制片、染色及显微观察

实验一微生物制片及形态观察一、显微镜油镜的使用显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。

显微镜的种类很多，在实验室中常用的有：普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。

1. 结构光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。

光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等；机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等（图1－1）。

图1－1 光学显微镜结构图标本的放大主要由物镜完成，物镜放大倍数越大，它的焦距越短。

焦距越小，物镜的透镜和玻片间距离（工作距离）也小。

油镜的工作距离很短，使用时需格外注意。

目镜只起放大作用，不能提高分辨率，标准目镜的放大倍数是十倍。

聚光镜能使光线照射标本后进入物镜，形成一个大角度的锥形光柱，因而对提高物镜分辨率是很重要的。

聚光镜可以上下移动，以调节光的明暗，可变光栏可以调节入射光束的大小。

显微镜用光源，自然光和灯光都可以，以灯光较好，因光色和强度都容易控制。

一般的显微镜可用普通的灯光，质量高的显微镜要用显微镜灯，才能充分发挥其性能。

有些需要很强照明，如暗视野照明、摄影等，常常使用卤素灯作为光源。

2. 原理显微镜的放大效能（分辨率）是由所用光波长短和物镜数值口径决定，缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率，可见光的光波幅度比较窄，紫外光波长短可以提高分辨率，但不能用肉眼直接观察。

所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的，提高数值口径是提高分辨率的理想措施。

要增加数值口径，可以提高介质折射率，当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（1.52）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。

显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。

3. 使用方法1）低倍镜观察先将低倍物镜的位置固定好，然后放置标本片，转动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。

组织病理切片步骤全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：组织病理切片是临床病理学中一项非常重要的操作步骤，通过对组织标本进行切片、染色和观察，可以帮助医生准确诊断患者的疾病。

下面我们将介绍一下组织病理切片的具体步骤。

1. 标本采集：在进行组织病理切片之前，首先需要进行标本采集。

医生会根据患者的临床症状和检查结果，决定需要进行组织切片检查的部位，并采集相应的组织标本。

常见的标本包括活检标本、手术标本等。

2. 标本固定：采集到的组织标本需要进行固定处理，以保持细胞和组织的形态结构。

常用的固定剂包括福尔马林、4%的中性缓冲福尔马林等。

3. 标本包埋：固定后的组织标本需要进行包埋处理，即将组织标本置于蜡块中，以便进行切片。

包埋可以帮助维持组织的完整性和形态结构。

4. 组织切片：将包埋好的组织标本切割成薄片，即组织切片。

组织切片的厚度通常为3-5微米，切片时需要使用显微镜预先调整刀片角度和大小。

5. 组织染色：切割好的组织切片需要进行染色处理，以凸显组织细胞的形态和特征。

常用的染色剂包括伊红染、嗜酸性粒染、埃曼若染、普鲁斯染等。

6. 组织观察：染色后的组织切片可以放置于显微镜下观察，通过观察组织细胞的形态、核的大小和形态等特征，医生可以进行病理诊断。

7. 病理诊断：最终根据对组织切片的观察和分析，医生可以进行病理诊断，明确患者疾病的类型、程度和预后。

第二篇示例：组织病理切片是病理学检查中的重要步骤之一，通过组织切片的制备，医生可以观察组织的形态结构，从而对疾病进行准确的诊断和鉴别。

下面将介绍一下组织病理切片的步骤。

第一步：标本采集组织病理切片的第一步是采集标本。

医生会根据患者的症状和临床表现，选择合适的部位进行组织采集，通常是通过手术或活检的方式获取组织标本。

采集的标本要求完整、清晰，以确保后续的切片制备质量。

第二步：固定采集到的组织标本需要进行固定处理，以保持组织的结构和形态。

固定的目的是使细胞和组织中的蛋白质、核酸等不能再发生变性、氧化或降解，防止组织腐败和细胞溶解。

细胞微丝和细胞核染色实验报告【实验目的】1、认识光学显微镜下细胞的形态结构；2、掌握临时制片和显微绘图的方法。

【材料、器材和试剂】材料：人体口腔黏膜上皮细胞、洋葱鳞茎；器材：显微镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸；试剂：1%碘液。

【方法和步骤】1、口腔黏膜上皮细胞的制片与观察口腔黏膜细胞涂片标本的制备：吸取一滴碘液滴在一张洁净的载玻片中央，用一根事先灭菌的牙签伸入自己的口腔内壁轻轻刮取黏膜上皮细胞，然后，将其放入载玻片上的染液中并来回搅动使细胞散开，染色1 min左右后小心加盖玻片（尽量避免产生气泡），用滤纸吸去盖玻片周围的液体。

