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细胞遗传学实验一、课程说明课程编号：280407Z11课程名称：细胞遗传学实验/ Cytogenetics Experiment课程类别：专业实践课学时/学分：28/1先修课程：组织胚胎学、细胞生物学、植物学、动物学适用专业：生物科学专业教材、教学参考书：1、《医学细胞生物学》（第2版），安威主编，北京大学医学出版社，20092、《精编人类遗传学实验指南》，N.C.德拉科波利主编，夏家辉主译，科学出版社，20093、《医学遗传学实验和学习指导》，金帆主编，浙江大学出版社，20054、产前诊断技术与服务规范，邬玲仟等主编5、《细胞遗传学实验指导》，龙志高、戴和平主编二、课程设置的目的意义细胞遗传学实验技术教学是细胞遗传学中的一个重要组成部分，通过实验操作和对实验结果的分析牢固地掌握和理解细胞及遗传学基本理论、基本知识，同时在实验过程中，也能培养学生的动手能力，提高分析问题、解决问题的能力，培养学生的创新能力。
要求学生实验中认真动手，善于观察、善于分析，写出详尽、规范的实验报告。
三、课程的基本要求知识：掌握遗传的细胞学基础，染色体畸变类型及机制，应用国际命名体制，外周血G显带技术和G显带染色体的分析等知识；熟悉细胞遗传学导论，C带和N带技术及染色体分析，了解高分辨染色体和姐妹染色单体交换等内容。
能力：使学生学会运用遗传学分析的基本方法和细胞遗传学的主要实验技术，加强实验技能操作，培养学生动手能力；通过实验教学，培养学生严谨的科学态度，使学生养成良好的实验工作习惯；能够独立进行实验操作，促进解决问题能力的提高。
素质：通过实验技能的训练，培养学生严肃认真，一丝不苟的科学态度，养成良好的科学习惯，提高学生科研的基本素质；使学生将所学细胞遗传学的理论知识应用于实践中，促进综合素质的提高。
四、教学内容、重点难点及教学设计注：实践包括实验、上机等五、实践教学内容和基本要求通过实验操作和对实验结果的分析牢固地掌握和理解细胞及遗传学基本理论、基本知识，同时在实验过程中，培养学生的动手能力，提高分析问题、解决问题的能力，培养学生的创新能力，学生在实验中认真动手，善于观察、善于分析，写出详尽、规范的实验报告。
同步化试剂在外周血高分辨染色体核型分析中的应用效果评估发布时间：2021-04-01T08:52:37.932Z 来源：《医药前沿》2020年34期作者：韦相韦德宁韦朔峰韦小妮王文丹覃江锋蔡稔严提珍徐玉婵（通讯作者）[导读] 建立一种将两个不同厂家同步化试剂应用于人外周血染色体核型分析的效果评估方法。
（柳州市妇幼保健院<柳州市生殖与遗传研究所；广西科技大学附属妇产医院、儿童医院> 广西柳州 545001）【摘要】目的：建立一种将两个不同厂家同步化试剂应用于人外周血染色体核型分析的效果评估方法。
方法：随机选取我院2019年7月7日的20份外周血样本，同时做3线培养，1线常规培养，另2线分别加同步化试剂A、B，收获制片后G显带，每线在全自动染色体扫描仪上自动扫描选取60个核型，随机分析其中20个核型，计算300条带、400条带、500条带、550条带的核型比率和每个核型的交叉数。
数据处理采用SPSS19.0 统计学软件，两组间率的比较采用χ2检验，交叉数以（x-±s）表示，进行方差齐性检验，两组间比较采用SNK检验或成组秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
结果：同步化试剂A和B均比未加同步化试剂的常规培养获得更多500～550的高分辨率条带，且分散程度较佳。
同样实验条件下，同步化试剂A优于同步化试剂B。
结论：该方法可从分辨率和分散程度两方面初步评估两种不同厂家人外周血淋巴细胞染色体培养同步化试剂的使用效果，为检验试剂的选择提供依据。
【关键词】同步化试剂；外周血；染色体核型分析；高分辨率【中图分类号】R394.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2020）34-0083-02由于先天性染色体结构畸变和（或）数目异常而引起的遗传病，称为染色体病。
染色体异常占流产胚胎的50%～70%，占死产婴的10%，占新生儿死亡者的10%，占新生儿的5‰～10‰，在普通人群中染色体病的发病率为6‰～9‰[1-2]。
