校准生化分析仪的注意事项

自动生化分析仪的使用、校准和维护卫生部检验中心张传宝第一节概述临床实验室检验操作经历了手工操作、半自动分析和自动分析过程。

目前，自动生化分析仪以高新技术为基础，以高准确性、精密度、灵活性和高效率为特点，在现代临床实验室中承担大部分的常规工作，成为实验室特别是大、中型实验室必备的检验仪器。

一自动生化分析仪的基本结构及工作原理按照反映装臵的结构，自动生化分析仪主要分为流动式、分立式、袋式及干化学自动生化分析仪。

其中，分立式自动生化分析仪应用最广，参加卫生部临床检验中心全国临床化学室间质量评价的实验室，绝大多数都使用该类自动生化分析仪。

干化学自动生化分析仪由于其方便快捷的优点，目前多用于急诊生化项目的检测。

二典型分立式自动生化分析仪的基本结构（一）样品系统样本包括校准品、质控品和病人样品。

系统一般由样品装载、输送和分配等装臵组成。

样品装载和输送的常见类型有：1 品盘式进样样品放臵在圆形的样本盘中，样本盘为单圈或者多圈，在运行中与分配机械臂配合转动，完成样本分配。

样本盘可以是整体，如日立7170型自动生化分析仪的样本盘。

有的采用更换式样品盘，分工作和待命区，其中放臵多个弧形样本架座转载台，仪器在测定中自动纺织更换，如贝克曼CX9型自动生化分析仪。

有的样品盘与试剂转盘甚至反应转盘相套和，部分小型自动生化分析仪采用该模式。

2传动带式或轨道式进样样本架为单排，通常每个可以容纳10个样品。

通过传送带，将样本架依次送到取样位臵，再由样品分配臂采样。

如奥林帕斯Au 640型自动生化分析仪。

3链式进样试管固定排列在循环的传动链上，水平转动到采样位臵，有的仪器可随后清洗试管。

目前多数仪器对质控品和校准品设臵了独立冷藏舱，有助于保持它们的稳定。

分配加样装臵大都由注射器、步进马达或者传动泵、加样臂和样品探针等组成。

一般加样系统能准确到0.1ul的体积。

（二）试剂系统一般由试剂储放和分配加液装臵组成。

试剂舱常与试剂转盘结合在一起。

全自动生化分析仪使用及维护标准操作规程1、开机前检查首先查看实验室温度湿度是否满足全自动生化分析仪使用条件、检查水源和水管连接、电源、通讯线和电源线连接、打印纸、废液桶、废液至下水道的连接、针杆、稀释/强化清洗剂余量。

1.1调整实验室温度湿度符合全自动生化分析仪使用条件。

1.2可能添加强化清洗剂和（或）清空废液桶。

注意：每天开始测试前，请将试剂盘盖上的防冷凝水塞子取下；否则，可能导致机械复位失败，采样针被撞弯。

测试完成后，再塞好冷凝塞子。

2、开机2.1手动开机2.1.1按下列顺序依次打开：分析部主电源开关、分析部电源开关、打印机、操作部显示器和主机电潮。

2.1.2登录Windows操作系统后，自动启动操作软件。

在登录窗口输入用户名和密码，点击确定。

2.2自动开机2.2.1选择应用>系统设置，点击仪器设置F1。

2.2.2选择休眠/开机设置>定时开机设置。

2.2.3设置一周内自动开机的日子和时间，然后点击设置。

2.2.4当达到设定的日子和时间后，仪器和操作软件自动启动。

在登录窗口输入用户名和密码，点击确定。

3、确队仪器状态确认系统状态（打印机状态、ISE模块状态和LIS连接状态）、故障/报警状态、试剂/校准状态、维护报警状态，以及子系统状态。

4、准备试剂（生化试剂及预处理液）4.1手动装载4.1.1选择试剂>试剂/校准或试剂>试剂盘状态，点击试剂装载F1,手动输入试剂信息。

4.1.2在试剂/校准界面点击打印F7打印试剂列表。

4.1.3将试剂放在试剂盘设定的位置上。

4.2自动装载：将贴有条码标签的试剂或预处理液放在试剂盘的空闲位置上，关闭试剂盘盖。

点击装载完成后，系统自动扫描试剂位，并获取试剂信息。

4.3特殊试剂选择试剂>试剂/校准，选择ISE试剂、ISE清洗剂、稀释清洗剂、针清洗剂、生理盐水，点击试剂装载F1,输入试剂信息，然后将试剂装载到以下位置：ISE试剂：分析部左侧ISE模块安装位ISE清洗剂：样本盘内圈D1位置稀释清洗剂：分析部样本针清洗剂：样本盘D2位置试剂针清洗剂：试剂盘D位置生理盐水：样本盘W位置、试剂盘W位置5、校准测试5.1选择试剂>试剂/校准，选择需要校准的项目，点击校准申请F5。

