罗氏实时荧光定量PCR仪

Roche 480II实时荧光定量PCR仪操作规程、维护方法、校准（SOP-1）1 目的：确保Line-Gene型核酸扩增荧光检测仪正确及正常使用。

2 适用范围：Line-Gene型核酸扩增荧光检测仪。

3操作人 ** **4标准操作方法：4.1在打开电源以前，先确认以下内容：4.1.1确认电源线插头已插入电源插座中。

4.1.2 Line-Gene与计算机及电源的连接是否可靠。

4.2．核酸扩增仪操作方法：4.2.1依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关,进入“荧光定量PCR检测系统”界面；4.2.2模板制好后，按模拟模板反应孔的样式放入扩增仪反应槽，注意阴阳性、阳性标准品、质控品位置，标本不够用空白管填补；4.2.3打开PCR仪电源开关,预热5分钟；4.2.4点击“运行”键，打开“运行”文件中“达安”试剂程序；4.2.3点击工具栏中的“样本资料”按钮，输入样本资料，并清空缺省样本号；点击“确认”保存样本资料信息，保存的文件名为：年月日+批次（批次用a、b、c表示）如20030516a 文件自动形成后缀名为*.flr4.2.4点击仪器运行的红色按钮“！！”，仪器进入运行状态。

4.2.5检测结果分析：a.程序运行结束后，系统自动进入分析界面并将检测结果自动保存，在荧光定量PCR检测系统界面单击“数据分析”键，进入结果分析界面。

b.定量分析：1）单击“分析模式”菜单中的“定量分析”命令，在分析方法选择中可选择样点拟合法。

2）样点数选择：样点为循环数/荧光强度对数曲线中基线以上各循环的点，系统根据选择的样点数，将被选中的样点拟合成直线，该直线与域值的交叉点即为CT值（仅适合于样点拟合）。

3）击“零点调整”，在弹出零点调整对话框进行设置——手动调整：以设置的起始循环至终止循环荧光强度的平均值为零点设置时尽可能选择样本荧光强度稳定（用“达安”试剂在Line-Gene荧光定量扩增仪对标本及控制品4）检测，通常起始及终止为5-15，结果较理想）。

