QCM与光学显微镜联用实时定量研究组胺对人脐静脉内皮细胞黏弹性及
- 格式:pdf
- 大小:2.05 MB
- 文档页数:7
doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2023.12.006LncRNA SNHG12调控miR-138-5p/HIF-1α轴改善缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤的研究①魏宗强王琳茹胡文贤张娟子黄贤明李林李强②(青岛大学附属青岛市海慈医院血管外科中心,青岛 266033)中图分类号R289.5 文献标志码 A 文章编号1000-484X(2023)12-2494-07[摘要]目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)调控miR-138-5p/低氧诱导因子-1α(HIF-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。
方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRNA SNHG12过表达组、H/R+miR-138-5p mimics组、H/R+共转染组、H/R+共转染阴性对照组,各转染组分别进行转染处理,除对照组外,其余各组给予5 h缺氧,再进行复氧1 h处理,诱导细胞模型,然后通过CCK-8实验检测各组细胞活力情况;通过流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况,比较各组细胞凋亡率;通过试剂盒测量各组细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)及炎症因子IL-6、IL-17、IL-18水平;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验测定各组细胞miR-138-5p及HIF-1α mRNA表达;通过免疫印迹实验检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及HIF-1α蛋白表达。
结果:与对照组相比,H/R模型组细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞HIF-1α mRNA 和蛋白水平、细胞caspase-9、Bax及HIF-1α蛋白水平升高(P<0.05),细胞活力、miR-138-5p水平降低(P<0.05)。
体外培养人脐静脉内皮细胞的光电镜观察
姚忠祥;蔡文琴
【期刊名称】《四川解剖学杂志》
【年(卷),期】1995(3)2
【摘要】体外培养人脐静脉内皮细胞的光电镜观察姚忠祥,蔡文琴第三军医大学重庆620038Pupnick等在培养微血管内皮细胞时,观察到内皮细胞具有多种不同的形态,并推测其原因可能是它们来源于不同节段的微血管。
本研究取正常人足月产胎儿脐静脉内皮细胞体外培养,第五...
【总页数】1页(P103)
【作者】姚忠祥;蔡文琴
【作者单位】第三军医大学,重庆620038;第三军医大学,重庆620038
【正文语种】中文
【中图分类】R329-33
【相关文献】
1.高糖对体外培养人脐静脉内皮细胞通透性及肌球蛋白轻链磷酸化的影响 [J], 赵晓燕;张金盈;王小芳;李丹花;金强松
2.人脐静脉内皮细胞的体外培养及鉴定 [J], 李曙;徐平;万苏;谢娟娟;张梦莹
3.改良酶消化法体外培养人脐静脉内皮细胞 [J], 张瑛;邹和群;夏学颖
4.人脐静脉内皮细胞体外培养及其相关研究 [J], 张清;张玲玲
5.微波对体外培养视网膜神经细胞损伤的光镜与电镜观察 [J], 刘学东;龚书明;杨瑞华;陈景元;刘秀红;邓中荣
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人脐血管内皮细胞发育进程中心钠素的免疫组化观察
姚忠祥;蔡文琴
【期刊名称】《第三军医大学学报》
【年(卷),期】1995(17)3
【摘要】应用免疫细胞化学(ICC)染色技术,用抗心钠素(ANP)血清对人胚胎发育不同时期的脐带血管进行免疫染色,观察结果:在第14周(月经龄)时脐动静内皮细胞(HUA/VEC)即显阳性反应,并随胎龄增加而略微增强,至第32周时阳性反应明显增强达高峰,维持至出生。
人脐动脉内皮细胞(HUAEC)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)之间存在明显差异。
至于HUA/VEC及ANP是否参与对脐血管舒缩的调节,尚有待进一步实验证实。
【总页数】2页(P237-238)
【关键词】心钠素;免疫细胞化学;内皮细胞;脐带血管
【作者】姚忠祥;蔡文琴
【作者单位】第三军医大学基础部组织胚胎学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R321.5;R392.11
【相关文献】
