荧光定量PCR仪说明书

q5荧光定量pcr仪说明书一、引言随着生物科学技术的不断发展，实时荧光定量PCR技术在生命科学研究中发挥着越来越重要的作用。

Q5荧光定量PCR仪作为一种高性能的实时荧光定量PCR设备，广泛应用于基因表达分析、突变检测、基因定量等研究领域。

本文将详细介绍Q5荧光定量PCR仪的基本原理、主要特点、操作步骤及应用领域。

二、Q5荧光定量PCR仪的基本原理Q5荧光定量PCR仪采用实时荧光定量PCR技术，通过测量扩增产物荧光信号的累积程度，对目标基因进行定量分析。

在PCR反应过程中，加入荧光标记的核酸探针，当探针与目标DNA序列互补配对时，荧光信号增强。

随着PCR反应的进行，扩增产物DNA量的增加，荧光信号逐渐累积，从而实现对目标基因的定量。

三、Q5荧光定量PCR仪的主要特点1.高精度：Q5荧光定量PCR仪具有高精度荧光检测系统，能够准确测定样品中目标基因的含量。

2.高速度：仪器具有四通道并行检测，大大提高了检测效率。

3.高度集成：仪器内置光源、制冷系统、样品处理系统等，实现了一体化操作。

4.操作简便：Q5荧光定量PCR仪具有友好的人机交互界面，使得实验操作更加简便。

5.广泛应用：适用于基因表达、基因突变、基因多态性等研究领域的实时荧光定量分析。

四、Q5荧光定量PCR仪的操作步骤1.准备样品：提取目标DNA或RNA，并进行稀释。

2.设计引物和探针：根据目标基因序列，设计特异性引物和荧光标记探针。

3.设置PCR反应体系：配置PCR反应液，加入适量的酶、缓冲液、核苷酸、引物和探针。

4.加入样品：将稀释好的样品加入Q5荧光定量PCR仪的反应孔中。

5.设置PCR反应条件：根据实验需求，设置反应温度、循环次数等参数。

6.开始实验：启动Q5荧光定量PCR仪，进行实时荧光定量分析。

7.数据处理与分析：通过专业软件对实验数据进行处理和分析，得到目标基因的定量结果。

五、应用领域与案例Q5荧光定量PCR仪广泛应用于生命科学、医学、农业等领域，如基因表达研究、病原微生物检测、遗传病诊断等。

荧光定量PCR仪使用方法
（1）开机：荧光定量PCR仪、与之相连的电脑
（2）放样：点击PCR仪上的“Eject”，放入已离心过的八连管样品，再缓慢关闭接样台。

（3）点击电脑上的“E盘”，找到“qRT-PCR“文件夹，找到相对应的应用程序，如做蓝耳，就选择”PRRSV”文件夹中的程序；腹泻则为“PEDV”.
（4）编辑：点开任一程序后，点击“Sample Editor“编辑所放样品的地址以及信息。

（5）存档：点击“File“选择”Saveas“，存到相对应的文件夹；务必修改名称（日期、时间）。

（6）传出：打开编辑好的程序，点击“T ool”→“Instrument Manager”，待灯变绿后（5-7s），再点击“Send/Receive Experiment”，找到要运行的程序，再点击＞，便传到荧光定量PCR仪上。

（7）运行：选中荧光定量PCR仪上要工作的程序，点击“Start”开始工作。

（8）传入：待PCR结束后，打开运行程序，点击“T ool”→“Instrument Manager”，待灯变绿后（5-7s），再点击“Send/Receive Experiment”，选中相对应的文件夹，找到已结束程序，再点击＜，便传到电脑上。

