精胺对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响

铁皮石斛原胚体液体悬浮培养条件陈军峰;张艳;戴黎鸣;周伟;沈婧菁;开国银;周根余【摘要】以铁皮石斛种子诱导的原胚体为材料,对液体悬浮培养条件下影响铁皮石斛原胚体增殖和多糖成份累积的因素进行了研究.结果表明,铁皮石斛原胚体在1/2MS+1.0mg/LNAA,每20mL接种2g,蔗糖浓度3%或含10%香蕉提取物上清液的液体培养基中增殖最佳,可溶性多糖成分累积相对较高.【期刊名称】《上海师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(036)001【总页数】5页(P69-73)【关键词】铁皮石斛;原胚体;悬浮培养;增殖;多糖【作者】陈军峰;张艳;戴黎鸣;周伟;沈婧菁;开国银;周根余【作者单位】上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234【正文语种】中文【中图分类】Q946-330 引言铁皮石斛(Dendrobium candidum WaLL ex Lindl.)为传统名贵中药材，具有滋阴养胃、清热生津、润肺止咳之功效．自然条件下，铁皮石斛种子萌发率极低，生长缓慢；另一方面，由于人为过度采挖，铁皮石斛资源日趋枯竭[1～4]．为保护利用这一珍稀中药材，不少学者进行了铁皮石斛组织培养快速繁殖技术的研究，并取得了一定的进展．在铁皮石斛组织培养的研究中，以铁皮石解原胚体为材料研究试管苗分化及壮苗培养已有较多报道[4]．也有报道以石斛原球茎为材料，进行原球茎增殖及药用成分累积的研究[5～9]，其宗旨是通过细胞工程技术来解决铁皮石斛资源紧缺的问题．铁皮石斛种子在液体悬浮培养条件下萌发，可形成原胚体[10]，原胚体可以通过继代不断增殖，将原胚体转接到固体培养基上可形成原球茎，进一步分化可形成石斛小植株[11]．本文以由铁皮石斛种子诱导的原胚体为材料，对影响铁皮石斛原胚体在液体悬浮培养条件下的增殖以及水溶性多糖积累的一些因素进行了研究，以期筛选既有利于铁皮石斛原胚体增殖又可累积药用可溶性多糖成分的液体培养基，为有效利用铁皮石斛资源，大规模生产原胚体提供科学的依据．1 材料与方法1.1 材料铁皮石斛蒴果由云南省瑞丽西南大地石斛开发有限公司提供．1.2 培养基及基本培养条件试验采用的基本培养基为1/2MS液体培养基，蔗糖3%，pH5.6．培养条件：温度(25±1)℃，光照10h/d，光照强度为60umol·m-2·s-1，转速100 r/min．1.3 试验方法1.3.1 原胚体诱导将成熟未裂开的蒴果先用75%的酒精表面消毒30 s，再用3%NaClO的消毒15min，无菌水冲洗3次．将蒴果切开，将种子接种于盛有20 mL 液体培养基的100 mL三角烧瓶中进行振荡培养．刘瑞驹等[12]报道，在1/2MS培养基中加入NAA0.5mg/L能够加速种胚萌发，因此我们采用添加NAA0.5mg/L的1/2MS液体培养基．培养20d后种子萌发为原胚体．1.3.2 原胚体增殖试验1.3.2.1 无机盐浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖合成的影响在无菌条件下，将约2g铁皮石斛原胚体分别接种于20mL的1/4MS，1/2MS，MS液体培养基．试验重复3次，60d后统计结果．1.3.2.2 蔗糖浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖合成的影响在无菌条件下，将约2g铁皮石斛原胚体接种于20mL分别添加1%，2%，3%蔗糖的1/2MS液体培养基中．试验重复3次，50d后统计结果．1.3.2.3 NAA浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖合成的影响在无菌条件下，将约2g铁皮石斛原胚体接种于20mL的NAA浓度分别为0.2mg/L， 0.5mg/L， 1mg/L， 2mg/L的1/2MS液体培养基．试验重复3次，60d后统计结果．1.3.2.4 接种密度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖合成的影响在无菌条件下，分别将1g，2g，4g，8g铁皮石斛原胚体接种于1/2 MS液体培养基中．试验重复3次，60d后统计结果．1.3.2.5 香蕉提取物对铁皮石斛原胚体增殖和多糖合成的影响在无菌条件下，将约2g铁皮石斛原胚体接种于以10%香蕉提取物上清液代替碳源的1/2MS液体培养基中．试验重复3次，60d后统计结果．1.3.3 可溶性多糖含量的测定1.3.3.1 可溶性多糖的提取按王宪泽[13]提取多糖的方法提取测定多糖．将铁皮石斛原胚体70℃烘干至恒重，称取0.1g，研磨．溶于10mL蒸馏水，煮沸15min．