实验一显微镜的构造及使用方法
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实验一显微镜的构造和使用、植物细胞基本结构一、实验目的1、了解普通光学显微镜的构造和各部分性能,学习和掌握显微镜的使用方法。
2、学习生活细胞观察方法,掌握植物细胞基本结构。
3、掌握细胞主要后含物的种类及鉴别4、学习临时制片方法(斯取法、刮取法)、粉末装片法和生物绘图方法。
二、实验器具与试剂光学显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊子、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、纱布块、吸水纸蒸馏水、稀碘液、苏丹Ⅲ、水合氯醛、稀甘油、20%蔗糖液。
三、实验材料洋葱鳞叶表皮细胞制片、马铃薯块茎、半夏粉末、大黄粉末、黄柏粉末、麻黄粉末。
四、实验内容(一)普通光学显微镜的构造显微镜是研究植物细胞结构、组织特征和器官构造的重要的和不可替代的仪器。
显微镜的种类繁多,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。
电子显微镜结构相对复杂,光学显微镜结构较为简单,基本结构均可分为机械部分和光学系统部分。
1.机械部分:显微镜机械部分是由精密而牢固的零件组成,主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。
(1)镜座:是显微镜的基座,用以支持镜体平衡,其上装有反光镜或照明光源。
(2)镜柱:是镜座上面直立的短柱,连接、支持镜臂及以上的部分。
(3)镜臂:弯曲如臂,上接镜筒、下接镜柱,支持载物台、聚光器和调焦装置。
是取放显微镜时手握的部位。
直筒显微镜镜臂和镜柱连接处有活动关节,可使显微镜在一定范围内后倾,一般不超过30°。
(4)镜筒:一般长160 mm~170 mm。
其上端放置目镜,下端与物镜转换器相连。
双筒斜式的镜筒,两镜筒距离可以根据两眼距离及视力来调节。
(5)物镜转换器:是固着在镜筒下端的圆盘,其上装有不同倍数的物镜。
可以左右自由转动,便于更换物镜。
(6)载物台:放置切片的平台,中央有一个通光孔,旁边装有固定玻片的压夹或标本移动器。
有的显微镜载物台下装有聚光镜。
(7)调焦装置:镜臂两侧有粗、细调焦轮各一对,旋转时可使镜筒上升或下降,以便得到清晰物像,即调焦。
实验一光学显微镜的结构、使用及保养一、目的了解光学显微镜的基本结构和各部分的作用,能正确、熟练地使用显微镜观察植物材料,掌握显微镜的保养措施。
二、用具和材料显微镜、擦镜纸或小绸布、二甲苯、任意一种植物切片或临时装片。
三、方法步骤(一)显微镜的结构:通常使用的生物显微镜,其结构分为机械部分和光学部分,现说明如下:1. 机械部分(1)镜座:即显微镜最下面的马蹄形部分,用以固定和支持镜体。
(2)镜柱:直立于镜座上的短柱,与镜臂相连。
(3)镜臂:取放或移动显微镜时手握的部位,一般呈弓形,也称执手。
(4)倾斜关节:镜柱与镜臂相连的关节,用于调节显微镜的倾斜度,以便于观察。
观察临时装片时,不要倾斜,以防玻片上的水流出,一般观察时,倾斜度不宜超过30°,以免显微镜因倾斜跌倒。
(5)载物台:位于显微镜中部,载标本制片的方形或圆形平台。
中央有一圆孔,既通光孔,光线即由此孔通过,台上两侧有用以固定制片的推进器。
(6)镜筒:为一金属圆筒,连接在镜臂上,下接转换盘。
(7)物镜转换盘:可以任意转动,上面安装有3—4个物镜,使用时根据需要可更换放大倍数不同的接物镜。
(8)焦螺旋:装在镜臂上部两旁,通过转动,调节焦距,有大小两对,大的叫粗准焦螺旋,转动一周可使镜筒升降10mm,小的是细准焦螺旋,每转动一周可使镜筒升降1mm。
2. 光学部分(1)目镜:装于镜筒上端,上面刻有号码,表示放大的倍数。
“5×、16×”可根据需要选择使用。
(2)物镜:安装在转换盘的螺旋孔上,一般有三个物镜:即低倍镜(10×)、高倍镜(40×)、油镜(100×,)物镜下端的镜孔越小,放大的倍数越大。
(3)聚光器:在载物台下,由透镜组成,可以聚集反光镜反射来的光线,照明玻片标本,聚光器下装有光圈,推动其上的小柄可使光圈任意开大或任意缩小,以调节光线强弱。
(4)反光镜:在聚光器下,安在镜臂下端可前后左右随意移动的一个镜片,通过它把光线反射到聚光器上面,凹面反射的光较强。
实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。
2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。
3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。
二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成(图1-1)。