羅氏應用科學L i g h t C y c l e r®480儀器操作手冊軟體版本1.0修訂史前言頁一.修訂史 (9)二.聯繫地址 (9)三.一致性申明 (10)四.保證 (10)五.商標 (10)六.用途 (11)七L i g h t C y c l e r®許可聲明 (11)八.軟體許可協定 (12)九.導言 (16)十.L i g h t C y c l e r®480儀器操作手冊的用法 (16)十一.本手冊中的約定 (17)文字約定 (17)符號 (17)十二.警告和預防 (19)操作要求 (19)一般預防 (20)電氣安全 (21)十三.儀器處理 (22)A概述頁1.介紹 (25)2.L i g h t C y c l e r®480規格 (26)2.1一般規格 (26)2.2環境參數 (26)2.3介面 (27)2.4樣本容量 (27)2.5運輸 (27)2.6數據站 (28)3.檢測單位規格 (29)3.1激發 (29)3.2探測器 (29)3.3濾光器 (29)4.溫度阻斷迴圈控制器規格 (30)5.多孔板條碼掃描器規格 (31)6.手提式條碼掃描器規格 (32)前言3修訂史4L i g h t C y c l e r ®480 儀器操作手冊-操作手冊1.0版B系統描述 頁1. 系統包裝...........................................................35 2. 安裝 ..............................................................36 2.1 安裝要求.............................................................36 2.2 空間和電源要求.......................................................36 2.3 環境要求.............................................................38 2.4 L i g h t C y c l e r ® 480 儀器安裝 ...........................................39 3. 系統描述...........................................................43 3.1 L i g h t C y c l e r ® 480儀器描述.............................................43 3.2 熱迴圈器單元描述.................................................... 47 3.3 檢測單元描述.........................................................50 3.4 檢測通道描述.........................................................52 3.5 L i g h t C y c l e r ® 480儀器耗材.............................................53 3.6 L i g h t C y c l e r ® 480儀器P C R 試劑 .........................................55 3.7 所需的額外設備.......................................................56 3.8 L i g h t C y c l e r ® 480 儀器即時P C R 檢測格式 ............................ ..56 3.8.1 概述...............................................................56 3.8.2 使用S Y B R 綠色I 染料監控P C R ..........................................58 3.8.3 使用水解探針監控P C R ...............................................60 3.8.4 使用H y b P r o b e 探針監控P C R ............................................62 3.8.5 使用S i m p l e P r o b e 探針基因分型. (64)C操作頁1. 介紹................................................................................................67 2. 系統的啟動.......................................................................................68 3. 準備和開始L i g h t C y c l e r ® 480儀器的運轉.............................................69 4. 更換L i g h t C y c l e r ® 480熱迴圈器 (72)修訂史D軟體頁前言5修訂史6L i g h t C y c l e r ®480 儀器操作手冊-操作手冊1.0版1. L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體概述.........................................................81 1.1 L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體用戶介面通則..........................................81 1.2 L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體的啟動..................................82 1.3 L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體主視窗...................................................85 1.4 選擇與流覽特性...........................................................................90 1.4.1 流覽器....................................................................................90 1.4.2 查詢表....................................................................................94 1.4.3 樣品選擇與樣品表.....................................................................98 1.5 導出與導入檔與物件.....................................................................100 2. 試驗的編程與運行........................................................................109 2.1 試驗的編程....................................................................................110 2.1.1 設定檢測格式...........................................................................112 2.1.2 定義程式與溫度靶.....................................................................113 2.1.3 定制線上資料顯示.....................................................................117 2.2 試驗運行.......................................................................................118 2.3 輸入樣品資訊.................................................................................120 3. 試驗分析概述..............................................................................126 3.1 分析步驟概述.................................................................................127 3.2 使用分析視窗.................................................................................129 3.2.1 選擇濾光器組合與顏色補償.........................................................130 3.2.2 在分析中處理樣品.....................................................................131 3.2.3 使用圖表.................................................................................132 3.2.4 添加分析注解...........................................................................132 3.2.5 對分析進行刪除或重新命名.........................................................133 4. 進行絕對定量分析........................................................................134 4.1樣品交叉點................................................... ..............................135 4.2 關於標準曲線的作用........................................................................136 4.3 提供標準曲線.................................................................................138 4.4 使用絕對定量方法...........................................................................140 5. 進行溶解曲線分析........................................................................144 5.1 使用溶解曲線特徵進行D N A 產物及其基因型的鑒定.................................144 5.1.1 定義溶解程式...........................................................................145 5.1.2 溶解溫度分析的內容..................................................................145 5.2 進行溶解溫度調用分析..................................................................146 6. 進行顏色補償分析........................................................................152 6.1 進行顏色補償試驗...........................................................................153 7. 使用範本與巨集..............................................................................156 7.1 製作與使用範本..............................................................................156 7.2 製作與使用宏.................................................................................156 8. 使用子功能表.................................................................................162 9. 使用圖表....................................................................................164 9.1 列印，導出與複製圖表.....................................................................165 9.2 進行變焦和變位元以查看圖表詳細內容 (169)D軟體 頁10. 生成報告 (171)修訂史11.使用選項工作 (174)11.1使用圖解選項 (175)11.1.1設定圖表表頭與標籤類型 (176)11.1.2設定螢光圖表內容 (177)11.1.3設定標準曲線圖表的外觀 (178)11.1.4設定溫度圖表的內容與外觀 (179)11.1.5覆蓋默認的圖表選項 (180)11.2使用樣品選項 (183)11.2.1更改所有試驗的樣品選項 (183)11.2.2重新設置默認的圖表選項 (185)11.3生成一個單獨的選項專案並將其設為默認 (187)11.4設定用戶選項 (188)12.管理工具 (189)12.1管理用戶訪問 (190)12.1.1用戶帳戶 (190)12.1.2組 (191)12.3.3角色 (191)12.1.4高級用戶角色的特權 (192)12.1.5本地管理員角色的特權 (193)12.1.6用戶訪問物件 (194)12.1.7管理用戶、組和角色 (197)12.1.8使用角色 (202)12.1.9更改密碼 (203)12.2報告的設置 (203)12.3.資料庫資訊 (204)12.4.儀器 (207)12.4.1定義儀器 (209)12.5檢測格式 (210)13.診斷工具 (213)14.L i g h t C y c l e r®480基礎軟體的安裝與維護 (214)14.1初始啟動步驟 (215)14.2L i g h t C y c l e r®480基礎軟體的安裝 (216)14.3保存一個已有的資料庫和安裝附加資料庫 (219)14.4登錄到不同資料庫 (223)14.5用一個資料庫檔替換一個已存在的同名資料庫 (224)14.6在L i g h t C y c l e r®480基礎軟體中整合一個恢復的資料庫檔使之成為附加資料庫 (225)14.7刪除L i g h t C y c l e r®480的基礎軟體 (228)14.8F L E X n e t許可證管理員 (229)前言7修訂史8L i g h t C y c l e r ®480 儀器操作手冊-操作手冊1.0版E 維護頁1. 常規維護.................................................. .........237 2. 儀器清潔操作指南 ...................................................237 2.1 常規清潔.................................................. ........ 237 2.2 預防性維護.................................................. ...... 237 3 更換氙氣燈................................................. ........238 4 更換風道灰塵篩檢程式......................................... ........242 5 更換保險絲 ..................................................... (244)F 附錄頁1. 訂購資訊.......................................................................................251 2. 索引................................... .. (253)前言修訂史前言9一、修訂史版本修訂時間1.02005年9月© 版權2005， R o c h e D i a g n o s t i c s G m b H . 版權所有.本手冊資訊可以在未經通知的情況下變更。