将残渣过滤．上清液加入2mL 醋酸铅溶液去蛋白，再加入0.2g草酸钾沉淀多余的醋酸铅，过滤，滤液定容至50mL，制得可溶性多糖提取液．取1mL提取液，加入5mL蒽酮溶液，煮沸5min，迅速用冰水冷却，制得样品供分析用．使用752型紫外分光光度计，测量620nm波长下的吸光度．1.3.3.2 标准曲线的制作配制100ug/mL蔗糖标准溶液，分别取0，0.2mL，0.4mL，0.6mL，0.8mL，1.0mL；加蒸馏水定容为1mL；根据1.3.3.1方法制得分析样品，测量620nm波长下的吸光度．以标准蔗糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为y = 0.0046x + 0.0078，R2 = 0.9955．2 结果与分析2.1 无机盐浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响表1的结果表明，无机盐浓度对铁皮石斛原胚体的增殖影响明显．1/4MS培养基无机盐浓度过低，不利于原胚体的增值， 1/2MS培养基上增殖系数最高，为3.002．MS培养基上增值率最低，说明铁皮石斛原胚体的增殖需要合适的无机盐浓度，并非越高越好；而多糖的累积却需要较低的无机盐浓度．魏小勇[8]报道原球茎在1/4MS培养基中增殖优于1/2MS,与本试验结果不一致，说明原胚体与原球茎的增殖对无机盐浓度有不同的要求．表 1 无机盐浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响培养基种类接种量g培养后重量g增殖系数多糖含量% 1 /4MS 2.473 5.421 1.192 14.451/2MS 2.106 8.428 3.002 8.83 MS 2.430 5.158 1.123 6.69增殖系数=(培养后重量-接种量) / 接种量2.2 蔗糖浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响蔗糖是离体培养条件下植物细胞生长必需的碳源．由表2可见，培养基中蔗糖浓度对铁皮石斛原胚体的增殖影响明显．在一定的浓度范围内，随着蔗糖浓度的升高，铁皮石斛原胚体的增殖也随之升高．蔗糖浓度为3%时，增殖系数最高为3.002．随着浓度继续增加到4%时，增殖系数开始降低．作为多糖合成的底物，随着蔗糖浓度的升高，原胚体的多糖含量也增高．但蔗糖除作为碳源外，还起到调节培养基渗透压的作用．因此，蔗糖浓度过高，培养基渗透压提高，影响了原胚体的正常生长，其增殖系数和多糖的累积量也开始下降．表 2 蔗糖浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响蔗糖浓度接种量g 培养后重量g 增殖系数多糖含量%1% 2.2543.857 1.711 2.882% 2.4955.8661.351 7.053%2.1068.4283.002 8.83 4% 2.4648.579 2.482 8.542.3 NAA浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响何静波等[11]报道，生长素NAA有利于原胚体增殖．如表3所示，在一定范围内随着NAA浓度的升高，原胚体的增殖迅速，当NAA浓度为1mg/L时，增殖系数最高，达到3.918．随NAA浓度的进一步提高到2mg/L时，原胚体的增殖率开始降低，而多糖物质的积累随原胚体的迅速增殖而下降．结果表明， NAA浓度为1mg/L时，原胚体的增殖率最高，且多糖累积含量也相对较高．表 3 NAA浓度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响NAA浓度mg/L接种量g培养后重量g增殖系数多糖含量%0 2.346 3.5706 1.522 14.720.22.695 4.9245 1.827 15.450.52.106 8.428 3.002 8.831 2.536 12.472 3.918 8.632 2.615 11.0077 3.209 6.312.4 接种密度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响接种密度对铁皮石斛原胚体增殖以及多糖合成的影响很大．表4所示，接种约1g 材料于20mL液体培养基中，培养20d后，开始枯黄死亡．说明铁皮石斛原胚体的生长需要一定密度，接种量太低不利于原胚体的生长．接种量约2g，增殖系数最高，达到3.002，且生长良好，此结果与宋经元[14]等以原球茎为试验材料所得的结果一致．当接种量达到4g左右，培养基中的营养物质不足以维持原胚体良好生长，增殖系数只有0.790，原胚体变为黄色．当接种量达到8g，增殖率更低，仅为0.309，且生长状况不良，原胚体黄褐色，趋于死亡．