人参皂苷Rh_2含量测定方法及药理作用研究现状

人参皂甙单体Rh2 对人K562 白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析摘要目的: 观察人参皂甙单体Rh2 对人K562 细胞增殖和凋亡的影响, 分析该影响的时间和剂量依赖性。

方法: 实验于2006-07 / 08 在吉林医药学院临床检验系实验室完成。

①取对数生长期人K562 细胞制成细胞悬液, 浓度1×108L- 1, 接种于96 孔培养板内, 每孔100μL, 6h 后加入终质量浓度分别为6.25 , 12.5 , 25.0 , 50.0 ,100.0 mg / L 的人参皂甙单体Rh 2100μL ( 购自吉林省宏久生物科技股份) , 每一浓度组均设4 孔。

对照孔及调零孔加100μL 培养液。

各孔总体积均为200 μL。

在加药后48 h 采用四甲基偶氮比色法检测各孔中细胞的抑制率。

在接近于半数抑郁浓度的人参皂甙单体Rh 2 处理作用于细胞6 , 12 , 24 , 48 和72 h 后采用四甲基偶氮唑盐比色法计算抑制率。

②在倒置显微镜下观察加药与未加药孔K562 细胞形态。

③常规苏木精-伊红染色, 检测25.0 mg / L 人参皂甙单体Rh 2 作用0 , 12 , 24 和48 h 后K562 细胞的凋亡率, 并观察人参皂甙单体Rh 2 质量浓度分别为0 , 12.5 ,25.0 , 50.0 , 100.0 mg / L 时, 培养24 h 后的细胞凋亡率。

结果: ①人参皂甙单体Rh 2 对K562 细胞生长抑制作用: 当人参皂甙单体Rh 2 质量浓度为6.25 , 12.5 , 25.0 , 50.0 和100.0 mg / L 时, 抑制率逐渐升高,呈现明显剂量依赖性。

人参皂甙单体Rh 2 对K562 细胞的半数抑制浓度为25.8 mg / L, 处理K562 细胞6 , 12 , 24 , 48 , 72 h 后细胞抑制率逐渐升高,且后4 个时间点明显高于处理6 h 时( t=11.79～50.89,P < 0.01 ) 。

人参皂甙Rh2产品质量检验及含量测定方法蒋磊;卢明春;鱼红闪;金凤燮【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2002(021)003【摘要】研究了酶转化法生产人参皂甙Rh2产品一般质量检验,确定了符合药典规定的产品质量标准.建立了高效液相色谱法测定人参皂甙Rh2含量的方法.通过对高效液相色谱系统适用性实验、稳定性实验、精密度实验、重现性实验、回收率实验的讨论,可以确定一个准确的色谱条件用来测定人参皂甙Rh2的含量.其测定条件为流动相甲醇∶乙腈∶水为8∶8∶1,流速1 mL/min,紫外检测波长203 nm,色谱柱ThemoHypersil ODS2 (250 mm×4.5 mm,5 μm),回收率≥99.74%,平均标准偏差(RSD)<1.83%,达到了药典规定.在该色谱条件下,人参皂甙Rh2的保留时间8～10 min.在流动相比例(甲醇∶乙腈∶水)改变,其他条件不变的情况下测定了人参皂甙Rh2 的R型和S型的含量比例为6∶4, R型保留时间为17 min左右,S型保留时间为16 min左右,R型在S型后面出峰.【总页数】5页(P197-201)【作者】蒋磊;卢明春;鱼红闪;金凤燮【作者单位】大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034【正文语种】中文【中图分类】Q503;Q946.49【相关文献】1.三七叶甙制备抗癌活性成分20(R)-人参皂甙-Rh2和人参皂甙Rg3 [J], 陈业高;黄荣;桂世鸿;吕瑜平;文净2.人参复方制剂中人参皂甙含量测定方法研究(大孔吸附树脂——比色法) [J], 徐晖;张润清3.人参皂甙Rh2对人胶质瘤细胞内钙离子浓度的影响 [J],4.中华人民共和国国家标准《人参加工产品分等质量标准》（二）对人参中总皂甙含量及人参皂甙Rb₁含量标准的研究与讨论 [J], 汤美兰;徐颖;庞亚清;秦静;梁雪芹;朱飞;朱妙英;许莹;赵秋萍;王晓萍;鞠萍;丁贵忠;王琳;初正云;王瑞江;郭安;富力;何晓秋;李树殿;赵晓松;魏春雁;徐绥绪5.人参皂甙Rh2对人胶质瘤细胞U87MG凋亡的影响 [J], 白磊;陈晨;李志磊;霍国进;冯毅;严飞平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人参皂甙单体Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用[关键词]喉肿瘤（Laryngeal Neoplasms）；人参皂甙（GINSENOSIDE）人参皂甙单体R h 2 （ginsenoside Rh2 ，G – Rh2）是近年从人参中提取的一种新的有效活性成分。

