检测水中双酚A高效液相色谱法与酶联免疫试剂盒法的比较
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免疫学课后作业比较几种免疫标记技术的异同。
答:根据标记物种类的不同,免疫标记技术可以分为放射免疫分析、酶标记免疫分析、荧光标记免疫分析、化学发光标记免疫分析、胶体金标记免疫分析技术,它们之间具有相同点,也有不同之处,现将其归纳如下。
一、相同点主要包括以下几个方面:1、均具有高特异性。
五种免疫标记技术的免疫技术都是采用抗原抗体反应,而抗原与抗体的结合是一一对应、特异性结合的,故它们都具有非常高的特异性。
2、均具有高灵敏性。
由于五种免疫标记技术的标记技术均采用示踪物标记,例如酶、放色性核素、荧光素、胶体金以及致密物质等,当与标本中的相应抗体或抗原反应后,可以不必测定抗原抗体复合物本身,只需测定复合物中的标记物,通过化学或物理的手段使不见的反应放大,转化为可见的、可测知的光、色、电、脉冲等信号,并可借助仪器精密测定,从而间接测出微量的抗原或抗体。
3、检测对象相同。
除了放射免疫技术只能检测抗原外,其他四种免疫标记技术均可检测抗原或者抗体,即通过已知抗原(或抗体)特异性结合待测抗体(或抗原),从而定性或定量地测出抗体或抗原。
4、免疫标记的程序基本相同。
其包括纯化抗原或抗体、确定标记物质(即决定了最终的检测方式)、进行标记、对标记产物分离纯化和分析鉴定等一系列程序。
二、不同点主要包括以下几个方面:1、检测原理不一样。
首先,酶免疫技术是以酶标记的抗体(或抗原)作为主要试剂,将抗原-抗体反应的特异性和酶催化底物反应高效性和专一性结合起来的一种免疫方法,其对作为标记用的酶具有特定的要求,如活性高、纯度高等;放射免疫标记技术是以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法;免疫荧光技术是以荧光素作为标记物与已知的抗体或抗原结合,然后将荧光素标记的抗体作为标准试剂,用于检测和坚定未知的抗原,其对用于标记的荧光素也有特定的要求,如荧光效率高,与蛋白质结合稳定,易于保存等;发光免疫分析技术是将发光分析与免疫反应相结合而建立的一种新型超微量分析技术,它是使用发光剂标记抗体(或抗原),通过发光检测抗原(或抗体)反应的免疫分析方法;免疫胶体金标记技术则是以胶体金作为示踪标记物,而胶体金在碱性环境中带负电荷,与抗体蛋白质分子的正电荷基团因静电而形成牢固结合应用于抗原抗体反应的一种新型免疫检测方法。
液相色谱测定双酚A摘要:由于双酚A在水样中通常为微量甚至痕量级,且水样基体复杂,干扰物多,往往难以直接测定,必须经过样品富集处理(包括萃取、洗脱、净化、浓缩、定容等步骤)后才可进行分析,本实验采用了高效液相色谱法对水样中双酚A 的测定。
关键词:双酚A;高效液相色谱;水样。
双酚A(BPA)是一种重要的有机化工原料主要用于生产环氧树脂、聚碳酸酯、聚砜树脂的单体;又可用作酚醛树脂、可塑性树脂的生产原料和橡胶、塑料、农药、油漆、油墨等的抗氧化剂及稳定剂;在食具、食品包装材料、塑料制品、防腐涂料、外科修补术用的填充物、输配水及贮水材料等方面应用广泛¨。
BPA在一定条件下会因溶出、迁移、排放及事故等原因进入水体。
研究表明BPA不仅对水生生物有急性毒性,而且还具有雌激素的特性,是环境内分泌干扰物之一,可影响人或动物的中枢神经系统和生殖免疫系统,降低人或动物的生殖繁衍能力,并被怀疑诱发生殖系统和心血管系统的癌变等。
因此,水样BPA的测定具有十分重要的意义。
目前,水样中BPA的常规测方法主要有气相色谱一质谱联用法(GC—MS) 、液相色谱一质谱联用法(LC—MS) 、液相色谱一多级质谱联用法(LC—MS—MS)以及高分辨色谱一高分辨质谱法(HRGC/LC —HRMS)No]等,Gomes…、任仁¨、赵利霞等先后对此进行了评述。
基于色谱或色一质联机的BPA检测方法灵敏度高、选择性好,因此,本实验采用高效液相色谱法测定水中的双酚A。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
液相色谱-串联质谱法测定污水处理厂水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物液相色谱-串联质谱法测定污水处理厂水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物一、引言污水处理厂是将废水进行处理,去除其中的有害物质,最终达到排放标准。
然而,近年来,一些有机物污染物,如双酚A、四溴双酚A和烷基酚类化合物等,经常被检测出在污水处理厂的水样中。
这些化合物具有潜在的环境和健康风险,因此对其进行准确测定是十分重要的。
二、双酚A双酚A (BPA) 是一种常见的内分泌干扰物,广泛用于塑料制品和树脂的生产中。