表 4 接种密度对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响接种量g 培养后重量g 增殖系数多糖含量%1.291 0.867 -0.3282.106 8.428 3.002 8.83 4.085 7.315 0.790 19.128.039 10.523 0.309 7.542.5 香蕉提取物对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响(表5)表 5 香蕉提取物上清液对铁皮石斛原胚体增殖和多糖含量的影响碳源种类接种量g培养后重量g增殖系数多糖含量%10%香蕉上清液 2.460 10.0758 3.096 7.401% 蔗糖 2.254 3.8570.416 2.882% 蔗糖 2.495 5.8661.3517.053% 蔗糖 2.106 8.4283.002 8.83李小军等[9]在香蕉提取物对霍山石斛原球茎增殖的研究中发现，培养基中添加10%香蕉提取物的上清液有利于原球茎的增殖．我们以10%香蕉提取物上清液代替蔗糖为碳源，原胚体的增殖效果与3%蔗糖为碳源的培养基相近．由于香蕉提取物上清液中含有有利于原胚体生长的因子且具有缓冲作用，培养基的pH值可长期稳定在5.0～5.5的范围内，这种酸性环境条件较有利于石斛原胚体的生长．因此，香蕉提取物上清液对原胚体的增殖和多糖累积及其与碳源之间的关系值得进一步认证．图 1 原胚体图 2 原球茎图 3 原胚体的增殖图 4 种胚萌发生成的愈伤组织3 结论(1)本试验以铁皮石斛种子诱导的原胚体为材料，对铁皮石斛原胚体在液体悬浮培养条件下的增殖及多糖成分的累积进行了研究．试验结果表明，1/2MS+1.0mg/L NAA，蔗糖浓度3%，接种量为每20mL培养基2g，最适合原胚体的增殖和可溶性多糖的积累．(2)试验发现，铁皮石斛种胚在液体悬浮培养条件下萌发除形成原胚体外，少部分也可形成生长为原球茎(图2)．培养末期，由于培养基的消耗以及原胚体的密度增大，导致不能充分悬浮振荡，表面一层的原胚体基部细胞开始增大，原胚体生长为原球茎，说明铁皮石斛种胚由萌发到生长为正常的原球茎需要与空气接触．涂红艳等报道[15]，细茎石斛原球茎在悬浮培养条件下生长呈“S”曲线，50d达到生长高峰，这与我们的试验结果相一致．因此，选取50d继代对铁皮石斛原胚体的增殖和可溶性多糖的积累应是比较合适的时期．超过这个时期，到达静止期，生长缓慢，将造成过条件化或老化[16]．(3)添加香蕉提取物上清液，可明显促进铁皮石斛原胚体的增殖，但本试验中，多糖含量并没有提高．因此，添加香蕉提取物上清液对原胚体的增殖和多糖累积及其与碳源之间的关系值得进一步认证．如果提高香蕉提取物上清液的浓度，或补充一定量蔗糖为碳源，是否可以取得更理想的结果，有待进一步研究．(4) 原胚体形成、生长过程中由基部丛生(图1，图3)，然后脱落[11]，这种增殖方式和原球茎的增殖方式相比更快速．因此，从增殖能力方面来看，原胚体更适合用于大规模培养．易明林等[17]报道，在附加NAA的培养基中，部分铁皮石斛种胚通过不正常萌发形成愈伤组织，该愈伤组织继代5年依然可以保持快速增殖，并可分化为原胚体，且多糖含量也较高[18]．因此，在尚未建立铁皮石斛愈伤组织发生的悬浮培养系之前，原胚体不失为一种理想的大规模培养材料．参考文献:[1] 徐红，王峥淘，丁家宜，等.药用石斛生发生物技术的研究概况[J].中国野生植物资源，2001，20(1):1-4.[2] 魏小勇，张铭，黄华荣.铁皮石斛药用研究进展[J] .中草药， 2000，31(增刊):189-193.[3] 王康正，高远文.石斛属药用植物研究进展[J] .中草药，1997，28(10):633-636.[4] 张治国，俞巧仙，叶智根.名贵中药-铁皮石斛[M] .上海:上海科学技术文献出版社，2006.[5] 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铁皮石斛原胚体高效诱导、增殖及多糖含量累积的研究张宇斌; 乙引; 陈训; 罗天霞【期刊名称】《《吉林农业C版》》【年(卷),期】2012(000)008【总页数】2页(P46-47)【关键词】铁皮石斛; 愈伤组织; 原球茎; 悬浮培养【作者】张宇斌; 乙引; 陈训; 罗天霞【作者单位】贵州师范大学生命科学学院贵州贵阳 550001; 贵州省科技厅贵州贵阳 550001; 贵州师范大学生命科学学院2010级生物技术贵州贵阳 550001【正文语种】中文【中图分类】S567.239铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）珍稀濒危植物，传统名贵中药材，是石斛中的上品，具有抗衰老、抗肿瘤、滋阴清热、滋阴养胃、清热生津、润肺止咳之功效，扩张血管及抗血小板凝集等作用[3-5]。

