常见荧光定量PCR仪汇总

四种常见PCR仪的区别及运用PCR扩增仪（俗称PCR仪）PCR：PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。

PCR仪实际就是一个温控设备，能在95℃，55℃，72℃之间很好地进行温度控制。

PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪，是利用PCR(Polymerase chain reaction，聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备，被广泛运用于医学、生物学实验室中，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定等。

根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR 仪，原位PCR仪，实时荧光定量PCR仪四类。

1). 普通PCR仪（2万以下，赛默飞、伯乐、大龙，艾本德）一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪，也叫普通PCR仪。

如果要做不同的退火温度需要多次运行。

主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。

该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。

如:启步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型2). 梯度PCR仪（2万-8万，赛默飞、伯乐、大龙，艾本德）一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（温度梯度，通常有12种温度梯度）的PCR仪称作梯度PCR仪。

因为被扩增的不同DNA片段，其最适退火温度是不同的，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR 扩增，就可以筛选出表达量高的最适退火温度，进行有效的扩增。

用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。

实时荧光定量PCR仪介绍 | QPCR的国际标准---MIQE | 联系我们仪器名称实时荧光定量PCR仪英文名称Real-Time QPCR System国产/进口进口产地/品牌美国品牌，德国制造型号Mx3000P/Mx3005P实时荧光定量PCR仪【性能参数】美国安捷伦Stratagene公司实时荧光定量PCR仪Mx3000P/Mx3005PMx3000P系统性能指标：激发光源：石英卤钨灯检测器：扫描光电倍增管(PMT）多重检测：四个光学通道，并提供用户选择的滤光系统加热系统：Peltier的热循环加热模块内置芯片在断电或连接中断时自动保存数据样品量：96孔高通量平台，反应体系10-100ul外形尺寸：33cm(宽) x 46cm(长) x 43cm(高)，重量：20kgMx3000P系统参数配置：动力学范围：10个数量级激发光范围：350—750nm发射光范围：350—700nm温度均一性：+/- 0.25℃温度精确性：+/- 0.25℃升降温速率：2.5℃/秒兼容所有常规荧光染料：FAM、SYBR Green I 、Texas Red、ROX、TET 、Cy3、Cy5、HEX、JOE、VIC 、TAMRA、ALEXA Fluor 350等标准配置的滤光片组为：Cy5，HEX，FAM，ROX具有快速QPCR功能(反应时间在50分钟内)Mx3000P软件功能：•分析功能强大：通过一台计算机可连接和控制6台QPCR仪;可同时分析12个独立的96孔板;也可以在同一块板上进行和分析不同的实验•设置和运行简单：根据实验目的和方法不同，可选择多种实验设置：（多重）绝对定量PCR、相对定量PCR、Sybr Green定量及熔解曲线分析、SNP分析、Molecular Beacon熔解曲线分析等使用简便：实验条件设置、反应过程监控、数据显示分析三大功能模块从同一界面链接，直观简便•实时观测和数据分析：反应过程中可实时监测和收集荧光信号，在实验还未结束的情况下便可对现有数据进行分析提供多种数据显示模式：用户可根据自己需要选择：扩增曲线模式、熔解曲线模式、标准曲线模式、原始荧光信号模式、最终定量结果模式等•多种数据传输格式：所有结果可以原始数据的形式显示，也可输出到Excel 中作进一步分析，曲线和表格等结果可直接用于PowerPoint、Text等文档中。

罗氏荧光定量PCR仪器简介罗氏荧光定量PCR仪器（Roche Real-Time PCR System）是一种用于荧光定量PCR（Polymerase Chain Reaction）的仪器。