1.BrdU示踪的恒河猴血管内皮细胞移植替代角膜内皮细胞的免疫组化染色观察[J], 张虹;朱勤;胡竹林
2.甲基莲心碱对LPS诱导人脐血管内皮细胞损伤中NF-KB信号通路及相关因子表
达的影响 [J], 戴谆;宋金春
3.人脐血管内皮细胞中的生物活性肽—免疫组化及原位杂交研究 [J], 蔡文琴;姚忠祥;等
4.人脐血管内皮细胞中几种生物活性肽发育的初步研究 [J], 姚忠祥;李泽桂;等
5.三例人胎心肌心钠素免疫组化的初步观察 [J], 李青水;林云
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
内皮细胞微粒对人脐静脉内皮细胞VCAM-1和ICAM-1表达的影响陆永光;苏强;曾晓聪;严华;黄军章;符春晖【期刊名称】《重庆医科大学学报》【年(卷),期】2011(36)9【摘要】目的:探讨内皮细胞微粒(Endothelial microparticles,EMPs)对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelialcells,HUVECs)血管细胞粘附分子-1(Vascular cellular adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间粘附分子-1(Intercellular adhe-sion molecule 1,ICAM-1)表达的影响。
方法:取生长良好的第4、5代HUVECs,将细胞以1×105个/ml密度接种于5 cm2的培养皿中,待细胞生长近80%融合时进行干预。
按0、1×102、1×103、1×104、1×105个/ml 浓度的EMPs进行分组及刺激,每组12个样本。
在共同培养24 h后收集细胞。
分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测VCAM-1和ICAM-1 mRNA和蛋白的表达。
结果:HUVECs受EMPs刺激,VCAM-1和ICAM-1 mRNA 及蛋白表达显著增加,且EMPs的这种作用呈浓度依赖性增强(均P<0.05)。
结论:EMPs能上调HUVECs VCAM-1和ICAM-1的表达,EMPs不仅是内皮功能障碍的标记物,还能加重内皮功能损害。
【总页数】3页(P1063-1065)【关键词】内皮细胞微粒;脐静脉内皮细胞;血管细胞粘附分子-1;细胞间粘附分子-1【作者】陆永光;苏强;曾晓聪;严华;黄军章;符春晖【作者单位】钦州市第二人民医院心内科;广西医科大学第一附属医院心内科【正文语种】中文【中图分类】R541【相关文献】1.三氧化二砷对人脐静脉内皮细胞凋亡及VCAM-1/ICAM-1表达的影响 [J], 黄杰;宋宇;徐汇川;李凤玲;栾天竹;周立君2.TNF-α对人脐静脉内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响 [J], 王健;黄午阳;郑其升;王兴娜;李春阳3.内皮细胞微粒对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达和NF-κB活性的影响 [J], 陆永光;李浪;符春晖;苏强;严华;黄军章4.MCP-3对人脐静脉内皮细胞表达ICAM-1,VCAM-1、TF/TFPI及其凋亡的影响[J], 陈劲松;张波;潘从泽;任磊;陈韵岱5.3种中药复方血清对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症因子LOX-1、TNF-α、VCAM-1和ICAM-1表达的影响 [J], 姜华;姜玉姬因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
人脐静脉内皮细胞血管紧张素转化酶及血管紧张素转化酶2表达与氧化型低密度脂蛋白的关系周鹏;李志樑;徐春生;严全能;宋旭东;付强;陈文忠【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2008(012)020【摘要】目的:新近研究发现血管紧张素转化酶2与血管紧张素转化酶在功能上相拮抗.采用反转录-聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹方法,观察氧化型低密度脂蛋白对人血管内皮细胞血管紧张素转化酶及血管紧张素转化酶2表达的影响.方法:实验于2007-05/08在南方医科大学附属珠江医院中心实验室完成.①用正常人新鲜血浆制备氧化低密度脂蛋白,人脐静脉内皮细胞株复苏、传代后取生长良好的3~6代用于实验.②实验分为7组:空白对照组加无血清培养基;20,40,80mg/L氧化型低密度脂蛋白组分别与人脐静脉内皮细胞孵育24h;40mg/L氧化型低密度脂蛋白分别与人脐静脉内皮细胞孵育6,12,24h.各组实验重复6次.③提取细胞总RNA及蛋白,应用反转录-聚合酶链反应检测血管紧张素转化酶、血管紧张素转化酶2mRNA表达水平;以蛋白质免疫印迹法检测血管紧张素转化酶、血管紧张素转化酶2蛋白表达水平.