罗氏荧光定量PCR仪器简介罗氏荧光定量PCR仪器（Roche Real-Time PCR System）是一种用于荧光定量PCR（Polymerase Chain Reaction）的仪器。

PCR技术是一种广泛应用于分子生物学领域的技术，可以在体外大量复制DNA序列。

荧光定量PCR通过荧光信号的强度来定量PCR反应产物的数量，具有高灵敏度、高准确性和高通量的特点，被广泛应用于生命科学研究、疾病诊断和药物研发等领域。

罗氏是一家全球领先的医药和诊断解决方案提供商，旗下的荧光定量PCR仪器采用先进的技术和设计，为用户提供可靠和精确的PCR分析结果。

主要特点1.高灵敏度：罗氏荧光定量PCR仪器采用先进的光学系统，能够检测和定量非常低浓度的荧光信号，提高了实验的灵敏度。

2.高准确性：仪器内置的精确温度控制系统和优化的PCR反应条件，保证了实验结果的准确性和可重复性。

3.高通量：罗氏荧光定量PCR仪器支持多样品同时进行PCR反应，大大提高了实验的通量，节省了时间和成本。

4.灵活性：仪器配备了多样的PCR试剂和芯片，可以适应不同实验需求的扩增反应。

5.友好的用户界面：仪器具有直观的用户界面和易于操作的软件，用户可以轻松设置实验参数、监控实时反应和分析数据结果。

主要应用罗氏荧光定量PCR仪器在各种领域都有广泛的应用，包括但不限于以下几个方面：1.基因表达分析：通过定量PCR技术，可以准确测量基因在不同组织、细胞或疾病状态下的表达水平，帮助科研人员了解基因的功能和调控机制。