主要分布于我国云南、贵州、广西、台湾等地。

铁皮石斛生长在年平均气温12℃～18℃、相对湿度60%～75%、林间透光度60%、无霜多雾、年降雨1100～1500mm的常绿阔叶林的树干上以及少数石灰岩上[1-2]。

自然条件下，野生铁皮石斛种子通过风媒和虫媒传播，其成活率极低，从种子萌发到进入商品阶段要经过5～7年时间，生长缓慢，而且人们过度采挖，导致铁皮石斛资源日益枯竭[7]。

铁皮石斛是珍稀名贵的中草药，由于市场需求过大，人们对野生石斛的过度采挖，致使我国的野生石斛资源遭到严重的破坏，野生石斛属植物资源已近濒危，为加强石斛的资源保护，建立无性系快速繁殖系统，提高培养材料的繁殖系数，实现大力发展药用石斛产业，从试管苗到大田栽培的中间环节成为制约铁皮石斛大面积人工栽培的主要障碍[8]，铁皮石斛已被列为濒危物种[4] 。

为了缓解供求矛盾，研究者开始探索人工繁殖的方法。

目前，铁皮石斛的繁殖方法大多为常规的固体培养[6]，有播种量小、周期长、劳动力消耗大、成本高等缺点，而液体悬浮培养可有效地解决这一问题，试验将对影响铁皮石斛种子液体培养的营养因子进行研究，以期为铁皮石斛的繁殖开发利用提供理论依据。

铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究多糖是石斛的主要药用成分。

现代药理学研究表明，石斛多糖具有延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤、降血糖等多种药理活性。

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall．ex Lindl）是石斛中的极品，具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳的功效。

近年来，由于过度消耗，石斛野生资源已濒临绝迹。

由此，提出铁皮石斛胚性组织原球茎（protocorm）替代其原植株成为药源的可能性。

但迄今有关铁皮石斛原球茎多糖的研究尚未见报道。

本研究旨在优化铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的培养条件，了解铁皮石斛原球茎多糖的理化性质和生物活性。

研究结果如下：1．铁皮石斛原球茎悬浮培养诱导高含量多糖的研究（1）铁皮石斛原球茎生长、多糖积累以及营养物消耗的动态变化为筛选适合铁皮石斛原球茎的最佳培养方式，对比了固体培养和液体悬浮培养这两种培养方式，并研究了液体悬浮培养基质的营养消耗趋势，同时分析了液体培养液中pH值和电导率的变化。