观察：将自制的口腔黏膜上皮细胞标本装片置于显微镜下观察，先用低倍镜观察较分散的、轮廓清晰的黏膜上皮细胞。

由于该细胞体积较小、着色较淡，观察时应稍降低视野亮度以便于较快找到目标（在低倍镜下，用碘液染色的细胞呈黄色，成群或分散分布，形态大小多呈扁平椭圆形）。

选择轮廓清晰的细胞移至视野中央，转换至高倍镜下观察。

在高倍镜下，可见口腔黏膜上皮细胞外围有一层薄薄的细胞膜，扁圆形的细胞核呈深黄色，细胞质呈浅黄色或浅蓝色，核中央致密的结构为核仁。

2、洋葱鳞茎内表皮细胞的制片与观察表皮细胞装片标本的制备：取一干净载玻片，在其中央滴一滴碘液，将洋葱鳞茎用小刀分为几块，取一块肉质鳞叶，用剪刀在内表皮划“田”字形小方格，每一小方格边长3-4mm，然后用镊子轻轻撕下一小方格的膜质表皮，置于载玻片的碘液滴中铺平，取一干净的盖玻片，将其一侧先接触标本旁的碘液，再缓缓地盖上盖玻片，尽量避免产生气泡，用滤纸吸去盖玻片周围的液体。

观察：将制备好的装片标本放到显微镜下，先用低倍镜观察，可见许多长柱状、排列整齐、彼此相连的细胞，选择其中一个典型的细胞移至视野中央，再转换至高倍镜下仔细观察细胞壁、细胞核、细胞质和液泡等结构。

【实验结果】绘图并进行适当标注：人口腔黏膜上皮细胞和洋葱鳞茎内表皮细胞。

【讨论】简述观察细胞形态时，制作临时装片和显微镜镜检时的注意事项。

2022年高考生物总复习：显微观察的方式1.显微观察的两种方式(1)原色观察：即观察材料不用染色，直接用显微镜观察即可。

相关实验有：使用高倍显微镜观察几种细胞、用高倍显微镜观察叶绿体、观察植物细胞的吸水和失水等。

(2)染色观察：即观察材料要经染色剂染色后才可用显微镜观察。

相关实验有：观察DNA和RNA在细胞中的分布、用高倍显微镜观察线粒体、观察细胞的有丝分裂或减数分裂等。

2.显微观察类实验的染色剂与材料选择3.显微观察3种临时装片的制作方法【高考例证】1.(2016·江苏卷，19)下列实验都需要使用光学显微镜进行观察，有关实验现象描述合理的是()A.实验①B.实验②C.实验③D.实验④解析观察植物细胞的质壁分离和复原时，紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中液泡大，占据整体细胞体积的绝大部分，呈紫色，不同细胞的细胞液浓度大小不同，质壁分离的位置、程度并不一致，A正确；用光学显微镜观察多种多样的细胞时，不能观察到核糖体，B错误；洋葱根尖分生区细胞呈正方形，多数细胞处于分裂间期，观察不到染色体，C错误；线粒体需染色后才能观察到清晰的形态且酵母菌无大液泡，D错误。

答案A2.(2015·山东卷，3)下列有关生物学实验的叙述，正确的是()A.叶绿体色素滤液细线浸入层析液，可导致滤纸条上色素带重叠B.低温诱导大蒜根尖时间过短，可能导致难以观察到染色体加倍的细胞C.用显微镜观察洋葱根尖装片时，需保持细胞活性以便观察有丝分裂过程D.将洋葱表皮放入0.3 g/mL蔗糖溶液中，水分交换平衡后制成装片观察质壁分离过程解析色素分离时，若滤液细线浸入层析液，不能分离出各色素带，A错误；低温诱导染色体数目加倍实验中，若诱导大蒜根尖时间过短，染色体数目可能并未加倍，B正确；用显微镜观察洋葱根尖细胞装片时，细胞在解离时已死亡，不可能再继续分裂进程了，C错误；观察植物细胞质壁分离时，先制作装片，再观察细胞质壁分离状况，D错误。

第1篇一、实验目的1. 学习制作洋葱切片的技巧。

2. 掌握细胞染色方法，观察植物细胞的基本结构。

3. 理解显微镜的使用方法，提高显微镜观察技能。

二、实验原理洋葱切片染色实验是生物学实验中常见的实验之一。

通过制作洋葱切片，并对其进行染色，可以观察到植物细胞的基本结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。

