人参首乌胶囊中人参皂苷Rg1- sub-的含量测定

现代食品XIANDAISHIPIN 219/分析检测Analysis and Testing doi:10.16736/41-1434/ts.2020.13.071人参食品中6种人参皂苷含量测定研究Study on Determination of Six Ginsenosides in Panax ginseng C. A. Mey Foods◎ 闫向竹，赵宏宇，刘恬佳（东北师范大学人文学院，吉林 长春 130117）Yan Xiangzhu, Zhao Hongyu, Liu Tianjia (College of Humanities & Sciences of Northeast Normal University, Changchun 130117, China)摘 要：目的：建立同时测定人参食品中Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 及Rg 16种人参皂苷成分含量的方法，为人参食品的质量控制提供依据。

方法：采用超高效液相色谱法，使用Supelco Discovery C 18色谱柱（5 cm ×3.0 mm ，2.7 μm ），以乙腈（A ）-水（B ）为流动相，梯度洗脱，流速0.4 mL·min -1，柱温30 ℃，波长为203 nm 。

结果：采用所建立的方法，6个皂苷成分分离度良好，平均加样回收率为97.01%～99.74%，符合定量分析要求。

3批人参食品中人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 及Rg 1平均含量分别为2.34、5.22、4.24、2.34、2.45 mg·g -1和1.52 mg·g -1。

结论：本方法重复性良好，准确度高，可应用于人参食品的质量控制。

关键词：人参食品；人参皂苷；含量测定Abstract ：Objective: To establish a method for simultaneous determination of six components of Rb1, Rb 2, Rc, Rd, Re and Rg 1 in Panax ginseng foods, and to provide a basis for the establishment of quality standards. Methods: UPLCmethod was used, the separation was performed on Supelco Discovery C 18 column (5 cm ×3.0 mm, 2.7 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile-water solution with gradient elution at a flow rate of 0.4 mL ·min -1. The column temperature was 30 ℃, and the detection wavelength was 203 nm. Results: The six ginsenosides were well separated the average recovery rates were 97.01%～99.74% , which met the requirements of quantitative analysis. The content ranges of Rb 1, Rb 2, Rc, Rd, Re and Rg 1 in 3 samples were .2.34, 5.22, 4.24, 2.34, 2.45 mg ·g -1 and 1.52 mg ·g -1. Conclusions: The established analytical method is suitable for the quality control and evaluation of Panax ginseng foods.Key words：Panax ginseng C. A. Mey foods; Ginsenosides; Determination 中图分类号：TS213.22人参为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey ）的干燥根和根茎，首载于《神农本草经》。

HPLC法测定人参须中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1的含量周兰【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2009(018)003【摘要】目的:用HPLC对人参须中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1进行测定.方法:采用依利C18色谱柱,流动相:乙腈(A)-水(B).梯度洗脱(0～35min,19%A;35-55min,19%A→29%A;55～70min,29%A;70～100min,29%A→40%A;);流速:1.0ml·min-1;检测波长203 nm;柱温:30℃.结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.1433～1.2895μg、0.4056～3.6504μg和0.6132～5.5188μg,相关系数分别为0.9995、0.9998和0.9996,平均加样回收率(n=6)分别为98.65%、99.24%和101.01%,RSD分别为1.96%、1.45%和1.58%.结论:该法准确,简便,快速,灵敏度高,重现性好.适合于人参及人参须的含量测定.【总页数】2页(P1-2)【作者】周兰【作者单位】贵州省药品检验所,贵州,贵阳,550004【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC测定温阳振衰颗粒中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量[J], 杨磊;张曼华;蔡虎志;石继连2.HPLC法测定含三七类保健食品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 张治军;钟名诚;黄秋华3.HPLC法测定通心络颗粒剂中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量 [J], 王传;刑蓉;王斌4.HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 李岚;陈华5.HPLC法测定活血通络片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量[J], 张松涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一、实验目的本研究旨在通过实验方法提取人参皂苷，并对其活性进行初步探究，以期为人参皂苷的应用提供科学依据。

二、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）人参：新鲜五加科植物人参根，产地吉林。

（2）试剂：甲醇、氯仿、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。

（3）仪器：超声波清洗器、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、紫外分光光度计、分析天平等。

2. 实验方法：（1）人参皂苷的提取：将人参根洗净、切片，用甲醇超声提取，提取液经旋转蒸发仪浓缩，得到人参皂苷粗提物。

（2）人参皂苷的鉴定：采用高效液相色谱法对人参皂苷进行鉴定。

（3）人参皂苷的活性研究：①抗氧化活性：采用DPPH自由基清除法检测人参皂苷的抗氧化活性。

②抗炎活性：采用小鼠耳肿胀法检测人参皂苷的抗炎活性。

③抗肿瘤活性：采用MTT法检测人参皂苷的抗肿瘤活性。

三、实验结果与分析1. 人参皂苷的提取通过超声波辅助提取法，从人参根中成功提取出人参皂苷粗提物。

经过旋转蒸发仪浓缩，得到人参皂苷的纯度较高。

2. 人参皂苷的鉴定采用高效液相色谱法对人参皂苷进行鉴定，结果显示，提取物中主要含有人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Rc等单体皂苷。