研究表明它对卵巢癌、黑色素瘤、肝癌、白血病和神经胶质瘤等肿瘤细胞生长具有明显的抑制作用。

探讨G – Rh2 对喉癌细胞的作用及其机制，现报道如下。

1资料与方法1.1 细胞培养。

喉鳞状细胞癌细胞株Hep - 2 购自北京市耳鼻咽喉科研究所，细胞用含1 0 % 灭活胎牛血清的RPMI1640培养基培养，每周传代2次。

1.2 M T T 试验。

取对数生长期H e p - 2 细胞，接种培养板中5 ×103/孔，每2 4h 换培养液。

培养2 4、4 8、7 2 h 后，观察细胞形态变化。

每孔加入MTT溶液10 µl，培养4 h后弃上清，加入D M S O 溶液1 0 0 µ l ，震荡后室温静止1 0 m i n ，然后用酶标仪于570n m 处测定吸光度（A）值，计算细胞生长抑制率。

生长抑制率（%）=（1－实验组A值/对照组A值）×100%。

1.3流式细胞仪检测细胞周期变化。

用G-Rh2 30 µg/ml处理Hep - 2 细胞2 4 h ，常规处理，碘化丙啶染色，流式细胞仪分析结果。

1.4免疫组化S A B C 法检测p27蛋白的表达。

按SABC 试剂盒说明进行常规免疫组化染色，封片后光镜观察。

每张切片随机取1 0 个高倍镜视野（400×），以CIAS - 1000 型全自动彩色细胞图像分析系统分析计算平均值，灰度值随表达量的增多而减少。

2 结果2 . 1 G-Rh2对Hep -2 细胞形态的影响。

不同浓度的G-Rh2对Hep -2 细胞共同培养2 4 、4 8、7 2h 后，倒置显微镜下观察。

HPLC法测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量
张天斌;丁长江;李绪文;孟勤
【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2003(029)004
【摘要】目的:采用高效液相色谱法(HPLC)测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量.方法:乙醇提取红参中总皂苷,乙醚萃取,硅胶柱层析分离.纯化制备人参皂苷-Rh2,色谱柱为惠普Zobax ODX(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇∶水∶磷酸(87∶13∶0.2).结果:红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量为0.25%.结论:HPLC法简便,准确度高.
【总页数】2页(P533-534)
【作者】张天斌;丁长江;李绪文;孟勤
【作者单位】吉林大学化学中心综合实验室,吉林,长春,130021;吉林大学化学中心综合实验室,吉林,长春,130021;吉林大学化学中心综合实验室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1;R446.1
【相关文献】
1.HPLC法测定西洋参果浆及其发酵液中人参皂苷—Rg3、Rh2的含量 [J], 刘桂艳;刘墨祥;于连贵;杨献文;张春红
2.HPLC法测定酶转化生产人参皂苷Rh2的含量 [J], 蒋磊;赵寿经;梁彦龙;李军华
3.RP-HPLC同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rh1、Rg3和Rh2的含量[J], 张泰;袁萍;茅仁刚;张华
4.HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rg_3的含量 [J], 孟勤;尹建元;赵俊艳;梁迪
5.HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rh_2的含量 [J], 丁长江;孟勤;李政;张明恺
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药物经济学与新药研究开发论文人参皂苷rh2的药物作用华南农业大学11经济学2班刘斌201131141611人参皂苷rh2的药物作用华南农业大学11经济学2班刘斌201131141611前言人参皂苷RH2来源为五加科植物人参的干燥根。

它适合早期肿瘤患者及免疫低下预防肿瘤发生人群服用。

急、重、晚期癌症患者，体质较虚弱，服用可提高自身免疫功能，增强抗瘤能力，减轻化疗后毒副作用如：骨髓抑制、外周血象改变、免疫抑制、恶心呕吐、乏力、脱发等；提高生活质量，延长生命期限。

本文通过文献综述的方法，列举了人参皂甙rh2的各种药物效用，说明人参皂甙是一种很重要的经济药物之一。

关键字：人参皂甙抗癌抗疲劳正文人参皂苷RH2是以人参为主要原料的特定提取成份精制而成的复方成分。

人参皂苷Rh2的别名是20(S)-人参皂苷Rh2，化学名为原人参二醇-3-氧-B-D-吡喃葡萄糖苷，英文名为Ginsenoside Rh2，分子式是C36H62O8，分子量622.87，CAS 号78214-33-2，检测方式为高效液相色谱法HPLC≥98%，性质为无色液体。

人参具有大补元气，滋补强壮，安神益智，生津，复脉固脱等功效。

现代医学普遍认为人参对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、内分泌系统、泌尿生殖系统有广泛的作用，从而可提高人体力、智力的活动能力，增强机体对有害刺激的非特异性抵抗力。

