儿中4名 未通过初筛，未通过率为17.4% (4/23)；而977名无高危 因素的新生儿中137名未通过初筛，未通过率为14.0% (137/977)。有高危因素新生儿的初筛未通过率略高于 无高危因素新生儿，但差异无统计学意义 ( χ2=0.21， P =0.65)。 2.2 基因筛查结果
摘要： 目的 探讨在新生儿听力筛查同时，采用新生儿脐带血进行线粒体耳聋基因筛查的可行性及其意义。 方法 收集邯郸地区新生儿1 000例为研究对象，进行常规听力筛查，同时采集脐带血，用于线粒体DNA的筛查。采用 Sanger测序法检测线粒体12S rRNA A1555G和C1494T两个突变位点。结果 在1000名新生儿中，初次听力筛查有141例 (14.1%) 未通过，经过复筛后仍有11例 (1.1%) 未通过新生儿听力筛查。线粒体12S rRNA检测发现携带A1555G突变4例 (0.4%)，C1494T突变2例 (0.2%)，而该6例新生儿均通过了初次听力筛查。结论 线粒体耳聋基因筛查可以有效补充听力筛 查的不足，早期发现对氨基糖苷类抗生素敏感的个体，避免药物性耳聋的发生。 [临床儿科杂志，2013,31(2)：137-140]
1 000名新生儿均进行了线粒体基因12SrRNA A1555G和C1494T位点筛查，发现4名新生儿携带 A1555G突变，2名携带C1494T突变 (图2，图3)。线 粒体基因12SrRNA突变携带率为0.6% (6/1000)。11 名UNHS复筛未通过的新生儿中未发现A1555G和 C1494T突变携带者。
M. 标准带；1~7. 样本序号 图1 PCR扩增片段凝胶电泳结果
2 结果
2.1 听力筛查结果 1 000名新生儿的初次TEOAE听力筛查，859名
(85.9%) 通过；141名 (14.1%) 未通过，其中单耳初筛未 通过101名 (10.1%)，双耳均未通过40名 (0.4%)。出生后 42 d复筛时，初筛未通过的141名新生儿中，24名家长拒 查；其余117名新生儿经过复筛后，11名 (1.1%) 未通过， 5名单耳未通过，6名双耳未通过，。
1.5%的琼脂糖凝胶电泳观察PCR扩增结果 (图1ห้องสมุดไป่ตู้。测序 仪使用ABI 3730xl，突变阳性样本均反向测序验证。 用Mutation Surveyor 4.0软件对测序结果与标准序列 NC_012920进行比对分析。

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新生儿耳道护理对新生儿听力筛查结果的影响

新生儿耳道护理对新生儿听力筛查结果的影响

新生儿耳道护理对新生儿听力筛查结果的影响【摘要】目的：由于新生儿并不能表达清楚自身感受，通过听力筛查能够及早的排查出患有听力障碍的新生儿，并及时对其进行有效治疗。

现研究对新生儿进行耳道护理是否能够影响听力筛查结果，为临床治疗提供可靠依据。

方法：此次选取2021年3月-2022年3月间我院进行听力筛查的80例新生儿作为研究对象，入组样本按照数字随机法平均分成常规护理组和耳道护理组,根据护理方式的不同对比两组的初、复筛查结果和家属满意度情况。

结果：经过数据对比分析发现，耳道护理组新生儿的初、复筛查结果和家属满意度情况都要明显更高，组间数值P＜0.05，说明存在对比意义。

结论：对新生儿采用耳道护理临床效果显著，可以有效提高新生儿听力筛查通过率，并可及时治疗听力障碍患儿，提高家属满意度，值得推广、建议提倡。

【关键词】新生儿；耳道护理；听力筛查结果；满意度新生儿听力筛查是通过耳声发射、自动听性脑干反应等电生理学检测，在所有的新生儿出生后自然睡眠或安静的状态下进行的客观、快速无创的检查。