（9）实验结果分析：点击已保存已完成的程序，点击“Analysis”，便可进行实验结果的分析。

（10）关机：点击PCR仪上“Eject”，取出八连管；点“Exit”→”YES’退出，关闭电源，拔下插头即可。

另用专用塑料袋套上，以免灰尘侵入缩短使用寿命。

羅氏應用科學L i g h t C y c l e r®480儀器操作手冊軟體版本1.0修訂史前言頁一.修訂史 (9)二.聯繫地址 (9)三.一致性申明 (10)四.保證 (10)五.商標 (10)六.用途 (11)七L i g h t C y c l e r®許可聲明 (11)八.軟體許可協定 (12)九.導言 (16)十.L i g h t C y c l e r®480儀器操作手冊的用法 (16)十一.本手冊中的約定 (17)文字約定 (17)符號 (17)十二.警告和預防 (19)操作要求 (19)一般預防 (20)電氣安全 (21)十三.儀器處理 (22)A概述頁1.介紹 (25)2.L i g h t C y c l e r®480規格 (26)2.1一般規格 (26)2.2環境參數 (26)2.3介面 (27)2.4樣本容量 (27)2.5運輸 (27)2.6數據站 (28)3.檢測單位規格 (29)3.1激發 (29)3.2探測器 (29)3.3濾光器 (29)4.溫度阻斷迴圈控制器規格 (30)5.多孔板條碼掃描器規格 (31)6.手提式條碼掃描器規格 (32)前言3修訂史4L i g h t C y c l e r ®480 儀器操作手冊-操作手冊1.0版B系統描述 頁1. 系統包裝...........................................................35 2. 安裝 ..............................................................36 2.1 安裝要求.............................................................36 2.2 空間和電源要求.......................................................36 2.3 環境要求.............................................................38 2.4 L i g h t C y c l e r ® 480 儀器安裝 ...........................................39 3. 系統描述...........................................................43 3.1 L i g h t C y c l e r ® 480儀器描述.............................................43 3.2 熱迴圈器單元描述.................................................... 47 3.3 檢測單元描述.........................................................50 3.4 檢測通道描述.........................................................52 3.5 L i g h t C y c l e r ® 480儀器耗材.............................................53 3.6 L i g h t C y c l e r ® 480儀器P C R 試劑 .........................................55 3.7 所需的額外設備.......................................................56 3.8 L i g h t C y c l e r ® 480 儀器即時P C R 檢測格式 ............................ ..56 3.8.1 概述...............................................................56 3.8.2 使用S Y B R 綠色I 染料監控P C R ..........................................58 3.8.3 使用水解探針監控P C R ...............................................60 3.8.4 使用H y b P r o b e 探針監控P C R ............................................62 3.8.5 使用S i m p l e P r o b e 探針基因分型. (64)C操作頁1. 介紹................................................................................................67 2. 系統的啟動.......................................................................................68 3. 準備和開始L i g h t C y c l e r ® 480儀器的運轉.............................................69 4. 更換L i g h t C y c l e r ® 480熱迴圈器 (72)修訂史D軟體頁前言5修訂史6L i g h t C y c l e r ®480 儀器操作手冊-操作手冊1.0版1. L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體概述.........................................................81 1.1 L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體用戶介面通則..........................................81 1.2 L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體的啟動..................................82 1.3 L i g h t C y c l e r ® 480基礎軟體主視窗...................................................85 1.4 選擇與流覽特性...........................................................................90 1.4.1 流覽器....................................................................................90 1.4.2 查詢表....................................................................................94 1.4.3 樣品選擇與樣品表.....................................................................98 1.5 導出與導入檔與物件.....................................................................100 2. 試驗的編程與運行........................................................................109 2.1 試驗的編程....................................................................................110 2.1.1 設定檢測格式...........................................................................112 2.1.2 定義程式與溫度靶.....................................................................113 2.1.3 定制線上資料顯示.....................................................................117 2.2 試驗運行.......................................................................................118 2.3 輸入樣品資訊.................................................................................120 3. 試驗分析概述..............................................................................126 3.1 分析步驟概述.................................................................................127 3.2 使用分析視窗.................................................................................129 3.2.1 選擇濾光器組合與顏色補償.........................................................130 3.2.2 在分析中處理樣品.....................................................................131 3.2.3 使用圖表.................................................................................132 3.2.4 添加分析注解...........................................................................132 3.2.5 對分析進行刪除或重新命名.........................................................133 4. 進行絕對定量分析........................................................................134 4.1樣品交叉點................................................... ..............................135 4.2 關於標準曲線的作用........................................................................136 4.3 提供標準曲線.................................................................................138 4.4 使用絕對定量方法...........................................................................140 5. 進行溶解曲線分析........................................................................144 5.1 使用溶解曲線特徵進行D N A 產物及其基因型的鑒定.................................144 5.1.1 定義溶解程式...........................................................................145 5.1.2 溶解溫度分析的內容..................................................................145 5.2 進行溶解溫度調用分析..................................................................146 6. 進行顏色補償分析........................................................................152 6.1 進行顏色補償試驗...........................................................................153 7. 使用範本與巨集..............................................................................156 7.1 製作與使用範本..............................................................................156 7.2 製作與使用宏.................................................................................156 8. 使用子功能表.................................................................................162 9. 使用圖表....................................................................................164 9.1 列印，導出與複製圖表.....................................................................165 9.2 進行變焦和變位元以查看圖表詳細內容 (169)D軟體 頁10. 生成報告 (171)修訂史11.使用選項工作 (174)11.1使用圖解選項 (175)11.1.1設定圖表表頭與標籤類型 (176)11.1.2設定螢光圖表內容 (177)11.1.3設定標準曲線圖表的外觀 (178)11.1.4設定溫度圖表的內容與外觀 (179)11.1.5覆蓋默認的圖表選項 (180)11.2使用樣品選項 (183)11.2.1更改所有試驗的樣品選項 (183)11.2.2重新設置默認的圖表選項 (185)11.3生成一個單獨的選項專案並將其設為默認 (187)11.4設定用戶選項 (188)12.管理工具 (189)12.1管理用戶訪問 (190)12.1.1用戶帳戶 (190)12.1.2組 (191)12.3.3角色 (191)12.1.4高級用戶角色的特權 (192)12.1.5本地管理員角色的特權 (193)12.1.6用戶訪問物件 (194)12.1.7管理用戶、組和角色 (197)12.1.8使用角色 (202)12.1.9更改密碼 (203)12.2報告的設置 (203)12.3.資料庫資訊 (204)12.4.儀器 (207)12.4.1定義儀器 (209)12.5檢測格式 (210)13.診斷工具 (213)14.L i g h t C y c l e r®480基礎軟體的安裝與維護 (214)14.1初始啟動步驟 (215)14.2L i g h t C y c l e r®480基礎軟體的安裝 (216)14.3保存一個已有的資料庫和安裝附加資料庫 (219)14.4登錄到不同資料庫 (223)14.5用一個資料庫檔替換一個已存在的同名資料庫 (224)14.6在L i g h t C y c l e r®480基礎軟體中整合一個恢復的資料庫檔使之成為附加資料庫 (225)14.7刪除L i g h t C y c l e r®480的基礎軟體 (228)14.8F L E X n e t許可證管理員 (229)前言7修訂史8L i g h t C y c l e r ®480 儀器操作手冊-操作手冊1.0版E 維護頁1. 常規維護.................................................. .........237 2. 儀器清潔操作指南 ...................................................237 2.1 常規清潔.................................................. ........ 237 2.2 預防性維護.................................................. ...... 237 3 更換氙氣燈................................................. ........238 4 更換風道灰塵篩檢程式......................................... ........242 5 更換保險絲 ..................................................... (244)F 附錄頁1. 訂購資訊.......................................................................................251 2. 索引................................... .. (253)前言修訂史前言9一、修訂史版本修訂時間1.02005年9月© 版權2005， R o c h e D i a g n o s t i c s G m b H . 版權所有.本手冊資訊可以在未經通知的情況下變更。

