甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂微板法)

甘油三酯测定试剂盒(酶法)技术要求原理以甘油三酯测定试剂盒（酶法）技术要求原理为标题，本文将详细介绍该原理及相关内容。

甘油三酯是一种存在于人体血液中的脂质，它是由甘油和三个脂肪酸分子组成。

甘油三酯的浓度可以作为评估人体脂肪代谢和心血管疾病风险的重要指标。

因此，准确测定血液中甘油三酯浓度对于临床诊断和疾病预防具有重要意义。

甘油三酯测定试剂盒（酶法）是一种常用的测定甘油三酯浓度的方法。

其原理基于酶催化反应，通过测定反应产物的浓度来间接测定甘油三酯浓度。

该试剂盒通常包含以下试剂：甘油酯酶、甘油酸酐、过氧化氢和染色剂。

其中，甘油酯酶是关键的酶催化剂，可以催化甘油三酯的水解反应。

甘油酯酶将甘油三酯水解为甘油和游离脂肪酸。

随后，过氧化氢被添加到反应体系中，与甘油反应生成过氧化甘油。

过氧化甘油与染色剂发生反应，形成有色化合物。

最后，根据产生的有色物质的浓度，可以间接测定甘油三酯的浓度。

具体操作步骤如下：首先，将待测血液样本加入试剂盒中，与试剂充分混合。

然后，将反应混合物孵育在适当的温度下，使甘油酯酶催化反应发生。

随后，加入过氧化氢，与产生的甘油反应生成过氧化甘油。

最后，加入染色剂，形成有色化合物。

通过比色法或分光光度法测定反应产物的光吸光度，可以计算出甘油三酯的浓度。

甘油三酯测定试剂盒（酶法）具有准确、敏感、简便等优点。

它可以在较短的时间内完成测定，且使用方便。

同时，该方法对于测定较低浓度的甘油三酯样本也具有较高的灵敏度。

然而，需要注意的是，甘油三酯测定试剂盒（酶法）也存在一些限制。

首先，由于该方法是间接测定，因此可能受到其他物质的干扰，导致结果的误差。

其次，某些特殊样本，如高脂血症患者的血液样本，可能需要进行预处理才能得到准确的测定结果。

因此，在使用该试剂盒进行甘油三酯测定时，需要仔细阅读并按照说明书进行操作，以确保结果的准确性和可靠性。

甘油三酯测定试剂盒（酶法）是一种广泛应用于临床和科研领域的方法，用于测定血液中甘油三酯的浓度。

sdgsdgs成都分行东风浩荡合法规和法规和土壤突然图腾甘油三酯（TG）试剂盒说明书（酶法）【产品名称】中文名称：甘油三酯（TG）试剂盒（酶法）英文名称：TR IGL Y CE RI DES RE AGE N T K I T（Enzymatic method）【包装规格】60ml/盒（R-1：45ml×1, R-2：15ml×1），280ml/盒（R-1：70ml×3，R-2：70ml×1），300ml/盒（R-1：45ml×5，R-2：15ml×5），360ml/盒（R-1：90ml×3，R-2：90ml×1），400ml/盒(R-1：60ml×5，R-2：20ml×5)，2000ml/盒（R-1：500ml×3，R-2：500ml×1）。

