紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量
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总皂苷的测定方法(分光光度法)本方法适用于保健食品中总皂苷的测定。
本方法人参皂苷Re的最低检出量为2μg/mL。
1. 方法提要样品中总皂苷经提取、PT-大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。
2. 仪器(1)722分光光度计。
(2)PT-大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。
(3)超声波振荡器。
3. 试剂(1)甲醇(分析纯)。
(2)乙醇(分析纯)。
(3)人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)。
(4)5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100mL。
(5)高氯酸(分析纯)。
(6)冰乙酸(分析纯)。
(7)人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg。
(8)重蒸水。
4. 测定步骤(1)样品处理:a. 固体样品:称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离。
b. 液体样品:含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离。
(2)柱层析:以PT-大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。
(3)显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣溶解,再加0.8mL高氯酸,混匀后移入10mL比色管中,塞紧盖子于60℃以下水浴上加温15min取出,冷却后准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后以1.0cm比色皿、于560nm处与人人参皂苷Re标准管同时比色。
人参片的鉴定实验报告实验目的:本实验旨在通过对人参片的鉴定,了解其化学成分和药理作用,以及评价其质量。
实验原理:人参片是以生晒、砂炒或红参为原料,经过处理和加工而制得的片状制剂。
人参片含有多种活性成分,如人参皂苷、人参多糖、挥发油和人参酮等。
其中,人参皂苷是药理活性最为明显的成分,具有兴奋中枢神经、增强机体免疫功能、抗氧化、改善记忆力和抗肿瘤等作用。
实验步骤:1. 人参片外观检查:观察人参片的形状、颜色和气味,记录其外观特征。
2. 酸不溶性灰分测定:取一定量的人参片,将其加热至灰烬并在550℃±25℃下灼烧2小时,冷却后称重,计算酸不溶性灰分的含量。
3. 总皂苷含量测定:按照适当的方法,提取人参片中的总皂苷,并用紫外分光光度法测定总皂苷的含量。
4. 薄层色谱鉴别:取一定量的人参片,进行薄层色谱检测,比较色谱图与标准品的相似度。
5. 老年式药材指纹图谱鉴别:采用高效液相色谱和质谱技术,建立人参片的指纹图谱,并与标准品进行比对。
6. 药理效应观察:利用适当的方法,评价人参片的药理效应,如中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力等。
实验结果及分析:根据人参片的外观特征和气味,清晰地观察到片状、棕黄色且具有独特的人参味道。
经过酸不溶性灰分测定,测得其酸不溶性灰分的含量为X%。
通过紫外分光光度法测定,得到人参片中的总皂苷含量为X mg/g。
经过薄层色谱和老年式药材指纹图谱鉴别,证实人参片的组成与标准品相似度高。
在药理效应观察中发现,人参片具有明显的中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力。
结论:通过本实验的鉴定,可以得出以下结论:1. 根据外观特征和气味,判断人参片为片状、棕黄色且具有人参味道。
2. 经过酸不溶性灰分测定,确定人参片的酸不溶性灰分含量。
3. 利用紫外分光光度法测定了人参片中的总皂苷含量。
4. 通过薄层色谱和老年式药材指纹图谱鉴别,验证了人参片的质量。
5. 在药理效应观察中,人参片表现出中枢兴奋作用、免疫调节作用和抗氧化能力等。
血塞通泡腾片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定何三民;余志怡;戴德雄【摘要】目的建立血塞通泡腾片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定方法.方法色谱柱为Kromateck C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),检测波长203 nm,检测温度35℃.结果人参皂苷Rb1进样量线性范围为1.584~7.920μg,人参皂苷Rg1为1.616~8.080 μg,三七皂苷R1为0.416~2.080μg;6批样品的总皂苷含量平均值为33.18 mg/片.结论所用方法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可作为血塞通泡腾片的质量控制方法.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)011【总页数】2页(P30-31)【关键词】血塞通泡腾片;三七皂苷R1;人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1;高效液相色谱法【作者】何三民;余志怡;戴德雄【作者单位】浙江省金华市中心医院,浙江,金华,321000;浙江省金华市中心医院,浙江,金华,321000;浙江维康药业有限公司,浙江,丽水,323000【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0血塞通泡腾片为三七总皂苷加辅料制成的泡腾片,具有活血祛瘀、通脉活络之功效,用于脑路瘀阻、中风偏瘫、心脉瘀阻、胸痹心痛,脑血管病后遗症、冠心病心绞痛属上述证候者,临床效果显著。
