生化分析仪的校准

自动生化分析仪的使用、校准和维护卫生部检验中心张传宝第一节概述临床实验室检验操作经历了手工操作、半自动分析和自动分析过程。

目前，自动生化分析仪以高新技术为基础，以高准确性、精密度、灵活性和高效率为特点，在现代临床实验室中承担大部分的常规工作，成为实验室特别是大、中型实验室必备的检验仪器。

一自动生化分析仪的基本结构及工作原理按照反映装臵的结构，自动生化分析仪主要分为流动式、分立式、袋式及干化学自动生化分析仪。

其中，分立式自动生化分析仪应用最广，参加卫生部临床检验中心全国临床化学室间质量评价的实验室，绝大多数都使用该类自动生化分析仪。

干化学自动生化分析仪由于其方便快捷的优点，目前多用于急诊生化项目的检测。

二典型分立式自动生化分析仪的基本结构（一）样品系统样本包括校准品、质控品和病人样品。

系统一般由样品装载、输送和分配等装臵组成。

样品装载和输送的常见类型有：1 品盘式进样样品放臵在圆形的样本盘中，样本盘为单圈或者多圈，在运行中与分配机械臂配合转动，完成样本分配。

样本盘可以是整体，如日立7170型自动生化分析仪的样本盘。

有的采用更换式样品盘，分工作和待命区，其中放臵多个弧形样本架座转载台，仪器在测定中自动纺织更换，如贝克曼CX9型自动生化分析仪。

有的样品盘与试剂转盘甚至反应转盘相套和，部分小型自动生化分析仪采用该模式。

2传动带式或轨道式进样样本架为单排，通常每个可以容纳10个样品。

通过传送带，将样本架依次送到取样位臵，再由样品分配臂采样。

如奥林帕斯Au 640型自动生化分析仪。

3链式进样试管固定排列在循环的传动链上，水平转动到采样位臵，有的仪器可随后清洗试管。

目前多数仪器对质控品和校准品设臵了独立冷藏舱，有助于保持它们的稳定。

分配加样装臵大都由注射器、步进马达或者传动泵、加样臂和样品探针等组成。

一般加样系统能准确到0.1ul的体积。

（二）试剂系统一般由试剂储放和分配加液装臵组成。

试剂舱常与试剂转盘结合在一起。

全自动生化分析仪校准规范全自动生化分析仪校准规范(湿式)全自动生化分析仪是临床诊断的重要手段之一 ,其检测结果是否准确对临床疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。

在仪器检测结果精密度良好的前提下，仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤，为此结合国内的相关标准的基础上，就全自动生化分析仪校准的基本要求提出如下建议。

1杂散光的试验方法1.1设定两个单试剂项目，波长设为340nm;1.2设定上述项目的试剂位，分别以蒸馏水和亚硝酸钠标称溶液(50g/L)为试剂和样本，每个项目重复测定5测试;1.3查看反应曲线或反应数据，以最后一点的吸光度作为所测定溶液的吸光度，共得到5个蒸馏水和5个亚硝酸钠标称溶液的吸光度;1.4计算最小的亚硝酸钠溶液吸光度与最大的蒸馏水溶液的吸光度的差值，为杂散光。

1.5应符合标准的要求;当测定波长为340nm时，杂散光应不大于0.5%(或吸光度不小于2.3)。

2吸光度线性范围的试验方法2.1以340nm吸光度不低于2.0(以蒸馏水为空白)的重铬酸钾溶液为原液，用蒸馏水稀释出相对浓度分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9和10(原液)的系列溶液;2.2设定一个单试剂项目，波长为340nm，试剂和样本均为待测溶液;通过反应曲线或反应数据查找试剂空白段的吸光度;2.3按照浓度由低到高的顺序，每个浓度重复测定2次;2.4以相对浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，画出散点图;2.5用最小二乘法对所有数据进行线性拟合，按照公式(1)、(2)和(3)计算每一个点的相对偏倚;相对偏倚=100*(A-(a+b*C))/(a+b*C) (1)式中:A为实际测定的吸光度，a为线性拟合的截距，b为线性拟合的斜率。

22b=(nΣA*C-ΣAΣC)/( nΣC-(ΣC)) (2)a=(ΣA/n)-b*(ΣC)/n (3)式中:A为吸光度，C为相对浓度，n为总的测定点数。

2.6应符合标准的要求:线性范围不小于2.0，各测定值的相对偏移不大于?5,。

生化分析仪校正系数计算生化分析仪校正系数计算是为了保证分析结果的准确性和可靠性，其目的是将测得的分析值与标准值进行比较，并进行修正。

校正系数是指校正样品测定结果与其真实值之间的关系，其计算通常包括线性回归、光学密度校正、浓度校正等多种方法。

一、线性回归法线性回归法是较为常用的校正计算方法，其基本原理是根据已知浓度的标准样品测量结果与其真实浓度之间的关系，建立测量值与浓度之间的线性回归方程，从而推算出未知样品的浓度值。