2.微生物检测：罗氏荧光定量PCR仪器可以用于检测和定量微生物如细菌、病毒、真菌等的核酸序列，广泛应用于食品安全、临床微生物学和环境监测等领域。

3.病毒载量检测：病毒载量是评估病毒感染严重程度的重要指标，罗氏荧光定量PCR仪器可以定量分析病毒的核酸含量，用于临床病毒学研究和病毒感染诊断。

4.药物研发：罗氏荧光定量PCR仪器可以用于药物研发过程中的基因表达分析、药物代谢相关基因的筛选和药物安全性评估等方面，为药物研发提供有力支持。

LightCycler 480 II是一款实时荧光定量PCR仪，由罗氏公司生产。

它广泛应用于分子生物学、基因工程、生物医药等领域，具有以下特点：
1. 快速：具有快速加热和冷却系统，能大幅度缩短实验时间。

2. 准确：采用双光束荧光检测技术，能够有效消除背景荧光，提高检测准确性。

3. 高灵敏度：具有高度灵敏的荧光检测系统，能够检测到微量的核酸样本。

4. 多功能：适用于各种荧光染料和引物，支持多种PCR反应格式。

此外，LightCycler 480 II作为一款高通量实时荧光PCR仪器，能灵活兼容96个或384个样本同时进行检测，满足不同样本通量的客户需求。

主要技术优势包括高精密度、高灵敏度、动力学范围广、高速等。

它采用了Therma-BaseTM热循环技术、导热性能好的银质热循环模块和先进的光学检测系统，彻底消除边缘效应，保持稳定优质的检测结果。

以上内容仅供参考，如需更多信息，建议访问罗氏公司官网或查阅相关文献资料。

Rotor-Gene Q 可以带给您：离心式的设计带给您出色的温度和光学表现■宽广的光谱范围，从紫外到红外波长■坚固耐用的设计，确保低维护和高度方便性■HRM遗传分析功能与定量扩增相结合■配合QIAGEN 试剂盒，在多种应用方向都有出色表现■广泛的应用领域Rotor-Gene Q 与QIAGEN 试剂盒相结合，实现所有定量PCR 的应用，以及高分辨率熔解（HRM®）分析：基因表达分析■■基因分型病原体检测■■基因扫描DNA 甲基化分析■■ miRNA研究物种、品种鉴定■■ HLA 配型分析详细应用参见第8页。

访问/PCR-applications并浏览Rotor-Gene Q模拟世界，体验超过20个仪器与软件的动画演示。

Rotor-Gene Q ——您实验成功的保障实时定量PCR 是一门精确的技术，它对仪器、试剂和软件都有极高的要求。

高度的温度和光学均一性、短时间内的温度平衡，以及快速的升降温对于精确和快速的定量分析都是极其重要的。

同样，检测的灵敏度、速度和特异性也高度依赖于DNA 聚合酶和反应组份。

QIAGEN公司的实时定量PCR分析仪Rotor-Gene Q将多种优化的设计相结合，为您精密的研究需求提供出色而可靠的实验结果。

配合QIAGEN 专为定量PCR 而优化的试剂盒，Rotor-Gene Q 可以让您直接、高效的将其应用于广泛的研究领域。

离心式的设计，出色的表现Rotor-Gene Q 独特的离心转子式设计让她成为在精确和通用性方面都非常出色的实时定量PCR分析仪（图1）。

每个PCR 管在反应仓里匀速旋转，空气不断高速流动，所有样品在快速的升降温过程中始终处于高度一致的温度下。

信号检测也具有同样的均一性。

当管子对准检测光路时，样品就被激发，荧光信号快速通过单一的短光路被PMT（光电倍增管）收集。

温度和光学上的均一性保证了定量PCR 分析的灵敏、精确和快速（图2）。

并且这种离心式的设计还消除了管和管之间的差异及边缘效应，而传统板式仪器由于板块内部温度的差异和复杂的光路系统无法具备Rotor-Gene Q 的这些出色性能。

实时荧光定量PCR目前实时荧光定量PCR已得到广泛应用，如：扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等......荧光定量PCR最常用的方法是DNA结合染料SYBR Green I 的非特异性方法和Taqman水解探针的特异性方法SYBR Green I 的非特异性方法(试剂盒：LightCycler 480 SYBR Green I Master）SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。