三七叶总皂苷中含人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1,原颗粒剂采用紫外分光光度法测定人参总皂苷[1],测定方法的准确性差。
为了有效控制该产品的质量,笔者参考相关文献建立了高效液相色谱法[2-4],用于测定血塞通泡腾片中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量,方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂的质量控制方法。
1 仪器与试药Agilent 1100型液相色谱仪,浙江大学N 2000色谱工作站;岛津UV-1240型紫外分光光度计;Sartorius BP 211D型电子天平;JL-180 DTH型超声波清洗器。
三七皂苷含量标准三七,又称田七、人参三七,是五加科人参属植物,具有丰富的药用价值。
三七皂苷是三七的主要活性成分,具有抗炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
因此,三七皂苷含量的测定对于评价三七质量具有重要意义。
本文主要对三七皂苷含量的测定方法及其标准进行研究。
一、三七皂苷含量的测定方法1. 液相色谱法(HPLC)液相色谱法是目前最常用的三七皂苷含量测定方法。
该方法具有灵敏度高、分离效果好、重复性好等优点。
常用的检测器有紫外检测器(UV)和蒸发光散射检测器(ELSD)。
根据三七皂苷的化学性质,可以选择适当的色谱柱和流动相进行分离和检测。
2. 薄层色谱法(TLC)薄层色谱法是一种常用的定性分析方法,也可以用于三七皂苷含量的初步测定。
该方法操作简单,但灵敏度和分离效果相对较低。
常用的显色剂有碘化铋钾、香草醛-硫酸等。
3. 毛细管电泳法(HPCE)毛细管电泳法是一种新型的分离分析方法,具有分离效果好、操作简单、运行成本低等优点。
该方法可以用于三七皂苷组分的分离和含量测定,但目前仍处于研究阶段。
二、三七皂苷含量标准三七皂苷含量标准是评价三七质量的重要依据。
目前,国内外尚无统一的三七皂苷含量标准。
不同国家和地区根据当地的气候、土壤、生长条件等因素,制定了相应的质量标准。
例如,中国药典规定三七中人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量分别不低于0.8%、0.5%和0.3%。
三、三七皂苷含量标准的影响因素1. 品种差异:不同品种的三七,其皂苷含量存在显著差异。
例如,云南三七的皂苷含量通常高于云南三七。
因此,在制定三七皂苷含量标准时,需要考虑到品种的差异。
2. 生长环境:生长环境对三七皂苷含量也有显著影响。
例如,土壤肥力、光照时间、降水量等因素都会影响三七的生长和皂苷含量。
因此,在制定三七皂苷含量标准时,需要考虑到生长环境的差异。
3. 采收时间:三七的生长周期较长,不同时间段采收的三七,其皂苷含量存在显著差异。
一般来说,种植后2-3年的三七,其皂苷含量高。
【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中,而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。
为了测定这些 皂苷的总含量,便建立了总皂苷的检测方法。
总皂苷的检测多使用分光光度法,并以某种标准品绘制 工作曲线,依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。
【检测方法与实验流程图】【文献】 Jian Lin, Xican Li, Lu Han, Fei Li, Wenbiao Lu, Ye Bai, Dongfeng Chen Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16.【溶液配制】1. 香草醛-冰醋酸溶液(测试液)配制:精密称取25mg 香草醛,加冰醋酸定容至5mL 。
即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。
2. 样品液配制:将待检测的样品用甲醇溶解, 配成约5mg/mL 的样品液。
具体浓度视样品的溶解度而定, 但是必须有精确的数据。
3.齐墩果酸标准品溶液配制: 精密称取齐墩果酸1mg ,加甲醇定容至5mL ,配成0.2mg/mL 齐墩果酸标 准品溶液。
(也可以使用其他的皂苷物质,如人参皂苷 Rg3。
但必须是纯的化合物)4. 高氯酸:分析纯试剂。
5. 冰醋酸:即纯的无水乙酸(分析纯)【标准曲线绘制】(齐墩果酸)取上述齐墩果酸溶液 x g L (x=0,40,80,120,160,200),依“实验流程图”,在70C 水浴15mim 后呈桃红色。
以第一份溶液(x=0)作为空白对照,测 A 540nm 值。
以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量, 为横坐标,A 540nm 值为纵坐标,绘制标准曲线。
以此标准曲线计算,得线性回归方程。
【样品液的测定】将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液,进行实验,并测定其此 A 540nm 代入线性回归方程,即可计算出其总皂苷的含量(以齐墩果酸计) 分光光度法测定总皂苷含量:实验流程图2017.10 A 540nm 值。
分光光度法测定三七伤药胶囊中三七总皂苷的含量
李文仕
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2010(023)001
【摘要】目的:建立三七伤药胶囊中三七总皂苷含量测定的方法.方法:采用比色法,通过对实验条件、线性、空白、精密度、稳定性、重复性、回收率进行考察,从而建立三七伤药胶囊中三七总皂苷的含量测定方法.结果:建立了以水饱和正丁醇为溶剂,超声处理20分钟,碱洗,甲醇转溶,显色,用紫外-可见分光光度仪在550 nm处测定三七伤药胶囊中三七总皂苷含量的方法.结论:本方法简便,准确,灵敏度高,重复性好,可作为该制剂中三七总皂苷含量测定的方法.
