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荧光定量 PCR 仪操作流程4、 实时监控反应过程（这一步可省）5、 实验完毕，分析实验结果运行开始后，程序会自动切换到 View Results 栏。
在运行过程中，用户能实时监 控温度和光学数据， 选择图表，分析设置和样品类型信息。
在运行完成前后及运行期间， 分析设置、图表和样品类型信息可以改变。
运行过程中，可以查看存在电脑中的以前的 运行。
6、保存并输出实验数据⑴ 点击 View Results 显示栏的 Export 按钮。
⑵ 检查输出数据类型。
⑶ 点击 Export Data 根目录里的 Export 按钮。
⑷ 从 Look In 下拉菜单里选择一个文件夹。
程序默认为 Smart Cycler 文件夹里 的 Export 文件夹。
⑸.输入一个文件名或接受一个默认的文件名，点击 Save 。
生物技术中心 仪器管理人： 李红兵2006 年 10 月 15 日 1 、开启电脑，并打开 Smart Cycler 密码为 Cycler 。
若 Create Run 直至 Create Run 图标变亮。
2、定义一个程序⑴. 点击 Define Protocols 图标⑶. 输入一个独特的程序名。
⑸.点击Save Protocol 按钮 3、创建运行⑴. 点击 Create Run 图标。
⑶. 选择 Dye Set 。
⑷. 点击 Add/Remove Site ⑷a.突出一个程序名。
⑷ c. 点击右箭头。
⑸.点击0K 。
开关,启动 Smart 软件，系统用户名为 Smart ，否则应重新连接， ⑵. 点击 New Protocols 图标。
⑷ . 输入热循环参数。
图标非灰色， 表明机器已与电脑连接，⑵ . 输入一个 Run Name 。
按钮⑷b.突出位点。
⑷d.重复⑷a-⑷c 步骤直到所有程序和点都被选定 ⑹.点击Start Run 按钮。
美国应用生物系统公司ABI Prism® 7000型荧光定量PCR仪操作手册快速入门指南美国应用生物系统中国公司· 技术服务部2003年ABI Prism剖7000中文操作手册目录一. 开机 (3)二. 实时定量的软件运行 (3)1. 新建文件 (3)2. 探针设置 (4)3. 填样品表 (4)4. 参比荧光 (5)5. 循环参数 (5)6. 启动扩增 (5)三. 实时定量的数据分析 (6)1. 数据分析 (6)2. 基线设定 (6)3. 线性图谱 (6)4. 原始数据 (7)5. 标准曲线 (7)6. 实验报告 (7)四. 终点读板的软件运行 (7)1. 新建文件 (8)2. 探针(D ETECTOR)设置 (8)3. 位点(M ARKER)设置 (8)4. 填样品表 (8)5. 参比荧光 (8)6. 终点读板 (9)五. 终点读板的数据分析 (9)1. 数据分析 (9)2. 信号分布 (9)3. 基因分型 (9)4. 保存结果 (9)六. 日常维护 (10)1. 荧光污染的检查与处理 (10)2. 检测器光源的更换流程 (10)2ABI Prism剖7000中文操作手册ABI Prism剖7000型荧光定量PCR仪快速入门指南一. 开机1. 确认电脑与主机的数据通讯线(灰色USB连线)连接正确。
2. 确认电脑处于外接电源供电状态。
3. 启动电脑，以Administrator用户名登录，进入Windows2000操作系统。
4. 待桌面图标出现后，打开7000主机的电源。
5. 待主机的电源指示灯点亮后，启动7000 SDS应用软件。
在进行实验之前，请先检查样品加热模块以确定它没有受到荧光污染，具体方法请按照第6节的“荧光污染的检查与处理”流程进行。
二. 实时定量的软件运行基因表达的绝对定量和相对定量研究、转基因食品的检测(GMO)、各种病原体的检验检疫等各种定量应用；以C T值的大小作为样品阴性、阳性判定依据的定性应用；以及SNP 检测、等位基因鉴定实验等的第一步PCR扩增，都是采用实时定量模式，按照以下步骤操作。