人参的药理活性常因机体机能状态不同双向作用，因此人参是具有“适应原”样作用的典型代表药。

人参皂苷是从人参中提取出来的一个天然活性多糖总成分，主要成分:Rg、Rg1、Rg2、Rg3、Rh、Rh2、Rh1、Rb1、Rb2等，RH2的抗肿瘤作用在其中是最强的,提高免疫力,缓解疲劳的作用最好。

人参皂苷Rh2——人参皂苷主要活性物质经水解后，最后产物中抑制癌细胞增殖作用的能力最强的成分。

经过众多国际权威专家论证具备良好的抗肿瘤活性功能，抑制肿瘤癌细胞生长。

Rh2 可以有效增强单核巨噬细胞的吞噬功能，诱发肿瘤癌细胞凋亡。

[文章编号]　16712587 (2003)0420533202[收稿日期]　2002203203[作者简介]　张天斌(1969-),男,吉林省辽源市人,技师,主要从事天然药物的研究。

HPLC 法测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh 2的含量张天斌1,丁长江1,李绪文1,孟　勤2(1.吉林大学化学中心综合实验室,吉林长春130021;2.吉林大学药学院)[摘　要]　目的:采用高效液相色谱法(H PL C )测定红参总皂苷中人参皂苷2R h 2的含量。

方法:乙醇提取红参中总皂苷,乙醚萃取,硅胶柱层析分离。

纯化制备人参皂苷2R h 2,色谱柱为惠普ZobaxODX (4.6mm ×250mm ,5Λm );流动相为甲醇∶水∶磷酸(87∶13∶0.2)。

结果:红参总皂苷中人参皂苷2R h 2的含量为0.25%。

结论:H PL C 法简便,准确度高。

[关键词]　人参皂甙 分析;红参;色谱法,高压液相[中图分类号]　R 28411;　R 44611 [文献标识码]　A 1992年宋长春等[1]从引种西洋参叶中分离得到人参皂苷2R h 2。

1993年马兴元等[2]从引种西洋参茎叶分离得到人参皂苷2R h 2。

近年来,未见有关人参皂苷2R h 2提取方面的报道。

红参中人参皂苷2R h 2含量低,一般方法难以检测出其含量。

现以红参为原料分离提取总皂苷,通过乙醚萃取,硅胶柱反复层析,制得人参皂苷2R h 2,经高效液相色谱归一化法测定其含量为98%以上。

1　材料与方法111　仪器、材料与试剂　美国W aters 高效液相色谱仪,W aters 2478双波长紫外检测器,Ch rom stati on 数据处理系统;人参皂苷2R h 2对照品含量98.3%(自制);甲醇为色谱纯;水为双蒸水;硅胶G 与硅胶H 为青岛海洋化工厂出品;硅胶G 薄层板(自制);溶剂系统CHC l 3∶M eO H ∶H 2O (2∶2∶4下层);所用试剂均为分析纯;红参由吉林抚松县参茸联合公司提供。

・综　述・人参皂甙Rh2抗肿瘤作用的研究赵　越,苏　适(长春生物制品研究所,吉林长春　130062)摘　要　作为中国传统中药的人参在中药史中占有重要的地位,被用于多种古方验方的主药。

其主要成分人参皂甙具有多种药理作用,其中二醇组皂甙Rh2为从人参中提取的天然活性成分,经现代医学研究证明具有很高的抗肿瘤活性,对肿瘤细胞具有分化诱导、增殖抑制、诱导细胞凋亡等作用。

关键词　人参皂甙Rh2;抗肿瘤;细胞凋亡中图分类号　R282.71 文献标识码　A 文章编号　1005-7021(2003)02-0061-03 人参(Panax ginseng C.A)为五加科多年生草本植物,其成分具有诸多生物活性,为研究者所瞩目并进行了深入的研究,现代医学研究表明人参具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性作用[1]。

人参皂甙是人参中一类主要的有效成分,迄今已确定结构的至少在30种以上,人参皂甙Rh2是由人参中提取的天然活性成分,属于二醇组皂甙,自从Odashima报告了从红参中提取的有效成分Rh2在体外对黑色素瘤B16细胞具有分化诱导作用后[2],各国学者先后通过多种体内外实验证实,Rh2可以通过诱导分化或调亡,抑制多种肿瘤细胞的增殖与生长,并证明对正常细胞的毒性甚低,现将近几年有关人参皂甙Rh2针对肿瘤细胞生物作用研究综述如下。

肿瘤治疗一般分为外科手术、放射疗法、化学疗法3种。

肿瘤化疗的目的是通过化学药物杀伤肿瘤细胞,促进肿瘤细胞的死亡或阻止其增殖,但是绝大多数化学药物的细胞毒性缺乏特异性,它在杀死肿瘤细胞的同时,无选择的杀伤正常细胞特别是造血组织细胞,正常细胞的损伤常导致严重的并发症。