【总页数】3页(P5-7)
【作者】李文仕
【作者单位】广西百色食品药品检验所,百色,533000
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.HPLC法测定腰痹通胶囊中三七总皂苷的含量 [J], 姚青;高晓艳;凌娅;
2.高效液相色谱法测定三七伤药胶囊中芍药苷含量 [J], 韦志疆
3.薄层色谱扫描法测定三七伤药胶囊中人参皂苷Rb1、Rg1的含量 [J], 郑耀东
4.三七总皂苷含量的紫外分光光度法测定 [J], 刘旭;付青姐;李明春;徐江平
5.心痛宁胶囊中三七总皂苷的含量测定方法研究 [J], 崔洋
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紫外分光光度法测定参芪三七胶囊中总皂苷含量岳展鹏;王贤英【摘要】Objective To determine the content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules. Methods The content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules was determined by an ultraviolet-visible speetrophotometer at 542 nm with perchloric acid as the ehromogenie reagent. Results The total saponins was linear in the range of 6. 87-41. 22 μg/mL, Y=0. 015 54 X+0. 002 9, r=0. 999 6 ( n=6 ) , and the average recovery rate was 98. 32%, RSD=1. 08% ( n=9 ) . Conclusion The determination method of total saponins is simple, fast, accurate with high sensitivity as well as good repeatability, which can be applied for qualitative discrimination of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.%目的:建立测定参芪三七胶囊中总皂苷含量的紫外分光光度法。
方法采用紫外分光光度仪,于542 nm波长处,以高氯酸显色法测定总皂苷含量。
结果总皂苷质量浓度在6.87~41.22μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,Y=0.01554 X+0.0029,r=0.9996( n=6),平均回收率为98.32%,RSD为1.08%( n=9)。
人参总皂苷Renshen ZongzaoganTOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT本品为五加科植物人参JPanaa: ginseng C. A. Mey. 的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。
【制法】取人参,切成厚片,加水煎煮二次,第一次2 小时,第二次1. 5 小时,煎液滤过,合并滤液,通过D 1 0 1型大孔吸附树脂柱,水洗脱至无色,再用6 0 %乙醇洗脱,收集60% 乙醇洗脱液,滤液浓缩至相对密度为1.06?1.08(80°C)的清膏,干燥,粉碎,即得。
【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末;微臭,昧苦;具吸湿性。
本品在甲醇或乙醇中易溶,在水中溶解,在乙米或石油米中几乎不溶。
【鉴别】(1)取本品O.lg,置试管中,加水2ml,用力振摇,产生持久性泡沫。
(2)取本品O.lg,加甲醇10ml使’溶解,作为供试品溶液;另取人参对照药材lg,加水100ml煎煮2 小时,滤过,滤液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1cm,柱高为15cm) ,用水洗至无色,弃去水液,再用6 0 %乙醇20ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残淹加甲醇10ml使溶解,作为对照药材溶液。
再取人参皂苷R b i对照品、人参皂苷R gl对照品与人参皂苷R e对照品,加甲醇溶解制成每lml各含2 m g 的混合溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验',吸取上述三种溶液各2M1,分别点于同一硅胶G 薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40 : 22 : 10) 1 0 1以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1 0 %硫酸乙醇溶液,在105°C加热至斑点显色清晰,分别置日光和紫外光灯(365mn)下检视。
供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置,日光下显相同颜色的斑点,紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
【检査】粒度依法检查(通则0982第二法),能通过1 2 0目筛的粉末不少于95% 。
紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量
田健;朱凯
【期刊名称】《吉林中医药》
【年(卷),期】2016(036)008
【摘要】目的用紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量.方法采用超声提取法对人参进行提取,再采用水饱和正丁醇对人参提取溶液进行萃取,用紫外可见分光光度法测定其吸光度值.结果测得的最大吸收波长为540 nm,人参皂苷Re在7.287~80.16 μg/mL范围内的线性关系良好.精密度RSD值为0.44%,平均回收率为104.33%.结论用紫外可见分光光度法测定人参中总皂苷的含量,简便易行,精确度高,测定速度快.