3. 人参皂苷的活性研究（1）抗氧化活性：采用DPPH自由基清除法检测人参皂苷的抗氧化活性，结果显示，人参皂苷具有显著的自由基清除作用，IC50值为（0.6±0.1）mg/mL。

（2）抗炎活性：采用小鼠耳肿胀法检测人参皂苷的抗炎活性，结果显示，人参皂苷具有显著的抗炎作用，耳肿胀抑制率为（75.3±2.5）%。

（3）抗肿瘤活性：采用MTT法检测人参皂苷的抗肿瘤活性，结果显示，人参皂苷对肝癌细胞HepG2和肺癌细胞A549具有显著的抑制作用，IC50值分别为（10.5±0.8）μg/mL和（15.2±1.0）μg/mL。

四、结论1. 本研究采用超声波辅助提取法成功从人参根中提取出人参皂苷，并对其进行了鉴定。

2. 人参皂苷具有显著的抗氧化、抗炎和抗肿瘤活性，为人参皂苷的应用提供了科学依据。

高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量皂苷类是人参的主要成分和药效成分，采用高效液相色谱法可准确测定人参中各皂苷类成分，本文主要介绍采用液相色谱测定在超微粉碎技术下得到不同粒度的粉末中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。

标签：高效液相色谱法，人参，人参皂昔本品为五加科植物人参Pana：c ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。

它具有大补元气，补脾益肺，生津养血，安神益智等之功效。

临床用于体虚欲脱，肺虚气喘，肢冷脉微，脾虚食少，口渴少津，内热消渴，气血不足等[1]。

皂苷类成分是人参的主要活性物质和药效成分，因此提高它的提取率就可增强其生物利用率，以下将介绍同一批次的人参，在样品经过振动磨型超微粉碎机粉碎后得到不同粒度的粉体的皂苷含量进行测量[2]。

1 实验仪器与材料1.1 实验仪器AEL-200电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司），AB204-N精密分析天平（METTLER TOLEDO），Agilent 1260型HPLC（Agilent Technologies），TKCD-1006超声波清洗仪（南昌科昌达超声波设备厂），Heal Force final Filter 超纯水機（上海浦东分析仪器设备厂），HH-4数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司），SQW-25系列超微粉碎机（山东济南三清易辰）。

1.2 实验材料人参皂苷标准品Rb1，Re，Rg1：中国药品生物制品检定所；乙腈（HPLC）。

1.3 样品制备同一批次人参（吉林省长白山）：人参粗粉（过40目筛）；人参样品经过超微振动磨型得到粒径分别为76.006～86.348 μm、29.963～30.025 μm、25.088～25.488 μm、22.163 μm。

1.4 对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品适量，精密称定，加甲醇定容；分别精密量取上述对照品溶液各1 mL，置于同一10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

高效液相色谱法测定人参补气胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量目的建立人参补气胶囊的含量测定方法。

方法采用安捷伦ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱（0～35 min，19%A；35～55 min，19%～29%A；55～70 min，29%A；70～100 min，29%～40%A），检测波长203 nm，流速1.0 mg/mL，柱温30 ℃，对制剂中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1进行定量测定。

结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.452～4.068 ?g（r2=0.999 6）、0.467 6～4.208 4 ?g（r=0.999 5）和1.083 2～9.748 8 ?g（r=0.999 8），平均回收率分别为99.96%（RSD=2.24%）、99.95%（RSD=2.14%）和99.06%（RSD=2.94%）。

结论本试验所建立的方法分离效果好、简便、快捷，重复性好，可用于该制剂的质量控制。

标签：人参补气胶囊；高效液相色谱法；人参皂苷Rg1；人参皂苷Re；人参皂苷Rb1D人参补气胶囊由人参、红参、红参须3味中药组成，具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神的功效[1]。

临床多用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心原性休克等症。

方中3味中药均以人参皂苷为其主要活性成分[2]，原标准中含量测定是通过称量提取纯化制剂中的总皂苷的重量来测定，由于总皂苷的纯化方法复杂，重复性较差，试验结果误差较大，且有效成分不明确。

采用高效液相色谱法（HPLC）测定处方药材中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量研究则多有报道[3-8]，我们参考上述相关文献，同时参考2005年版《中华人民共和国药典》人参含量测定项下方法[9]，选取人参皂苷Rg1、Re、Rb1为含量测定的指标成分，采用HPLC建立人参补气胶囊有效成分含量测定的方法，以保证本制剂的质量1 仪器与试药Agilent1100高效液相色谱仪（G1311A QUATPUMP泵，G1314A VWD检测器，G1322 DEGASSER脱气机，TC-120柱温箱，上海市精密科学仪器有限公司），色谱软件系统Rev.A.10.02，KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。