此外并非所有肿瘤细胞都对化疗敏感,即使对化疗敏感的肿瘤细胞,在停止用药后也易复发。

由于肿瘤分化异常在肿瘤发病学上占有重要地位,所以有学者提出使用药物对肿瘤细胞的异常分化进行逆转,即将肿瘤细胞诱导分化为正常细胞或近似正常细胞,作为抗肿瘤药物研究的新途径,而从天然化合物中寻找分化诱导剂成为学者们研究的热点。

人参皂苷药理活性的研究进展与分析摘要神经系统中的一氧化氮(NO)是一种气体型信使分子,在一氧化氮合酶(NOS)的催化下产生,具独特的作用特点,有许多重要的生物功能。

NO作为外周神经递质主要在植物神经中起作用,也在外周感觉传入中发挥作用;NO还参与神经系统的发育;影响神经递质的释放;在中枢神经系统,NO作为逆行信使参与长时程增强和长时程抑制的诱导和维持,在学习和记忆中发挥作用;但当NO过量时会导致神经毒性,从而在神经疾病中起作用。

关键词一氧化氮一氧化氮合酶神经递质逆行信使神经毒性人参化学成分复杂,生物活性广泛,药理作用独特,目前从人参中提取出的成分有皂苷、糖类、蛋白质、低分子肽、多胺、氨基酸、有机酸、维生素、脂肪酸、果胶、β-谷甾醇等。

医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分之一,它是人参根的主要生理活性物质。

目前,用色谱法从人参及其地上部分共分离得到39个人参皂苷。

把总皂苷称为人参皂苷Rx,按硅胶薄层色谱Rf值的大小顺序由小到大将每一组分命名为Ro、Ra、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、 Rg3、Rh1、Rh2和Rh3等。

但最近几年对纯皂苷的研究多集中于Rb1、Re、Rg1、Rh2等。

人参皂苷按其化学性质可分为;人参皂苷二醇型(A型),包括Rb1、Rb2、RC、 Rd、Rh2等;人参皂苷三醇型(B型),包括Re、Rf、Rg1、 Rg2、Rhr等;齐墩果酸型(C型),如Ro。