结果表明：原球茎在固体培养条件下，培养60d后干重达到最大为13.40g ／L，多糖产量最大值为2412.5mg／L，在液体悬浮培养条件下，干重需要50d 达到最大为17.64g／L，多糖产量最大值为3081.2mg／L，液体悬浮培养在干重量、多糖含量和多糖产量等方面优于固体培养。

在70d的周期内，悬浮培养原球茎以近“S”型曲线生长；原球茎在培养初期生长较缓慢，培养10d后原球茎生长进入快速生长期，原球茎干重量在第50d有最大值（17.64g／L），随后下降，60d后原球茎开始衰亡。

多糖的积累与原球茎生长有一定的相关性，多糖含量从10d起开始逐步增长，30d达到最大（213.5mg／g·DW），而后迅速降低。

在悬浮培养过程中，糖和磷的消耗速度较快，铵态氮优于硝态氮被吸收利用；pH值在培养前10d快速下降，随后又逐渐回升；在指数生长期，培养基中电导率降低与原球茎干重量增加之间有线性负相关性。

2种多胺对铁皮石斛瓶内开花的影响作者：李茹李枝林白建昆商正蕊赵丽莹王玉英来源：《热带作物学报》2020年第04期摘要：以铁皮石斛无根组培苗为试验材料，研究不同浓度的外源腐胺（Put）和精胺（Spm）对铁皮石斛瓶内开花的影响。

结果表明：培养基中添加适量的Put和Spm可提高开花率。

当Put浓度为0.4 mg/L时，铁皮石斛瓶内开花率最高，为30.47%;Spm浓度为0.2 mg/L 时，铁皮石斛瓶内开花率最高，为22.26%;Put浓度为0.2 mg/L时，铁皮石斛始花期最短，为83.33 d，观赏期最长，为43.33 d。

Put浓度为0.4 mg/L时，植株可溶性糖和可溶性蛋白含量最高;对照处理下植株全N含量达最高;Spm浓度为0.6 mg/L時，植株C/N比达最大。

Put浓度为0.4 mg/L时，有利于铁皮石斛组培苗碳氮化合物的积累，可提高铁皮石斛的开花率;Put浓度为0.2 mg/L时，能使花期提前，延长观赏期。

Spm浓度为0.4 mg/L时，有利于铁皮石斛组培苗株高增长和生根，促进铁皮石斛组培苗的营养生长。

关键词：铁皮石斛;多胺;瓶内开花;开花率中图分类号：S682.31 文献标识码：AAbstract： The effects of different concentrations of exogenous putrescine （Put） and spermine （Spm） on the flowering of Dendrobium officinale Kimura et Migo were studied using the rootless plantlets in vitro. The flowering rate of D. officinale could be increased by adding appropriate amount of Put and Spm in the medium. The flowering rate of D. officinale was the highest （30.47%） when the concentration of Put was 0.4 mg/L， and the flowering rate of D. officinale was 22.26% when the concentration of Spm was 0.2 mg/L. The time to have the first flower bud appeared of D. officinale was the shortest （83.33 d） when the concentration of Put was 0.2 mg/L， and the viewing period of D. officinale could be prolonged by 43.33 days. When the concentration of Put was 0.4 mg/L， the content of soluble sugar and soluble protein was the highest. The content of total N was the highest in CK. When the concentration of Spm was 0.6 mg/L， the C/N ratio of the plant was the highest. The concentration of Put 0.4 mg/L would be beneficial to the accumulation of carbon and nitrogen compounds， which could promote the flowering rate of D. officinale.Keywords： Dendrobium officinale Kimura et Migo; polyamines; in vitro flowering; rate of floweringDOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.04.011铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）又名黑节草，是重要的兰科（Orchidaceae Juss.）植物。

