下载文档原格式
人参不同部位中人参皂苷成分的分析周卫松【摘要】This study was aimed to measure the content of ginsenoside in ginseng extract by UV/HPLC. Through the approximate translation comparison of two different testing results with UV and HPLC in current market, and several typical HPLC peaks ratio analysis on contents of different ginsenoside extracted from the root, stem and leaves of ginseng, in order to establish identification method of ginsenoside from different sources. The results showed that the ratio for Re:Rb1:Rc:Rd in ginseng root extract was approximately 1:2.20:0.94:0.97. And the ratio for Re:Rb1:Rc:Rdin ginseng leave extract was approximately1:(0.05~0.07):(0.10~0.16):(0.32~0.37). Compared with the mixture of ginseng root and ginseng leave extract, the theoretical value ofRe:Rb1:Rc:Rd should between those two ratios. It was concluded that this method was simple, stable and reliable, which can be used as the identification method of ginsenoside from ginseng root, stem and leaves.%目的：建立UV/HPLC法测定人参不同部位中人参皂苷含量。
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)一、实验介绍人参是一种传统的中药材，具有滋补强壮、改善免疫功能、抗氧化、抗疲劳等保健作用。
人参中的主要活性成分为人参皂苷，是一类四环倍半萜类化合物，已经被证明具有多种药理活性，包括治疗心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等。
本实验将通过浸提、分离纯化和质谱鉴定等方法，提取并鉴定人参中的人参皂苷。
二、实验原理1、浸提法浸提法是将药材浸入某种合适的溶剂中，使药材中的有效成分与溶剂发生物理或化学变化，达到提取目的的一种分离方法。
2、硅胶柱层析法硅胶柱层析法是将样品溶液通过硅胶柱，利用在硅胶表面的物理吸附或化学吸附作用，将混杂在一起的化合物分离开的方法。
3、质谱鉴定质谱鉴定是一种能够确定样品化学结构和分子质量的分析技术。
常用的质谱仪有基质辅助激光解吸/电离质谱仪（MALDI-TOF MS）、毛细管电泳-电喷雾离子化质谱仪（CE-ESI-MS）、气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）等。
三、实验步骤1、人参皂苷的浸提提取取50克粉碎后的人参，加入500 mL纯水，加热至60℃灌装入烧杯中，自然冷却至室温，用纱布过滤液体，重复浸提两次，将过滤液集合并浓缩至100 mL，抽取所有成分并将溶剂蒸干，得到人参的浸提液。
将人参浸提液溶于甲醇，用硅胶柱层析法进行分离。
在硅胶柱中注满硅胶，静置，再用甲醇将硅胶冲洗至洗液pH值小于7，并流至平衡，用稀甲酸使硅胶柱的pH值保持在4.5左右，注入30 ml的样品溶液后，按照乙醇-水（5:95）逐步更换溶剂进行洗提。
收集各部分2 mL溶液，检测其皂苷浓度。
将含有人参皂苷的溶液分别离子化并进入质谱仪，分别进行质谱分析，并比对和参考相关文献，确定人参皂苷的种类及分子质量。
四、实验结果浸提液得率为12.5%，色深浅不一，澄清程度良好。
利用硅胶柱进行层析分离，得到了包含人参皂苷的溶液。
收集了各部分的溶液，并测定了其皂苷浓度，得到各部分的含人参皂苷浓度、总皂苷脂含量和分离效果。
人参中总皂苷含量测定的研究作者：陈薇薇来源：《食品界》2017年第06期药材与试剂5年生园参，样品经50℃烘干粉碎后（过40目筛），密封保存备用。
甲醇、乙醚、无水乙醇、正丁醇、浓硫酸、香草醛、氯仿；以上试剂均为国产分析纯，实验用水均为蒸馏水。
人参皂苷 Re 对照品购自中国药品生物制品检验所。
仪器与设备TU-1810 型紫外分光光度计（北京普析通用仪器）。
方法对照品溶液的制备。
取人参皂苷 Re 对照品 20mg，精密称定，加甲醇溶解，定容至10ml，摇匀、滤过，即得。
供试品溶液的制备。