A型、B型皂苷的皂苷元分别为20(S)—原人参二醇及20(S)-原人参三醇,均属达马烷型,属于四环三萜,而C型皂苷则是五环三萜的衍生物。

现将近年研究概况综述如下。

1 A型皂苷的药理活性1.1 抑制细胞凋亡研究发现缺血再灌注可诱导成年大鼠心肌细胞内钙离子积聚而导致凋亡,人参皂苷 Rb1能阻滞细胞膜上钙离子通道的活动,减轻细胞内钙离子的积聚而达到抑制凋亡的作用。

最近已研究证实Rb1、Rb2、Rb3、Rc和Rd 均具有钙离子通道的阻滞作用,并且它们对犬急性心肌缺血还有明显保护作用。

第6卷第1期北华大学学报(自然科学版)Vol.6No.12005年2月JOURNAL OF BEIHUA UN IV ERSIT Y (Natural Science )Feb.2005文章编号:100924822(2005)0120050203人参皂甙Rh 2抗肿瘤作用机制的研究王占峰1,罗毅男1,洪新雨1,鞠　砚1,孙玉芹2,韩海铃2(1.吉林大学第一医院,吉林长春　130021;2.北华大学附属医院,吉林吉林　132011)摘要:恶性肿瘤治疗至今尚无好的方法.传统化疗药因其缺乏特异性的细胞毒性作用,治疗中容易造成正常细胞的损伤,从而引起一系列的并发症.人参皂甙Rh 2是人参中提取的天然活性成分,具有很高的抗肿瘤活性,而对正常细胞无毒副作用.文章从人参皂甙Rh 2的抗肿瘤作用机制(抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、诱导分化、抑制肿瘤DNA 合成、提高荷瘤机体的免疫功能和抑制肿瘤转移、抗肿瘤耐药性增强、其他化疗药物对耐药肿瘤作用)等方面进行研究.关键词:生物提取物;人参皂甙Rh 2;抗肿瘤作用机制中图分类号:R282 文献标识码:A 收稿日期:2004210210作者简介:王占峰(1978-),男,硕士研究生,主要从事脑外伤及颅脑肿瘤的临床治疗及基础研究. 人参作为中国传统中药,在中药史上占有重要的地位,具有大补元气,补气益肺,安神益智的功效,被用于多种古方验方的主药.人参为五加科多年生草本植物,其成分具有诸多生物活性成分,现代医学研究表明,人参具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性作用[1,2].人参皂甙是人参中主要的有效成分,迄今已分离出40多种单体,人参皂甙Rh 2是从人参中提取的天然活性成分,属于十二醇皂甙,在体外对黑色素瘤16细胞具有分化诱导作用.通过实验已证实,Rh 2可以通过诱导分化或凋亡,抑制多种肿瘤细胞的增殖和生长,并证明对正常细胞毒性作用甚低[3].肿瘤的常规治疗包括手术治疗、放射治疗、化学治疗.肿瘤化疗的目的在于通过化疗药物杀伤肿瘤细胞,促进肿瘤细胞的死亡或阻止其增殖.但绝大多数药物其细胞毒性缺乏特异性,造成正常细胞的死亡,特别是增生活跃的造血干细胞,导致骨髓移植及全身毒性等并发症,影响治疗效果.因此,迫切需要寻找新的方法弥补和完善常规治疗的不足.肿瘤细胞区别于正常细胞的一个主要特征在于分化障碍,因此,恶性肿瘤被看作是细胞分化异常的疾病.分化异常后,返回原始胚胎细胞表型,即去分化.近来的研究表明,引起细胞分化阻抑特异性的基因改变在一定条件下是可逆的.诱导分化治疗就是基于以上认识,应用分化诱导剂,使恶性肿瘤细胞向正常细胞分化转变,甚至完全转变为正常细胞,即再分化或肿瘤逆转,已成为抗肿瘤药物研究的新途径,从天然化合物中寻找分化诱导剂成为学者们研究的重点[4].细胞凋亡是一个程序化死亡的过程,其与肿瘤发生、发展及其对治疗因子的反应关系密切.近年来,人们逐渐认识到凋亡可维持细胞的形态,减轻周围炎症反应,促进肿瘤细胞的凋亡,并成为恶性肿瘤化疗的新目标.大量研究表明,该药抗肿瘤作用与传统的化疗药物有所不同,深入研究的抗肿瘤作用机制具有重要的现实意义[5].1　抑制肿瘤细胞DNA 合成通过[3H]2TdR 掺入实验检测人参皂甙Rh 2对前列腺癌细胞株PC 23M 细胞核酸合成的影响,发现人参皂甙Rh 2作用的PC 23M 细胞的[3H ]2TdR 掺入率明显少于对照组,这可能是人参皂甙Rh 2作用于细胞后对DNA 合成复制有抑制作用,且作用强度随药物浓度的增高而增强[6,7].2　诱导肿瘤细胞的凋亡和分化2.1　诱导肿瘤细胞的凋亡人参皂甙Rh 2诱导肿瘤细胞凋亡是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一,超微结构和DNA 凝胶电泳都发现了人参皂甙Rh2诱导C6胶质瘤细胞凋亡所致的形态学与生化改变.用电镜观察到典型的细胞凋亡特征:核染色体密度增高并凝聚于核膜周边,核固缩,沿核膜孔裂解为核碎裂片,但细胞膜完整,并可见凋亡小体.流式细胞术分析在DNA组方图上出现初小典型凋亡峰(Ap峰),且该作用存在时间与剂量依赖性,随作用时间延长和药物浓度增高,凋亡细胞的比例明显增加[6,7].韩国Hyun2Eui kim等利用小鼠胶质瘤细胞株观察研究人参皂甙Rh2对脑瘤的潜在作用时发现,通过引起细胞形态的改变,DNA断裂,caspe(凋亡活化基因)的激活和活性氧系列(Ros)的产生导致胶质瘤细胞的凋亡,但在应用Rh2处理后,特异性的(ADP2核酶)多聚酶却没有像在其他凋亡实验中断裂成85ku蛋白, Bcl22和Bax表达水平也没有发生改变,且过度表达的抗氧化蛋白质也与亲本细胞相类似[8].