染色体异常检测技术在产前诊断应用中的研究进展谢文美;周凤娟;王强;赵小荣【摘要】产前诊断中染色体异常检测技术是保证出生人口素质的重要手段,是妊娠期内预防遗传性疾病和出生缺陷的重要措施.随着基因组测序技术、DNA芯片技术的发展和完善,作为对怀疑存在染色体异常临床表现的患者及具有相关异常家族史人群进行产前筛查和诊断的金标准,常规染色体核型分析技术面临新的应用挑战.本文简要综述了临床上常用的染色体核型分析技术包括常规染色体G显带、N带、C 带等的综合应用及与其他技术如荧光原位杂交(FISH)、染色体微阵列分析技术、定量荧光PCR(QF-PCR)、无创DNA检测技术的优劣比较,旨在说明将各种染色体核型检测分析技术合理地联合应用,取长补短,能更好地为遗传病诊断和产前诊断服务.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2015(033)002【总页数】3页(P134-136)【关键词】染色体;核型;G带;无创产前诊断【作者】谢文美;周凤娟;王强;赵小荣【作者单位】平凉医学高等专科学校基础教学部生物教研室,甘肃平凉744000;平凉医学高等专科学校基础教学部生物教研室,甘肃平凉744000;平凉医学高等专科学校基础教学部生物教研室,甘肃平凉744000;平凉医学高等专科学校基础教学部生物教研室,甘肃平凉744000【正文语种】中文【中图分类】R714.55自20世纪60年代以来，传统的染色体核型分析技术(G显带核型分析技术)作为临床上进行产前诊断染色体异常的金标准，在诊断遗传病和明确胎儿及自然流产胎儿原因及产前诊断中发挥着重要的作用。
随着分子细胞遗传学技术及测序技术的迅速发展，更快速、高效的分子产前诊断技术(如荧光原位杂交技术、染色体微阵列分析技术、无创产前诊断技术等)正被逐渐应用于临床，为各种遗传疾病的诊断提供重要依据和创新思路。
本文就各种染色体核型分析技术在临床染色体异常检测中的应用作一综述，以期为我国遗传病诊断及产前诊断的临床应用提供参考。
高分辨染色体核型分析1. 概述染色体核型分析是一种用于评估染色体异常的常规检测方法。
传统的染色体核型分析使用低分辨率的染色体带图进行观察和分析，然而，这种方法并不适用于检测微小染色体异常或亚显性染色体异常。
因此，高分辨染色体核型分析应运而生。
高分辨染色体核型分析通过使用高分辨率的染色体技术，如单基因数组比较基因组杂交（aCGH）或单体型多倍体检测技术（SNP），能够提供更详细和准确的染色体分析结果。
2. 原理高分辨染色体核型分析主要基于DNA杂交技术。
首先，从被检样本中提取DNA，然后对DNA进行荧光标记。
接下来，将荧光标记的DNA与参考DNA进行杂交，通过比较信号强度的差异，可以确定样本DNA中存在的染色体异常。
最常用的高分辨染色体核型分析方法包括：2.1 单基因数组比较基因组杂交（aCGH）aCGH技术是一种常用的高分辨染色体核型分析方法。
该方法使用DNA微阵列，将被检样本DNA和参考DNA同时杂交，通过比较信号强度的差异，可以确定染色体异常的位置和类型。
aCGH技术可以检测到小至数千个碱基对的染色体缺失或重复。
2.2 单体型多倍体检测技术（SNP）SNP技术是一种基于单体型多倍性的高分辨染色体核型分析方法。
该方法通过检测DNA序列中的单核苷酸多态性位点，可以确定染色体异常的位置和类型。
相比于aCGH技术，SNP技术具有更高的分辨率和更广的适用范围。
3. 应用高分辨染色体核型分析主要用于以下方面：3.1 染色体异常的筛查和诊断高分辨染色体核型分析可以为临床诊断提供重要的信息。
对于染色体异常的筛查和诊断，该方法能够检测到包括染色体数目异常、染色体结构异常等各种类型的染色体异常。
3.2 遗传病的检测和咨询高分辨染色体核型分析对于遗传病的检测和咨询也具有重要的作用。
通过分析染色体核型，可以确定染色体异常在遗传病形成中的作用，为家族遗传病的风险评估和遗传咨询提供依据。
3.3 生殖医学的辅助诊断在生殖医学领域，高分辨染色体核型分析被广泛应用于试管婴儿（IVF）的前期检测和胚胎染色体筛查。
医院细胞遗传室高分辨染色体的制备与识别作业指导书1目的为获得具有550条带及850条带以上的染色体分裂相，从而以此为依据进行人类染色体高分辨分析。
2实验方法手工显带法3实验原理正常情况下，人外周血中是没有分裂相的，只有在异常情况下才能发现。
植物血球凝集素（PHA）是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂，在PHA作用下，原处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进而进行有丝分裂。
利用PHA这一特性，淋巴细胞经过含有PHA培养液培养，在体外便可获得丰富的生长活跃、含有丝分裂细胞的细胞群，当细胞增殖到一定数量时，加入5-氟尿嘧啶和尿嘧啶核苷从而阻断DNA的合成，将其同步在S期。
17个小时后加入胸腺嘧啶核苷（TDR）释放细胞，使细胞有丝分裂继续，进入分裂期后加入染色体缩短抑制剂溴乙锭（EB），并加入秋水仙胺破坏纺缍丝的形成，最终获得高分辨率染色体。
4性能特征经G显带处理后可见550-850条显带。