在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。

因此，SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR 体系存在的双链DNA数量。

一、实验前准备：实验试剂及耗材：试剂：特异性PCR引物，新鲜提取备用的总RNA试剂盒:Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit、LightCycler 480 SYBR Green I Master1号管包含：热启动Taq DNA Polymerase、反应缓冲液、dNTP mix、SYBR Green I染料、MgCI2仪器及耗材：罗氏LightCycler 480全自动实时定量PCR仪以及配套使用的48或96孔板；Thermo Scientific Arktik PCR仪、F1单道移液器、冰盒、QSP盒装吸头等正式实验开始前，冰上解冻各个试剂【注意：SYBR Green I Master 需要避光放置】二、反转录实验操作时注意：所有RNA相关的操作均需要佩戴手套，防止RNase污染。

严格按照试剂盒使用说明进行相关操作。

按照体系配方在冰上的Rnasefree的灭菌PCR管中配置Templateprimer mix，总体系13ul。

本实验是联合使用anchored oligo dT引物和随机六聚体引物进行的反转录。

型号：LightCycler® 480产品介绍Roche罗氏LightCycler 480实时荧光定量PCR系统可以让你实现实时在线的高通量快速荧光定量PCR循环，可同时检测96或384孔板样品。

结果可以通过PCR循环过程中实时荧光采集和软件分析进行定量和基因型的分析。

复杂的光学检测系统可以进行多重PCR检测，并适用于多种检测模式。

超过10年的实时定量PCR系统与试剂研发的丰富经验，凝聚成今日业界的巅峰之作。

主要特性：1.高灵敏度：可检测单拷贝基因2.动力学范围广：可同时检测到1－1010个拷贝DNA3.高重复性：CV%<0.15%4.高分辨率：轻松区分1000与2000拷贝浓度差异5.高速：40分钟完成40个PCR循环（384孔板）6.技术创新：采用Therma-BaseTM热循环专利技术和先进的光学检测系统，彻底消除边缘效应，保持稳定优异的检测结果。

7.全能：分析模式多样，绝对定量、相对定量、基因分型（溶解曲线法和终点法）、高分辨率溶解曲线分析，同时适用几乎所有检测模式（染料检测、水解探针（TaqMan探针）、杂交探针、简单探针等）8.开放式平台：可使用市面上绝大多数荧光染料以及第三方提供的8 连管，96孔板和384孔板9.灵活：可互换的96孔、384孔加热模块，用户可自行更换，无需工程师到场10.自动化平台：配以LIMS系统及自动进样机械臂，可实现远程操作及全自动化运行。

技术指标产品应用1.绝对定量2.相对定量3.终点法基因分型4.溶解曲线法基因分型5.DNA甲基化研究6.Micro RNA研究7.HRM基因扫描......。

荧光定量pcrlightcycler 480ii 技术参数全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：荧光定量PCR技术是一种用于检测DNA或RNA含量的方法，其通过荧光信号的变化来定量检测目标分子的数量。

LightCycler 480II是一款高性能的荧光定量PCR仪器，具有快速、灵敏和高通量的特点，适用于各种科研和临床领域的实验。

LightCycler 480II具有多种技术参数，下面分别介绍：1. 快速反应：LightCycler 480II具有优化的发热和降温速度，整个PCR过程只需要几十分钟就能完成，大大提高了实验效率。