Code No.：DRR041ASYBR® Premix Ex TaqTM （Perfect Real Time） (200 次量)目内 容●制品说明 ●制品内容 ●适用的 Real Time PCR 扩增仪 ●保 存录页 码1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3●TaKaRa Ex TaqTM HS活性定义 ●纯 度●Real Time PCR 性能检测 ●试剂盒原理 ●试剂盒特长 ●操作注意 ●Real Time PCR 操作顺序 ●操作方法 ◆应用 Thermal Cycler Dice Real Time System 扩增仪的操作方法 ◆应用 ABI PRISM 7000/7700/7900 HT， 7300/7500/7500 Fast Real - Time PCR 的操作方法 ◆应用 Light Cycler Real Time PCR 扩增仪的操作方法 ◆应用 Smart Cycler II System Real Time PCR 扩增仪的操作方法 ◆应用 Mx3000P Real Time PCR 扩增仪的操作方法 ●PCR 反应条件说明 ●实验例 ●进行 RT-PCR 反应时的实验方法 ●引物设计说明 ●引物设计服务说明： 本公司提供用于基因表达定量分析的引物设计及合成服务 ●问 答4 5 7 8 9 9 11 1314 14◆特别提示： 本制品请于 4℃避光保存，避免冻结制品！●制品说明本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。
制品中已经将DNA聚合酶、反 应用Buffer、dNTP、SYBR® Green I等试剂预混在一起，是一种 2×浓度的Premix Type试剂，进行实验 时，PCR反应液的配制十分方便简单。
制品中的DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex TaqTM HS，与TaKaRa精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
abi quantstudio 荧光定量pcr仪操作规程以下是abi quantstudio 荧光定量pcr仪的操作规程：1. 打开仪器：确保电源线插入到电源插座中，按下电源开关，荧光定量PCR仪开始启动。
启动完成后，屏幕会显示主界面。
2. 准备样品：将待测样品按照实验方案进行处理和准备，包括提取和纯化核酸、制备反应体系等，确保样品标签的正确性。
3. 设置反应模板：在主界面上选择“新建实验”的选项，并选择荧光定量PCR反应模板。
根据实验需求设置反应模板，包括样品的位置、引物和探针的浓度和体积等。
4. 加载样品：根据设置的标本位置，使用注射器或微量移液器将样品逐一加载到相应的孔中。
确保每个孔都正确对应到相应的标本。
5. 设置PCR反应参数：通过点击“设置反应参数”按钮，进入PCR反应参数设置界面。
根据实验需求设置温度、时间和周期等参数。
设置完成后，保存反应参数。
6. 开始PCR反应：点击“开始实验”按钮，启动PCR反应。
仪器会自动根据设置的参数进行PCR反应。
在PCR反应过程中，可实时监测反应的进展和荧光信号的变化。
7. 数据分析：PCR反应结束后，仪器会自动停止反应。
通过点击“数据分析”按钮，可查看PCR反应结果，包括荧光信号曲线、阈值循环数和浓度等数据。
可以保存数据文件或导出结果。
8. 关机：实验结束后，点击主界面上的“关机”选项，按照仪器提示进行关机操作。
拔下电源线，清理实验平台和反应模板，保持仪器的整洁。
以上是abi quantstudio 荧光定量pcr仪的操作规程，一定要按照实验方案和操作规程进行实验，以保证实验结果的准确性和可靠性。
applied biosystems 7900HT荧光定量PCR仪相对定量实验简易操作流程SDS 2.47900HT定量PCR仪相对定量实验简易操作流程1.双击桌面图标开启SDS software或从Start >All Programs > AppliedBiosystems > SDS 2.4> SDS 2.4开启软件。
2.进入SDS software后出现Login窗口，输入用户名和密码，或以administrator登入（无须键入密码），按OK进入软件。
3.点选或从“File”下选择“New”，出现如下窗口：Assay：选择△△Ct（RQ）Container：根据反应板类型，选择96-well Plate，384-well Plate或384-well Taqman Low Density ArrayTemplate：Blank Template (如有之前已设好的Template，点击Browse可导入模板) 。
Barcode：可使用扫瞄器记录样品板条形码，如果没有条码此项留空白。