5仪器及耗材酒精灯，烧杯，天平，离心机，CO2培养箱，冰盒，载玻片，玻片盒，光学显微镜，灭菌注射器（5ml），离心管，无菌吸管，量筒，培养瓶，试剂瓶等。
6试剂5%的RPMI1640小牛血清培养基5ml；秋水仙素浓度：20μg/ml；低渗液：0.075mol/L的KCl溶液；卡诺固定液（甲醇:乙酸=3:1）；0.25% EDTA-trypsin；生理盐水；10-5M 5FU （五氟尿嘧啶) ；10-4M Uridine（尿嘧啶核苷）；1/15M KH2PO4；10-3M TDR（胸腺嘧啶）；1/15M Na2HPO4；1mg/ml EB （溴化乙锭）；2.5%胰酶；0.4%酚红。
7操作流程7.1细胞培养将0.25-0.3ml外周血入高分辨培养基；培养72小时后，加Frdu和尿嘧啶核苷各100µl；17小时后加TDR100µl；继续培养4小时加EB 50µl；45分钟后加秋水仙胺35µl10分钟后收获。
2021复杂染色体重排采用改良高分辨G 显带技术分析的效果范文 摘要： 目的应用染色体改良高分辨G显带技术, 对四例复杂染色体重排(CCRs) 携带者进行细胞遗传学分析, 探讨该技术对CCRs的临床应用价值。
方法选取因复发性流产或不孕不育就诊于广东省妇幼保健院医学遗传中心的4对夫妇, 经改良高分辨G显带技术制备外周血染色体, 核型分析并与常规方法进行比较。
结果改良高分辨G显带染色体分辨率达到550条以上核型占比50%以上;核型分析提示4对夫妇中各有一方是CCRs携带者, 涉及3～4条染色体易位;易位染色体涉及3号和12号染色体最多。
结论改良高分辨G显带技术能更好的发现CCRs携带者的多个染色体易位, 避免漏诊。
该技术成本较低、操作简单, 适合在基层单位推广。
关键词： 高分辨;G显带; 复杂染色体重排; 染色体; Abstract： ObjectiveTo investigate the cytogenetic analysis of 4 patients with complex chromosomal rearrangements (CCRs) by using chromosome modified high resolution G banding technique, and explore the clinical value of this technique in CCRs. Methods The karyotype of peripheral blood chromosomes was prepared from 4 couples referring for recurrent abortion or infertility in the Medical Genetic Center of Guangdong Women and Children Hospital. The karyotype of peripheral blood was prepared by improved high resolution G banding technique and compared with conventional methods. Results The resolution of the modified high resolution G banding chromosomes was over 50%, and the karyotype analysis showed that one of each couple was CCRs carriers, which involved 3 or 4 chromosome translocations. The most involving chromosomes were 3 and 12. Conclusion Improved high resolution G banding technique can better detect multiple chromosome translocations and avoid missed diagnosis in CCRs carriers. The technology is simple in operation and low cost, and is suitable for promotion in grassroots units. Keyword： Highresolution; G banding; Complex chromosomal rearrangement; Chromosome; 复杂染色体重排(complex chromosomal rearrangements, CCRs) 是一种染色体结构性异常, 通常涉及两条或更多的染色体, 且至少有3个或以上断裂点, 染色体重新排列组合并伴随遗传物质的交换[1]。