【总页数】3页(P832-834)
【作者】田健;朱凯
【作者单位】长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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1.RP-HPLC测定人参果总皂苷中人参皂苷Re和人参皂苷Rd的含量 [J], 曲芯瑶;赵宏峰;弥宏;庞威;郭禹彤;金光洙
2.紫外可见分光光度法测定刺五加果中总皂苷的含量 [J], 粘成贺;倪秀珍;姜玮伦;姚云霞;张萌;姚慧敏
3.UPLC法测定人参总皂苷提取物中7种人参皂苷的含量 [J], 蔡艳;宋剑;王贵金;贾
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4.高效液相色谱梯度洗脱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rb1、人参皂苷 Rg1和三七皂苷 R1含量 [J], 马雯霞
5.人参饼干中人参总皂苷、人参单体皂苷Rb1、及Re+Rg1含量测定及人参饼干中人参皂苷的定性鉴别 [J], 魏建华;杨文志;刘强;曹志强
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三七药材中总皂苷的含量测定
三七药材中总皂苷的含量测定
姚志娟;徐健
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2005(018)005
【摘要】目的:测定三七中总皂苷的含量.方法:应用比色法.结果:三七中总皂苷的平均含量为0.452mg/g.结论:本法简便、可行,可供本品质量控制用.
【总页数】2页(319-320)
【关键词】三七;三七总皂苷;比色法;含量测定
【作者】姚志娟;徐健
【作者单位】哈药集团三精制药有限公司,哈尔滨150069
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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1.分光光度法测定三七伤药胶囊中三七总皂苷的含量 [J], 李文仕
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3.太白三七中三七总皂苷的提取及含量测定 [C], 索建兰; 王苏红
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5.双液相萃取法测定三七块根与茎叶中三七总皂苷含量 [J], 习峰敏; 刘昌铭; 李付名; 浦周芳; 刘赟心; 赵文秀
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编号:FZD0111 人参提取物中总皂甙(Total ginsenoside)含量测定方法一、试剂1%香草醛溶液:称取香草醛 1.0g加高氯酸溶解定容至100mL。
此溶液需临用新制。
77%硫酸溶液:量取77ml浓硫酸在不断搅拌下加到23ml水中冷却至室温。
二、溶液制备对照品溶液:精密称取约10mg人参皂甙Rb1对照品(或已知含量标准样品适量)于50ml容量瓶中,用甲醇溶解定容(必要时过滤取续滤液)。
样品溶液:精密称取约15mg人参提取物于50ml容量瓶中,加约30ml甲醇超声20min溶解,放至室温后以甲醇定容,过滤取续滤液。
三、样品测定与结果计算
分别精密吸取0.2ml、0.4ml、0.6ml对照品溶液、0.5ml样品溶液0.5ml甲醇于10ml具塞试管中,真空加热挥干溶剂,精密加入1%香草醛溶液0.5ml,混匀后于60℃水浴中加热15min,取出并立即放入冰水中冷却2min,随后加入77%硫酸溶液5ml,摇匀,待气泡消失后以试剂空白液(甲醇管)为参比,于550nm测吸光度。
以对照品管中皂甙绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品管中皂甙绝对量(mg)。
人参总皂甙含量(%) =(C×50)/(W×0.5)×100%
式中:C为由工作曲线计算的样品管绝对量;W为样品称样量(mg)。
注:除甲醇外,其余均需平行显色两份。