液体悬浮培养促进铁皮石斛原球茎高效诱导、增殖的研究
液体悬浮培养促进铁皮石斛原球茎高效诱导、增殖的研究
用正交设计方法对铁皮石斛原球茎具有高效增殖影响的激素(BA,NAA,KT,马铃薯汁)以及配比进行研究,结果表明:以茎段为外植体在培养基MS+BA2.0 mg/L+NAA2.0 mg/L+马铃薯汁10%+糖3%,具有很好的原球茎诱导作用,50 d后诱导率达95.20%;原球茎在1/2MS+BA2.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+糖3%的培养基上,以液体悬浮培养,原球茎增殖达49.032 g/50d.
作者：苏钛张晓南 Su Tai Zhang Xiaonan 作者单位：云南省药物研究所,云南,昆明,650111 刊名：中国野生植物资源英文刊名：CHINESE WILD PLANT RESOURCES 年，卷(期)：2009 28(4) 分类号：Q943.1 关键词：铁皮石斛原球茎悬浮培养。

几种因素对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响韦晓新;苏江;何铁光【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2008(039)005【摘要】通过探讨几种不同因素对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响,结果表明,MS、1/2MS、B5、N6和White培养基对原球茎的生长和多糖积累有不同的影响;其中,1/2MS和N6培养基适合原球茎生长和多糖积累.当氮源浓度为30～60mmol/L、NO3-/NH4+分子比为40∶20、30∶30时,有利于原球茎生长和多糖积累.通过二次回归正交组合设计,优化拟合得到激素6-BA和NAA的正交回归模型;寻优定量结果表明,6-B A为1.25mg/L、NAA为0.52mg/L时,原球茎最大干重可达14.68g/L;当6-BA与NAA组合的最佳浓度配比为1.41mg/L、036mg/L时,原球茎最高多糖含量为274.2mg/g·DW.在以转速、接种量、pH 3因素4水平的L16(43)正交试验中,对原球茎生长影响最大的因子是pH,其次是转速,接种量影响最小;当初始培养液pH为7.0、摇床转速为110r/min、接种量为30g·FW/L时,适合原球茎生长.各因子对原球茎多糖积累的影响程度依次为转速、pH、接种量,当初始培养液pH为5.0、摇床转速为110r/min、接种量为50g·FW/L时,有利于多糖积累【总页数】6页(P601-606)【作者】韦晓新;苏江;何铁光【作者单位】百色国家农业科技园区,广西百色,533612;广西大学农学院,南宁,530005;广西农业科学院生物技术研究所,南宁,530007;广西农业科学院生物技术研究所,南宁,530007【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9【相关文献】1.几种因素对铁皮石斛原球茎增殖生长的影响 [J], 姚睿;朴炫春;邵春绘;于丹;廉美兰2.中途添加不同浓度蔗糖对铁皮石斛原球茎多糖积累的影响 [J], 苏江;岑忠用;何铁光3.蔗糖对铁皮石斛原球茎生长与多糖积累的影响 [J], 何铁光;杨丽涛;李杨瑞;王灿琴;苏江4.外源一氧化氮(NO)对铁皮石斛类原球茎生长及多糖积累的影响 [J], 蒋天仪;卓宇;唐敏;王波5.外源一氧化氮对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响 [J], 李巧自;高素萍;张科燕;陈锋;段晶晶;蔡心怡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水杨酸调节霍山石斛类原球茎生长和多糖合成的研究
霍山石斛是珍贵的药用植物,野生资源濒临灭绝,其药用成分多糖具有抗氧化、提高免疫功能、抗肿瘤以及显著的抗白内障活性。

水杨酸广泛存在于植物体内,它能有效调节植物细胞生长代谢,介导植物在生物和非生物胁迫下防卫反应的发生等。

目前国内外关于水杨酸调节植物次生代谢产物合成的研究较多,但关于水杨酸诱导多糖合成却未见报道。

本文以植物细胞悬浮培养技术为手段,研究水杨酸诱导霍山石斛类原球茎高产多糖,为保护和可持续利用霍山石斛药用资源提供依据。

论文考察了外源水杨酸对霍山石斛类原球茎生长、多糖合成、碳氮磷代谢以及培养基pH的影响,并建立了相关的培养动力学模型。

结果表明,水杨酸浓度在50—150μmol/L范围内对细胞生长没有明显的影响,但可显著促进多糖的合成,以100μmol/L浓度的水杨酸处理效果最佳,培养18 d时,多糖产量达到3.129 g/L,是同期对照的1.63倍。