取供试品粉末约 1.0g（细粉），精密称定，用中性滤纸包好，置索氏提取器中，加入乙醚47左右微沸回流提取1h，弃去乙醚液，供试品药包挥干溶剂，加入甲醇浸泡过夜，次日再加入适量甲醇，90℃微沸回流提取，控制滴速 100～120滴/min，虹吸次数5～6次/h，回流3次，每次2h，以人参皂苷提尽为准（定性鉴别为阴性），合并甲醇提取液，回收溶剂，少量甲醇提取液置蒸发皿中，水浴蒸干。
蒸馏水溶解提取物，加水30ml置分液漏斗中，用水饱和正丁醇50ml进行萃取，共4次。
取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀、滤过即得。
人参总皂苷提取定性鉴别。
供试品回流提取3次以后，取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量点于硅胶G薄层后的下层溶液，用10%硫酸乙醇显色，将薄层板置通风橱内，喷10% 硫酸乙醇溶液，105℃加热。
标准曲线的绘制。
精密吸取人参皂苷Re对照品10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃试管中，水浴挥干甲醇。
分别加入8%香草醛无水乙醇试液0.5ml，72%硫酸试液 5ml，充分振荡摇匀后置60℃恒温水浴锅上加热10min，立即用冰水冷却10min，摇匀。
以试剂做空白，照分光光度法于544nm处分别测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品取样量为横坐标绘制标准曲线。
稳定性考察。
精密吸取样品溶液20μl，按3.4项下方法显色，并分别在显色后0、10、20、30min测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。
【导言】我国药典是国家药典的统称，是指对我国境内生产、流通和使用的药品质量标准的权威性规定，是保障药品质量和使用合理、安全的基本依据。
其中，人参总皂苷含量是人参药材质量的重要评价指标，其测定方法对于保证人参药材的质量具有重要意义。
本文将对我国药典2020版中人参总皂苷含量测定方法进行详细介绍。
【正文】1. 依据依据我国药典是国家药典，是依法规定的药品标准，它规定了符合标准的药品质量要求、规范药品生产、流通和使用。
人参作为一种重要的中药材，在我国药典中有着详细的质量标准，其含有的总皂苷含量是一个至关重要的指标。
2. 人参总皂苷含量的意义总皂苷是人参中的重要有效成分之一，它具有调节免疫功能、提高机体抗氧化能力、增强心肌供血量、预防心绞痛、心肌梗死等保护心脏的作用。
测定人参总皂苷含量不仅有利于评价人参的药用价值，还能为人参的质量控制提供依据。
3. 我国药典2020版中人参总皂苷测定方法我国药典2020版中，人参总皂苷的测定方法主要包括提取、净化、分离和定量测定这几个步骤。
具体操作步骤如下：3.1 溶剂选择：首先选择合适的溶剂，如乙醇、丙酮等，将人参样品粉碎成粉末状，然后用溶剂进行提取，得到提取液。
3.2 净化分离：将提取液进行净化分离，去除杂质，得到待测液。
3.3 定量测定：采用分光光度计或者高效液相色谱仪等仪器，进行人参总皂苷的定量测定，计算出含量结果。
4. 测定方法的操作要点在操作过程中，需严格控制提取温度、时间和溶剂的体积比例，避免提取效果不佳。
净化过程中也需保证分离效果，避免杂质对测定结果的影响。
测定过程中应根据仪器的要求进行参数设置，确保测定结果的准确性。
为了保证人参总皂苷含量的测定结果的可靠性和稳定性，建议重复测定并取平均值。
5. 结论我国药典2020版中的人参总皂苷测定方法，是一种全面、准确的测定方法，可以有效地评价人参药材的质量，并为制定人参制剂的合理使用提供依据。
基于该方法，人们可以对人参药材的质量进行科学评价，保证人参产品的质量和疗效。
林下山参片人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量测定陈金鸾;孟繁玉;王振洲;张浩;朱海林;赵炳林;刘金平;李平亚【摘要】目的测定林下山参片中人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量. 方法采用以水为溶剂的加热回流法提取林下山参片中的总皂苷,经大孔吸附树脂纯化,采用香草醛-浓硫酸比色法测定人参总皂苷含量,检测波长540nm. 采用二极管阵列检测器高效液相法(HPLC-PDA)测定林下山参片中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1、Rg2、Rb1、Rc、Ro、F1、Rb2、Rb3、Rd、20 (S)-Rg3、20 (R)-Rg3、PPT、F2、Rh2、齐墩果酸和PPD共19种单体皂苷(元)的含量,用Unitary C18色谱柱( 4.6mm×250 mm,5μm) ,以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,流速为1.3mL·min-1,柱温为30℃,检测波长203nm.结果:比色法测定人参总皂苷,在42.8~171.2μg(r=0.999)范围内线性关系良好.测得样品中人参总皂苷含量为2.78%. 