2. 高通量：LightCycler 480II支持96孔和384孔板，可同时进行多个样品的PCR反应，适用于高通量实验。

3. 高灵敏度：LightCycler 480II的检测灵敏度可达到单个分子水平，可以检测到极微量的目标序列。

6. 灵活的控制软件：LightCycler 480II配备了功能强大的数据分析软件，可实现实时监测、自动分析和结果导出，为用户提供便利。

LightCycler 480II是一款功能强大的荧光定量PCR仪器，具有快速、灵敏、高通量和多功能的特点，适用于各种科研和临床领域的实验。

通过合理使用LightCycler 480II，科研人员和临床医生可快速、准确地进行目标序列的定量检测，为科研和诊断提供强有力的支持。

【注：此文章为人工智能助手撰写的作品，仅供参考。

】第二篇示例：荧光定量PCR技术是一种高灵敏度和高特异性的分子生物学技术，可以用于检测和定量DNA或RNA的数量。

荧光定量PCR的原理是通过PCR反应产生的双链DNA结合荧光探针来实现对特定序列的定量检测。

而LightCycler 480 II是罗氏公司推出的一款高端荧光定量PCR仪器，具有高速、高灵敏和高通量的特点，被广泛应用于科研和临床领域。

一、仪器参数1.1 光源：LightCycler 480 II采用的是白色长寿命LED光源，可提供高强度的荧光激发1.2 探测：支持FAM、JOE、ROX、Cy5等多种荧光探针，适用于多通道荧光检测1.3 温度范围：可设定反应温度范围为4-99°C，满足不同引物的PCR检测需求1.4 可视化：配备有高分辨率的液晶触摸屏，实时显示PCR过程和结果，操作简便直观1.5 通量：支持96孔和384孔板，可满足不同规模的实验需求，提高实验效率1.6 数据分析：内置的分析软件可自动生成PCR曲线、计算Ct值和扩增因子，方便数据处理1.7 软件更新：可通过网络连接实现软件升级，保持仪器性能和功能的最新状态二、技术优势2.1 高灵敏度：LightCycler 480 II具有极高的灵敏度，可实现对低拷贝数目标的定量检测，适用于稀有基因的研究2.2 高特异性：荧光探针结合PCR技术，能够区分特异性序列，避免非特异扩增和干扰2.3 高速度：LED光源和快速温度控制系统，可缩短PCR反应时间，提高实验效率2.4 高通量：支持大规模的样本检测和多通道荧光检测，可实现高通量实验2.5 数据可靠性：系统自动调整反应条件，减少人为误差，确保数据的准确性和可靠性2.6 多样性：支持不同引物和探针的应用，适用于各种PCR实验设计和研究需求2.7 自动化：仪器操作简便，支持自动化实验流程，减少人工干预，提高实验一致性三、应用领域3.1 基因表达分析：荧光定量PCR可用于检测基因的表达水平和变化，研究基因功能和调控机制3.2 病原体检测：可以用于检测病原体的种类和数量，诊断传染病和病原体感染3.3 药物筛选：可用于快速筛选药物的效果和剂量，评估药物的毒性和疗效3.4 生物标记物检测：可通过检测生物标记物的浓度和变化，评估疾病风险和预后3.5 遗传研究：可用于研究基因突变和遗传变异，揭示遗传疾病的发病机制和遗传规律3.6 食品安全检测：可用于检测食品中的潜在病原体和有害物质，保障食品安全和质量第三篇示例：LightCycler 480II具有快速的反应时间。

罗氏荧光定量 PCR 是一种高灵敏度、高精确度的多重荧光定量 PCR 技术，可以用于定量检测 DNA 或 RNA 中的特定序列。

该技术不仅可以用于基础研究，还可以应用于临床诊断和药物研发等领域。

一、基本原理罗氏荧光定量 PCR 基于 PCR 扩增技术，在 PCR 反应过程中，使用荧光标记的探针来定量检测扩增产物的数量。

该技术采用两个荧光染料：SYBR Green 和 TaqMan 探针。

SYBR Green 是一种结合双链 DNA 的荧光染料，可以在 PCR 反应过程中不断累积，并发出荧光信号；而 TaqMan 探针是一种在 PCR 反应过程中被水解释放的荧光探针，可以在特异性结合目标序列后发出荧光信号。