染色剂可以将细胞结构中的不同成分染上不同的颜色，便于观察和区分。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、染色液、清水、酒精、盐酸等。

2. 实验仪器：显微镜、酒精灯、烧杯、滴管、显微镜载物台等。

四、实验步骤1. 制备洋葱切片（1）将洋葱洗净，切成薄片，厚度约为0.1毫米。

（2）用镊子将洋葱薄片取出，放置在载玻片上。

（3）用盖玻片轻轻覆盖在洋葱切片上，避免气泡产生。

2. 染色（1）将染色液滴加在盖玻片边缘，使染色液浸润整个洋葱切片。

（2）将载玻片放入装有酒精的烧杯中，进行脱色处理，脱色时间约为1分钟。

（3）取出载玻片，用滴管滴加清水，清洗切片，去除多余的染色液。

（4）将载玻片放入装有盐酸的烧杯中，进行酸化处理，酸化时间约为1分钟。

（5）取出载玻片，用滴管滴加清水，清洗切片，去除多余的盐酸。

（6）将载玻片放入装有染色液的烧杯中，进行染色处理，染色时间约为2分钟。

（7）取出载玻片，用滴管滴加清水，清洗切片，去除多余的染色液。

3. 观察与记录（1）将载玻片放置在显微镜载物台上，调整显微镜，使视野清晰。

（2）观察洋葱切片，记录细胞的基本结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。

（3）根据观察结果，分析洋葱细胞的生长状态。

五、实验结果与分析1. 观察到洋葱细胞呈长方形或椭圆形，细胞壁明显，细胞膜较薄，细胞质均匀，细胞核较大，位于细胞中央。

2. 细胞核内含有染色体，染色体呈紫色，易于观察。

3. 细胞质中的细胞器，如叶绿体、线粒体等，在染色过程中被染色剂染成绿色或蓝色，便于观察。

六、实验总结本次洋葱切片染色实验成功制作了洋葱切片，并观察到了植物细胞的基本结构。

微生物制片显微观察及检测技术微生物是一类不能看见的生物体，它们很小、很微弱。

为了观察和检测微生物，科学家们开发出了多种显微观察和检测技术。

本文将介绍一些常用的微生物制片技术及显微观察和检测技术。

微生物制片技术主要是将微生物样本制备成薄片以便进行显微观察。

常用的制片技术包括固定、包埋和切片。

固定是将微生物样本中的细胞或细菌固定在载玻片上，常用的方法有热固定、酒精固定和甲醛固定等。

包埋是将固定的微生物样本包裹在固体介质中，通常用于切片前的处理，常用的方法有冰冻包埋和石蜡包埋。

切片是将包埋的微生物样本切成薄片，常用的方法有冷冻切片和石蜡切片。

显微观察技术是利用显微镜观察微生物样本的细节和特征。

常用的显微观察技术包括光学显微镜和电子显微镜。

光学显微镜是利用光线通过样本并经过透镜放大观察，主要适用于观察细菌、真菌、原生动物等较大的微生物。

电子显微镜是利用电子束通过样本并经过电磁透镜放大观察，主要适用于观察细菌、病毒等较小的微生物。

电子显微镜分为扫描电子显微镜和透射电子显微镜两种，扫描电子显微镜适用于表面观察，透射电子显微镜适用于内部观察。

检测技术是用于检测微生物样本中的特定组分或特定物质。

常用的检测技术有免疫荧光检测法、酶联免疫吸附检测法和聚合酶链反应检测法等。

免疫荧光检测法是利用荧光染料标记的抗体与特定抗原结合形成复合物，通过显微镜观察荧光信号来检测微生物样本。

酶联免疫吸附检测法是利用酶标记的抗体与特定抗原结合形成复合物，通过显色反应来检测微生物样本。

聚合酶链反应检测法是利用特定的引物和酶来扩增微生物样本中的特定基因片段，通过电泳分析来检测扩增产物。

除了上述的微生物制片技术、显微观察和检测技术，还有一些其他的辅助技术可以提高微生物观察和检测的效果。

例如，染色技术可以通过染色一些特定物质来突出显示微生物样本中的细节和结构。

常用的染色技术有普鲁士蓝染色、格拉姆染色和伊汀染色等。

荧光标记技术可以通过标记荧光染料来突出显示微生物样本中的特定组分。