具体步骤如下：1.收集一组已知浓度的标准样品，并使用生化分析仪进行测量，记录相应的测量值。

2. 根据测量值和标准样品的真实浓度，建立测量值与浓度之间的线性回归方程。

常见的回归方程可以是一次线性方程：y = kx + b，其中y 为测量值，x为浓度，k和b为回归系数。

3.使用建立的线性回归方程，将未知样品的测量值代入方程中，得到未知样品的浓度。

二、光学密度校正法光学密度校正法常用于酶标仪等直读型生化分析仪器的校正计算。

其基本原理是根据标准样品的光学密度与其浓度之间的关系，建立测量值与光学密度之间的线性回归方程，从而计算出未知样品的浓度值。

具体步骤如下：1.收集一组已知浓度的标准样品，并使用生化分析仪进行测量，记录相应的光学密度值。

2. 根据光学密度值和标准样品的真实浓度，建立测量值与光学密度之间的线性回归方程。

常见的回归方程可以是一次线性方程：y = kx + b，其中y为测量值，x为光学密度，k和b为回归系数。

3.使用建立的线性回归方程，将未知样品的光学密度值代入方程中，得到未知样品的浓度。

三、浓度校正法浓度校正法适用于一些无法直接测量样品浓度的情况，例如一些物质的浓度无法直接通过光学密度或其他参数来测定。

其基本原理是通过对标准样品的浓度进行合适的稀释，使其在可以测量范围内，然后测量其浓度值。

根据已知稀释倍数和测量值，可以计算出未稀释样品的浓度。

具体步骤如下：1.收集一组已知浓度的标准样品，并进行适当的稀释。

生化分析仪器校准方法说明书一、引言生化分析仪器是一种用来测量生物体内化学成分的仪器，广泛应用于医疗、生物科学研究、环境监测等领域。

为了确保生化分析仪器的准确性和可靠性，校准是至关重要的环节。

本说明书将详细介绍生化分析仪器的校准方法，以确保用户能正确进行操作。

二、校准前准备在进行生化分析仪器的校准之前，需要进行以下准备工作：1. 校准仪器选择根据需要校准的参数和指标，选择合适的校准仪器。

确保校准仪器的准确度和稳定性。

2. 校准试剂准备准备好所需的校准试剂，并按照其储存条件储存。

确保校准试剂的有效期和质量。

3. 校准环境设置选择适宜的环境来进行校准，确保温度、湿度等条件符合要求。

避免有干扰物质存在的环境，保证校准的准确性。

三、校准步骤根据生化分析仪器的不同类型和参数，校准步骤会有所差异。

在进行校准之前，务必仔细阅读生化分析仪器的操作手册，了解校准步骤和注意事项。

以下是一般的校准步骤：1. 校准前系统检查打开生化分析仪器，检查仪器的电源、连接线路等是否正常。

确保仪器处于正常工作状态。

2. 校准前准备校准试剂根据需要进行稀释，按照仪器的说明设置校准参数。

确保试剂和仪器配套正确。

3. 校准样品准备准备校准样品，可以是标准物质或已知浓度的样品。

根据仪器的要求，制备一系列浓度不同的校准样品。

4. 校准曲线绘制使用校准样品进行测量，并记录各个浓度下的信号强度。

根据信号强度和浓度的关系，绘制校准曲线。

5. 校准参数设定根据校准曲线，确定仪器测量信号与样品浓度之间的关系，并进行校准参数设定。

确保仪器能够准确计算出未知样品的浓度。

6. 片分校准对于分析仪器中的不同部件，如电极和滤波片等，需要进行片分校准。

按照仪器的要求，调整和校准各个部件，确保其准确性。

7. 质控样品校准使用质控样品对仪器进行校准，以验证仪器的准确性和稳定性。

记录校准结果，并进行数据分析。

四、校准结果与记录校准完成后，需要对校准结果进行记录和管理。

以下是记录校准结果的一些建议：1. 校准日期和时间记录校准的日期和时间，并确保校准的频率符合实验需求和相关规定。

一、仪器校准序1.1 仪器光路系统经过大型保养或仪器更换重要部件。

1.2 挪动仪器的安装地点。

1.3 更换不同品牌的试剂。

1.4 更换试剂批号。

1.5 室内质控失控。

二、校准物的准备2.1 尽量购买仪器和试剂配套的校准物。

若厂家无配套校准物，可以购买一种质量好、有效期长的冻质控品，通过比对实验确定质控品的靶值来作为仪器校准品的浓度值。

校准物要按厂家的要求进行保存。

使用校准物见后表。

2.2 在进行校准前，按厂家要求复溶冻干品。

如果一次用不完，可以分装成小瓶，放-20℃冻存，以后每次复溶一瓶。

分装冷冻保存的校准品尽量在两周类使用。

三、校准参数设置3.1 在编辑各项目的参数是，已经在Utilitv-Application-Calib 菜单中定义好了定标类型和几点定标。

因此在对个项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。

3.2进入Calibration-Status菜单，用鼠标选择P1或P2模块上需要定标的项目，根据需要点单点定标（BLANK键）或（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），在选择其他项目进行相应选择，最后点SAEVE，将定标品放入在Calibration-Calibrator中定义好的位置（定义位置见后表），点Start,再点Start，仪器开始定标。

3.3在Calibration-Status菜单中看定标结果，点Calibration-Result键看定标结果点Reaction Monitor键看每个定标品的反应曲线。

点Reaction Information查看定标信息。

四、校准的有效性检查通过测定室内质控来判断和分析校准结果是否有效。

如果室内结果在控（要求在2SD）内，说明校准成功。

否则，必需分析原因。

五、校准失败的处理首先分析、确认并记录校准失败原因，按下列步骤排除异常情况后，再校准。

a)检查试剂：试剂状态（颜色、沉淀物等）、批号、有效期、保存条件等；b)室内质控物：复溶状态、保存时间、保存条件及有效期等；c)校准品：复溶状态、保存时间、保存条件及有效期等；d)仪器原因：光路（灯泡寿命）比色杯、水浴池以及保养情况，必要时联系厂家进行仪器维护保养。