林下山参片中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1+Rg2、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3、Rd、20(S)-Rg3、20 (R)-Rg3、F2、PPD的含量分别为0.32%、0.12%、0.09%、0.06%、0.62%、0.15%、0.15%、0.13%、0.02%、0.20%、0.10%、0.11%、0.01%、0.40%、2.48%;未检出人参皂苷F1、PPT、Rh2、齐墩果酸.结论:首次对林下山参片中的人参总皂苷及19种单体人参皂苷进行含量测定, 为林下山参片新产品的开发提供了科学依据.%OBJECTIVE:To determine the contentsof total ginsenosides and 19 monomer ginsenosides or aglycones in tablets of Panax ginseng C.A.Meyer cv. Silvatica. METHODS: The total ginsenosides were extracted through thermal reflux method by water and purified by macroreticular resin. The content of total ginsenosides was determined by vanillin - sulfuric acid colorimetry method under 540 nm. HPLC-PDA was chose to separate and detect monomer ginsenosides oraglycones Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2, Rb1, Rc, Ro, F1, Rb2, Rb3, Rd, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, PPT, F2, Rh2, oleanolic acid and PPD . They were separated by Unitary C18 chromatographic column ( 4.6mm × 250 mm,5 μm), acetonitrile-0.05%phosphoric acid aqueous was chose as moving phase, flow velocity was 1.3 mL·min-1, column temperature was 30℃. The ginsenosides were detected by PDA under 203nm. RESULTS: The linear range of the colorimetric method for determination was 42.8~192.6μg(r=0.999), the content of total ginsenosides was 2.783%. The contents of ginsenosides or aglycones Rg1, Re, Rf, Rh1+Rg2, Rb1, Rc, Ro, Rb2, Rb3, Rd, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, F2, PPD were0.3179%,0.1243%,0.0890%,0.0576%,0.6221%,0.1518%,0.1529%,0.1285%,0.0 174%,0.2047% ,0.1020% ,0.1057% ,0.0110% ,0.3981% and 2.4830% respectively. Ginsenosides or aglycones F1, PPT, Rh2, oleanolic acid had not been detected from the sample. CONCLUSION: It is the first time to determine the contents of total ginsenosides and to determine the contents of ginsenosides or aglycones Rg1, Re, Rf, Rh1, Rg2, Rb1, Rc, Ro, F1, Rb2, Rb3, Rd, 20 (S)-Rg3, 20 (R)-Rg3, PPT, F2, Rh2, oleanolic acid, PPD through HPLC-PDA, and provides scientific basis for development of new products of Panax ginseng C.A.Meyer cv. Silvatica.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P2-5)【关键词】林下山参片;人参总皂苷;单体人参皂苷;含量测定;HPLC-PDA法【作者】陈金鸾;孟繁玉;王振洲;张浩;朱海林;赵炳林;刘金平;李平亚【作者单位】吉林大学药学院,长春 130021;吉林敖东延边药业股份有限公司,敦化133700;吉林大学药学院,长春 130021;吉林大学药学院,长春 130021;吉林大学药学院,长春 130021;吉林省抚松县关东绿色生态参茸有限公司,抚松 134500;吉林大学药学院,长春 130021;吉林大学药学院,长春 130021【正文语种】中文林下山参是模拟山参的生态环境，把园参籽撒到或者参苗栽到原始森林里，不进行任何人工管理，自然生长，具有和野山参相似的生长环境，无农药、化肥等残留，其质量和价值均可与野山参媲美。