3.1点击OK，即出现Plate Document。
①在Setup 窗口下点“Add Detector”即会弹出Detector Manager，②如有已设定的Detectors，选中待检测的Detector，③点击Copy to Plate Document，④点击Done完成添加。
3.2设定新的Detector：①在Detector Manager中点击“New”，②进入“AddDetector”窗口设置Detector，③点击“OK”完成detector设置。
Name：输入基因名称。
Reporter：选择所使用的报告荧光。
Quencher：如果使用MGB探针或SYBR染料则选None Fluorescent。
如探针淬灭基团为TAMRA则选择TAMRA。
3.3设置反应板：①选中放置样品的反应孔，②标记“Use”，③输入样本名称，④在“Task”栏中选择属性：目的基因“Target”，内参“Endogenous Control”。
7500荧光定量PCR 仪使用说明注意事项：实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。
PCR 反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR 管禁止使用。
使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。
实验数据用光盘刻录，禁止U 盘拷取，数据可暂存于本机电脑硬盘中，各实验室D 盘中有指定文件夹，中心外部人员数据存于FUWU 文件夹下的子文件夹中。
操作步骤开机放入反应板注：关闭仪器托盘时，应按一个角度推压托盘的右侧。
按压此处 ！ 待电脑启动稳定后，按压7500仪器电源按扭，等待仪器启动（约30 s ）。
当仪器只显示Power 状态指示灯时，方可按压托盘以打开它。
（以下过程按字母顺序a →q 进行操作）创建反应板文件双击电脑桌面上SDS 软件图标打开SDS 软件；a. 从 Assay 下拉列表中选择反应板类型c. 单击Next 反应板文件类型有以下几种：1. Relative Quantification (ddCt) Plate（相对定量） 2. AbsoluteQuantification(StandardCurve)（绝对定量，标准曲线）3. Allelic Discrimination （等位基因鉴别）4. Plus/Minus （阳性/ 阴性实验）d. 选择要添加到反应板文件的探针（引物），单击Add 添加选中探针e. 如果在列表中未列出所需探针，请单击New Detector 创建新探针f. 单击Nextb. 为反应板文件命名为反应孔设置样品名g.选取探针相同的反应孔h.点击反应孔对应的探针。
i.单击 Task栏的下边指定探针任务。
j.选择Use （使用）。
k.单击Finish （完成）。
ghijkl.选取反应孔，直接输入相应样品名（也可右键，调出反Well Inspector对话框，在Sample Name中进行修改）设定PCR循环参数、运行程序1.实验结束后关闭软件。
Mastercycler PersonalPCR 仪操作手册1 简介Eppendorf 的Mastercycler Personal 是适用于所有分子生物学和生化实验室研究的PCR仪。
样品温度在4-90 度间快速可调（最大速度每秒3 度）。
设计有特殊的¡离心管控制¡模式，从而对装有不同体积溶液的不同离心管中的样本进行温度控制。
加热槽为一通用模块，可适用5X5 的微孔板、25 个0.2ml 的Eppendorf PCR 管、16 个0.5ml 薄壁的Eppendorf PCR 管或其他相应的试管，而无须更换模块。
为避免样本蒸发浓缩，本仪器设计有可适应各种试管高度的热盖。
本仪器易于操作，有完整的八线显示，并可连接打印机。
Mastercycler Personal 是Perkin-Elmer 公司授权许可生产的PCR 仪。
2 安全警告3 安装3.1 包装一个包装内应含有以下物品：1 台小型PCR 仪1 条主电源线1 本操作指南1 张个人存储卡1 包0.2mlPCR 管（100 个）3.2 装机安装时请确保通气孔通畅，四周有足够的空间散热；并请确保仪器下部无其他异物。
搬动仪器时无须其他装置，可抓住仪器两侧将其提起。
所需空间：宽18cm深：35cm高：25cm电源连接：1 个防电击插座。