由于其广泛应用,它已经被检测出在各种环境样品中,包括水和废水中。
传统的双酚A测定方法主要依赖于气相色谱-质谱法,但该方法需要样品预处理过程复杂,且仪器昂贵。
液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 是一个更快捷、更灵敏的测定方法。
三、四溴双酚A四溴双酚A (TBBPA) 是一种阻燃剂,普遍应用于电子产品和塑料制品中。
它具有持久性,易在环境中累积并引起一系列生态问题。
TBBPA可以通过液相色谱-串联质谱法定量测定,该方法具有高分辨率、高选择性和高灵敏度。
四、烷基酚类化合物烷基酚类化合物包括烷基酚 (AP) 和烷基酚聚氧乙烯醚(APEOs)。
它们广泛存在于工业和家庭用品中,是水体中常见的有机污染物之一。
由于其疑似致癌性和内分泌干扰作用,十分关注。
LC-MS/MS是测定烷基酚类化合物的最常用方法,它准确快速、操作简便。
五、实验方法液相色谱-串联质谱法测定水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物主要包括以下步骤:1. 样品预处理:水样中的有机物需经过提取和净化处理,消除干扰物。
2. 色谱条件优化:选择适当的色谱柱、流动相以及梯度洗脱条件。
3. 质谱条件设置:设置质谱的离子源参数、离子传输参数和离子检测参数。
4. 标准曲线制备:制备一系列浓度已知的标准溶液,通过建立标准曲线来定量待测样品中目标化合物的浓度。
5. 样品测定:将经过预处理的样品通过液相色谱-串联质谱系统,测定目标化合物的浓度。
荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法检测食用油黄曲霉毒素B1的比较黄思伟;张银菊;宋红;张翠【摘要】对荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法在检测食用油黄曲霉毒素B1的过程和结果进行比较。
结合数据发现,三种方法在检测过程中各有优劣,检测结果均能满足一般检测要求。
因此,检测员因根据实验室的环境设备和样品数量择优选择适合的方法。
【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2014(000)023【总页数】2页(P48-49)【关键词】黄曲霉毒素B1;荧光光度法;高效液相色谱法;酶联免疫法【作者】黄思伟;张银菊;宋红;张翠【作者单位】云浮市质量计量监督检测所食品化工室;云浮市质量计量监督检测所食品化工室;云浮市质量计量监督检测所食品化工室;云浮市质量计量监督检测所食品化工室【正文语种】中文黄曲霉毒素(Afilatoxin,AFT)是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物。
黄曲霉毒素分为B族和G族两大类及其衍生物,又以黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性最大[1],并于1988年被国际癌症研究机构(AIRC)列为Ⅰ类致癌物。
黄曲霉毒素主要污染粮油食品,如花生、玉米和大豆等[2],对人类的生命健康造成了极大的威胁,世界各国对食用油中AFB1规定了严格限量标准。
目前,我国检测机构对食用油中AFB1的常用检测方法有荧光光度法(SFB)、高效液相色谱法(HPLC)和酶联免疫法(ELISA)等。
在食品检测中选择省时省钱又精确的方法对于检测的效率至关重要,因此本文对SFB、ELISA和HPLC在检测粮油中的优劣进行比较分析。
材料与方法Vicam V2系列4型荧光光度计;Agilent LC120高效液相色谱仪;Agilent 1260 FLD检测器;318C酶标仪;Mycosep系列多功能净化柱;GCG-24M氮吹仪;Milli-Q Direct 1b 纯水/超纯水一体化系统;黄曲霉B1ELISA快速检测试剂盒(山西德丰信成生物有限公司);AFB1标准品;BDS HYPERSIL C18柱;甲醇(分析纯);石油醚(分析纯);乙腈(色谱纯);三氟乙酸(分析纯);正己烷(色谱纯);溴(分析纯);;二水硫酸奎宁(分析纯);吐温-20。