水杨酸对多糖合成的促进作用和它促进细胞对培养基中碳源和氮源的利用有关,外源添加100μmol/L的水杨酸,可提高细胞内蔗糖酶、蔗糖合成酶和硝酸还原酶活性,增加胞内蔗糖、葡萄糖、果糖、NO₃^-和NH₄⁺含量。

分别建立了细胞生长、多糖合成和碳源消耗的动力学模型,实验验证表明所建立的模型能够较好地反映水杨酸调控霍山石斛类原球茎悬浮培养的动力学过程。

影响霍山石斛原球茎生长的若干因素
张艳;钱忠英;陈军峰;开国银;周根余
【期刊名称】《上海师范大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2009(038)004
【摘要】以霍山石斛原球茎为材料,研究了培养天数、不同生理状态、接种密度以及迭层培养方法对其生长的影响.实验结果表明:颜色翠绿形态饱满、组织致密的原球茎增殖和增重迅速;相同生理状态的原球茎在15～45d内增殖和增重最为显著;8个原球茎为一组的接种方式有利于原球茎的增殖和增重;迭层培养对上层原球茎增殖和增重具有明显效果.
【总页数】6页(P408-413)
【作者】张艳;钱忠英;陈军峰;开国银;周根余
【作者单位】上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.33
【相关文献】
1.稀土元素铈对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响 [J], 王凯;潘利华;查学强;罗建平
2.香蕉提取物对霍山石斛原球茎形成和小苗生长的影响 [J], 张艳;钱忠英;陈军峰;开国银;周根余
3.精胺对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响 [J], 魏明;姜绍通;罗建平
4.^(60)Co γ辐照对霍山石斛悬浮培养原球茎生长和生物碱积累的影响 [J], 洪萨丽;金青;黄蓓;蔡永萍;林毅
5.植酸对霍山石斛类原球茎悬浮培养细胞生长和多糖合成的影响 [J], 魏明;姜绍通;罗建平
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培养基渗透压对铁皮石斛原球茎生长和多糖含量的影响苏江【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2016(031)005【摘要】以无菌铁皮石斛原球茎为材料，于培养液中分别添加不同浓度的甘露醇以调节其渗透压，研究不同甘露醇浓度对铁皮石斛原球茎生长及多糖含量的影响。

结果表明：添加低浓度的甘露醇可促进铁皮石斛原球茎生长及增加多糖含量，添加高浓度的甘露醇能明显抑制铁皮石斛原球茎生长及降低多糖含量。

在不同的培养时间，当甘露醇质量浓度为0～20 g・L －1时，原球茎活力、生长量、多糖含量和多糖产量总体呈上升趋势，当甘露醇质量浓度超过20g・L －1，原球茎活力、生长量、多糖含量和多糖产量呈下降趋势。

培养后35d，各处理的原球茎干重、多糖含量和多糖产量均达最大值，且甘露醇质量浓度为20 g・L －1的处理其干重、多糖含量和多糖产量均高于对照和其他处理，分别为17.30 g・L －1、361.52 m g・g －1和6255.38 m g・L －1。

【总页数】5页(P475-479)【作者】苏江【作者单位】河池学院化学与生物工程学院，广西宜州 546300【正文语种】中文【中图分类】S682.2【相关文献】1.真菌诱导子对铁皮石斛原球茎多糖含量的影响 [J], 杨慧;陈晓梅;郭顺星2.四种添加物对铁皮石斛原球茎生长及多糖含量的影响 [J], 包英华;潘超美;白音3.印度梨形孢对铁皮石斛种子萌发和原球茎生长的影响 [J], 许凤来;朱志炎;何勇;田志宏4.印度梨形孢对铁皮石斛种子萌发和原球茎生长的影响 [J], 许凤来;朱志炎;何勇;田志宏5.悬浮培养的铁皮石斛原球茎在固体培养基上生长和分化的研究 [J], 侯丕勇;郭顺星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。