从细胞增殖动力学角度研究人参皂甙Rh2诱导人肝癌细胞SK2HEP21的细胞凋亡结果表明,人参皂甙Rh2诱导人肝癌细胞SK2HEP21的细胞凋亡作用,是通过与细胞周期性蛋白A激酶复合物有关的p21WAF/CIPI分裂蛋白的分裂方式导致SK2HEP2 1的细胞凋亡[9].用流式细胞仪研究人参皂甙Rh2对S180肉瘤细胞周期移型性影响,发现人参皂甙Rh2能使肉瘤细胞周期阻止于S期.通过人参皂甙Rh2诱导人肝癌Bel27404细胞凋亡的实验证明,人参皂甙Rh2其抗肿瘤作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡而实现其抗肿瘤作用[9,11].2.2　诱导分化诱导分化是恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导剂的作用下,再分化向正常方向逆转现象.它作为肿瘤生物治疗学的一个新领域,已日益受到关注.各国学者先后通过多种体内外实验证实:Rh2其通过诱导分化凋亡,抑制多种肿瘤.Odashima报告了从红参中提取的有效成分Rh2在体内外对黑色素瘤细胞具有分化诱导作用[12].Rh2作用后,B16细胞不仅在形态上出现分化改变,如细胞呈网状结构,细胞变大变长,多数细胞具有树突状结构,而且功能上也出现了分化改变,表现为黑色素生成能力和酪氨酸酶活力增加.人参皂甙Rh2属非细胞毒性抗肿瘤药物,通过诱导肿瘤细胞分化和凋亡可能是其抗肿瘤主要机制,但对于前者目前的研究还比较少[13].3　抗肿瘤的免疫机制人参皂甙Rh2抗肿瘤免疫机制是近年来研究的另一个热点,人参皂甙Rh2能够通过不同种途径改善和提高机体免疫功能,对免疫系统具有保护作用,这使得该药有可能成为一种独特的新型抗肿瘤药物.人参皂甙Rh2有提高荷瘤机体细胞免疫功能作用.IL22主要是由活化的辅助性T淋巴细胞产生的细胞因子,IL22具有自身正向免疫调节作用.N K 细胞是细胞免疫中非特异部分.在大多数荷瘤机体N K细胞活性明显降低时,IL22系统处于明显的抑制或紊乱[14].通过人参皂甙Rh2诱注射液对核肝癌(H22)小鼠免疫功能的影响实验观察到,(H22)荷瘤小鼠的N K细胞活性处于严重低下状态,而人参皂甙Rh2注射液高中剂量组与荷瘤组比较,N K细胞杀伤活性明显增强.本实验中(H22)荷瘤小鼠的IL22活性低于正常组,人参皂甙Rh2注射液高剂量组显著提高IL22活性.人参皂甙Rh2注射液通过调节和增强机体免疫发挥抗肿瘤作用[15].4　相关研究4.1　抗肿瘤转移通过20(R)2人参皂甙Rh2对抗癌细胞转移实验研究发现,人参皂甙Rh2对小鼠B162BL6黑色素瘤细胞高转移株自发性肺部转移具有显著的抑制作用,Rh2在26,52mg/kg的剂量下的肺系数于对照组有显著的差异,Rh2在8.3,16.6mg/kg的剂量下预先给药,肺转移抑制率为44%,64%,其中16.6mg/kg的剂量下肺转移节结数与对照比较,具有明显差异.4.2　抗耐药性顺铂(Cisplad)为临床广谱抗肿瘤药物,可诱导多种肿瘤细胞凋亡[16].通过人参单体皂甙Rh2增强顺铂对PC23M致凋亡效应的研究发现[17],以顺铂与Rh2皆能促进肿瘤细胞凋亡为理论依据,将二者联合应用,以期能提高顺铂对前列腺癌细胞的致凋亡效应,为前列腺癌治疗提供新线索.人参皂甙Rh2作为人参有效抗癌成分,具有促进多种肿瘤细胞凋亡作用,可提高柔红霉素、长春新碱等抗肿瘤药物对多耐药白血病细胞的细胞毒性.这表明人参皂甙Rh2不易使肿瘤细胞产生抗药性,特别适用于已对其他化疗药物产生耐受性的肿瘤治疗.5　小结和展望人参皂甙Rh2属非细胞毒性抗肿瘤药物,它能有效抑制多种肿瘤细胞的生长增殖.抑制肿瘤细胞核酸合成,诱导肿瘤细胞凋亡和分化是其作用机制15第1期王占峰,等:人参皂甙Rh2抗肿瘤作用机制的研究 的一个主要特点,人参皂甙Rh2能改善和提高荷瘤机体的细胞免疫功能.此外,榄香烯还具有抗肿瘤转移、毒副作用小和不易耐药、增加其他药物抗肿瘤作用等优点,具有良好的应用前景.虽然对人参皂甙Rh2的抗肿瘤作用已有多方面研究,但我们发现本领域的研究还缺少系统和深入,尤其是对于人参皂甙Rh2的作用部位、作用通路,以及榄香烯对癌基因、抑癌基因的影响等还有待阐明.研究中还发现不同肿瘤对该药的敏感性差异较大,人参皂甙Rh2对不同肿瘤细胞的作用以及其诱导分化效应也需进一步的明确和证实.随着人参皂甙Rh2在临床的逐渐应用,其抗肿瘤机制将随着进一步深入研究而逐渐清楚.参考文献:[1]Odiashima ST,K ohmo H.Control of PhcnotypicExpression of Cultured B16Melannoma Cell by PlantG lycosides[J].Cancer Res,1985,45:2781.[2]潘正安.中药大辞典[M].上海:上海科技出版社,2003.3～5.[3]周洪语,钟春龙.神经胶质瘤诱导分化治疗的研究进展[J].国外医学神经病学神经外科学分册,2000,27:3. 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人参皂苷测定及其药理作用的研究概况摘要：人参(P anax g inseng C. A. M eyer) 为五加科人参属植物, 具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神等作用〔1〕。