新生儿听力筛查分为初筛和复筛，检查结果显示为通过或未通过两种情况，通过听力筛查可以及早发现有听力障碍的新生儿【1】。

对听力损害的婴幼儿，在出生半年内进行干预，有效降低听力损伤带来的不良结果，保证患儿的正常生活和心理健康情况，达到较理想的治疗效果。

具体内容报告如下：1 资料与方法1.1 一般资料此次入组样本均为2021年3月至2022年3月在我院进行听力筛查的新生儿，共计80例，按护理措施不同将其平均分为两组，每组各40例。

两组新生儿年龄：2-10天；平均年龄：（7.31.9）天；体重：2.69-3.51千克；平均体重：（2.990.5）千克；男女比例：41:39；出生类型有：阴道自然分娩和剖腹产。

组间数据统计(p>0.05)，具有可比性。

1.2 护理方法新生儿的听力筛查安排在其出生后的48小时-出院前几天。

常规护理组新生儿采用基础护理包括给与家长关于新生儿听力筛查的相关资料（仪器使用、检测项目的顺序和操作、听力测试的意义）；定期对检测仪器进行清洁消毒和维护，保证它的准确性和有效性；在进行筛查时，保持新生儿处于睡眠或安静状态，避免由于新生儿的哭泣吵闹和四肢乱动影响到筛查结果；在筛查的全程，医护人员要使用无菌操作，避免对脆弱的新生儿造成感染，并要动作轻柔，避免伤害到新生儿的脆弱耳道【2】。

邯郸地区健康体检人群线粒体DNA_1555G和C1494T突变分析

邯郸地区健康体检人群线粒体DNA_1555G和C1494T突变分析

·遗传与优生·邯郸地区健康体检人群线粒体DNA A1555G 和C1494T 突变分析①要跟东李守霞②张小芳陈丁莉孙彩霞郭丽丽杨志明河北省邯郸市中心医院检验科056001中国图书分类号R394，R34文献标识码A文章编号1001-4411（2013）06-0971-03；doi ：10.7620/zgfybj.j.issn.1001－4411.2013.28.29①冀南地区重大出生缺陷三级预防体系建立的研究〔1113108017〕②通讯作者E －mail ：lishouxia1968@【摘要】目的：调查邯郸地区健康体检人群线粒体DNA A1555G 和C1494T 突变的携带率，明确非综合征型耳聋患者发病的分子学基础。

方法：对健康体检人群进行常见耳聋基因筛查内容的宣传，每个受检者抽取外周血并提取DNA ，应于PCR 对线粒体12SrRNA 基因片段进行扩增，应用直接测序法分别对线粒体12SrRNA 基因的2个基因片段进行直接测序。

结果：①2308名健康体检人群中，2000名同意进行常见耳聋基因筛查，接受率达86.96%。

②PCR 检测结果：以2000例研究对象的DNA 样本进行线粒体12SrRNA 基因的2个基因片段扩增，扩增产物片段大小与预期相符。

③测序结果：被检测的2000例研究对象中，3例（占0.15%）携带线粒体12SrRNA 基因A1555G 点突变，其中男性1例，女性2例；1例男性（占0.05%）携带线粒体12SrRNA 基因C1494T 点突变。

结论：常见耳聋基因筛查在健康体检人群中接受程度高，如列入常规的体检项目中，可以用于早期诊断，遗传咨询和指导该家系成员预防药物性耳聋，可以有效避免高危人群出现耳聋。