光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1.机械装置镜座(base)和镜臂(arm)镜座位于显微镜底部,呈马蹄形,它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种,活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒(body tube)是由金属制成的圆筒,上接目镜,下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种,单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的,倾斜式镜筒倾斜45°。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置,以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器(no sepiece)为两个金属碟所合成的一个转盘,其上装3—4个物镜,可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台(stage)又称镜台,为方形或圆形的盘,用以载放被检物体,中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹,用以固定标本;有的装有标本推动器,将标本固定后,能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度,能确定标本的位置,便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件,有粗动螺旋(coarse adjustment)即粗调节器和微动螺旋(fine adjustment)即细调节器,利用它们使镜筒或镜台上下移动,当物体在物镜和目镜焦点上时,则得到清晰的图像。
2.光学系统物镜(objective)物镜安装在镜筒下端的转换器上,因接近被观察的物体,故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大,是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
实验一显微镜的构造及使用酵母菌的形态观察一、实验目的1.了解显微镜的构造及使用方法。
2.观察酵母菌的形态。
二、实验原理显微镜是观察微生物的常用工具之一。
它是用来放大细菌、真菌、病毒、单细胞等微生物肉眼无法观察的微小结构的光学仪器。
显微镜的基本构造包括镜头系统、光源、机械系统和目镜系统。
镜头系统包括目镜和物镜,光源是用来照射样本的光源。
机械系统包括支撑和移动的部分,目的是将样本放到光学系统中进行观察。
目镜系统用来放大样本图像并观看。
酵母菌是一种单细胞真菌,营养模式为化学合成型与发酵型。
常见的酵母菌有酿酒酵母、面包酵母等。
它们的大小一般在1-5微米左右,形状呈球形、椭圆形或短棒形。
酵母菌能形成菌丝,但这种情况比较少见。
三、实验方法1.将显微镜移动到桌子上并固定。
2.将目镜放置在顶部的镜头上。
3.调整物镜的位置,使其与样本平齐,同时调整焦距以获得清晰的图像。
在调整过程中需要注意不要接触到样本。
4.将透射光源调整到合适的位置,以达到适当的照射强度。
5.将酵母菌样本涂在载玻片上。
6.将载玻片放到显微镜的机械系统上。
7.观察样本并记录所见的情况。
4.处理数据观察并记录显微镜下看到的酵母菌样本形态及数量。
五、实验结果经过观察,酵母菌呈球形和椭圆形,大小约在1-5微米之间。
本实验观察了显微镜的构造以及使用方法,并在此基础上观察了酵母菌的形态。
酵母菌是一种典型的单细胞真菌,大小约在1-5微米之间,通常呈球形和椭圆形,并且能形成菌丝。
本实验结果表明显微镜是一种重要的工具用于观察微细结构的形态,为后续实验提供了基础。
显微镜的构造和使用实验报告显微镜的构造和使用实验报告引言:显微镜是一种重要的科学工具,它能够让我们看到微小的物体和微观世界。
本实验旨在探索显微镜的构造和使用方法,以便更好地理解显微镜的原理和应用。
一、显微镜的构造显微镜主要由以下几个部分构成:物镜、目镜、光源、调焦机构和台座。
1. 物镜:物镜是显微镜的主要部件,它负责放大被观察物体的图像。
物镜通常有多个镜片组成,每个镜片的放大倍数不同,可以根据需要选择不同的物镜。
2. 目镜:目镜是显微镜的另一个重要部分,它位于物镜的下方,用于放大物镜所形成的物体图像。
目镜通常有一个或多个镜片组成,其放大倍数一般较小。
3. 光源:光源是显微镜的照明部分,它提供光线以照亮被观察的样本。
常见的光源有白炽灯、荧光灯和LED灯等。
在实验中,我们使用了LED灯作为光源。
4. 调焦机构:调焦机构用于调节物镜和目镜的位置,以获得清晰的图像。
常见的调焦机构有粗调焦和细调焦两种,粗调焦用于快速调节焦距,而细调焦则用于微调焦距。
5. 台座:台座是显微镜的支撑部分,它提供稳定的基础,使显微镜能够保持平衡和稳定。
二、显微镜的使用方法1. 准备样本:首先,我们需要准备一份待观察的样本。