PCR仪使用说明步骤：1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”，显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单：“-RUNENTER PROGRAM PROGRAM”准备执行程序。

2、放入样本管，关紧盖子。

3、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示：“-ENABLE DISABLE HEATED LID” 按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。

4、如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM，按《Proceed》，屏幕显示“-NEW LIST EDIT DELET”，按《Proceed》，1）选择NEW，命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认。

2）输入程序步骤：名字输入后，显示“STEP1 _TEMP GOTO OPITON END”，按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。

3）选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达9999次）（为实际循环数-1)。

4) 选择option，显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE”再选择increment，按《Proceed》确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按《Proceed》确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（-0.1℃～6℃），按《Proceed》确认。

选择extend，按《Proceed》确认，输入每个循环增加或减少的时间（-60～60秒），按《Proceed》确认。

选择slop（指温度上升或下降的速率），输入温度的改变值（-0.1～1.5℃）按《Proceed》确认，然后输入加热或致冷的速度，按《Proceed》确认。

1. iQ™5多重实时荧光定量PCR仪简介在现代分子生物学的发展过程中，核酸放大技术的出现及与之相关的检测技术的成熟起到了至关重要的作用，而实时荧光定量PCR技术可以说是两者完美的结晶。

它通过加入能与DNA结合的荧光染料或在引物/探针上标记荧光基团等方法，在PCR过程中，随着产物的量不断增加，荧光信号也随之发生相关性的变化，再通过数学处理，算出原始靶DNA的含量。

实时荧光定量PCR技术可以在较大的动力学范围内实现精确定量，其灵敏度也达到相当高的程度。

随着这项技术的发展，其专用的实时荧光定量PCR仪也应运而生。

我们伯乐公司这次推出的iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪是在iCycler荧光定量PCR仪的基础上强化而成，以求性能达到最优。

iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪所装配的光源（钨卤素灯）拥有更宽的光谱范围，给予用户在其选择上最大限度的灵活性。

经过优化的激发/发射透镜组可以显著提高多重PCR的灵敏度，减少多重荧光之间的干扰。

它的CCD检测器可以同时监测96个反应孔的荧光数据。

在热循环过程中，当前完整的实验数R据会被软件实时地以图解的形式表现出来。

实时的数据显示可以大大提高反应孔与孔之间数据比较的可靠性，iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪则可以方便地实现数据实时显示，有利于及时反馈试验状况。

以上介绍的各项特性保证了iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪在使用过程中具有更强的可靠性和灵活性。

iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪所配备的运行、分析软件设计得十分人性化，且功能强大。

其功能模块的界面模式可使用户可以快速地完成各种操作。

当用户把光标放在软件的功能键上时，其下方还会出现相应说明文字。

此外，按键盘的“F1”键还可以启动在线帮助指南。

当用户设定完结果分析参数后，点一键即可得到最终分析结果。

2. iQ™5使用快速指南2.1 如何用iQ™5运行一次实验2.1.1 综述1. 创建、选择或修改一个反应程序文件（Protocol file）2. 创建、选择或修改一个反应板设置文件（Plate Setup file）。

ABI7500说明书1 4版一中文ABI7500说明书第一章产品简介1.1 产品概述本说明书是ABI7500实时荧光定量PCR仪的详细介绍，旨在帮助用户了解并正确使用该仪器。

1.2 产品特点1.2.1 准确可靠：ABI7500采用先进的光学系统和控制技术，确保高精度和可靠的实时荧光定量PCR结果。

1.2.2 高通量：该仪器支持多通道扩展，满足不同规模实验需求，最多可容纳96孔板。

1.2.3 快速高效：ABI7500具有快速升温和降温功能，大大缩短PCR 反应时间，提高实验效率。

1.2.4 用户友好：仪器操作简便，配备直观的触摸屏界面和友好的软件，使实验操作更加方便快捷。

第二章产品配置2.1 主机及配件ABI7500主机、电源线、数据传输线、安装光盘、用户手册、试剂盖、盖板、96孔板等。

第三章仪器安装与连接3.1 安装步骤1.将ABI7500主机放置在干燥、通风良好的实验室台面上。

2.连接电源线和数据传输线。

3.2 连接示意图（图略）第四章仪器操作4.1 打开仪器按下ABI7500主机上的电源按钮，待仪器启动成功后，进入操作界面。

4.2 设置实验参数根据实验需求，在仪器上设置反应温度、时间、通道数等参数。

4.3 添加样品和试剂按照实验方案，取适量的PCR模板DNA或cDNA，并添加相应的PCR Master Mix等试剂。

4.4 启动PCR反应将PCR反应混合液加入96孔板中，将孔板放入ABI7500中，启动PCR反应程序。

4.5 数据获取与分析待PCR反应结束后，ABI7500会自动采集并记录实时荧光信号。

用户可使用附带软件对数据进行分析和图像处理。

第五章维护与保养5.1 清洁定期清洁仪器表面和孔板槽，使用干净的布擦拭。

5.2 保养定期检查仪器线缆、接口和连接器的牢固性，如有发现损坏或松动，及时修复或更换。

第六章故障排除6.1 仪器无法启动6.1.1 检查电源线是否插入稳定，是否有电源供应。

6.1.2 检查电源开关是否处于开启状态。

1. iQ™5多重实时荧光定量PCR仪简介在现代分子生物学的发展过程中，核酸放大技术的出现及与之相关的检测技术的成熟起到了至关重要的作用，而实时荧光定量PCR技术可以说是两者完美的结晶。