PCR技术是一种广泛应用于分子生物学领域的技术，可以在体外大量复制DNA序列。

荧光定量PCR通过荧光信号的强度来定量PCR反应产物的数量，具有高灵敏度、高准确性和高通量的特点，被广泛应用于生命科学研究、疾病诊断和药物研发等领域。

罗氏是一家全球领先的医药和诊断解决方案提供商，旗下的荧光定量PCR仪器采用先进的技术和设计，为用户提供可靠和精确的PCR分析结果。

主要特点1.高灵敏度：罗氏荧光定量PCR仪器采用先进的光学系统，能够检测和定量非常低浓度的荧光信号，提高了实验的灵敏度。

2.高准确性：仪器内置的精确温度控制系统和优化的PCR反应条件，保证了实验结果的准确性和可重复性。

3.高通量：罗氏荧光定量PCR仪器支持多样品同时进行PCR反应，大大提高了实验的通量，节省了时间和成本。

4.灵活性：仪器配备了多样的PCR试剂和芯片，可以适应不同实验需求的扩增反应。

5.友好的用户界面：仪器具有直观的用户界面和易于操作的软件，用户可以轻松设置实验参数、监控实时反应和分析数据结果。

主要应用罗氏荧光定量PCR仪器在各种领域都有广泛的应用，包括但不限于以下几个方面：1.基因表达分析：通过定量PCR技术，可以准确测量基因在不同组织、细胞或疾病状态下的表达水平，帮助科研人员了解基因的功能和调控机制。

2.微生物检测：罗氏荧光定量PCR仪器可以用于检测和定量微生物如细菌、病毒、真菌等的核酸序列，广泛应用于食品安全、临床微生物学和环境监测等领域。

3.病毒载量检测：病毒载量是评估病毒感染严重程度的重要指标，罗氏荧光定量PCR仪器可以定量分析病毒的核酸含量，用于临床病毒学研究和病毒感染诊断。

4.药物研发：罗氏荧光定量PCR仪器可以用于药物研发过程中的基因表达分析、药物代谢相关基因的筛选和药物安全性评估等方面，为药物研发提供有力支持。

德国耶拿qTOWER 3G德国耶拿qTOWER3G touch罗氏LightCycler 480II仪器光源采用蓝色、绿色、红色、白色（RGBW）四个高强度长寿命LED光源采用蓝色、绿色、红色、白色（RGBW）四个高强度长寿命LED光源高强度，宽光谱光源，寿命不低于10000小时通道最高六通道的配置，可灵活配置成1-6通道中的任意一种通道数，而且使用过程中可以随时进行通道数升级，以满足未来更多的检测需求最高六通道的配置，可灵活配置成1-6通道中的任意一种通道数，而且使用过程中可以随时进行通道数升级，以满足未来更多的检测需求≥5通道（校正通道，专用共振通道FRET除外）检测器通道式光电倍增管（CPMT）通道式光电倍增管（CPMT）冷CCD滤光系统有12 种激发/检测滤光片组可供自由组合，包括滤光片错配的FRET检测组合和专用于蛋白熔解曲线分析的滤光片组有12 种激发/检测滤光片组可供自由组合，包括滤光片错配的FRET检测组合和专用于蛋白熔解曲线分析的滤光片组激发/检测可自由组合≥20种样品通量96孔96孔96孔/384孔激发光范围≥5通道广泛的激发波长400－700nm，可以使用尽可能多的荧光信号检测光范围400－700nm可用荧光染料（470 nm-520 nm）FAMTM, Sybr®Green, Alexa488®（515 nm-545 nm）JOETM, HEXTM, VIC®, YakimaYellowTM（535 nm-580 nm）TAMRATM, DFOTM,Alexa546®, NEDTM（565 nm-605 nm）ROXTM, TexasRed®, Cy3.5®（630 nm-670 nm）Cy5®, Alexa633®,Quasar670TM（660 nm-705 nm）Cy5.5®, LightCyclerRed®（470 nm-580 nm）FAMTM (donor) /TAMRATM (acceptor)（470 nm-670 nm）FAMTM (donor) / Cy5® (acceptor)（470 nm-705 nm）FAMTM (donor) /Cy5.5® (acceptor)(515 nm-670 nm)JOETM (donor) / Cy5®(acceptor)(470 nm-605 nm)FAMTM(Donor)/ROXTM (acceptor)(490 nm-580 nm)SYPRO® Orange（470 nm-520 nm）FAMTM, Sybr®Green, Alexa488®（515 nm-545 nm）JOETM, HEXTM, VIC®, YakimaYellowTM（535 nm-580 nm）TAMRATM, DFOTM,Alexa546®, NEDTM（565 nm-605 nm）ROXTM, TexasRed®,Cy3.5®（630 nm-670 nm）Cy5®, Alexa633®,Quasar670TM（660 nm-705 nm）Cy5.5®, LightCyclerRed®（470 nm-580 nm）FAMTM (donor) /TAMRATM (acceptor)（470 nm-670 nm）FAMTM (donor) / Cy5® (acceptor)（470 nm-705 nm）FAMTM (donor) /Cy5.5® (acceptor)(515 nm-670 nm)JOETM (donor) / Cy5®(acceptor)(470 nm-605 nm)FAMTM (Donor)/ROXTM(acceptor)(490 nm-580 nm)SYPRO® Orange荧光染料（SYBR Green I）等检测动态范围10个10个10个温度均一性±0.15 ℃±0.15 ℃±0.2 ℃升降温速度升温速率：最大8 ℃/s降温速率：最大6 ℃/s升温速率：最大8 ℃/s降温速率：最大6 ℃/s≥3.3 ℃/s(升降温速率连续可调)实时荧光定量PCR仪比较表罗氏LightCycler 96美国热电（原ABI）Prism 7500 Fast美国热电（原ABI）Prism 7900HT Fast高强度白色固态光源的寿命长达10000-20000个小时。