结果:①与空白对照组比较,氧化低密度脂蛋白20,40,80mg/L组血管紧张素转化酶mRNA表达增加,血管紧张素转化酶2mRNA表达降低(P<0.01),不同剂量组间差异亦有显著性意义(P均<0.01).40mg/L氧化型低密度脂蛋白6,12,24h组血管紧张素转化酶mRNA表达增加,血管紧张素转化酶2mRNA表达减少(P<0.05),不同时间点间差异亦有显著性意义(P均<0.05).②与空白对照组比较,氧化低密度脂蛋白20,40,80mg/L组血管紧张素转化酶蛋白表达增加,血管紧张素转化酶2蛋白表达减少(P<0.01),不同剂量组间差异亦有显著性意义(P均<0.01).40mg/L氧化型低密度脂蛋白6,12,24h组血管紧张素转化酶蛋白表达增加,血管紧张素转化酶2蛋白表达降低(P<0.05),不同时间点间差异亦有显著性意义(P均<0.05).结论:氧化型低密度脂蛋白可上调血管紧张素转化酶蛋白及基因表达,下调血管紧张素转化酶2蛋白及基因表达,且呈剂量和时间依赖性.【总页数】5页(P3869-3873)【作者】周鹏;李志樑;徐春生;严全能;宋旭东;付强;陈文忠【作者单位】南方医科大学附属珠江医院,心內科,广东省广州市,510280;南方医科大学附属珠江医院,心內科,广东省广州市,510280;南方医科大学附属珠江医院,急诊科,广东省广州市,510280;南方医科大学附属珠江医院,心內科,广东省广州市,510280;南方医科大学附属珠江医院,心內科,广东省广州市,510280;南方医科大学附属珠江医院,心內科,广东省广州市,510280;南方医科大学附属珠江医院,心內科,广东省广州市,510280【正文语种】中文【中图分类】R329.412【相关文献】1.siRNA干扰内源性TM9SF1基因对人脐静脉内皮细胞炎症因子及血管紧张素转化酶1表达的影响 [J], 张国英;杨朵;高娜娜;唐子华;李娜;仝永娟;肖娟2.氧化高密度脂蛋白对培养的人脐静脉内皮细胞血管紧张素转化酶表达的影响 [J], 李晓庆;王秋林;张磊;姜轶3.血管紧张素转化酶Ⅱ与血管紧张素转化酶在胰腺癌组织中的表达水平变化及相互关系 [J], 周琳;张连峰;姚玮艳;赵阿红;袁耀宗4.辛伐他汀抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体的表达 [J], 郝文君;白小涓;杨向红5.氧化型低密度脂蛋白及阿托伐他汀对培养的人脐静脉内皮细胞血管紧张素转化酶2表达的影响 [J], 周鹏;李志樑;徐春生;严全能;陈文忠;范智文因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
烟酸对人脐内皮细胞损伤的保护作用罗舜菁;汪志宇;刘成梅;陈臣;王文飞;姚景宇;高江宇【期刊名称】《南昌大学学报(工科版)》【年(卷),期】2011(033)004【摘要】研究了烟酸对胆固醇处理的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.使用倒置显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定HUVECs存活率.结果表明:随着胆固醇浓度的增加,用MTT比色法测得的吸光度逐渐降低,HUVECs 存活率显著降低(P<0.05).烟酸呈剂量依赖性的显著改善胆固醇诱导所致下降的HUVECs存活率(P<0.05).胆固醇可以诱导内皮细胞损伤,烟酸对胆固醇诱导的人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用.【总页数】3页(P352-354)【作者】罗舜菁;汪志宇;刘成梅;陈臣;王文飞;姚景宇;高江宇【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌330031;南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌330031【正文语种】中文【中图分类】Q255【相关文献】1.天然和加工产生的两种反油酸对人脐动脉内皮细胞损伤的比较研究 [J], 饶欢;徐婷婷;邓泽元;范亚苇;李静2.甲基莲心碱对LPS诱导人脐血管内皮细胞损伤中NF-KB信号通路及相关因子表达的影响 [J], 戴谆;宋金春3.sCD40L诱导人脐静脉内皮细胞损伤对人脐间充质干细胞趋化性的影响 [J], 史丽;赵喜娃;尹洁;李青梅;董晓静4.红花黄色素A通过调控SIRT1基因表达对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用 [J], 王起;邵静;邵清蔚;司丹丹;郝月娇5.硫化烟酸对血管内皮细胞损伤模型的保护作用 [J], 李博;陈钏;罗丽君;欧学兰;周春阳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