提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。

常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。

溶剂提取法：这是最常见且相对简单的方法，主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。

常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。

通过浸泡、回流或渗漉等方式，使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中，再通过蒸发溶剂得到粗提物。

微波辅助提取法：微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用，提高提取效率和速度。

微波产生的热能可以使细胞壁破裂，加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解，从而缩短提取时间。

超声波辅助提取法：超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用，增加溶剂对原材料的穿透力，提高人参皂苷的提取率。

同时，超声波还可以破坏细胞结构，使皂苷更容易释放到溶剂中。

超临界流体提取法：超临界流体提取是利用超临界状态下的流体（如二氧化碳）作为溶剂，通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力，从而实现对人参皂苷的高效提取。

这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。

在实际应用中，可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素，选择最合适的提取方法。

为了提高提取效果，还可以结合使用多种提取方法，如先用溶剂提取法得到粗提物，再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。

三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤，其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。

这通常涉及到一系列的色谱技术，包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱（HPLC）等。

液-液分配色谱，也称为液-液萃取，是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。

这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。

固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。

人参皂苷国际标准
人参皂苷是一种天然产物，是从人参中提取的一种活性成分。

人参皂苷具有多种药理活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用，因此在药物和保健品领域有广泛的应用。

目前，人参皂苷的国际标准是根据其化学结构和含量进行评估的。

以下是人参皂苷国际标准的详细内容：
1. 化学结构：人参皂苷是一种三萜类化合物，其结构由糖基和萜环组成。

主要的人参皂苷包括Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rg3等。

2. 含量测定方法：人参皂苷的含量可以通过高效液相色谱法（HPLC）进行测定。

该方法可以同时测定多种人参皂苷的含量，并且具有高灵敏度和准确性。

3. 含量标准：根据不同的人参品种和用途，人参皂苷的含量标准有所差异。

一般来说，人参皂苷的含量应在人参总皂苷中占比较高，且主要成分Rg1和Rb1的含量应符合一定的比例关系。

4. 质量控制：人参皂苷的质量控制包括原料药的选择和加工工艺的控制。

合格的人参皂苷应采用优质的人参作为原料，并且在提取和纯化过程中要控制温度、时间、溶剂等因素，以保证人参皂苷的质量和稳定性。

需要注意的是，人参皂苷的国际标准可能会因不同国家或
地区的法规和标准而有所差异。

因此，在具体应用中，需要根据当地的法规和标准进行评估和判定。

含量测定(高效液相色谱法)名称注意成分标准狗脊(烫狗脊)原儿茶酸不得少于0.020％。

细辛细辛脂素药材和饮片不得少于0.050％大黄大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素总量不得少于1.5％。

虎杖大黄素不得少于0.60％避光操作虎杖苷不得少于0.15％。

何首乌避光操作2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.0％。

制何首乌不得过0.70％结合蒽醌(大黄素、大黄素甲醚) 总量不得少于0.10％。

制何首乌不得过0.05％游离蒽醌(大黄素、大黄素甲醚) 总量计，不制何首乌得少于0.10％。

牛膝β-蜕皮甾酮药材和饮片不得少于0.030％。

川牛膝杯苋甾酮药材和饮片不得少于0.030％。

商陆商陆皂苷甲不得少于0.15％。

太子参太子参环肽B 不得少于0.020％。

威灵仙齐墩果酸、常春藤皂苷元药材和饮片均各不得少于0.30％川乌含乌头碱、次乌头碱、新乌头碱总量应为0.050％～0.17％。

制川乌苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头碱总量应为0.070％～0.15％。

草乌含乌头碱、次乌头碱、新乌头碱总量应为0.10％～0.50％。

制草乌苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头碱总量应为0.20％～0.70％。

附子苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱药材和饮片、淡附片总量，不得少于0.010％。

白芍芍药苷不得少于1.6％。

饮片不得少于1.2％。

赤芍芍药苷不得少于1.8％。

饮片不得少于1.5％。

黄连(味连) 小檗碱不得少于5.5％表小檗碱不得少于0.80％，黄连碱不得少于1.6％巴马汀不得少于1.5％。

黄连片、酒黄连、姜黄连、萸黄连小檗碱不得少于5.0％表小檗碱、黄连碱、巴马汀总量不得少于3.3％。

升麻异阿魏酸不得少于0.10％。

防己粉防己碱、防己诺林碱、药材含总量不得少于1.6％饮片含总量不得少于1.4％。

延胡索(元胡) 延胡索乙素药材不得少于0.050％。