【预期用途】本试剂用于测定人血清或血浆中甘油三酯（TG）的含量。

【检验原理】在第一反应中采用抗坏血酸氧化酶（AOD）消除抗坏血酸的影响；采用甘油激酶消去游离甘油的影响。

在第二反应中，通过甘油三酯生成的甘油与过氧化物酶（POD）作用生成醌系色素，由此可测得甘油三酯的含量。

第一反应：抗坏血酸氧化酶2抗坏血酸+ O2──────────→2脱氢抗坏血酸+ 2H2O甘油激酶游离甘油+ ATP ──────────→甘油-3-磷酸+ ADP甘油-3-磷酸氧化酶甘油-3-磷酸+ O2 ──────────→磷酸二羟丙酮+ H2O2（用过氧化氢酶消去）第二反应：脂蛋白酯酶甘油三酯+ H2O ──────────→甘油+ 脂肪酸甘油激酶甘油+ ATP ──────────→甘油-3-磷酸+ ADP甘油-3-磷酸氧化酶甘油-3-磷酸+ O2 ──────────→磷酸二羟丙酮+ H2O2P0D2H2O2 + 4-AA+TOOS + H3+O ─────→醌系色素+ 5H2OTOOS: N-Ethyl-N-（2-hydroxy-3-solfopropyl）-3-methylaniline, sodiumsalt, dihydrate 【主要组成成份】━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━试剂成份含量─────────────────────────────────R-1 抗坏血酸氧化酶≥3000U/L甘油激酶≥1000U/L甘油-3-磷酸氧化酶≥8000U/LTOOS 1.17mmol/L过氧化氢酶≥3000U/L─────────────────────────────────R-2 脂蛋白酯酶≥2000U/LPOD ≥20000U/L4-AA 2.5mmol/L━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━脂类校准血清人血清详见标示量，━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━*1. 不同批号试剂盒中的各组份，经检验符合产品性能指标的，可以互换。

1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司甘油三酯（TG ）测定试剂盒（氧化酶法）测定方法 2、适用范围：适用于人血清甘油三酯（TG ）的测定。

3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。

3.2 试剂储存：未开启的试剂盒在2℃～8℃保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定21天。

试剂不可冰冻 3.3 仪器：迈瑞BS-2000M 全自动生化分析仪. 4、操作程序4.1方法原理在脂蛋白酯酶（Lipase ）、甘油激酶（GK ）和甘油-3-磷酸氧化酶（GPO ）等一系列酶的作用下，甘油三酯被催化产生过氧化氢。

过氧化氢在过氧化物酶（POD ）的作用下，与4-氨基安替比林（4-AAP ）和酚类缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得甘油三酯的含量。

甘油三酯 + 3H 2O甘油 + 脂肪酸甘油 + ATP甘油-3-磷酸 + ADP甘油-3-磷酸 + O 2二羟丙酮磷酸 + H 2O 2H 2O 2+ 4-氨基安替比林+ 4-氯酚醌亚胺+ HCl +2H 2O4.2样本要求GKPODLipasesGPO新鲜血清样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。

血清样本于2℃～8℃避光保存，可稳定3天。

在-20℃可稳定4个月。

4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。

4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。

当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。

4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。

谈维生素Ｃ对甘油三酯（ＴＧ）测定结果的干扰近年来，在临床生物化学检验中，酶比色测定法的应用越来越广泛。

许多项目的测定都使用工具酶参与的反应，常用的是利用葡萄糖氧化酶、胆固醇氧化酶、甘油氧化酶等测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯等的酶法Trinder反应，即H2O2偶联过氧化物酶反应。

是利用较高特异性的氧化酶产生过氧化氢(H2O2)，再加氧化发色剂比色。

该酶法的单试剂一步终点法，操作简便、快速准确、微量、试剂稳定，在半自动生化分析仪上的使用更是普及。

但在实际工作中，却存在一些物质对该反应的干扰，给测定结果带来一定的分析误差。

本文作者对一定浓度的维生素C对氧化酶(GPO)法测定甘油三酯(TG)做干扰试验，讨论维生素C对Trinder反应的干扰。

1 测定原理[1]2 试剂与仪器2.1血清标本收集浓度约为2.30mmol/L无肝炎病毒、无溶血、无脂浊的人的TG，混合血清。

2.2 维生素C标准液(5.68mmol/L)取规格为5ml：1g的维生素C(分子量为176.13)注射液1支，加蒸馏水稀释至1000ml。

2.3 其他试剂上海玉兰生物技术有限公司生产的甘油三酯GPO-PAP法单试剂检测试剂盒。

2.4 仪器赛诺迈德(中国)SBA-730半自动生化分析仪。

3 试验方法[2]3.1 样品制备①基础样品血清0.9ml+蒸馏水0.1ml；②干扰样品I 血清0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.05ml＋蒸馏水0.05ml；③干扰样品Ⅱ血清0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.06ml+蒸馏水0.04 ml；④干扰样品Ⅲ血清0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.07 ml+蒸馏水0.03 ml；⑤干扰样品Ⅳ：血清0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.08 ml+蒸馏水0.02ml；⑥干扰样品Ⅴ血清0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.09ml+蒸馏水0.01 ml；⑦干扰样品Ⅵ血清0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.1ml；⑧维生素C样品蒸馏水0.9ml+5.68mmol/L，维生素C，标准液0.1ml。

