香蕉dna的粗提取实验

DNA许愿瓶一、教学目标1.了解DNA的概念和性质2.学会利用简易方法粗体香蕉的DNA3.对提取的DNA进行染色，使用显微镜观察DNA二、教学重难点教学重点：对DNA的介绍教学难点：提取DNA，制作简易标本三、教学准备四、教学过程（一）回顾：回顾上次课所学知识，5分钟（1-2个学生回答），教师总结（二）引入大家喜欢吃香蕉嘛？大家平时有观察过香蕉与香蕉之间是不同的，味道也是不一样的。

那大家知道香蕉的样子和味道主要是由什么决定的嘛？对DNA，不管是植物还是动物，呈现给我们的样子都是由它的DNA决定的，今天我们就来看看香蕉的DNA是什么样子的。

（三）实验过程1.制取香蕉研磨液1）加50ml温水和2g食盐研磨一段约2cm长的去皮香蕉，研磨至呈糊状。

2）用纱布过滤研磨液，存入烧杯中。

2.粗提取DNA1）向烧杯内加入少许洗洁精，按一个方向轻摇1分钟。

（洗洁精中含有的SDS（十二烷基磺酸钠）具有使蛋白质变性，与DNA分离的作用，有利于提取DNA）。

2）加入与研磨液体积比为1:1的酒精。

3.DNA标本制作和观察1）用竹签小心地从烧杯中提取一点DNA样本，并将它放置在一片干净的显微镜载玻片上。

2）保持载玻片的水平，盖上盖玻片，用染色剂（1%甲苯胺盐、亚甲基蓝）给样本染色。

3）在显微镜下观察这些析出物，你不要指望能够看到著名的双螺旋结构。

即使用电子显微镜，也是看不到的。

你能看到的，只是一团团的DNA，就像纠缠在一起的线团。

后面会有专门的课程来介绍DNA的结构。

五、教学总结学生回顾老师总结。

DNA粗提取与鉴定“dna的粗提取与鉴定”实验研究综述文摘：在“DNA粗提取与鉴定”实验中，实验原理较为抽象复杂，实验步骤较多，实验效果不理想。

因此，目前我国在实验材料的选择、实验试剂和工具的处理、实验方法的优化、实验教学设计的创新等方面进行了大量的研究。

本文综述了粗DNA提取与鉴定的实验研究进展和教学。

关键词：DNA的粗提取与鉴定实验改进教学设计中文图纸分类号：G633-91“dna的粗提取与鉴定”实验是人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题五课题1的实验内容，教材中详细介绍了动植物细胞dna提取、分离、提纯所涉及到的一般原理、方法和实验材料的选取，但并没有以哪一种材料为例具体介绍其操作过程。

且在dna分离、提纯过程中理想的方法应该是通过离心来不断分离、提纯，而一般中学的实验室又不具有离心设备，这就对本实验的可行性带来了一定的影响。

为了使实验变得简单、可行，许多学者对该实验进行了研究与改进。

1.实验原理真核生物dna核蛋白的溶解度随nacl浓度的变化而改变。

在0.14mol/l时,溶解度最小,而在纯水或1～2mol/l的盐溶液中,溶解度则较大。

利用这一原理,可以将dna溶于nacl溶液中,而与其他物质分开。

在dna的提取物中常常含有蛋白质及其他一些杂质,而使dna提取物呈黄色。

为了去除这些杂质(主要是蛋白质),利用十二烷基磺酸钠(sds)使蛋白质变性的原理,使蛋白质与dna分开。

dna不溶于酒精,而细胞中有些物质则可溶于酒精。

在中等浓度单价阳离子(2mol/l1nacl)存在下,酒精易使DNA沉淀，这就是为什么教科书实验使用2mol/lnacl溶液溶解DNA而不是蒸馏水。

2.实验材料的选择2.1原材料改进的原因根据教材的介绍，该实验的材料可以选择动物材料(如鸡血)，也可以选择植物材料(如菜花、洋葱等)。

但是，选用dna含量相对较高的生物组织，实验成功的可能性更大。

课本推荐使用的实验材料是鸡血,优点是细胞易破裂,dna含量大,现象明显;缺点一是费用太高,对普通学校来说,买活鸡显然不现实,与市场上的小商贩联系购买新鲜鸡血,很难定时、定量地保证供应;二是实验步骤烦琐,操作要求高,学生一堂课很难完成实验。