高效液相色谱法测定桶装水及水桶中双酚A含量刘涛;黄子晏【摘要】该文建立固相萃取/高效液相色谱测定桶装水及水桶中双酚A含量的方法.桶装水样品经C18固相萃取柱富集,水桶用二氯甲烷溶解甲醇提取双酚A;采用C18色谱柱,以乙腈-水(V/V,60:40)为流动相,检测波长224 nm,高效液相色谱法测定双酚A含量.在最优检测条件下,双酚A在0.4~10μg/mL浓度范围内线性关系良好(r2=0.9998),方法的检出限为0.069μg/mL,定量限为0.23μg/mL,平均回收率为98.3%.该方法简便、灵敏、重现性好,所抽取桶装水中并未检测到双酚A的存在,水桶材质中检测出双酚A的含量为37.1μg/g.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2018(044)011【总页数】5页(P152-156)【关键词】高效液相色谱法(HPLC);固相萃取;桶装水;双酚A【作者】刘涛;黄子晏【作者单位】莆田学院环境与生物工程学院,福建莆田 351100;福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室,福建莆田 351100;莆田学院环境与生物工程学院,福建莆田 351100【正文语种】中文【中图分类】X56;O6570 引言双酚A(BPA)是聚碳酸酯的生产单体,生产聚氯乙烯的稳定材料,环氧树脂的主要组成部分,由俄国科学家Alexander P.Dianin在1891年利用两分子苯酚和一分子丙酮在氯化氢催化下第一次合成出来[1]。
由于双酚A制品的良好机械性能、低吸水性及热稳定性,因此被大量用于制作水管、水杯、奶瓶、玩具以及其他食品容器。
然而双酚A是一种环境类激素,能够干扰人体内分泌系统[2],不仅能够导致肥胖问题同时还有增加癌变[3]、畸形的可能。
市场所售桶装水,绝大部分水桶材均质为聚碳酸酯,双酚A作为聚碳酸酯的合成单体,水桶中残留的双酚A有可能会从水桶迁移至饮用水中,进而进入人体内。
目前,双酚A的残留可通过液-液萃取[4]、固相萃取[5]进行富集,而后利用高效液相-荧光法[6]、液相色谱-质谱联用[7]或气相色谱-质谱联用法[8]进行检测,此外电化学[9-10]也是一种高灵敏检测BPA的方法。
高效液相色谱法和化学发光酶免疫分析法测定茶碱的血药浓度范毅;刘梦【摘要】目的采用高效液相色谱法和化学发光酶免疫分析法对茶碱血药浓度进行测定,比较两种方法的差异.方法分别使用高效液相色谱法和化学发光酶免疫分析法对40例患者使用茶碱后的血药浓度进行检测,对两种方法的结果进行比较.结果高效液相色谱法的平均回收率为102.77%,日内RSD为0.8543%~7.5472%.日间RSD为1.4758%~4.6979%;化学发光酶免疫分析法的平均回收率为101.17%,日内RSD为2.2554%~7.4972%,日间RSD为0.789 8%~4.391 7%.结论两种方法的茶碱浓度测定值无显著性差异,测定结果无需互相校正.%tive Using ihe HPLC and CLEIA to determine the serum theophylline concentration and comparing the two methods.Methods Using IIPLC and CLEIA to determine the serum theopbyiline concentration of 40 patients,then comparing two restles of the two methods. Results The average recovery rate of using HPLC was 102. 77% , the intraday RSD was 0. 854 3% -1. 547 2% , the interday RSD was 1. 475 8% -4. 697 9% ; the average recovery rate of using CLEIA was 101. 17%, the intraday RSD was 2. 255 4% -7. 497 2%, the interday RSD was 0.789 8% -4.391 7%. Conclusion There was no obvious error between two methods. The results of two methods were accurate,sensitive,stable,and no error.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)021【总页数】2页(P6-7)【关键词】茶碱;高效液相色谱法;化学发光酶免疫分析法;血药浓度【作者】范毅;刘梦【作者单位】江苏省泰州市人民医院,江苏泰州,225300;南通大学医学院,江苏南通,226000【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R974+.3茶碱是黄嘌呤类抗支气管痉挛药,具有良好的平喘、抗炎作用,几十年来一直是治疗支气管哮喘等急、慢性肺部疾病的常用药物,但其治疗剂量与中毒剂量较接近,安全范围较窄,剂量过大或给药速度太快,易引起严重毒性反应甚至死亡,因此检测茶碱的血药浓度非常重要。