医疗器械产品技术要求编号：
甘油三酯（T G）测定试剂（盒）（G PO-P AP法）
2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2净含量
试剂装量的应按表 2，液体装量的最大允许负偏差应为 5%。

表 2 装量要求
2.3试剂空白吸光度
试剂(盒)以纯化水为空白在37 ℃±1 ℃ 、546 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度应≤0.10 。

2.4分析灵敏度
试剂(盒)测试 1.22 mmol/L 的被测物时，吸光度变化（ΔA）应在0.200～0.300 的范围内。

2.5线性范围
试剂（盒）在(0～10) mmol/L范围内的分析性能应符合如下要求：
a)线性相关系数r≥0.990；
b)(0～1) mmol/L 范围内，线性绝对偏差应在±0.1 mmol/L 以内；(1～10) mmol/L 范围内，
线性相对偏差应在±10% 以内。

2.6测量精密度
2.6.1重复性
用校准品重复测试所得结果的变异系数CV≤4%。

2.6.2批间差
试剂（盒）批间相对偏差R≤6%。

2.7准确度
校准品的相对偏差 B 在±10% 以内。

2.8分析特异性
血红蛋白浓度在250 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在6 mg/dL 内、胆红素浓度在40 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10% 以内。

甘油三酯测定试剂盒（GPO-PAP法）适用范围：用于体外定量测定人血清中甘油三酯的含量。

1.1包装规格
a) 单一试剂：4×40mL；
b) 单一试剂：5×60mL；
c) 单一试剂：2×100mL。

1.2 主要组成成分
2.1试剂装量
应不低于试剂瓶标示装量外观。

2.2外观
单一试剂：无色或浅粉红色澄清液体。

2.3 试剂空白吸光度
在520nm处测定试剂空白吸光度，应＜0.2。

2.4分析灵敏度
测定TG含量为1mmol/L样本时，其△A应为0.2420～0.2958。

2.5线性范围
2.5.1 在[1.13，9.04] mmol/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990；
2.5.2 测试浓度在[1.13，3] mmol/L范围内线性绝对偏差不超过±0.5mmol/L；测试浓度在(3，9.04] mmol/L范围内线性相对偏差应不超过±10%。

2.6 测量精密度
2.6.1 重复性：用两个水平质控血清重复测试其变异系数（CV）应不超过5％。

2.6.2 批间差：抽取3个不同批号的试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。

2.7 准确度
以国家标准物质为检测样本时，测定结果相对偏差不超过±10％。

2.8 稳定性
取在2℃～8℃条件下贮存达到18个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

南京建成甘油三酯试剂盒说明书南京建成生物工程研究所的甘油三酯(TG)测试盒说明书，货号为A110-1 GPO-PAP，酶法单试剂型。

以下是试剂组成及配制、测定原理、样本处理和结果计算等方面的详细说明：一、试剂组成及配制1.甘油三酯(TG)测试盒（96T）试剂组成：•酶剂：甘油三酯脂肪酶（GPO）•校准品：甘油三酯标准品•终止液：磷酸二氢钾/磷酸氢二钾缓冲液（PBS）•洗涤液：磷酸缓冲液（PBS）试剂配制：a. 将GPO酶液及甘油三酯标准品放入测试盒中，并加入适量的PBS洗涤液。