P C R实验室主要仪器设备地区试剂准备区标本制备区序号所需仪器数目型号规格1冰柜1－ 20℃移液器10.5-10ul移液器120－ 200ul210-100ul 或许 5-50ul或许移液器110-200ul3混匀器1200－ 2500 转/ 分4微型离心计1Mini-6k1金属浴1一般 ( 达到 100℃ )2冰箱14℃，－ 20℃300-16000 转 / 分 ( 能达到3高速离心计114000)4混匀器1200－ 2500 转/ 分5生物安全柜或净化工作1单人单面操作台6清洗池1500× 500mm移液器10.5-10ul7移液器120－ 200ul移液器1100－ 1000ul扩增区1核酸扩增仪（PCR）1TC-XP-AMini-6k，配可离心 8 联管转以2微型离心计1头上1清洗池1500× 500mm不2冰箱14℃，－ 20℃含3恒温水浴箱137℃－ 100℃医产物剖析区4医用核酸分子迅速杂交1凯普 HHM-2用仪核5移液器120－ 200ul酸移液器1100－ 1000ul分子迅速杂交仪和荧光定量PCR仪（用于展开导流杂交平台检测项目（如 HPV21分型、 STD三联检），可不用荧光定量PCR仪。

）耗材清单：耗材数目0.2mlPCR 管盒（ 96 孔）起码 2个200ul枪头盒起码 4个1000ul枪头盒起码 3个10ul 枪头盒（盒高依据采买起码 2个枪头大小配套）1.5ml 离心管架 (60 孔 )起码 3个废液缸 2 个1000ul枪头（蓝色）若干，建议带滤芯200ul枪头（黄色或透明）若干，建议带滤芯10ul 枪头（透明）若干，建议带滤芯，选择长款（防止污染枪）PCR管，单管若干，建议购置入口1.5ml 离心管若干，建议购置入口小镊子起码2 个样本管架（放采样瓶用）2个一次性橡胶手套和PE手套若干，橡胶手套建议无粉挂衣钩（挂毛巾或实验服）建议每个分区一件实验服垃圾桶（配生物垃圾袋）3个酒精喷壶3个计时器2个其余实验用品： 75%酒精、次氯酸钠片或许84 消毒液、生理盐水、浮板（假如是水浴会用到）、纸抽、棉签、剪刀、冰袋、记号笔、吸水纸等。

各款荧光定量PCR仪的性能比较本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作，用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪，如ABI5700，ABI7700，ABI7000，ABI7300，ABI7500，MJ opticon，MJ opticon2，bio-rad ICycler，LightCycler1.5，roter-gene3000，Stratagene Mx3000P，line-gene等等。