样本可以是生物组织、细胞、昆虫等微小的物体。
将样本放置在玻璃片上,并加上一滴显微镜溶液,以便更好地观察。
2. 调整光源:将显微镜放在平稳的台面上,打开光源。
通过调节光源的亮度,使样本能够被适当照亮,但不至于过亮。
3. 调节物镜和目镜:将样本放置在显微镜的物镜下方,并通过调节物镜和目镜的位置,使样本能够被清晰放大。
首先,使用粗调焦将样本大致调焦,然后使用细调焦进行微调,直到获得最清晰的图像。
4. 观察和记录:一旦样本被清晰放大,可以开始观察并记录所见的现象。
可以使用显微镜的目镜上的刻度尺来测量样本的大小,并使用显微镜的调焦机构来调整焦距,以观察样本的不同层面。
5. 清洁和存放:实验结束后,将显微镜上的样本和玻璃片清洁干净,并将显微镜存放在干燥、清洁的地方,以防止灰尘和污垢的积累。
实验一显微镜的构造及使用方法
一、目的要求
1.了解显微镜的构造、性能及成像原理。
2.掌握显微镜的正确适用及维护方法。
二、实验器材
1.显微镜、纱布、绸布
2.酵母菌示教标本
三、普通光学显微镜简介
微生物的最显著的特点就是个体微小,必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。
熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。
光学显微镜包括:明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。
其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜,其它显微镜都是在此基础上发展而来的,基本结构相同,只是在某些部分作了一些改变。
明视野显微镜简称显微镜。
(一)显微镜的构造
普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。
图1-1 显微镜构造
1.目镜
2.镜筒
3. 转换器
4. 物镜
5. 载物台
6. 聚光器
7. 虹彩光圈
8. 聚光镜调节钮9.反光镜10. 底座11. 镜臂12. 标本片移动钮
13. 细调焦旋钮14. 粗调焦旋钮15.电源开关16.光亮调节钮17.光源
1.机械系统:
(1)镜座Base:在显微镜的底部,呈马蹄形、长方形、三角形等。
(2)镜臂Arm:连接镜座和镜筒之间的部分,呈圆弧形,作为移动显微镜时的握持部分。
(3)镜筒Tube:位于镜臂上端的空心圆筒,是光线的通道。
镜筒的上端可插入接目镜,下面可与转换器相连接。
镜筒的长度一般为160mm。
显微镜分为直筒式和斜筒式;
有单筒式的,也有双筒式的。
(4)旋转器Nosepiece:位于镜筒下端,是一个可以旋转的圆盘。
有3~4个孔,用于安
装不同放大倍数的接物镜。
(5) 载物台Stage :是支持被检标本的平台,呈方形或圆形。
中央有孔可透过光线,台
上有用来固定标本的夹子和标本移动器。
(6) 调焦旋钮:包括粗调焦钮Coarse adjustment knob 和细调焦钮Fine adjustment knob ,
是调节载物台或镜筒上下移动的装置。
2. 光学系统
(1) 接物镜Objective lens ,常称为镜头,简称物镜,是显微镜中最重要的部分,由许多
块透镜组成。
其作用是将标本上的待检物进行放大,形成一个倒立的实像,一般显微镜有3~4和物镜,根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。
干燥系物镜包括低倍物镜(4~10x )和高倍物镜(40~45x ),使用时物镜与标本之间的介质是空气;油浸系物镜(90~100x )在使用时,物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质(香柏油)作为介质。
(2) 接目镜Eyepiece lens :通常称为目镜,一般由2~3块透镜组成。
其作用将由物镜所
形成的实像进一步放大,并形成虚像而印入眼帘。
一般显微镜的标准目镜是10x 。
(3) 聚光镜Condenser :位于载物台的下方,由两个或几个透镜组成,其作用是将由光源
来的光线聚成一个锥形光拄。
聚光镜可以通过位于载物台下方的聚光镜调节旋钮进行上下调节,以求得最适光度。
聚光器还俯有虹彩光圈(Iris diapHragm ),此调节锥形光拄的角度和大小,以控制进入物镜的光的量。
(4) 反光镜:反光镜是一个双面镜,一面是平面,另一面是凹面,起着把外来光线变成
平行光线进入聚光镜的作用。
使用内光源的显微镜就无需反光镜。
(5) 光源:日光和灯光均可,以日光较好,其光色和光强都比较容易控制,有的显微镜
采用装在底座内的内光源。
(二)显微镜的成像原理
显微镜的放大作用是由物镜和目镜共同完成的。
标本经物镜放大后,在目镜的焦平面上形成一个倒立实像,再经目镜进一步放大形成一个虚像,被人眼所观察到(图1-3)。
在油镜系中,载玻片与镜头之间多用香柏油作介质。