它通过加入能与DNA结合的荧光染料或在引物/探针上标记荧光基团等方法，在PCR过程中，随着产物的量不断增加，荧光信号也随之发生相关性的变化，再通过数学处理，算出原始靶DNA的含量。

实时荧光定量PCR技术可以在较大的动力学范围内实现精确定量，其灵敏度也达到相当高的程度。

随着这项技术的发展，其专用的实时荧光定量PCR仪也应运而生。

我们伯乐公司这次推出的iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪是在iCycler荧光定量PCR仪的基础上强化而成，以求性能达到最优。

iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪所装配的光源（钨卤素灯）拥有更宽的光谱范围，给予用户在其选择上最大限度的灵活性。

经过优化的激发/发射透镜组可以显著提高多重PCR的灵敏度，减少多重荧光之间的干扰。

它的CCD检测器可以同时监测96个反应孔的荧光数据。

在热循环过程中，当前完整的实验数R据会被软件实时地以图解的形式表现出来。

实时的数据显示可以大大提高反应孔与孔之间数据比较的可靠性，iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪则可以方便地实现数据实时显示，有利于及时反馈试验状况。

以上介绍的各项特性保证了iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪在使用过程中具有更强的可靠性和灵活性。

iQ™5 多重实时荧光定量PCR仪所配备的运行、分析软件设计得十分人性化，且功能强大。

其功能模块的界面模式可使用户可以快速地完成各种操作。

当用户把光标放在软件的功能键上时，其下方还会出现相应说明文字。

此外，按键盘的“F1”键还可以启动在线帮助指南。

当用户设定完结果分析参数后，点一键即可得到最终分析结果。

2. iQ™5使用快速指南2.1 如何用iQ™5运行一次实验2.1.1 综述1. 创建、选择或修改一个反应程序文件（Protocol file）2. 创建、选择或修改一个反应板设置文件（Plate Setup file）。

实时荧光定量PCR仪使用说明书一、引言实时荧光定量PCR仪是一种高精度的分子生物学实验仪器，广泛应用于基因表达分析、病原体检测、遗传多态性分析等领域。

本说明书将介绍实时荧光定量PCR仪的基本操作流程、主要功能模块及相关注意事项。

二、仪器概述实时荧光定量PCR仪由以下组成部分构成：1. 仪器外观：实时荧光定量PCR仪外形美观大方，采用高质量塑料和金属材料制成，确保仪器的稳定性和耐用性。

2. 基本功能模块：实时荧光定量PCR仪包含恒温控制系统、光学采集系统和数据处理系统等主要模块。

(1) 恒温控制系统：实时荧光定量PCR仪可精确控制反应体系的温度，支持高速升温和快速降温，同时提供恒温状况下的稳定控制。

(2) 光学采集系统：实时荧光定量PCR仪配备高灵敏度的光学传感器，可实现对荧光信号的准确采集。

(3) 数据处理系统：实时荧光定量PCR仪可实时监测和记录PCR反应的信号强度，并通过内置算法对数据进行分析和处理。

三、操作流程实时荧光定量PCR仪的操作流程如下：1. 准备样本和试剂：根据实验需要，准备好待检测的样本溶液和PCR试剂。

2. 设置反应条件：按照实验方案要求，在仪器上设置好所需的反应条件，包括温度、时间和循环次数等参数。

3. 导入样本：使用专用导入工具，将样本溶液小心地加入PCR反应管或板中，并确保导入的样本量准确。

4. 启动仪器：按下仪器上的启动按钮，开始PCR反应过程。

5. 反应监测：实时荧光定量PCR仪会自动监测荧光信号的变化，并将数据实时显示在仪器屏幕上。

6. 数据分析：在PCR反应结束后，使用仪器自带的数据处理软件对监测到的荧光信号进行分析，根据实验需要得出结果。

四、注意事项使用实时荧光定量PCR仪时需要注意以下事项：1. 按照仪器说明书准确操作：在使用实时荧光定量PCR仪之前，仔细阅读使用说明书，并按照说明书上的操作步骤进行操作。

2. 仪器检查和维护：定期检查仪器的温度控制系统和光学采集系统，确保其正常工作。

美国应用生物系统公司ABI Prism® 7900HT型荧光定量PCR仪操作手册目录ABI PRISM® 7900HT型荧光定量PCR仪简明手册 . 快速入门 (3)ABI PRISM® 7900HT型荧光定量PCR仪简明手册 . 绝对定量 (4)一.开机 (4)二.新建文件 (4)三.探针设置 (4)四.参数设置 (5)五.填样品表 (6)六.启动循环 (7)七.数据分析 (7)八.查看结果 (7)ABI PRISM® 7900HT型荧光定量PCR仪简明手册 . 相对定量 (9)一.开机 (9)二.新建文件 (9)三.探针设置 (9)四.参数设置 (10)五.填样品表 (11)六.启动循环 (12)七.数据分析 (12)八.设置S TUDY (12)九.查看结果 (12)ABI PRISM® 7900HT型荧光定量PCR仪简明手册 . 终点读板 (14)一.开机 (14)二.新建文件 (14)三.设置D ETECTOR和M ARKER (15)四.参数设置 (16)五.填样品表 (16)六.终点读板 (16)七.数据分析 (17)八.查看结果 (17)ABI Prism® 7900HT型荧光定量PCR仪简明手册 · 快速入门1. 开机开电脑显示屏电源，启动电脑，进入Windows NT操作系统，以用户名Administrator 登陆，密码7900。