【关键词】健康体检遗传性耳聋遗传咨询线粒体12SrRNAAnalysis on mitochondrial DNA A 1555G mutation and C 1494T mutation amongpopulation receiving health physical examination in Handan areaYAO Gen －Dong ，LI Shou －Xia ，ZHANG Xiao －Fang et al .Clinical Laboratory ，Central Hospital of Handan City ，Handan 056001，Hebei ，China〔Abstract 〕Objective ：To investigate the carrier rates of mitochondrial DNA A1555G mutation and C1494T mutation among popu-lation receiving health physical examination in Handan area ，and identify the molecular basis of nonsyndromic hearing loss.Methods ：Pub-licity about common deafness genetic screening among population receiving health physical examination was conducted ，peripheral blood sam-ples were abstracted from every study object ，and DNA samples were obtained ，PCR was used to amplify segments of mitochondrial 12SrRNA gene ，the sequences of two gene segments of mitochondrial 12SrRNA gene were detected by direct sequencing method.Results ：Among 2308respondents receiving health physical examination ，2000respondents received common deafness genetic screening ，the acceptance rate was 86.96%.Two gene segments of mitochondrial 12SrRNA gene from DNA samples of 2000study objects were amplified ，the size of prod-uct was consistent with expectant size.Among 2000study objects ，3study objects （0.15%）carried A1555G point mutation of mitochondri-al 12SrRNA gene ，including one man and two women ；one man （0.05%）carried C1494T point mutation of mitochondrial 12SrRNA gene.Conclusion ：The acceptance level of common deafness genetic screening is high among the population receiving health physical examination ，and it can be used for early diagnosis ，genetic consultation ，and directing prevention of drug －induced deafness among the family members if it is included into routine items of health physical examination ，so deafness can be avoided effectively among high risk population.〔Key words 〕Health physical examination ；Hereditary hearing loss ；Genetic consultation ；Mitochondrial DNA12SrRNA随着我国经济的快速发展和国民生活质量的提高，社会整体的保健意识逐渐增强，定期对自己的身体进行检查，对疾病做到早预防、早诊断、早治疗已成为一种必然趋势，健康体检的健康服务产业正是基于此得到了迅速发展〔1〕。

5025例新生儿药物性耳聋基因突变筛查结果分析

5025例新生儿药物性耳聋基因突变筛查结果分析

ｍｕ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｆ ｏ ｒ ｈｅ ｔ ｎ ｅ ｗｂ ｏ ｎｓ ｒ ｍｉ ｔ ｏ ｃ ｈ ｏ ｎ ｄ ｒ ｉ ａ ｌ １ ２ Ｓ ｒ ＲＮＡ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｍｕ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ，ｉ ｎ ｐ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ ｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ．５ ０ ２ ５ ｎ ｅ ｗｂ ｏ ｒ ｎ ｓ ａ ｃ ｃ ｅ ｐ ｔ ｅ ｄ ｈｅ ｔ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ｏ ｆ ｈｅ ｔ ｄ ｅ ａ ｆ ｎ ｅ ｓ ｓ ｍｉ ｔ ｏ ｃ ｈ ｏ ｎ ｄ ｒ ｉ ａ １ ２ Ｓ ｒ ＲＮＡ．Ｉ ｔ ｕ ｓ ｅ ｄ ｍｕ ｌ ｔ ｉ ｐ ｌ ｅ Ｐ ＣＲ Ｔ ａ ｑ Ｍａ ｎ ｆ ｌ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ
ＨＵ Ｗｅ ｉ ｑ ｕ ｎ ， ＸＵＥ Ｚｈ ａ ｎ ｇ ｗｅ ｉ ， ＨＵＡＮＧ Ｊ ｉ ｎ ｑ ｉ ａ ｏ ， ＣＨＥ Ｎ Ｗｅ ｎ ｚ ｈ ｉ ， Ｃ ＡＩ Ｚｈ ｉ ｆ ｕ
（ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｏｔ ｏ ｌ ａ ｒ ｙ ｇ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｔ ｈ ｅ Ａｆ ｉｌ ｆ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｐ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｐ ｕ ｔ ｉ ａ ｎ Ｆ ｕ ｊ ｉ ａ ｎ ３ ５ １ １ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
文献标识码 ： Ａ
５ Ｏ ２ ５ 例 新 生 Ｌ 药 物 性 耳 聋 基 因 突 变 筛 查 结 果 分 析
胡伟群 ，薛章伟 ，黄金樵 ，陈文质 ，蔡志福
（ 莆 田学院附属 医院 耳鼻咽喉科 ， 福建 莆 田 ３ ５ １ １ ０ ０ ）
摘 要 ： 通过对莆田地区新生儿药物性耳聋基 因线粒体 １ ２ Ｓ ｒ Ｒ Ｎ Ａ突变的检测结果进行分析 ， 为预防莆田地
2022听力筛查及基因检测在遗传性耳聋诊疗中的应用进展全文