因香柏油的折射率(n=1.51)与玻璃的折射率(n=1.52)几乎相等,故透过载玻片的光线通过香柏油后,直接进入物镜,而不发生折射。
两组物镜光线通路的区别如图1-4所示
图1-2 物镜的各种标记 1——放大倍数
2——数值口径
3——镜筒长度要求
4——指定盖玻片厚度
图1-3 显微镜成像原理 图1-4物镜光线通路 (三)显微镜的性能
1. 分辨率和数值口径
衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率,显微镜的分辨率(Resolving power )是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力。
它主要取决于物镜的分辨能力,物镜的分辨力是所用光的波长和物镜数值口径的函数。
分辨率用镜头所能分辨出的两点间的最小距离表示,距离越小,分辨能力越好。
可用公式表示:
A
N D .21λ= 物镜的数值口径(Numberical aperture ),简写为(N.A ):表示从聚光镜发出的锥形光柱照射在观察标本上,能被物镜所聚集的量。
可用公式表示:
θsin .n A N =
n ——标本和物镜之间介质的折射率
θ——由光源投射到透镜上的光线和光轴之间的最大夹角
光线投射到物镜的角度越大,数值口径就越大。
如果采用一些高折射率的物质作介质,如使用油镜时采用香柏油作介质,则数值口径增大,从而提高分辩能力。
物镜镜筒上标有数值口径,低倍镜为0.25,高倍镜为0.65,油浸镜为1.25。
这些数值是在其它条件都适宜的情况下的最高值,实际使用时,往往低于所标的值。
2. 放大倍数、焦距和工作距离
显微镜的放大倍数是物镜和目镜放大倍数的乘积。
放大倍数一样时,由于目镜和物镜搭配不同,其分辨率也不同。
一般来说,增加放大倍数应该是尽量用放大倍数高的物镜。
物镜的放大倍数越大,焦距越短,物镜和样品之间的距离(工作距离)便越短。
(四)显微镜的使用指南
1. 观察前的准备:
显微镜的安置:取放显微镜时应一手握住镜臂、一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳。
置显微镜于平整的实验台上,镜座距实验台边缘3~4cm 。
镜检时姿势要端正。
接通电源,根据所用物镜的放大倍数,调节光亮度调节钮、调节虹彩光圈的大小,使视野内的光线均匀、亮度适宜。
2. 显微观察:
(1)接通电源,采用白炽灯为光源时,应在聚光镜下加一蓝色的滤色片,除去黄光。
一般情况下,对于初学者,进行显微观察时应遵从低倍镜到高倍镜再到油浸镜的观察程序,因为低倍镜视野较大,易发现目标及确定检查的位置。
(2)低倍镜观察,将做好的酵母标本片固定在载物台上,用标本夹夹住,移动推进器
使观察对象处在物镜的正下放。
旋转旋转器,将10x物镜调至光路中央。
旋转粗调焦钮将载物台升起,从侧面注视小心调节物镜接近标本片,然后用目镜观察,慢慢降载物台,使标本在视野中初步聚焦,再使用细调节钮调节图像清晰。
通过玻片夹推进器慢慢移动玻片,认真观察标本个部位,找到合适的目的物,仔细观察并记录所观察的结果。
调焦时只应降载物台,以免一时的误操作而损坏镜头。
注意无论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察,以减少眼睛的疲劳,也便于边观察边绘图记录。
(3)高倍镜观察,在低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心,轻轻转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置。
对聚光镜光圈及视野亮度进行适当调节后微调细调节钮使物像清晰,仔细观察并记录。
如果,高倍镜和低倍镜不同焦,则按照低倍镜的调焦方法从新调节焦距。
(4)油浸镜观察,在高倍镜或低倍镜下找到要观察的样品区域,用粗调焦钮先降载物台,然后将油镜转到工作位置。
在待观察的样品区域加一滴香柏油,从侧面注视,用粗调节钮将载物台小心地上升,使油浸镜浸在香柏油并几乎与标本片相接。
将聚光镜升至最高位置并开足光圈。
慢慢地降载物台至视野中出现清晰图像为止,仔细观察并作记录。
3. 显微镜的维护:
(1)观察结束后,先降载物台,取下载玻片。
(2)用擦镜纸分别擦拭物镜和目镜。
(3)用擦镜纸拭去镜头上的油,然后用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹,最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。
(4)清洁显微镜的金属部件。
(5)将各部分还原,将物镜转成“八”字形,同时把聚光镜降下,以免物镜和聚光镜发生碰撞危险。
(6)把显微镜放回原处。
四、实验报告
1.根据讲义报告,对照实物,熟悉显微镜的构造。
2.按显微镜的使用方法,分别用低倍镜和高倍镜对酵母细胞示教标本进行观察。
3.哪个物镜的工作距离最短?
4.有哪些部件可以调节视野中光的强弱?
5.有哪些方法可以提高显微镜的分辨率?
6.为什么在用高倍镜和油镜观察标本之前要先用低倍镜进行观察。