现代药物学研究证明: 人参皂苷(ginsenoside) 是人参中重要的活性物质, 因此人参皂苷含量的多少评价人参内在质量的重要指标之一。

迄今为止, 人们已从人参各部位(人参根、芦头、茎叶、花、花蕾及参果) 共分离得到20 多种人参皂苷, 可分为20S2原人参二醇(p rotopanaxadiol) 类、20S2原人参三醇(p rotopanaxatriol) 类和齐墩果酸(oleanolic acid)类三类。

对于人参中人参皂苷的含量测定, 国内外研究的都比较多, 常用的测定方法主要有: 高效液相色谱法、薄层扫描法、分光光度法及重量法等。

本文主要讨论这些方法测定的结果, 即不同采收期和不同年限的人参中人参皂苷的含量变化, 以及人参各部位人参皂苷的含量变化等, 以期为综合利用人参资源, 扩大人参药用部位, 合理进行人工种植和炮制提供一定参考。

关键词：人参皂苷人参总皂苷八种主要皂苷含量测定药理作用1、人参总皂苷的测定1.1 样品的制备取人参粉（40目）1g，置50ml磨口圆底烧瓶中，精密加入甲醇25ml与沸石少许，摇匀，称重，放置过夜后于水浴中保持微沸回流6小时，添加甲醇至原重离心分离，精密吸取上清液5或10ml（视含量而定），挥去甲醇，将提取物残渣仔细移入1ml容量瓶中，容器用少量甲醇洗涤，洗液合并，精密稀释至刻度。

1.2 总皂苷的测定用微量注射器吸取上述样品溶液10至20μl（视皂苷含量而定），在硅胶薄层上点成线状，用氯仿-甲醇-水（70:55:10）展开，依溶剂达到顶端，将板取出，使溶剂然全挥去，置碘蒸气中数秒，待色点刚显出，立即取出，画出斑点位置，用冷风将碘完全吹尽，用小刀将色点刮入10ml磨口带塞试管中，精密加入5%香荚醛-冰醋酸溶液0.2ml与高氯酸0.8ml，混匀，密塞置60℃水浴中加热15分钟，立即冷却，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，离心，取上清液在波长560nm处比色测定，同时取与色点同样大小的空白硅胶加显色剂显色，作为空白对照。

人参皂苷Rh2的人类内靶点鉴定及抗肿瘤分子机制研究人参皂苷Rh2的人类内靶点鉴定及抗肿瘤分子机制研究(20S)G-Rh2是人参加工成红参过程中产生的次级皂苷,具有出色的抗肿瘤活性。

研究表明,(20S)G-Rh2可诱导人白血病细胞、人宫颈癌细胞、人卵巢癌细胞、人肺癌细胞、人肝癌细胞和人乳腺癌细胞在内的多种肿瘤细胞的细胞凋亡,并且(20S)G-Rh2同时启动线粒体途径和和膜死亡受体途径高效杀死癌细胞。

(20S)G-Rh2还可通过抑制JNK、Akt、MAPK和β-catenin信号通路诱导肿瘤细胞周期G1期阻滞,抑制肿瘤细胞的生长。

在乳腺癌细胞中,(20S)G-Rh2可以抑制microRNA介导的多重药物抵抗。

在人多形型恶性胶质瘤细胞中,(20S)G-Rh2通过下调血管内皮生长因子A,抑制EGFR/PI3k/Akt/mTor信号通路,降低肿瘤细胞的侵袭转移能力。

动物水平研究表明,(20S)G-Rh2同样抑制多种种植瘤在小鼠中的生长。

本文旨在通过对(20S)G-Rh2相互作用蛋白质的研究,揭示(20S)G-Rh2的细胞内靶点,并最终阐述(20S)G-Rh2抗肿瘤作用的分子机制。

为探索与(20S)G-Rh2相互作用的蛋白质,我们分别使用(20S)G-Rh2-PEGA树脂和(20R)G-Rh2-PEGA树脂对人肝癌细胞HepG2的全细胞裂解液进行了pull-down分析,通过液相色谱串联质谱分析获得了381个蛋白质。

通过比较上述蛋白质在(20S)G-Rh2-PEGA树脂和(20R)G-Rh2-PEGA树脂的相对丰度,我们获得了113个与(20S)G-Rh2具有较强结合能力的蛋白质。

通过检索上述蛋白质在肝细胞癌中的相对表达水平,我们确定了13个在肝癌细胞中高表达的蛋白质。

结合(20S)G-Rh2相互作用蛋白质组的GO分析,最终选择Annexin A2进行深入的功能研究。

Annexin A2蛋白质是重要的多功能蛋白质,在细胞增殖、细胞迁移、细胞粘附等过程中发挥重要作用。

人参皂苷Rh2抗心肌缺血作用及其机制开题报告一、选题背景与意义冠心病是心血管疾病中最为常见的病例之一，其中心肌缺血是其主要的病理生理基础。

人参皂苷Rh2是一种来源于人参的三萜皂苷，具有广泛的药理活性。

研究表明Rh2可以有效地抑制冠心病发展，并具有很好的抗心肌缺血作用。

因此，本研究旨在探讨人参皂苷Rh2的抗心肌缺血作用及其机制，为冠心病防治提供实验依据。

二、研究内容与方法1. 研究内容本研究将通过以下几方面来探讨人参皂苷Rh2的抗心肌缺血作用及其机制：（1）研究人参皂苷Rh2的抗心肌缺血作用及其影响因素；（2）探究Rh2对心肌组织氧化应激程度和线粒体功能的影响；（3）分析Rh2对心肌损伤和缺血再灌注损伤的保护作用。