全自动生化分析仪校准规范全自动生化分析仪校准规范(湿式)全自动生化分析仪是临床诊断的重要手段之一 ,其检测结果是否准确对临床疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。

在仪器检测结果精密度良好的前提下，仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤，为此结合国内的相关标准的基础上，就全自动生化分析仪校准的基本要求提出如下建议。

1杂散光的试验方法1.1设定两个单试剂项目，波长设为340nm;1.2设定上述项目的试剂位，分别以蒸馏水和亚硝酸钠标称溶液(50g/L)为试剂和样本，每个项目重复测定5测试;1.3查看反应曲线或反应数据，以最后一点的吸光度作为所测定溶液的吸光度，共得到5个蒸馏水和5个亚硝酸钠标称溶液的吸光度;1.4计算最小的亚硝酸钠溶液吸光度与最大的蒸馏水溶液的吸光度的差值，为杂散光。

1.5应符合标准的要求;当测定波长为340nm时，杂散光应不大于0.5%(或吸光度不小于2.3)。

2吸光度线性范围的试验方法2.1以340nm吸光度不低于2.0(以蒸馏水为空白)的重铬酸钾溶液为原液，用蒸馏水稀释出相对浓度分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9和10(原液)的系列溶液;2.2设定一个单试剂项目，波长为340nm，试剂和样本均为待测溶液;通过反应曲线或反应数据查找试剂空白段的吸光度;2.3按照浓度由低到高的顺序，每个浓度重复测定2次;2.4以相对浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，画出散点图;2.5用最小二乘法对所有数据进行线性拟合，按照公式(1)、(2)和(3)计算每一个点的相对偏倚;相对偏倚=100*(A-(a+b*C))/(a+b*C) (1)式中:A为实际测定的吸光度，a为线性拟合的截距，b为线性拟合的斜率。

22b=(nΣA*C-ΣAΣC)/( nΣC-(ΣC)) (2)a=(ΣA/n)-b*(ΣC)/n (3)式中:A为吸光度，C为相对浓度，n为总的测定点数。

2.6应符合标准的要求:线性范围不小于2.0，各测定值的相对偏移不大于?5,。

一、仪器校准序1.1 仪器光路系统经过大型保养或仪器更换重要部件。

1.2 挪动仪器的安装地点。

1.3 更换不同品牌的试剂。

1.4 更换试剂批号。

1.5 室内质控失控。

二、校准物的准备2.1 尽量购买仪器和试剂配套的校准物。

若厂家无配套校准物，可以购买一种质量好、有效期长的冻质控品，通过比对实验确定质控品的靶值来作为仪器校准品的浓度值。

校准物要按厂家的要求进行保存。

使用校准物见后表。

2.2 在进行校准前，按厂家要求复溶冻干品。

如果一次用不完，可以分装成小瓶，放-20℃冻存，以后每次复溶一瓶。

分装冷冻保存的校准品尽量在两周类使用。

三、校准参数设置3.1 在编辑各项目的参数是，已经在Utilitv-Application-Calib 菜单中定义好了定标类型和几点定标。

因此在对个项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。

3.2进入Calibration-Status菜单，用鼠标选择P1或P2模块上需要定标的项目，根据需要点单点定标（BLANK键）或（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），在选择其他项目进行相应选择，最后点SAEVE，将定标品放入在Calibration-Calibrator中定义好的位置（定义位置见后表），点Start,再点Start，仪器开始定标。

3.3在Calibration-Status菜单中看定标结果，点Calibration-Result键看定标结果点Reaction Monitor键看每个定标品的反应曲线。