如需连接打印机，则需用另一电源连接。
3.3 启动仪器拆除热盖上的胶条并取出热盖下的泡沫塑料。
连接电源线。
启动仪器前请核对用户电源是否与铭牌要求相符。
连接和启动打印机的步骤见第9 部分。
4 技术说明4.1 仪器结构图1：前面观1 热盖2 热盖锁3 显示与控制面板4 个人存储卡读取器图2：侧面观图3：背面观1 热盖2 加热槽（此图中未显示）3 通气孔4 PC 连接插孔5 打印机连接插孔1 通气孔2 主电源开关3 保险丝4 主电源插孔5 铭牌图4：显示与控制面板1 编辑键2 光标键3 控制键4 小数点和顺序颠倒标志键5 显示屏4.2 按键1、编辑键Opt ¡在运行过程中按opt 键可显示程序运行的剩余时间¡编程时选择温度指令（ramp、梯度、增量）Del ¡删除程序条，数据字母或重新设定参数：按住此键可删除整条信息Sel ¡选择程序指令¡选择菜单信息¡可选择字母（用¡键决定正逆序）Ins ¡在程序编辑中插入程序条2、光标键▲►▼◄用于移动光标，显示为黑色方块。
荧光定量PCR仪操作规程1．开机程序（1）打开电脑，进入桌面。
（2）打开PCR仪器的电源开关（注：该仪器有两个电源开关，一个控制PCR 仪，一个控制光源系统）。
（3）双击桌面上的软件图标，点击“yes”,进入软件的主菜单。
(4)或打开开关，视窗上显示“SELF TEST”，显示10秒中后，显示RUN-ENTER 菜单：“RUN ENTER PROGRAM”准备执行程序。
2．关机程序(1) 保存数据，退出软件的主菜单。
(2) 关掉电脑，关闭PCR仪器的电源开关。
3.程序文件的设置及打开(1)实验程序已预先设定点击软件左方主目录中的“Library”，进入该界面后。
选择“View Protocol”页面，根据路径，找到预存的程序文件。
放入样本管，关紧盖子。
运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示：“-ENABLE DISABLE HEATED LID” 按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。
(2)创建新的程序文件点击软件左方主目录中的“Workshop”，进入该界面。
选择“Edit Protocol”页面，输入相应的温度、时间、重复的循环数（Repeats），增加或删除步骤（Cycle和Step），在“Select data collection step（s）”中选择需要进行荧光收集的步骤。
完成后，在“Protocol Filename”中输入程序的文件名，点击“Save this protocol”。
如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM，按《Proceed》，屏幕显示“ -NEW LIST EDIT DELET”，按《Proceed》，1）选择NEW，命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认。
输入程序步骤：名字输入后，显示“ STEP1TEMP GOTO OPITON END”，按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。
实时荧光定量PCR仪快速操作指南1.连接电源从包装箱里取出仪器放置在实验台上，拿出电源线和电源适配器，将电源线一端与电源适配器相连，另一端连接至交流220V电源插座（AC85~264V）电源适配器的输出端连接到仪器电源插孔。
接口插入仪器电源插孔，注意插孔方向箭头方向朝上。
打开仪器背面的电源开关开启仪器，仪器自检成功，自动进入到软件界面。
2.样品准备◼准备试剂Q1600实时荧光定量PCR仪使用0.2ml透明离心试管根据试剂要求选用10-100μl合适的加液量。
◼离心操作配置完成试剂样本的试管在放入仪器之前，要用离心机进行离心操作，确保试剂液体处于试管底部，且液体内部不含有气泡。
◼放置样品将反应管按照顺序放入加热孔内。
3.设置程序，运行实验软件操作基本步骤：◼新建实验新建实验，选择运行槽◼基本设置设置实验名称，实验类型，检测项目，选择使用的染料。
◼样本设置设置样品名称，样本ID号，选择样本类型◼程序设置设置需要的反应程序◼保存文件单击保存，保存实验文件◼运行单击运行，运行实验。
4.结果分析◼实验结束，软件自动计算Ct值，根据判定规则自动出结果。
◼如需进行熔解分析和基因分型，在软件分析类型里选择相应的分析功能。