待鼠标沙漏消失，电脑完全启动后，开7900HT电源，红橙绿灯依次闪动2次，然后绿灯点亮。

双击桌面图标，打开SDS应用软件。

2. 新建文件菜单File → New，新建一个空白文件。

Assay代表试验类型，实时定量选Absolute Quantification；终点读板选Allelic Discrimination；Container指反应板类型，根据需要选择96孔板、384孔板或微量反应卡；Template项用于调用事先设置好的模板文件；Barcode是反应板的条形码，可以用扫描仪扫入或者手工输入。

目录:1 安全预防法2 安装2。

1 交货包装2。

2 仪器的安装2.3 功能性单元2。

3.1 Mastercycler ep realplex2。

4 启动2。

4.1 realplex模块与热模块之间的连接2.4。

2 Mastercycler ep realplex 与计算机之间的连接2。

4.3 与其它部件的连接2。

4。

4 realplex软件的安装2.4。

4.1 安装主程序2.4.4。

2 数据恢复2。

4.4。

3 开始realplex软件的运行3。

操作3.1 管理者登陆3。

2 登陆3.3 用户变更3。

4 系统配置3。

4.1 对使用者的管理3。

4。

1。

1 新用户建立3.4.1.2 编辑用户3。

4。

1。

3删除用户3.4.2 用户层3.4。

3 循环仪3。

4.4 realplex 模块3.4.5 系统层3.4。

5。

1 特性3.4.5。

2 登陆出错信息3。

4.5。

3 用户登陆3.4。

5。

4 软件更新3。

5 检测项目管理3。

5.1 建立检测项目3。

5.2 打开检测项目3。

5.3 保存检测项目3.5.4 保存模板文件3.5。

5 模板文件的使用3.5.6 复制检测项目3。

5。

7 检测项目的输出3.5。

8 检测项目的输入3。

5.9 建立文件夹3.5。

10 删除检测项目和文件夹3.6 探针管理3。

7 染料管理3。

8 校准3.8.1 背景校准3。

8。

2 颜色校准3。

8。

2。

1 使用商业的校准工具包进行的颜色校准3。

8.2。

2 客户特有的染料的校准3.9 数据库管理3.9.1 当前数据库的自动保存3。

9.2 当前数据库的保存3。

9.3 输入数据库3.9。

4 数据库的归档4 编程（检测项目的建立）4。

1 建立一个新的检测项目4.2 建立板布局4.2。

1 染料的确定4。

2.2 参考染料的选择4。

2.3 样本容积输入4。

2。

4 探针类型的确定4.2.5 背景的确定4。

2。

6 样品类型的定义4.2。

6。

1 标准4。

2。

6。

2 阳性对照4。

目录：1 安全预防法2 安装2.1 交货包装2.2 仪器的安装2.3 功能性单元2.3.1 Mastercycler ep realplex2.4 启动2.4.1 realplex模块与热模块之间的连接2.4.2 Mastercycler ep realplex 与计算机之间的连接2.4.3 与其它部件的连接2.4.4 realplex软件的安装2.4.4.1 安装主程序2.4.4.2 数据恢复2.4.4.3 开始realplex软件的运行3. 操作3.1 管理者登陆3.2 登陆3.3 用户变更3.4 系统配置3.4.1 对使用者的管理3.4.1.1 新用户建立3.4.1.2 编辑用户3.4.1.3删除用户3.4.2 用户层3.4.3 循环仪3.4.4 realplex 模块3.4.5 系统层3.4.5.1 特性3.4.5.2 登陆出错信息3.4.5.3 用户登陆3.4.5.4 软件更新3.5 检测项目管理3.5.1 建立检测项目3.5.2 打开检测项目3.5.3 保存检测项目3.5.4 保存模板文件3.5.5 模板文件的使用3.5.6 复制检测项目3.5.7 检测项目的输出3.5.8 检测项目的输入3.5.9 建立文件夹3.5.10 删除检测项目和文件夹3.6 探针管理3.7 染料管理3.8 校准3.8.1 背景校准3.8.2 颜色校准3.8.2.1 使用商业的校准工具包进行的颜色校准3.8.2.2 客户特有的染料的校准3.9 数据库管理3.9.1 当前数据库的自动保存3.9.2 当前数据库的保存3.9.3 输入数据库3.9.4 数据库的归档4 编程（检测项目的建立）4.1 建立一个新的检测项目4.2 建立板布局4.2.1 染料的确定4.2.2 参考染料的选择4.2.3 样本容积输入4.2.4 探针类型的确定4.2.5 背景的确定4.2.6 样品类型的定义4.2.6.1 标准4.2.6.2 阳性对照4.2.6.3 阴性对照4.2.6.4 未知样品4.2.7 复制和标准系列的自动建立4.2.8 定量的样品类型4.2.9 相对定量的样品类型4.2.9.1 多plex分析例子4.2.9.2 单plex分析的例子4.2.10 熔点分析中的样品类型4.2.11 终点测定中的样品类型4.2.12 +/-检测项目中的样品类型4.2.13 基因辨识中的样品类型4.2.12 样品的复制与剪切4.2.15 删除样品4.2.16 几个样品的归组4.2.17 子检测项目的测定4.2.18 板布局的删除4.2.19 完整检测项目的板布局编辑4.3 pcr程序的建立4.3.1 用模板程序建立一个pcr程序4.3.2 不用模板程序建立pcr程序4.3.3 程序步的插入和编辑4.3.3.1 温度4.3.3.2 循环（1－5步循环）4.3.3.3 保温4.3.3.4 暂停4.3.3.5 声音4.3.3.6 熔解曲线4.3.3.7 终点4.3.4 程序的复制4.3.5 程序的删除4.3.6 测量点的确定4.3.7 热盖设置5 操作（监测）5.1 样品的加载5.2 模块温度控制5.3 样品体积5.4 启动检测项目5.5 单个样品的选择5.6 单个样品类型的选择5.7 循环仪状态5.8 当前运行检测项目的中断5.9 继续运行检测项目5.10 终止检测项目5.11 mastercycler ep realplex 作为pcr的使用5.12 mastercycler ep realplex 作为荧光计的使用5.13 关闭6 分析6.1 概要6.1.1 打开检测项目6.1.1.1 打开在运行的检测项目6.1.1.2 打开子检测项目6.1.2 单一检测项目的选择6.1.3 使样品处于不活动状态6.1.4 样品类型的选择6.1.5 分析模式的选择6.1.6 图标缩放6.1.7 存储默认设置6.1.8 图表的保存和复制6.1.9 样品数据的保存和复制6.1.10 编辑报告6.1.10.1 模板报告的应用6.1.11 分析的保存6.1.12 调用分析6.2 定量6.2.1 阈值确定6.2.2 基准线测定6.2.3 标准曲线6.2.4 分析6.2.5 multiplex 分析6.3 相对定量6.3.1 阈值的测定6.3.2 多plex 分析的估算6.3.3 单plex分析的估算6.4 熔解曲线分析6.4.1 阈值的测定6.4.2 分析6.5 终点测量6.5.1标准曲线6.5.2 分析6.6 +/-检测项目6.6.1 将终点测定作为数据源的+/-检测项目分析模式6.6.1.1 阈值的测定6.6.2 pcr数据作为数据源的+/-assay6.6.2.1 阈值测定6.6.3 分析6.6.4 多plex分析6.7 基因测定6.7.1 阈值测定6.7.2 分析7 维护7.1 清洁仪器的一般方法7.2 热模块的清洁7.3 热模块的验证与校准8 故障查找8.1 一般故障8.2 在sybr绿色分析中发生的错误8.3 qrt－pcr过程中发生的错误9.1 登陆9.2 新用户的建立9.3 创建一个检测项目9.4 检测项目的保存9.5 执行检测项目9.5.1 概述9.5.2 板布局9.5.3 pcr程序9.5.4 开始检测项目9.5.5 当前运行检测项目的中断9.5.6 继续运行检测项目9.5.7 退出检测项目9.5.8 分析10 技术数据2.3 功能性单元2.3.1 Mastercycler ep realplex图1：关闭的realplex模块前面观1 realplex模块2 状态显示3 密封压板（锁住状态）4 控制面板的挂钩（Mastercycler ep realplex不需要）5 热模块图2：打开的realplex模块前面观1 密封压板（开启状态）2 realplex模块3 热模块放入试验样本后，向前拉动realplex模块，覆盖住插入的试管。