奇智方对人脐静脉内皮细胞ICAM-1和ICAM-1mRNA 表达的影响张淑霞【期刊名称】《中西医结合心脑血管病杂志》【年(卷),期】2010(0)2【摘要】目的采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC-304)进行细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及其转录水平(ICAM-1mRNA)表达的离体实验研究,观察奇智方对血管内皮功能的作用.方法应用ELISA方法检测ICAM-1;用原位杂交的方法检测ICAM-1mRNA.结果中药治疗组和阳性对照组与生理盐水组比较,ICAM-1蛋白分子表达均有统计学意义(P<0.01);中药治疗组和阳性对照组均能明显使缺氧/复氧后细胞ICAM-1mRNA下调,与缺氧组比较有统计学意义(P<0.01).结论奇智方抑制缺氧/复氧后血管内皮细胞表达ICAM-1和ICAM-1mRNA,从而保护血管内皮细胞的屏障完整和功能正常,可能是其免疫抑制机理的分子基础之一.【总页数】3页(P207-209)【作者】张淑霞【作者单位】河北省怀来县医院,075400【正文语种】中文【中图分类】R392.5;R289.5【相关文献】1.活血解毒益气方含药血清对人脐静脉内皮细胞分泌ICAM-1、MCP-1的影响 [J], 彭哲;祝光礼;刘昭;行俊柱;王春林2.牙龈卟啉单胞菌脂多糖在高糖条件下对人脐静脉内皮细胞表达ICAM-1的影响[J], 刘奕;王峰;鄂玲玲;温宁3.阿托伐他汀对内皮细胞微粒诱导的人脐静脉内皮细胞ERK、p38MAPK、NF-κB p65蛋白及ICAM-1mRNA 表达的影响 [J], 陆永光;符春晖;严华;陈湘桂;黄军章;陈丽媛4.替格瑞洛对oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响 [J], 刘华;康美尼;王兴华;梁雪;李广平5.焦油和尼古丁对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响 [J], 严政;赖斌;吴贝贝;柳星;李东升;熊晓昉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
p65小干扰 RNA 对人脐静脉内皮细胞再灌注后趋化因子CXCL16表达的影响曾敏;魏欣;李伟;符秀虹;蒙绪卿;陈积雄;王萍【摘要】目的:探讨 p65小干扰 RNA(siRNA)对人脐静脉内皮细胞再灌注损伤后趋化因子 CXCL16表达的调节机制。
方法分4组对人脐静脉内皮细胞进行培养和处理,即对照组(正常培养基培养)、缺血再灌注组(以模拟缺血培养液培养30 min 后换正常培养液再培养4 h)、p65 siRNA 转染组(正常内皮细胞培养基培养+ p65 siRNA 转染)、缺血再灌注+ p65 siRNA 转染组(模拟缺血再灌注+ p65 siRNA 转染)。
观察4组核因子κB p65、CXCL16 mRNA 相对表达量及CXCL16表达水平以及细胞存活率。
结果对照组、p65 siRNA 转染组及缺血再灌注+ p65 siRNA 转染组核因子κB p65、CXCL16 mRNA 相对表达量及 CXCL16表达水平较缺血再灌注组均降低( P <0,05)。
WST -1法测定,p65 siRNA 转染组及缺血再灌注+ p65 siRNA 转染组细胞存活率较缺血再灌注组均增高(P<0,05)。
结论 p65 siRNA 通过沉默 p65,抑制模拟缺血再灌注诱导的 CXCL16表达,有利于细胞生存。
%Objective To investigate the regulation mechanism of CXCL16 under the condition of mimic ischemia reperfusion in human umbilical vein endothelial cells(HUVEC)by utilizing p65 siRNA, Methods HUVEC were divided into 4 groups:control group(HUVEC were cultured with normal medium),mimic ischemia reperfusion group(HUVEC were cultured with mimic ischemic medium for 30 min,then were cultured with normal medium for 4 h),p65 siRNA group(HUVEC were cultured with normal medium,and were transfected with p65 siRNA),mimic ischemia reperfusion + p65 siRNA group (HUVEC were transfected with p65siRNA,48 h later,HUVEC were cultured with mimic ischemia medium), The relative ex-pression quantity of κB p65 and CXCL16 mRNA,the