5.结果导出◼导出实验结果单击导出，导出实验数据。
◼结果打印连接配置的热敏打印机，选中要打印的样品孔，单击打印，打印实验结果。
6.关闭仪器◼实验结束，取出反应管◼长按仪器前面板关机按键，关闭仪器◼长时间不使用仪器，请关闭仪器背部左下角电源开关。
applied biosystems 7900HT荧光定量PCR仪绝对定量实验简易操作流程SDS 2.47900HT定量PCR仪绝对定量实验简易操作流程1.双击桌面图标开启SDS software或从Start >All Programs > AppliedBiosystems > SDS 2.4> SDS 2.4开启软件。
2.进入SDS software 后出现Login 窗口，输入用户名和密码，或以administrator 登入（无须键入密码），按OK 进入软件。
3.点选或从“File”下选择“New”，将会出现如下窗口：Assay：选择Standard Curve (AQ)Container：根据反应板类型，选择96-well Plate ，384-well Plate或384-well Taqman Low Density ArrayTemplate：Blank Template (若有之前已设好的Template，点击Browse可导入模板) 。
Barcode：可使用扫描器记录样品板条形码，如果没有条码此项留空白。
3.1按OK，即出现Plate Document。
①在Setup 窗口下点“Add Detector”即会弹出Detector Manager，②若有已设定的Detectors，选中待检测的Detector，③点击Copy to Plate Document，④点击Done完成添加。
3.2设定新的Detector：①在Detector Manager中点击“New”，②进入“AddDetector”窗口设置Detector，③点击“OK”完成detector设置。
Name：输入基因名称。
Reporter：选择所使用的报告荧光。
Quencher：如果使用MGB探针或SYBR染料则选None Fluorescent；若探针淬灭基团为TAMRA则选择TAMRA。
荧光定量P C R仪操作指南e p p e n d o r f(总97页)本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March目录：1 安全预防法2 安装交货包装仪器的安装功能性单元Mastercycler ep realplex启动realplex模块与热模块之间的连接Mastercycler ep realplex 与计算机之间的连接与其它部件的连接realplex软件的安装安装主程序数据恢复开始realplex软件的运行3. 操作管理者登陆登陆用户变更系统配置对使用者的管理新用户建立编辑用户删除用户用户层循环仪realplex 模块系统层特性登陆出错信息用户登陆软件更新检测项目管理建立检测项目打开检测项目保存检测项目保存模板文件模板文件的使用复制检测项目检测项目的输出检测项目的输入建立文件夹删除检测项目和文件夹探针管理染料管理校准背景校准颜色校准使用商业的校准工具包进行的颜色校准客户特有的染料的校准数据库管理当前数据库的自动保存当前数据库的保存输入数据库数据库的归档4 编程（检测项目的建立）建立一个新的检测项目建立板布局染料的确定参考染料的选择样本容积输入探针类型的确定背景的确定样品类型的定义标准阳性对照阴性对照未知样品复制和标准系列的自动建立定量的样品类型相对定量的样品类型多plex分析例子单plex分析的例子熔点分析中的样品类型终点测定中的样品类型+/-检测项目中的样品类型基因辨识中的样品类型样品的复制与剪切删除样品几个样品的归组子检测项目的测定板布局的删除完整检测项目的板布局编辑pcr程序的建立用模板程序建立一个pcr程序不用模板程序建立pcr程序程序步的插入和编辑温度循环（1－5步循环）保温暂停声音熔解曲线终点程序的复制程序的删除测量点的确定热盖设置5 操作（监测）样品的加载模块温度控制样品体积启动检测项目单个样品的选择单个样品类型的选择循环仪状态当前运行检测项目的中断继续运行检测项目终止检测项目mastercycler ep realplex 作为pcr的使用 mastercycler ep realplex 作为荧光计的使用关闭6 