CFX 系列实时荧光定量 PCR触摸屏可让您无需电脑即可并在实验过程中实时浏览独特的离线操作模式 使之成为真正无需外接电脑控制的定量 PCR 仪的设计理念 每台仪器的光学系统出厂时都经过校正 安装使用过程中也反应模块设计实现超大大缩短运行时间配的温度梯度功能是帮助您筛选最佳反应条件的有力工具 节省通道多重5 µl 也能得CFX384 Touch反应也能得到理想运行结束后实验结果可作为您更多信息 请浏览 /qpcrsystems2.5˚C/sPeltier0–100˚C±0.2˚C90˚C 10秒达到LEDsFiltersFilters Photodiodes通过彩色 LCD触摸屏完成仪器操控和运行状态实时监控CFX96 Touch Deep Well ™ 定量 PCR 仪1020 3040CFX Connect ™ 定量 PCR 仪及双通道检测器320 10 20 30 40500 10 20 30 40 50432320 10 20 30 40500 10 20 30 40 50302520151034 5 6 7 8 90 10 20 30 40 50432010203040502345010203040502345人性化的界面 高效简洁的设置向导■ CFX Manager Software 3.0 提供了多种相对定量的分析方法供您选择 包括 法 法 多内参校正法 结Gene Study 无限量数据合并分析■ CFX Manager 能与 LIMS 系统兼容 并符合美国 FDA 21 之要求伯乐生命医学产品 上海 有限公司地址 上海市浦东东方路 18 号保利广场 E 栋 3 楼电话 021 - 6169 8500传真 021 - 6169 8599邮编 200120北京办事处地址 北京朝阳区曙光西里 5 号A 栋凤凰置地广场 22 楼电话 010 - 5939 0088传真 010 - 5939 0160邮编 100028广州办事处地址 广州市环市东路 403 号广州国际电子大厦 1302 - 03 室电话 020 - 8732 2339传真 020 - 8732 2332邮编 510095中国呼叫中心 800 - 820 - 5567 ************欢迎访问 Ordering Information Catalog # Description184-5384 CFX 384™ Optical Reaction Module, for use withC1000 Touch thermal cycler chassis, includes CFXManager software, license for qbase PLUS software,communication cable, reagents, consumables185-5484 CFX384 Touch Real-Time PCR Detection System,includes C1000 Touch thermal cycler chassis,CFX384 optical reaction module, CFX Managersoftware, license for qbase PLUS software,communication cable, reagents, consumables184-5096 CFX96™ Optical Reaction Module, for use withC1000 Touch thermal cycler chassis, includes CFXManager software, license for qbase PLUS software,communication cable, reagents, consumables185-5196 CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System,includes C1000 Touch thermal cycler chassis,CFX96 optical reaction module, CFX Managersoftware, license for qbase PLUS software,communication cable, reagents, consumables184-5001 CFX Manager Software, Security Edition, includes 1user license, installation CD, HASP HL key184-5025 Precision Melt Analysis Software, includes 2 userlicenses, installation CD, 2 HASP HL keys, meltcalibration kit184-5008 CFX Manager Software, Chinese Edition, includes3user licenses, installation CD, 3 HASP HL keys185-4096 CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR DetectionSystem, includes C1000 Touch thermal cyclerchassis, CFX96 Deep Well™ optical reactionmodule, CFX Manager software, license forqbase PLUS software, communication cable,reagents, consumables185-4095 CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR DetectionSystem, includes C1000 Touch thermal cyclerchassis, CFX96 Deep Well optical reaction module,CFX Manager software, license for qbase PLUSsoftware, communication cable184-4096 CFX96 Deep Well Optical Reaction Module, for use with C1000 Touch thermal cycler chassis, includesCFX Manager software, license for qbase PLUSsoftware, communication cable, reagents,consumables185-5200 CFX Connect Real-Time PCR Detection System,includes CFX Connect thermal cycler chassis, CFXConnect optical reaction module, CFX Managersoftware, license for qbase PLUS software,communication cable, reagents, consumables 185-5201 CFX Connect Real-Time PCR Detection System,includes CFX Connect thermal cycler chassis, CFXConnect optical reaction module, CFX Managersoftware, license for qbase PLUS software,communication cable184-5008 CFX Manager Software, Chinese Edition, includes 3user licenses, installation CD, 3 HASP HL keys184-5025 Precision Melt Analysis Software, includes 2 userlicenses, installation CD, 2 HASP HL keys, meltcalibration kit172-5200 SsoFast™ EvaGreen® Supermi x 2 ml, 2x real-timePCR mix, contains dNTPs, Sso7d fusion polymerase,MgCl2, EvaGreen dye, stabilizers, for 200 x 20 μlreactions172-5210 SsoFast™ EvaGreen® Supermix with Low ROX 2ml, 2x real-time PCR mix, contains dNTPs, Sso7dfusion polymerase, MgCl2, ROX passive referencedye, stabilizers, for 200 x 20 μl reactions172-5120 iTaq™ Universal SYBR® Green Supermix 2 ml (2 x1ml), 2 x qPCR mix, contains dNTPs, iTaq DNApolymerase, MgCl2, SYBR® Green I, enhancers,stabilizers, fluorescein, ROX normalization dyes, for200 x 20 μl reactions172-5130 iTaq™ Universal Probes Supermix 2 ml (2 x 1 ml),2 x qPCR mix, contains dNTPs, iTaq DNApolymerase, MgCl2, enhancers, stabilizers, ROXnormalization dyes, for 200 x 20 μl reactions172-5270 SsoAdvanced Universal SYBR® Green Supermix 2ml (2 x 1ml), contains dNTPs, Sso7d fusionpolymerase, MgCl2, SYBR® Green I, enhancers,stabilizers, fluorescein, ROX normalization dyes, for200 x 20 μl reactions172-5280 SsoAdvanced Universal Probes Supermix 2 ml (2 x1 ml), contains dNTPs, Sso7d fusion polymerase,MgCl2, enhancers, stabilizers, ROX normalizationdyes, for 200 x 20 μl reactions172-5996 SsoFast EvaGreen Control Assay, predesigned kitfor verifying performance of real-time PCR systemsor training new users, includes template DNA,primers, supermix, waterHSP-9601 Hard-Shell® Thin-Wall 96-Well Skirted PCR Plates,white shell, clear well, 50MSB-1001 Microseal® 'B' Adhesive Seals, optically clear, 100China/Printed in China13-121 0613。