exp ression level of CXCL16 and cell survival rate were investigated, Results The expression quantity of κB p65 and CXCL16 and the expression level of CXCL16 in control group,p65 siRNA group and mimic ischemia reperfusion + p65 siRNA group were significantly lower than those in mimic ischemia reperfusion group( P <0, 05), Meanwhile,by the method of WST - 1 assay,cell survival rate in p65 siRNA group and mimic ischemia reperfusion +p65 siRNA group were significantly higher than that in mimic ischemia reperfusion group(P < 0, 05), Conclusion By silencing p65,p65 siRNA can inhibit mimic ischemic reperfusion - induced expression level ofCXCL16,which brings benefits to the survival of HUVEC.【期刊名称】《中国全科医学》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】4页(P1362-1365)【关键词】RNA,小分子干扰;脐静脉;内皮细胞;再灌注损伤;趋化因子 CXCL16【作者】曾敏;魏欣;李伟;符秀虹;蒙绪卿;陈积雄;王萍【作者单位】570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心;570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心;570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心;570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心;570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心;570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心;570311 海南省海口市,海南省人民医院医疗中心【正文语种】中文【中图分类】R458.8炎症反应是缺血再灌注细胞损伤的重要环节,其中许多黏附因子和趋化因子都有参与。
生长抑素对人脐静脉内皮细胞Ca2+及其膜通道的调控研究姚忠祥;蔡文琴
【期刊名称】《解剖学杂志》
【年(卷),期】2003(026)001
【摘要】目的:观察生长抑素(SOM)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)膜上Ca2+通道及胞浆内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的调控作用.方法:应用共聚焦激光扫描显微术(CLSM)和膜片钳单通道记录技术对体培养HUVEC胞浆内[Ca2+]i、膜上Ca2+通道开放情况进行观察.结果:SOM促使HUVEC胞浆内[Ca2+]i明显升高.胞膜上Ca2+通道的开放出现1~2 min的潜伏期后也开放但其开放概率明显降低.结论:SOM对HUVEC胞浆内[Ca2+]i的调节可能首先通过细胞内储存的Ca2+释放及稍后的细胞膜上Ca2+通道开放,从而达到其调节效应.
【总页数】4页(P47-50)
【作者】姚忠祥;蔡文琴
【作者单位】第三军医大学组织学与胚胎学教研室,重庆,400038;第三军医大学组织学与胚胎学教研室,重庆,400038
【正文语种】中文
【中图分类】R32
【相关文献】
1.神经元膜Ca2+敏感K+通道非线性动力学数学模型的研究 [J], 葛曼玲;郭鸿涌;李玲玲;颜威利
2.灯盏花素对人脐静脉内皮细胞胞内Ca2+水平的调控作用 [J], 潘雪刁;朱邦豪;马丽;刘捷
3.运动康复训练对老年骨骼肌细胞Ca2+通道调控能力的影响 [J], 陈杰
4.血管紧张素(1-7)/Mas受体轴通过调控ATP敏感性钾通道对抗高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤 [J], 梁伟杰;陈君;余盛龙;陈美姬;林佳琼;吴文
5.血管活性肠肽对人脐静脉内皮细胞Ca^(2+)及其膜通道的调控 [J], 姚忠祥;蔡文琴
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。