重组人内皮抑制素抑制血管内皮细胞迁移研究
发表时间：2009-06-05T14:04:42.013Z 来源：《中外健康文摘》2009年1月第1期供稿作者：张海青
[导读] 癌症是危害人类健康的重大疾病，为继心脑血管疾病后的我国第二大疾病。
【摘要】获得rhEndostatin后，我们从体外研究其生物学活性并对它进行客观评价。在体外，rhEndostatin对内皮细胞HMEC、HUVEC 迁移都有明显的抑制作用。
【关键词】重组人内皮抑制素酵母抑制作用
癌症是危害人类健康的重大疾病，为继心脑血管疾病后的我国第二大疾病。目前治疗癌症的方法放疗、化疗、手术对患者毒副作用比较大，不能改善生存条件，因而研究开发有效的、毒性低的新抗癌药势在必行。以往肿瘤治疗均以肿瘤细胞为靶，但肿瘤细胞基因具有不稳定性，易突变，因此对化疗药物容易产生耐药性，常招致治疗失败。RhEndostatin作为血管抑制剂是以血管内皮细胞为靶向，内皮细胞具有相对稳定性，不易产生耐药性，因而抗血管生成剂必将在治疗肿瘤方面有广阔的前景。本文从体外初步研究rhEndostatin的体外生物学活性并对它进行客观评价，为将来的人体临床实验奠定了理论基础。
应用细胞株进行药物筛选和评价是新药开发研究的一个重要手段。我们将通过rhEndostatin对迁移行为的影响来评价其体外生物学活性。我们选用具有代表性的2种血管内皮细胞来进行 rhEndostatin体外生物学活性研究。它们的名称、类别、种属、类型、培养基、特征如下表1：
表1. 细胞介绍
Table 1. Cell introduction
内皮 HMEC 血管内皮细胞人源贴壁 DMEM +10%FBS 传代
细胞 HUVEC 脐静脉内皮细胞人源贴壁 ECM +5%FBS+ECGS 原代
1 实验原理
内皮细胞有迁移特性，在迁移膜上表面的内皮细胞可以通过迁移膜上8 μm的小孔迁移到迁移膜下表面并贴壁生长。文献报道血管抑制剂药物——rhEndostatin有抑制内皮细胞迁移的作用。去除迁移膜上表面的细胞，通过固定染色可以在显微镜下数出已迁移膜下表面的细胞。根据rhEndostatin抑制迁移细胞数量的多少来评价其生物学活性。
2 试剂与材料
细胞培养基：高糖DMEM 培养基，购自美国GIBCO BRL公司产品；ECM、FBS、ECGS、P/O Solution，均购自美国Sciencell公司；
图5 rhEndostatin抑制HMEC和HUVEC显微镜下观察照片
Fig.5 Effect of rhEndostatin on HMEC and HUVEC migration
A：HMEC（NS）；B：HMEC（1000μg/ml）；C：HUVEC （NS）；D：HUVEC（1000μg/ml）
5 小结
EC50为160.8μg/ml；对内皮细胞HMEC、HUVEC迁移都有明显的抑制作用，其EC50分别是10.5、1.7μg/ml，二者有显著差异
（P<0.01）。
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