通过测量这些荧光信号的强度，可以确定 PCR 反应产物的数量。

二、实验步骤1. 样品制备首先需要从样品中提取出目标 DNA 或 RNA，常用的提取方法包括酚-氯仿提取法、磁珠法等。

提取后需要进行纯化和定量，确保样品质量和浓度符合要求。

2. PCR 反应将样品DNA 或RNA 与特异性引物、荧光探针和PCR Master Mix 混合，加入 PCR 反应管中，进行 PCR 扩增反应。

PCR 扩增条件需根据具体引物和模板 DNA/RNA 来确定，一般包括以下步骤：(1) 热变性：将反应体系加热至 95℃，使 DNA/RNA 双链分离为单链。

(2) 退火：将反应体系降温至引物的退火温度，使引物与模板DNA/RNA 特异性结合。

(3) 延伸：利用DNA/RNA 聚合酶将引物延伸，合成新的DNA 单链。

(4) 荧光检测：在延伸过程中，荧光探针与目标序列特异性结合，发出荧光信号。

荧光信号的强度与产物数量成正比，可以通过检测荧光信号来定量 PCR 扩增产物。

3. 数据分析利用荧光数据分析软件对荧光信号进行分析，得出 PCR 扩增产物的数量。

根据标准曲线，可以将荧光信号转化为目标序列的数量，从而定量检测样品中的目标 DNA 或 RNA。

第1包实时荧光定量PCR仪参数
第一包实时PCR仪的参数主要包括：
一、技术参数：
1、荧光探测器：可以检测多达4种荧光，最大检测面积高达980mm2；
2、PCR培养箱：高达72电极可以检测；
3、边缘模块：支持多种控制参数；
4、检测波长：440nm；
5、检测分辨率：可达0.2ng/μl；
6、最低检测量：可达0.1ng/μl；
7、温度控制范围：4℃～99℃；
8、温度精度：±0.5℃；
9、温度分辨率：0.1℃；
10、温度可调范围0～99℃；
11、温度控制精度：±0.5℃；
12、温度控制可调范围：0～99℃；
13、探头：支持多种孵育管，96孔板和Slide；
14、PCR数据分析：支持多种格式的数据分析，包括孵育温度、荧光、电流和电压等；
15、电流输入电压：110V-220V；
16、输出电流：1A；
17、外形尺寸：430mm×340mm×160mm (L×W×H）；
18、重量：约16公斤。

二、操作参数：
1、画面控制：可以操作图形化画面，以调整位置、横向和纵向测定等；
2、孵育参数：可以调节温度、湿度、反应时间、反应模式等参数；
3、计算机控制：可以用计算机操作，可以控制培养箱的参数；
4、网络传输：可以通过网络将孵育图像传输到计算机；。