2. 研究方法（1）建立心肌缺血再灌注模型，观察Rh2治疗对模型动物心肌缺血再灌注损伤的影响；（2）检测Rh2对心肌损伤和线粒体功能的保护作用，通过细胞和动物实验评估其抗凋亡、抗氧化、抗炎、抗缺血等作用；（3）应用生化分析方法检测Rh2的不同浓度治疗心肌组织对线粒体功能的影响及其改变的机制。

三、预期成果通过本研究，我们预期获得以下成果：（1）研究人参皂苷Rh2对心肌缺血的保护作用及其影响因素；（2）探究Rh2对心肌组织氧化应激程度和线粒体功能的影响；（3）分析Rh2对心肌损伤和缺血再灌注损伤的保护作用。

四、研究意义人参皂苷Rh2作为一种具有广泛药理活性的三萜皂苷，其抗心肌缺血作用已经得到证实。

本研究的意义在于，为进一步深入掌握Rh2的抗心肌缺血机制提供实验依据，为探索Rh2在冠心病防治中的应用提供理论和实验基础，从而为预防和治疗冠心病提供重要参考。

人参皂苷测定及其药理作用的研究概况人参皂苷是一种天然植物化合物，主要存在于人参中。

人参皂苷是人参的主要活性成分，具有多种药理作用，包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳和增强免疫功能等。

另外，人参皂苷还被广泛应用于治疗心血管疾病、神经系统疾病和代谢性疾病等。

人参皂苷的测定方法多种多样，主要分为化学分析法和生物学分析法两类。

化学分析法是通过人参皂苷的化学性质进行测定。

目前常用的化学分析法有高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法、红外光谱法、紫外光谱法、核磁共振法等。

其中，高效液相色谱法是目前较常用的测定方法，其操作简便、灵敏度高、重现性好。

生物学分析法是通过人参皂苷对生物体的影响进行测定，主要包括细胞毒性试验、测定药效物质的体内外药效学参数和对细胞的保护作用等。

人参皂苷具有广泛的药理作用。

首先，人参皂苷具有抗炎作用，可以抑制炎症介质的释放和炎症反应的发生，从而减轻炎症反应所引起的病理损伤。

其次，人参皂苷具有抗氧化作用，可以清除自由基，减少氧化应激，保护细胞免受氧化损伤。

此外，人参皂苷还具有抗肿瘤作用，可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散，并诱导肿瘤细胞的凋亡。

此外，人参皂苷还可以增强机体的免疫功能，提高机体抵抗力和抵抗疾病的能力。

此外，人参皂苷还具有抗疲劳作用，可以提高机体的耐力，延缓疲劳的发生。

人参皂苷在临床上具有广泛的应用价值。

首先，人参皂苷被广泛应用于心血管疾病的治疗。

由于其抗氧化和抗炎作用，人参皂苷可以降低血脂和减少血管炎症反应，从而改善心血管疾病的病理过程。

其次，人参皂苷还被应用于神经系统疾病的治疗，包括脑缺血、中风、阿尔茨海默病等。

人参皂苷可以提高脑血液循环，增强脑细胞的代谢能力，改善神经系统疾病的症状。

此外，人参皂苷还可以应用于代谢性疾病的治疗，包括糖尿病、肥胖症等。

人参皂苷可以提高胰岛素的敏感性，减少体重和血糖的升高。

总之，人参皂苷具有多种药理作用，并在临床上具有广泛的应用价值。

人参皂苷的测定方法繁多，各具优缺点，需要根据具体情况进行选择。

人参皂苷Rh_2含量测定方法及药理作用研究现状
李学哲;朴惠顺
【期刊名称】《延边大学医学学报》
【年(卷),期】2009()2
【总页数】4页(P153-156)
【关键词】人参皂甙类;抗肿瘤剂(中药);黑色素瘤;食管癌;前列腺肿瘤
【作者】李学哲;朴惠顺
【作者单位】延边大学附属医院肿瘤内科;延边大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.康艾注射液中间产品人参提取液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法及高效液相指纹图谱研究 [J], 李建英; 李晓彤; 翁红; 王道新; 纪丽岩; 祁宇祥; 王波; 米广明
2.HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rh_2的含量 [J], 丁长江;孟勤;李政;张明恺
3.RP-HPLC测定西洋参叶皂苷碱降解物中20(S)-人参皂苷Rh_2的含量 [J], 李绪文;桂明玉;郑莹;金永日;张寒琦
4.高效液相色谱法测定正泰胶囊中20(R)-人参皂苷Rh_2的含量 [J], 徐飞;赵雪梅;秦桂莲;崔道云
5.人参皂苷Rg_1与人参皂苷Re含量测定方法的研究 [J], 曹泰山;王丹
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