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey.）的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参".人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷（ginsenosides）.到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、—Ra1、-Ra2 、—Rb1、—Rb2、—Rb3、-Rc、-Rd、—Re、—Rf、—Rg1、—Rg2、-Rg3、—Rh1、-Rh2及—Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型—A型，②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20（S）—原人参二醇［20（S）-protopanaxadiol］。
B型皂甙元称为20(S)—原人参三醇[20(S）—protopanaxatriol］。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid）。
[目的要求］1。
通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2。
学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能.［实验原理］人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性.人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
红参中总皂苷及人参皂苷Rg1.Re.Rb1含量的测定刘春霖，谢强胜，李启艳，高天阳，刘慧香，蒋慧(山东省食品药品检验研究院，山东省食品药品安全检测工程技术研究中心，山东济南250101)摘要：目的测定不同产地的26批红参药材中总皂苷及人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量。
方法采用紫外可见分光光度法测定红参中总皂苷的含量，高效液相色谱法测定红参中人参皂苷Rg1、Re、Rh的含量。
结果26批红参药材中总皂苷含量为1.2%〜3.0%，人参皂苷Rg1、Re含量之和为0.17%〜0.61%，人参皂苷Rb〔含量为0.21%〜0.81%o结论不同产地的红参药材总皂苷及人参皂苷Rg1,Re.Rb1的含量存在差异,提示应进一步规范红参药材的种植、加工炮制及标准的建立。
关键词：红参;总皂苷;人参皂苷Rg〔、Re、Rb〔；含量测定中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号：2095-5375(2021)02-0087-004doi：10.13506/ki.jpr.2021.02.005Determination of total ginsenosides,ginsenosides Rg i,Re and Rb i in red ginsengLIU Chunlin,XIE Qiangsheng,LI Qiyan,GAO Tianyang,LIU Huixiang,JIANG Hui(Shandong Research Center of Engineering and Technology for Safety Inspection of Food and Drug, Shandong Institute for Food and Drug Control, Jinan250101,China)Abstract:Objective The contents of total ginsenosides,ginsenosides Rg〔,Re and Rb〔in26batches of red ginseng from different habitats were determined.Methods The contents of total ginsenosides in red ginseng were determined by uv-visible spectrophotometry and ginsenosides Rg〔,Re and Rb〔in red ginseng were determined by high performance