b. 在酶标板上准确加入待测样本，并尽量避免产生气泡。

c. 加入终止液，轻轻振荡混匀。

d. 将测试盒放入冰箱中保存。

2.洗涤液试剂组成：•磷酸缓冲液（PBS）试剂配制：a. 将适量的PBS加入到洗涤液中，并加入适量的水使其稀释至所需浓度。

b. 将洗涤液加入到测试盒中，并尽量避免产生气泡。

二、测定原理GPO酶能催化甘油三酯水解为游离脂肪酸和甘油，从而使测试盒读数。

测试盒上的反应窗口会在酶催化反应的过程中逐渐变为无色，当反应窗口变为绿色时，表示酶的催化反应已经完全进行，此时可以读取测试盒的读数。

三、样本处理1.采集空腹血清样本a. 在采集空腹血清前至少8-10小时内，避免摄入高脂食物和饮料。

b. 在采集血清前，将采血针清洗干净并尽可能地减少采血针与皮肤接触的时间。

c. 用采血针刺破手指，将适量的血液滴入测试盒的反应窗口中。

d. 将采集的血清保存于-20 ℃冰箱中，以备后续实验使用。

2.采集空腹静脉血样本a. 在采集空腹静脉血前至少8-10小时内，避免摄入高脂食物和饮料。

b. 在采集血样前，将采血针清洗干净并尽可能地减少采血针与皮肤接触的时间。

c. 用采血针刺破手指，使用真空采血管采集血液，并尽可能地保持血液在3-5秒内滴入测试盒的反应窗口中。

d. 将采集的血清保存于-20 ℃冰箱中，以备后续实验使用。

3.样本处理注意事项a. 采集的样本应尽快进行实验，如果不能马上进行实验，应将样本保存于-20 ℃冰箱中。

甘油三酯试剂盒-TG（酶法）简介本试剂盒采用GPO-PAP法配制，用于体外测定血清中甘油三酯含量。

适用于半/全自动生化分析仪。

测定原理甘油三酯+ 脂肪酸甘油+ 甘油磷酸 + ADP甘油磷酸磷酸二羟基丙酮+ H2O2PODH2O2 + 4-AAP +对氯苯酚红色醌化物+ H2O生成的醌类化合物颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比，分别测定标准管和样本管的吸光度值，计算甘油三酯的含量。

测定步骤1.将酶剂用适量的缓冲液溶解,配成工作液,稳定10分钟后使用。

2.测定参数：波长：500nm；光径：10mm；温度：37℃。

3.测定方法：加入物(mL) 空白管 标准管 样本管 标准液 —— 0.010 ——样 本 —— —— 0.010工作液 1.0 1.0 1.0混匀,37℃保温5分钟,以空白管调零,测定各管吸光度值。

4.上机操作步骤:样本量/水 Sample volume μL 3工作液 reagent μL 30037℃保温5分钟,工作液＋蒸馏水调零,测定光吸收值A。

主波长 Main wavelength nm 500副波长 Sub wavelength nm 660反应类型 Reaction type 终点法反应方向 Reaction direction 升反应(+)样本︰试剂=1︰100,根据需要可按比例调节加样量。

5.计算: A样甘油三酯含量 = × 标准液浓度 标准液浓度200mg/dL(2.26mmol/L)A标性能指标1.缓冲液pH：7.60±0.102.试剂空白吸光度≤0.1003.瓶间差：CV≤3%24.线性：0～9mmol/L范围内，r＞0.995。

5.准确度：相对偏差≤3%6.精密度：CV≤3%，批间相对极差≤5%7.稳定性：原装试剂盒在2℃～10℃避光保存，有效期为24个月。

工作液18℃～25℃可稳定24h，2℃～10℃可稳定14天。

血清甘油三酯（TG）测定1.2 原理：用高效的微生物脂蛋白脂肪酶（LPL）使血清中TG水解成甘油与脂肪酸，将生成的甘油用甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油（G-3-P），然后以过氧化物酶（POD）、4-氨基比林（4-AAP）与4-氯酚（三者合称PAP）显色，测定所生成的H2O2，故本法简称为GPO-PAP法，反应式如下：TG + 3H2O 脂肪酶甘油+ 3 RCOOH（脂肪酸）甘油+ ATP 甘油激酶甘油-3-磷酸（G-3-P）+ ADPG-3-P + O2 GPO磷酸二羟丙酮（DAP）+ H2O22H2O2 + 4-AAP + 4-氯酚过氧化物酶苯醌亚胺非那腙+ 4H2O + HCl1.3标本的采集1.3.1受检者的准备：除胆固醇（TC）测定不一定用空腹血外，测定甘油三酯（TG）、脂蛋白与载脂蛋白（apo）时应在禁食（可少量饮水）12小时后抽血。

24小时内不饮酒，以免影响TG水平。

对于体检对象抽血前应有2周左右时间保持平常的饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病、外伤、手术等意外情况。

妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳吼个月查血才能反映基本血脂水平。

注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β-受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压药、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等，在查血以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录用有关药物的情况。

对体检对象及作前瞻性观察者，还应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检查。

1.3.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取座位。

体位影响水分在血管内的外的分布，因此影响血脂水平。

例如站立5分钟可使血脂浓度提高5%，15分钟可提高16%，故在抽血前至少应静坐5分钟。

一般用肘静脉取血，也可以用其他臂静脉。

止血带的使用不可超过1分钟，穿刺成功后应立即松开止血带，然后抽血。