LightCycler® 480 II 实时荧光定量PCR仪非凡体验谋求突破，专业设计诠释经典LightCycler ® 480 II 实时荧光定量PCR 仪具备出色的分辨率、重复性及高速度，可广泛应用于科研、临床诊断、食品安全、疫情监控等1985 Kary Mullis 发明PCR 技术▼▲*1991 罗氏公司获得PCR全球专利权▲1993 Kary Mullis 因发明PCR 技术而获得诺贝尔化学奖▲1998 罗氏应用科学部推出LightCycler ®全自动实时定量PCR 仪▲2012 含新光源的LightCycler ®480 II 上市▲2006 LightCycler ® 480全自动实时定量PCR 仪问世！1993 罗氏公司Russell Higuchi 发明实时定量PCR 仪▼1995 罗氏诊断公司推出PCR 诊断行业金标准：COBAS Amplicor▼2008 全新升级型号，LightCycler ® 480 II 正式上市▼2005 LightCycler ®全球装机突破5000台，成为全球销量成绩斐然的单型号实时定量PCR 仪▼高精密度轻松区分1.5倍浓度差异，置信度≥99.8%高灵敏度可检测单拷贝基因动力学范围广可同时检测到1-1010个拷贝DNA 高重复性重复性高，CV ＜0.15%高速40分钟完成40个PCR 循环(384孔板)技术领先采用Therma-Base TM热循环技术(专利号US Patent No.5161609)、导热性能好的银质热循环模块和先进的光学检测系统，彻底消除边缘效应，保持稳定优质的检测结果，且整个过程中无需使用ROX 等内参染料，有效节约成本全能分析模式多样，绝对定量、相对定量、基因分型(熔解曲线法及终点法)、高分辨率熔解曲线分析，同时适用市面上主流的检测模式(染料检测、水解探针(TaqMan ®探针)、杂交探针、简单探针等)开放式平台可使用市面上绝大多数常见荧光染料以及第三方提供的8联管、96孔板和384孔板灵活可互换的96孔、384孔加热模块，用户可自行更换，无需工程师到场自动化平台配以LIMS 系统及自动进样机械臂，可实现远程操作及全自动化运行LightCycler ® 480 II 实时荧光定量PCR 仪——温控系统独具匠心的PCR热循环模块设计加热模块和冷却元件之间引入的高效热平衡技术(Therma-Base TM)，同时使用导热性能出色的银质材质，使LightCycler ® 480 II 的温控系统获得了技术性的进步。

罗氏lightcycler96 溶解曲线罗氏LightCycler96溶解曲线分析在分子生物学实验中，PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的技术，用于扩增目标DNA片段。

然而，仅仅通过PCR产生的扩增产物并不能提供足够的信息来确定PCR是否成功以及扩增产物的准确性。

为了解决这个问题，研究人员开发了溶解曲线分析技术，通过观察PCR产物的溶解行为，可以获得关于DNA序列、多态性以及污染物存在的重要信息。

一、罗氏LightCycler96系统简介罗氏LightCycler96是一种实时荧光PCR系统，采用独特的热稳定DNA聚合酶和荧光探针技术，能够进行高效、准确的PCR实验。

该系统具有高灵敏度、高特异性和高速度的优点，可用于快速检测和定量分析目标DNA序列。

二、溶解曲线分析原理溶解曲线分析是基于PCR产物在升高温度条件下的溶解行为而进行的。

在PCR反应中，DNA链会逐渐解开，形成单链DNA。

当温度升高到DNA的解链温度（Tm）时，DNA链完全解开。

而不同DNA序列的Tm值是不同的，因此可以通过观察PCR产物的溶解曲线来确定其组成和纯度。

三、溶解曲线分析步骤1. 进行PCR反应。

根据所需扩增的DNA片段设计引物，并使用LightCycler96系统进行PCR反应。

反应体系中加入荧光探针，该探针与扩增产物结合后会发出荧光信号。

2. 温度升高。

在PCR反应结束后，将反应体系在逐渐升高的温度条件下进行熔解，通常温度从低到高按照0.1-1°C的速率升高。

3. 监测荧光强度。

在升高温度的过程中，使用光学系统连续监测PCR产物的荧光强度变化。

当温度达到Tm值时，PCR产物解链，荧光强度会发生剧烈变化。

4. 生成溶解曲线。

将监测到的荧光强度与温度绘制成图形，即得到PCR产物的溶解曲线。

5. 分析溶解曲线。

通过分析溶解曲线的形状、峰值以及Tm值，可以确定PCR产物的组成和纯度，进而判断PCR反应的成功与否。

四、溶解曲线分析的应用1. 确定PCR产物的准确性。