这种仪器各有各的特点，但都存在不足之处。

ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多，成系列，但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光，因而已经退出历史舞台，尤其是ABI7700，不但很贵，而且采用苹果机电脑，使用很不方便。

ABI7000目前也已经淘汰，我用的这台仪器老出问题，曲线极不光滑，但同样的反应体系在国产机杭州博日line-gene上曲线非常好，在ABI7500上曲线也很光滑，所以，本人估计是ABI7000设计上有不足之处。

而且卤钨灯特别容易坏，在南方，我们实验室平均5个月换一个，配件容易坏，后续使用成本就会高一些。

现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。

另外我个人感觉ABI7900（ABI公司第二代产品）有些华而不实，价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的，硬件上跟ABI7700差不了太多，但性能指标还不如ABI7500（ABI公司第三代产品），硬件设计上也不如ABI7500合理。

所以这个型号的仪器，谁买了，用的时候会不呼上当。

ABI7500是ABI公司最成功的产品，各方面性能都不错，虽然加热模块还是有一些边缘效应，但使用中央的孔位效果可以得到保证，在96孔板使用中间的48个孔位，结果都能得到保证。

总的来说，ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的，其仪器在科研上还是可以用的，但由于硬件设计上的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，并且占用了一个检测通道。

常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪（Fluorescence Quantitative PCR Instrument）主要有以下几种：1. Applied Biosystems 7500 Fast System：该系统是ABI公司旗下产品之一，具有优秀的性能和稳定性。

其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。

该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。

2. Bio-Rad CFX96 Touch System：这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一，具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。

它支持多种共轭染料和探针，可以同时检测多个靶序列，适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。

3. Roche LightCycler 480 System：这是一款高通量的PCR仪，可同时处理多达384个孔的样品，适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。

该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力，可提供更准确和一致的PCR结果。

4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System：该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择，可以满足不同的研究需求。

它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度，适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。

5. Qiagen Rotor-Gene Q：这是一款高通量PCR仪，可同时处理多达72个样品。

它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力，适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。

6. Stratagene Mx3000P/QPCR System：这是Agilent Technologies旗下的产品，具有高精度和稳定性的特点。

它支持多种探针和染料，可以同时检测多个靶序列，适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。

ABI 7500荧光定量PCR
一、简介
7500型荧光定量PCR仪是特异性靶基因检测与定量的一体化平台。

7500型将PCR热循环，荧光检测和各种应用分析软件结合在一起，可实时定量观察PCR 每一循环各反应管中PCR扩增产物的情况。

PCR实验结束后即刻得到定量结果，无需凝胶电泳分析，无需纯化PCR产物，无需进行任何实验操作。

7500型实时荧光定量PCR仪具有节省时间，灵敏度高，准确性好和避免产物污染等优点。

二、主要技术参数
1. 样品孔数：96孔样品基座，
2. 温度范围：4.0-99.9℃
3. 温度显示：经计算机计算的实际样品温度，精确到0.1℃
4. 加热冷却速度：平均温度变化速度1℃/秒
5. 温度准确性：正负0.25℃，35－100℃范围
6. 升降温重现性：任意温度达到时间误差小于5秒
三、仪器性能:
1.电脑图表式PCR扩增方法，填表式PCR编程，程序运行可闪烁显示当前状态。

2.样品基座基本配置为可更换型96孔基座，可满足不同PCR反应管，不同孔数以及不同类型PCR实验的要求。

3.计算机计算不同样品体积的实际样品温度，控温精确，扩增效果重现性更好。

4.软件容量大，可储存100个完整的PCR方法，软件自动计算引物解链温度。

5.自动断电保护，恢复供电后自动执行未完成循环，保证扩增全过程安全运行。

四、主要功能
利用荧光染料和探针标记跟踪PCR产物，对反应进行实时监控；不仅可以对产物进行溶解曲线分析，而且可以通过加入已知浓度的标准样品做标准曲线，确定待测样品的浓度。

可应用于基因表达分析，突变检测；细菌、病毒等致病微生物的检测；食品卫生检疫等。