分析概要打开检测项目打开在运行的检测项目打开子检测项目单一检测项目的选择使样品处于不活动状态样品类型的选择分析模式的选择图标缩放存储默认设置图表的保存和复制样品数据的保存和复制编辑报告模板报告的应用分析的保存调用分析定量阈值确定基准线测定标准曲线分析multiplex 分析相对定量阈值的测定多plex 分析的估算单plex分析的估算熔解曲线分析阈值的测定分析终点测量标准曲线分析+/-检测项目将终点测定作为数据源的+/-检测项目分析模式阈值的测定pcr数据作为数据源的+/-assay阈值测定分析多plex分析基因测定阈值测定分析7 维护清洁仪器的一般方法热模块的清洁热模块的验证与校准8 故障查找一般故障在sybr绿色分析中发生的错误qrt－pcr过程中发生的错误登陆新用户的建立创建一个检测项目检测项目的保存执行检测项目概述板布局pcr程序开始检测项目当前运行检测项目的中断继续运行检测项目退出检测项目分析10 技术数据功能性单元Mastercycler ep realplex图1：关闭的realplex模块前面观1 realplex模块2 状态显示3 密封压板（锁住状态）4 控制面板的挂钩（Mastercycler ep realplex不需要）5 热模块图2：打开的realplex模块前面观1 密封压板（开启状态）2 realplex模块3 热模块放入试验样本后，向前拉动realplex模块，覆盖住插入的试管。
荧光pcr仪操作方法
荧光PCR仪是一种用于检测PCR反应过程中荧光信号的仪器。
以下是荧光PCR 仪的基本操作方法：
1. 打开荧光PCR仪的电源开关，并确保仪器的电源已经连接好。
2. 打开荧光PCR仪的软件程序，并选择所需的检测参数和实验方案。
3. 准备PCR反应体系，并将样品添加到PCR管或板中。
4. 将PCR管或板放入荧光PCR仪的样品舱中，并确保样品与荧光检测系统接触良好。
5. 关闭样品舱的盖子，以避免光干扰。
6. 根据实验方案和仪器要求，设置反应温度和时间。
7. 启动PCR反应，在反应过程中荧光PCR仪会定时检测样品的荧光信号。
8. 反应结束后，根据实验要求保存和分析荧光PCR仪中所记录的数据。
9. 关闭荧光PCR仪的电源开关，清理工作台和仪器。
注意事项：
- 使用荧光PCR仪时，应按照仪器操作说明书和实验方案进行操作。
- 在操作荧光PCR仪时，应避免直接暴露在紫外线下，以免损坏眼睛。
- 软件程序的选择应根据实验需要进行，包括荧光信号的检测波长、集光时间和发射滤光片等参数。
- 样品的添加和处理应避免污染和交叉污染，以确保实验结果的准确性。
- 在荧光PCR仪工作结束后，应及时清洁和维护仪器，保持其良好的工作状态。
1. 目的：确保荧光定量PCR仪能够正确和正常的使用，保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2. 范围：适用于AB7500荧光定量PCR仪的使用及维护。
3. 定义：无4. 职责：荧光定量PCR仪使用人员负责本规程的实施。
质保部对本规定的有效执行承担监督检查责任。
5. 内容：5.1室内温度控制在15～30℃，相对湿度45～75%。
5.2仪器操作5.2.1依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关，进入Windows界面。
5.2.2接着打开AB7500仪器电源开关，预热10分钟。
5.2.3点击7500Softwarev2.3图标，打开软件。
5.2.4按压仪器托盘上的按压位，待托盘弹出后，将所需检测的8联PCR反应管或者96孔PCR反应板放入检测孔位，记下放置位置。
检测8联PCR反应管用**反应孔模块，检测96孔PCR反应板用**反应孔模块。
（检测8联PCR反应管需放入盖紧管盖的空8联PCR反应管配平，检测96孔PCR反应板无需配平）5.2.5再次按压托盘使其滑入仪器。
5.2.6新建扩增参数模板：例如新建一个UG-63-62的模板，扩增参数是95°，10′；（95°，10″；63°，45″）×5cycles；（95°，10″；62°，35″）×40cycles，在62°时收集荧光信号（HEX、FAM信号），20μl反应体系。
5.2.6.1在Setup-PlateSetup-DefineTargetsandSamples中，将TargetName下的Target1改成FAM；点击AddNewTarget，将新增的Target1改成HEX，点击Reportee下拉菜单，选择VIC。