植物D N A的粗提取与鉴定实验摘要：对香蕉的果肉组织进行DNA的粗提取,并用二苯胺﹝沸水浴﹞进行DNA鉴定;实验原理：1.洗涤剂可溶解植物细胞膜在氯化钠溶液中的溶解度曲线呈U字形;3.细胞中的某些蛋白质溶于酒精,而DNA不溶;4. DNA分子在低温下更易凝结;5.在沸水条件下,DNA遇二苯胺会被染成染色;6.离心机可使悬浊液中的颗粒沉淀下来﹝详见附录﹞实验器材：玻璃棒、烧杯、滤纸、试管、试管夹、电磁炉、离心机、NaCl、二苯胺试剂、洗涤剂、香蕉等实验步骤：1.取50克左右的去皮香蕉,放入研磨钵中研磨,同时加入一定量的氯化钠与洗涤剂,尽可能的充分研磨,使更多的DNA从植物细胞中释放出来,但动作要轻缓,否则会产生大量泡沫,不利于后续操作;2.研磨好后,过滤并收集研磨液,在研磨液中加入氯化钠,使氯化钠溶液物质的量浓度为2mol/L,过滤除去不可溶杂质;再调节氯化钠溶液物质的量浓度为L,析出DNA,过滤除去溶液中的杂质,再用物质的量浓度为2mol/L的氯化钠溶液溶解DNA;3.加入与DNA溶液体积相等的、冷却的酒精溶液﹝体积分数为百分之九十五﹞,静置2到3分钟,溶液会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物﹝玻璃棒带负电,易吸附DNA﹞,并用滤纸吸去上面水分,注意搅拌动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀;4.取两支20ml试管,各加入物质量浓度为2mol/L的氯化钠溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解;然后,向两支试管各加入4ml的二苯胺试剂;混合均匀后,将两支试管放入沸水中加热5分钟,待两支试管冷却后,比较试管颜色的变化,看看溶有DNA的溶液是否变蓝;实验过程摘要：1.在研磨时发现,用研磨钵难以将香蕉研磨充分,估计是水分较多导致的;后用榨汁机进行该部分实验,效果好很多,没有较大的固体;并意外的发现剧烈的搅拌并没有产生大量泡沫;2.进行过滤时,所得到的研磨液非常少,担心DNA没有完全溶到研磨液中,所以往滤渣加一定量的2mol/L氯化钠溶液,用玻璃棒搅拌,再过滤一次;第二次过滤时,产生了大量的气泡;后来发现原来是第二次水分较多,使滤液直接通过滤纸底部尖端滴下,在经过漏斗下端细长部分时产生气泡;让滤液沿漏斗壁流下时则不再产生气泡;3.在将滤液的氯化钠量浓度稀释到L的过程中,并未发现任何絮状物,整个溶液非常澄清;一度以为实验失败,难以进行;后询问老师,老师认为有可能是因为植物DNA 的提取物片段较小,加之本身DNA含量不多,故看不见;可试下离心实验;4.于是将滤液上层的泡沫去掉,取清液分别加入12支离心管中,放入离心机进行试验;经过一段时间后,取出观察,仍未发现絮状物;我们认为可能是离心时间过短,转速不够;便再次放入,第二次在老师的指点下,振荡离心管,终于发现小段白色絮状物,每支离心管都有;5.我们用滤纸进行过滤,发现过滤速度非常慢,加之由于时间关系,便直接将一支白色絮状物含量较多的离心液倒入一支试管中,加入4ml的二苯胺试剂,取另一支加入同离心液等量的2mol/L的氯化钠溶液,同样加入4ml的二苯胺试剂作对照;再放入沸水中加热;6.遗憾的是,当时已打上课铃,实验还未做完,刘越老师说加热部分可统一交给实验老师进行;当第三节下课后来到实验室,发现还未加热;第二天早上再去时发现试管已被倒掉;故实验结果不得而知;实验结果：成功提取了白色絮状物,但二苯胺鉴定结果未知;实验总结：1.总的来说,实验还是比较有意义的,虽然未完成DNA鉴定实验,但已提取出白色絮状物,并尝试着使用离心机;整个实验过程有很多问题,我们学会了独立地解决一部分问题,当然有一些问题仍需请教老师;2.一些难以观察到,难以测量的量可通过一些易观测的现象表达;如；在确定氯化钠的量浓度已调节到L,是通过溶液无新的絮状物生成得出的;3.实验设计的一些步骤在未进行实施,不清楚效果,在效果不好时应及时改进;如在用研磨钵研磨时,效果很不好,当时以为是研磨的时间不够,到后面才改用榨汁机,而刚好此时别的组在用榨汁机,这样浪费了很多时间;4.做实验前,或者是说设计实验前应去查阅资料;仅以靠课本,且课本还未对此实验进行专门的介绍是远远不够的;如果现在再让我重新设计一次实验,我会改进许多步骤,如；1.选取材料时会用DNA含量更高的菜花进行实验;2.在实验前,可先将香蕉冷冻24小时;冷冻过后,在研磨时,植物细胞更易破裂,便提取DNA;3.植物DNA片段比动物的细碎的原因是植物细胞的细胞质含有DNA酶,这种酶可分解DNA;有以下几种方法可以抑制该酶的活性﹝1﹞可加入EDTA﹝乙二胺四乙酸二钠﹞﹝2﹞可在低温下进行操作﹝3﹞可调整pH,使其大小约为,呈偏碱性;方法1可能不太能够实现,但方法2,3还是可行的;这些措施都可以提高实验的成功率,与此同时查资料后,面对实验意外的状况时,不会太茫然、不知所措;这样可以节省很多时间,实验后面部分就不会太紧张,导致一些步骤都直接省略了﹝如离心后,本可利用冷却的酒精溶液进行进一步提纯,这是提取的白色絮状物较少的很重要的一个原因﹞附；离心机原理当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时,由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉;粒子越重,下沉越快,反之密度比液体小的粒子就会上浮;微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关,并且又与重力场的强度及液体的粘度有关;象红血球大小的颗粒,直径为数微米,就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程;参考资料视频资料文献资料。