q5荧光定量pcr仪说明书摘要：一、引言二、q5 荧光定量PCR 仪的概述1.仪器简介2.技术参数三、q5 荧光定量PCR 仪的使用步骤1.准备工作2.样品制备3.反应程序设定4.数据处理与分析四、q5 荧光定量PCR 仪的维护与保养五、q5 荧光定量PCR 仪的常见问题及解决方法六、附录正文：【引言】q5 荧光定量PCR 仪是一款广泛应用于生物学、医学等领域的实验仪器，它具有高精度、高灵敏度、高效率等优点，为实验人员提供了便捷、准确的实验手段。

本文将详细介绍q5 荧光定量PCR 仪的使用方法、维护保养以及常见问题的解决方法。

【q5 荧光定量PCR 仪的概述】1.仪器简介q5 荧光定量PCR 仪是一种用于实时定量PCR 分析的仪器，通过荧光信号的检测，实现对目标DNA 分子的快速、准确分析。

它具有高度的自动化、智能化，能够满足不同实验需求。

2.技术参数q5 荧光定量PCR 仪的主要技术参数包括：（1）温度控制范围：4℃~99℃；（2）升温速率：最大30℃/s；（3）温度分辨率：±0.1℃；（4）荧光检测通道：多通道；（5）样品位数：多样品位；（6）数据存储：内置存储，可扩展；（7）通信接口：USB、以太网等。

【q5 荧光定量PCR 仪的使用步骤】1.准备工作在使用q5 荧光定量PCR 仪前，需确保仪器已经安装好，并按照说明书的要求进行预热。

同时，检查仪器内部有无损坏，确保所有配件齐全。

2.样品制备根据实验需求，制备适当量的DNA 样品。

样品要求无杂质，并充分混匀。

3.反应程序设定根据实验目的和样品特性，设定合适的反应程序。

通常包括：预变性、退火、延伸、终止等阶段。

同时，设置荧光检测通道、检测时间等参数。

4.数据处理与分析实验完成后，通过仪器自带的数据处理软件，对实验数据进行处理和分析，得出实验结果。

【q5 荧光定量PCR 仪的维护与保养】1.使用过程中，注意保持仪器清洁，避免灰尘、污渍等影响实验结果。

实时荧光定量PCR仪快速操作指南1.连接电源从包装箱里取出仪器放置在实验台上，拿出电源线和电源适配器，将电源线一端与电源适配器相连，另一端连接至交流220V电源插座（AC85~264V）电源适配器的输出端连接到仪器电源插孔。