点Reaction Information查看定标信息。

四、校准的有效性检查通过测定室内质控来判断和分析校准结果是否有效。

如果室内结果在控（要求在2SD）内，说明校准成功。

否则，必需分析原因。

五、校准失败的处理首先分析、确认并记录校准失败原因，按下列步骤排除异常情况后，再校准。

a)检查试剂：试剂状态（颜色、沉淀物等）、批号、有效期、保存条件等；b)室内质控物：复溶状态、保存时间、保存条件及有效期等；c)校准品：复溶状态、保存时间、保存条件及有效期等；d)仪器原因：光路（灯泡寿命）比色杯、水浴池以及保养情况，必要时联系厂家进行仪器维护保养。

生化分析仪操作规程《生化分析仪操作规程》一、操作前准备：1. 确保生化分析仪处于正常工作状态，所有仪器仪表显示正常；2. 仪器所需试剂和标准品准备齐全，并检查试剂和标准品的保质期；3. 准备所需的生化分析仪操作手册和相关资料；4. 确认样本标记准确无误，样本标本准备妥当。

二、开机操作：1. 按照生化分析仪操作手册中的指引，按照顺序打开主机、仪器电源和计算机；2. 等待生化分析仪自检完成，确保各功能正常后，进入下一步操作。

三、样本处理：1. 将样本放入样本架中，按照操作手册指引的样本处理方法进行操作；2. 选择相应的测试项目，确认样本编号与测试项目一致，无误后确认开始测试。

四、数据记录与分析：1. 根据测试项目，选择对应的分析方法和参数；2. 开始测试后，及时记录测试时间和各项数据；3. 确认测试结果准确无误后，保存数据并进行分析。

五、仪器关机：1. 测试完成后，按照操作手册指引，关闭生化分析仪；2. 关闭计算机和其他辅助设备；3. 清理生化分析仪和周围环境，做好仪器维护工作。

六、操作记录与交接：1. 完成所有操作后，及时填写操作记录，将其中重要的细节和数据进行归档保存；2. 如有交接工作，将操作手册和相关资料整理妥当，准确交接给下一位负责人。

七、安全注意事项：1. 在操作生化分析仪时，务必遵循安全操作规程，避免发生事故；2. 定期进行生化分析仪的维护和保养，确保仪器长期正常工作；3. 在任何情况下，严格遵守操作手册和相关规定，确保测试结果的准确性和可靠性。

以上即是关于《生化分析仪操作规程》的相关内容，希望能对使用生化分析仪的工作人员提供一些参考和帮助。

目前我国县级以上包括县医院均配置有全自动生化分析仪，甚至沿海县区的中心卫生院也配备了，绝大部分为自建检测系统。

问及校准他们会拿出来的是K值记录，问及K值怎么得来的？都说用一个校准品的标示值来定标，K值自动显示。

把一点定标作为校准对待，这样做对吗？另一方面，使用校准品也有问题，这些都值得深思。

一、校准与定标有无区别？校准与定标均来自英文“Calibrate”一词，似乎没有什么区别。

让我们首先复习一下校准的定义和内涵。

我们查阅和温习了《临床实验室质量控制（QC）》的要求，上面对“校准”是这样描述的：“在一定条件下的一系列操作来确定检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一物质，或者参考物质代表的值，与相应标准所认识量之间的关系。

”接下来必需做“校准验证”，“就是要求按标本方式对校准品进步分析，以检查并证实仪器、试剂盒或检验系统的检验结果在规定的报告范围内保持稳定。

”这才是规范化的校准过程。

同时文件指出自己建立的检测系统必须建立校准方法：①选择合适的校（标）准品，包括校（标）准品的数目、类型和浓度；②如有可能，校（标）准品应溯源到参考方法和或参考物质；③确定校准的频度。

同时建立校准验证方法：①如有可能，方法应追溯到参考方法或己知值的参考品；②确定校（标）准品的数目类型和浓度，校准验证的接受限，以及校准验证的频度；③确定检验诘的报告范围，确定时必须包括一个最小值，中间值和此范围的上限的最大值。

同时还规定六个月以及有下列情况发生时，进行一次校验，如仪器或检测系统进行过一次大的预防性维护或者更换了重要部件；质控反映出异常趋势或偏移，或者超出了实验室规定的接受限，采取一般性纠正措施后，不能识别和纠正问题时。

最后特别强调所有进行过的校准和校准验证工作时必须记录并写成文件。

冯仁丰教授在《CLIA’88更新规则介绍》报告中也论及校准和校准验证(确认)：“要求校准的项目，你必须继续按照厂商要求，进行校准和校准确认(验证)。