5.2.6.2在Setup-RunMethod-GraphicalView中的ReactionVolumePerWell后面输入20（20μl反应体系）。
ABI7900 操作流程I. 简易上机操作步骤1.先开计算机，待开机后再将7900HT的电源打开。
2.开启SDS 软件：双击计算机屏幕上7900软件的icon。
3.当软件开启之后会出现窗口，窗口下方为状态显示列。
此时右下显示Disconnected。
4.从“File”下选择“New”后会出现一窗口如下:Container 选择适当的Plate，384-或96- well Plate。
Template 点选已设好的Template；若无，则选择“Blank Template”。
5.在输入适当参数后，按OK即出现Plate Document如下图:按下Add Detector，开始设定Detectors（Detectors 代表样品的荧光种类），选择此次所需的Detector，并按下Copy to Plate Document将Detector加入Plate Document后则可按下Done。
如要设定新的Detector ，则可在Detector Manager中按下New选项以设定新的Detector：•Name：代表基因名称。
•Description：可输入简短叙述最多32个字母。
•Reporter：依实际所使用的荧光种类选择。
•Quencher：若为一般的TaqMan Probe选择TAMRA。
若为MGB Probe或SYBR Green I 则选“None Fluorescent”。
按“OK”。
重复以上步骤设定新的Detectors。
设定完成后，点选“Copy to Plate Document”。
之后，选Done，所设定的Detector即会加入Plate Document 中。
7.圈选Plate Grid中有放样品的well，在Set Up窗口下选定适当的Detector，然后点选Detector列中Use的框框，并在Task栏中选择其种类：Absolute Quantification：“NTC”，“Unknown”，“Standard”，若选择standard 则须输入样品量。
TaKaRa Code：DRR063ASYBR® PrimeScript™ RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(200次量)目录内 容 页 码●制品说明 1●制品内容 1 ●适用的Real Time PCR扩增仪 2●保 存 2 ●试剂盒原理 2 ●特 长 3●RNA样品制备 3 ●操作注意 5 ●操作方法 5 1．反转录反应 5 2．Real Time PCR反应6◆应用Thermal Cycler Dice TM Real Time System扩增仪的操作方法 6 ◆应用ABI PRISM 7000/7700/7900 HT，77300/7500/7500 Fast Real-Time PCR的操作方法◆应用LightCycler Real Time PCR扩增仪的操作方法8◆应用Smart Cycler II System Real Time PCR扩增仪的操作方法9◆应用Mx3000P Real Time PCR扩增仪的操作方法 10●PCR反应条件说明 11 ●实验例 11 ●引物设计说明 13 ●特别提示：本公司提供用于基因表达定量分析的引物设计及合成服务 14 ●问 答14●制品说明本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time RT-PCR的专用试剂。
Real Time RT-PCR方法以其卓越的快速性及定量性被广泛应用于科研领域，使用本制品可以准确简便地进行mRNA的表达分析。
本制品由「A. 反转录反应试剂」（TaKaRa Code：DRR037A）和「B. PCR反应试剂」（TaKaRa Code：DRR041A）两部分构成。
其「B. PCR反应试剂」部分是一种2×浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。
「B. PCR反应试剂」制品中的PCR用DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq TM HS，并与TaKaRa精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