接口插入仪器电源插孔，注意插孔方向箭头方向朝上。

打开仪器背面的电源开关开启仪器，仪器自检成功，自动进入到软件界面。

2.样品准备◼准备试剂Q1600实时荧光定量PCR仪使用0.2ml透明离心试管根据试剂要求选用10-100μl合适的加液量。

◼离心操作配置完成试剂样本的试管在放入仪器之前，要用离心机进行离心操作，确保试剂液体处于试管底部，且液体内部不含有气泡。

◼放置样品将反应管按照顺序放入加热孔内。

3.设置程序，运行实验软件操作基本步骤：◼新建实验新建实验，选择运行槽◼基本设置设置实验名称，实验类型，检测项目，选择使用的染料。

◼样本设置设置样品名称，样本ID号，选择样本类型◼程序设置设置需要的反应程序◼保存文件单击保存，保存实验文件◼运行单击运行，运行实验。

4.结果分析◼实验结束，软件自动计算Ct值，根据判定规则自动出结果。

◼如需进行熔解分析和基因分型，在软件分析类型里选择相应的分析功能。

5.结果导出◼导出实验结果单击导出，导出实验数据。

◼结果打印连接配置的热敏打印机，选中要打印的样品孔，单击打印，打印实验结果。

6.关闭仪器◼实验结束，取出反应管◼长按仪器前面板关机按键，关闭仪器◼长时间不使用仪器，请关闭仪器背部左下角电源开关。

荧光定量PCR仪标准操作指导书1、适用范围：AGS AGS4800型实时荧光定量PCR仪。

1、双击桌面“AGS4800”快捷方式，运行程序。

打开AGS4800程序进入用户选择界面。

选择用户后，进入软件操作界面。

2、新建一个检测程序文件单击新建按钮，新建一个检测程序文件。

2.1设置热盖温度调节热盖温度(30-105℃)，默认105℃。

2.2设置试管加液量根据实际试管加液量调节加液量参数（5-100μl），默认25μl。

2.3设置扩增程序单击“添加”创建一个程序段2.4添加程序名称，设置各程序段循环数。

2.5温度设置功能按钮添加--------------------在当前温度节结尾，新建一个温度节插入--------------------在当前温度节前添加一个温度节删除--------------------将当前温度节删除2.6 样本信息录入2.6.1打开样本参数设置界面2.6.2在当前程序染料设置里，选择试剂所对应的染料。

2.6.３样本信息设置选择扩增的染料，选中要设置孔位依次输入“样本序号、样本名称、样本ID”，在荧光信息选择框中选择样本类型，若为标准品可以输入样本浓度信息。

样本浓度信息可以手工输入数值或者使用下拉选择框选取标准样品浓度信息。

最大样本浓度输入值1.00e+10。

2.6.4孔位选择单孔选择-----------------通过鼠标单击选中单个孔位。

相邻孔位选择--------------通过单击鼠标并拖动选择矩形框内相邻孔位或者先选中一个孔位，按住“Shift”功能键单击另一孔位进行选择。

不连续孔位选择---------通过按住“Ctrl”功能键进行依次追加选择孔位。

A（B）行全选----------在A（B）行开始位置单击鼠标则选中A(B)行所有孔位。

孔位全选-----------------在图示位置单击鼠标左键则全选所有孔位。

选择孔位增减-------------按住“Ctrl”键，使用鼠标单击需增加或减少的孔位。

LightCycler96荧光定量PCR仪操作规程1.开机前请注意确保室温在20-30℃，仪器通风散热口不能有物品遮挡影响散热。

2.请选用与罗氏原装耗材高度一致的96孔板或8联管（100ul白色矮管）。

3.在操作过程中，切忌戴有粉末的乳胶手套或裸手接触光学透性封板膜或管盖。

4.先打开仪器背面的电源开关，Initialization表示仪器开始初始化（期间不能运行试验，但已可设置程序），直到仪器出现Ready即为可用状态。

Standby状态表示加热模块盖关闭，可以通过点击Heat lid（新版本无需），激活Start运行实验。

5.配制反应液，加样封膜完毕，在板式离心机中离心，排除气泡及贴壁液滴。

6.数据可以直接储存在仪器或者U盘，仪器最多可以储存50个实验数据需定时备份清理，按“synchronization”按钮仪器数据可以和U盘同步，U盘支持热插拔，linux 系统正常情况下无需担心病毒问题。

7.LC96 背后有两个USB接口，上面用于连接U盘，下面用于连Barcode，请不要交换使用。

8.实验完成后可以用U盘备份，或者以附件的形式发到指定邮箱。

关闭电脑及总电源，实验人员在离开PCR扩增区时带走用完的反应板。

维护SOPLightCycler 96是一台免维护的仪器。

做任何维护工作前，须确认仪器电源已关闭。

预防性维护：1．检查LightCycler 96主机两侧与背后空间，确保无任何阻碍空气流通的物品，包括书本、纸张或窗帘等；2．若需清洁主机表面或触摸屏，用不起毛的软布蘸少量灭菌水擦拭即可。

切勿直接将去污剂喷洒在仪器和触摸屏上。

清洁性维护：若有需要，可用性质温和的商品化清洁剂或70％的乙醇溶液对LightCycler 96主机表面、热循环96孔模块进行清洁。

清洁96孔热循环模块：1.打开抽屉，关闭仪器，2.用移液器移取125μl 70％乙醇溶液或异丙醇至所有孔内；3.15分钟后，使用移液器对孔内溶液进行多次吹洗；4.移除孔内的液体，并使96孔模块孔内自然风干；注意操作时不要让清洗液腐蚀热循环模块的涂层。