liquid chromatography.Results The contents of total ginsenosides in26batches of red ginseng were1.2%~3.0%,the sum of ginsenosides Rg[and Re were0.17%~0.61%,and ginsenosides Rb〔were0.21%~0.81%.Conclusion The contents of total ginsenosides,ginsenosides Rg〔,Re and Rb〔of red ginseng from different habitats were different.It is suggested that the planting, processing and establishment of standard should be further regulated.Key words:Red ginseng;Total ginsenosides;Ginsenosides Rg〔,Re,Rb〔；Determination红参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A. Mey.)的栽培品经蒸制后的干燥根和根茎。
一测多评法测定几种人参产品中人参皂苷的含量李冀;项峥;窦德强【摘要】目的建立一种简单的一测多评方法同步计算测定三种人参产品(人参茎叶总皂苷、人参皂苷三醇组、血塞通注射液)中多种皂苷成分.方法:测定人参总皂苷的指纹图谱,以人参皂苷-Rb1为基准峰,分别计算人参皂苷-Rg1、-Rb1、-Rc、-Rb2、-Rd与其的相对校正因子(RCF),外标法测定人参皂苷-Rg1、-Re、-Rb1、-Rc、-Rb2及-Rd的含量,用校正因子计算总皂苷的含量；一测多评法结果,RCF为1的结果与外标法测定结果进行比较.测定不同批号的血塞通注射液,以验证方法可行性和科学性.并对不同品牌填料及不同长度的色谱柱进行考查,评价一测多评法在复方制剂中应用的准确性和科学性.结果建立了人参总皂苷含量的简便测定方法,以一测多评法计算含量,结果与外标法结果之间的变异系数分别为0.07％、0.32％、0.14％,另外以人参皂苷-Re的RCF值为1计算测定含量,结果与外标法测定结果之间的变异系数分别为1.53％、3.87％、2.11％,三种方法无显著性差异.三种方法测得9个不同批号的血塞通注射液的总皂苷含量无明显差别,RSD＜5％.结论用本法只采用人参皂苷-Re对照品即可同时控制多种成分的含量,又能节约对照品的使用,适合中药的多指标质量评价模式的要求.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2012(024)004【总页数】6页(P2-7)【关键词】一测多评法;相对校正因子;HPLC;人参皂苷;人参【作者】李冀;项峥;窦德强【作者单位】辽宁中医药大学药学院辽宁大连·116600;辽宁中医药大学药学院辽宁大连·116600;辽宁中医药大学药学院辽宁大连·116600【正文语种】中文人参作为名贵中药材广泛应用于临床[1]，皂苷类化合物是其主要有效成分，目前从人参中分离鉴定的人参皂苷已有40余种，可以分为原人参二醇型和原人参三醇型。
人参皂甙中文名称：人参皂甙英文名称：ginsenoside;GS结构式：基本性质：分子式：C42H72O13分子量：785.02密度：1300kg/m3熔点：315-318。
C来源植物：人参产地：主产于东北三省，而70%产于吉林省，出自吉林的人参70%出自白山市。
在人参不同部位的含量：侧根总皂苷（60.5%）》花蕾总皂苷（15%）》参叶总皂苷（7.6-12.6）、人参须根总皂苷（8.5-11.5）》参皮总皂苷（8.0-8.8）》人参主根总皂苷（2-7）人参幼根总皂苷（3%）种子总皂苷（0.7%）人参皂甙的提取：（从人参根部）方案1:人参根粗粉用滤纸筒包好，置索氏提取器中加甲醇加热回流提取，至三氯化锑氯仿饱和溶液反应呈阴性提取液减压回收甲醇浸膏用10倍量蒸馏水溶解水溶液用乙醚在分液漏斗中振摇脱脂4次乙醚液（脂类）水层用水饱和的正丁醇萃取6次，合并正丁醇液减压回收正丁醇，蒸干残留物（总皂苷粗品）方案2:用滤纸筒包好，置索氏提取器中，加10倍量乙醚回流脱脂至无色，乙醚液（脂类）残渣加甲醇加热回流提取至三氯化锑氯仿饱和溶液反应呈阴性甲醇提取液减压回收甲醇浸膏用10倍量蒸馏水溶解水溶液用水饱和的正丁醇萃取6次，合并正丁醇液减压回收正丁醇，蒸干残留物（总皂苷粗品）人参皂甙的分离和提纯：方法（1）沉淀法1份总皂苷粗品10倍量丙酮，黄白色沉淀母液过滤回收溶剂，用少量甲醇溶解，再倾入约10倍量丙酮过滤60℃下真空干燥，称重计算收率精制总皂苷方案2：1份总皂苷粗品用少量水溶解，加样于处理好的D101型大孔树脂柱上，吸附1小时后，用3倍柱体积蒸馏水洗脱除杂质继用60%乙醇洗脱至三氯化锑氯仿饱和溶液反应呈阴性洗脱液减压回收溶剂残留物减压60℃下真空干燥，称重计算收率精制总皂苷人参皂甙的鉴定：人参皂苷的鉴定（一）理化检识1．泡沫试验取人参根粗粉1g，加水浸泡（1：10）1小时或置80℃水浴上温浸30分钟，过滤得滤液供以下试验。