2022听力筛查及基因检测在遗传性耳聋诊疗中的应用进展全文

2022听力筛查及基因检测在遗传性耳聋诊疗中的应用进展（全文）摘要新生儿耳聋发病率逐年升高，遗传因素是新生儿耳聋的主要病因之一。

耳聋基因检测为遗传性耳聋的诊断和治疗提供了方向。

本综述比较不同听力筛查和基因检测手段，介绍耳聋基因检测的现状、成本与效益，以及基因检测在耳蜗植入疗效预测中的价值，以期提高新生儿遗传性耳聋的检测效率及经济学效益。

耳聋是新生儿常见的出生缺陷，发病率1%。

~3%。

,新生儿重症监护病房（neonatal intensive care unit, NICU ）中达2%~4% [ 1 ]o根据2015年世界卫生组织统计，全球共有5亿耳聋患者。

在所有致残原因中，耳聋从2010年第11位上升至2015年第4位,其中儿童有3 200万[2, 3 ]O 我国新生儿耳聋发病率为2%o-3%o [ 4 ]o至2015年，我国0-14岁儿童中有262万中度及以上耳聋患儿[5 I O耳聋可由遗传因素（包括先天性和后天性）和环境因素（如感染性聋、药物性聋、老年性聋和噪音性聋）引起[6 ],由遗传因素或遗传和环境因素共同所致的耳聋为遗传性耳聋, 主要为单基因病,占耳聋的50%以上[4, 5 ]0听力异常可影响儿童期语言发育和社会认知功能，导致学习困难和永久性残疾[7 ],如能在生后3 个月内明确诊断并在生后6个月内开始干预，患儿在发音、理解力、社会适应和行为等方面得分将升高20%~40% ,故早期识别、早期干预对耳聋患儿十分重要［8 I o本文就新生儿听力筛查和耳聋基因检测方法的选择及对遗传性耳聋诊疗的临床应用进展进行综述。

一、新生儿听力筛查L听力筛查方法：2018版(新版)婴幼儿听力损失评估的国际共识认为,耳声发射(Otoacoustic emission , OAE )和自动听性脑干反应(auto auditory brainstem response AABR建新生儿听力筛查的首选方/9 ］0OAE主要检测外耳道至耳蜗外毛细胞的功能，双耳筛查时长一般不超过5 min ,敏感度［93% ( 87%~96% )］和特异度［94% ( 84%~98% )］者B 很高，最为常用［10 ］,但受外耳道内胎脂、中耳羊水、呼吸或环境噪声等影响可出现假阳性，且不能检出蜗后病变［11 L最有效的技术是瞬态诱发OAE和畸变产物OAE ,分别针对中频段(2 000-4 000 Hz )和中低频段( 500~1000 Hz)［12］0AABR能检出听神经功能障碍、定位病变部位并判断耳聋性质，且不受患儿意识及镇静剂影响［13 ］,敏感度为70% ( 62%~77% ),特异度高达97% ( 92%~99% )[10]r更推荐用于NICU新生儿[8 L但AABR检测费用高、耗时长，对操作人员专业技术要求更高［11 L2 .听力筛查模式：听力筛查有一阶段(初筛)和两阶段(初筛与复筛)2种模式，国际上更推荐两阶段模式。