超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺微板法)

超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)简介：超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

Leagene 超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)又称超氧阴离子清除能力检测试剂盒，其检测原理是利用羟胺氧化的方法可以检测生物体系中超氧阴离子自由基(O 2-)，即超氧阴离子自由基(O 2-)与羟胺反应生成NO 2-，在一定范围内颜色深浅与超氧阴离子自由基(O 2-)成正比，根据NO 2-反应的标准曲线将A 530换算成NO 2-浓度，再依据上述关系式即可计算出O 2-浓度。

该试剂盒主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自由基含量或超氧阴离子清除能力。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 实验材料：植物组织(大豆、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等3、 研钵或匀浆器4、 离心管或试管5、 低温离心机6、 恒温箱或水浴锅7、 比色杯8、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：编号 名称TO1123 50T Storage试剂(A): NO 2-标准(1mM) 1ml RT 试剂(B): O 2- Lysis buffer 125ml RT 试剂(C): 羟胺溶液30ml RT 试剂(D): 氨基苯磺酸显色液 30ml 4℃ 避光 试剂(E): 萘胺显色液 30ml4℃ 避光 使用说明书1份1、准备样品：①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取预冷的O2-Lysis buffer后冰浴条件下匀浆或研磨，4℃离心，上清液即为超氧阴离子自由基提取液，4℃保存备用。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，4℃保存，用于超氧阴离子自由基的检测。

2022年南京工业大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、G－细菌的鞭毛是由基体以及______和______3部分构成，在基体上着生______、______、______和______4个与鞭毛旋转有关的环。

2、艾滋病全名为______，其病原体称为______，英文简写为______。

3、发酵的产能机制都是______，因而产能效率极低。

4、实验室常用的有机氮源有______和______等，无机氮源有______和______等。

为节约成本，工厂中常用______等作为有机氮源。

5、在真核微生物细胞质内存在着沉降系数为______S的核糖体，它是由______S和______S两个小亚基组成，而其线粒体和叶绿体内则存在着______S核糖体，它是由______S和______S两个小亚基组成。

6、在微生物促进人类医疗保健事业发展过程中，曾发生过“六大战役”，即______，______，______，______，______，______。

7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。

其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。

8、植物根际微生物对植物有害的方面有______和______等。

9、目前国际上有代表性的菌种保藏机构美国的ATCC仅使用两种保藏方法，即______和______。

10、T细胞在识别抗原的同时也识别自身______。

二、判断题11、固氮菌等的孢囊，除其形成方式与芽孢不同外，其功能（休眠、抗热性）与芽孢相同。

（）12、在分离化能无机自养细菌时，必须使用以硅胶作凝固剂的无机培养基平板。

（）13、在肽聚糖的合成过程中，各个肽聚糖单体间的交联仅靠转肽作用即可完成。

（）14、腺病毒是一种呈二十面体对称的DNA病毒，在其包膜上，长有12个刺突。

（）15、游动孢子只存在于鞭毛菌和子囊菌的无性世代中。

第1页，共2页超氧阴离子清除能力检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC1410规格:50T/48S 产品内容:提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。

临用前加8mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂五：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

产品说明:超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

AP-TEMED系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成NO 2－，NO 2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。

自备实验用品及仪器:天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、1ml玻璃比色皿、恒温水浴锅。

操作步骤:一、样品处理1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。

2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。

3.培养液或其它液体：直接检测。

4.粉剂药物可配制成相同浓度，比如1mg/mL。

二、测定操作空白管对照管测定管试剂一（μL）404040试剂二（μL）160160H2O（μL）260100充分混匀，25℃反应1min样品（μL）100试剂三（μL）200200200充分混匀，37℃反应30min试剂四（μL）200200200试剂五（μL）200200200充分混匀，37℃显色20min，于1ml玻璃比色皿，以空白管调零，在530nm处测定对照管和测定管的吸光值，分别记为A对照管和A测定管。

2022年湖南环境生物职业技术学院生物制药技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、微生物学为现代生命科学提供的独特研究方法有：① ______，② ______，③ ______，④ ______，⑤ ______，⑥ ______，⑦ ______，⑧ ______和⑨ ______等。

2、G－细菌细胞外膜的构成成分为______、______、______和______。

3、微生物的自发突变一般有三个主要原因：① ______，② ______，③ ______。

4、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。

其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。

5、霉菌的气生菌丝可分化出各种类型的子实体，如无性的______、______、______等；有性的______、______和______等。

6、病毒可分真病毒与亚病毒两大类。

从组成的化学本质来划分，真病毒至少含有______和______两种成分；亚病毒中的______只含______， ______只含______或______，而______则只含______。

7、在工业防霉剂的筛选中，经常要用8种霉菌作为模式试验菌种，如______、______、______和______等。

8、氮源物质主要有______、______、______、______等，常用的速效氮源如______、______，有利于______；迟效氮源如______、______，它有利于______。

9、分支代谢途径中酶活性的反馈抑制可以有不同的方式，常见的方式是______、______、______、______等。

10、细菌性病原体会通过产生______、______和______等物质危害宿主；病毒会通过______、______和______等方式危害宿主；而真菌则会通过______、______、______和______等方式危害其宿主。

2022年塔里木大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、G－细菌细胞外膜的构成成分为______、______、______和______。

2、T4噬菌体由______、______和______三部分组成。

3、微生物的4种糖酵解途径中，______是存在于大多数生物体内的一条主流代谢途径；______是存在于某些缺乏完整EMP途径的微生物中的一种替代途径，为微生物所特有；______是产生4碳、5碳等中间产物，为生物合成提供多种前体物质的途径。

4、霉菌水浸片的制片程序是______，______，______，______， ______，______。

5、酵母菌中，有性生殖可以产生的孢子有______孢子或______孢子。

6、微生物在现代生物分类系统中分别属于______界、______界、______界和______界。

7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。

其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。

8、由霉腐微生物引起的材料劣变有______、______、______和______ 等多种。

9、当前对原核受体细胞来说，在遗传工程中的最合适外源基因载体是 ______和______，对真核细胞受体来说，在动物方面主要有______，植物方面则主要是______。

10、IgG在木瓜蛋白酶的作用下，可产生2个相同的______（符号为______）和1个______（符号为______）。

二、判断题11、细菌的芽孢只能由杆菌产生，细菌一旦形成芽孢后，不具有运动和繁殖的能力。

（）12、用白糖配制培养基能满足微生物对一般微量元素的需要。

（）13、无氧呼吸是专性厌氧菌所特有的一种生物氧化产能方式。

（）14、在病毒分离时，经盲传3代仍无感染症状出现，便可认定没有病毒存在。

2022年同济大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、细菌表面常有毛状附属物，其中用于运动的称为______，帮助细菌附着到物质表面的称为______，在不同菌株间传递遗传物质的称为______。

2、温和噬菌体的存在形式有三种，即______、______和______。

3、呼吸链在传递氢或电子的过程中，通过与______反应相偶联，产生了生物的通用能源______，其形成机制可根据英国学者______的______ 学说来解释。

4、实验室常用的培养细菌的天然培养基为______，培养酵母菌的天然培养基为______，培养放线菌的组合（合成）培养基为______等，培养真菌的组合培养基为______等。

5、细胞骨架是由______、______和______三种蛋白质纤维构成的细胞支架，具有支持、运输和运动等功能。

6、在微生物促进人类医疗保健事业发展过程中，曾发生过“六大战役”，即______，______，______，______，______，______。

7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。

其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。

8、微生物间和微生物与它种生物间的主要关系有五种，即______、______、______、______、______。

9、某些核糖体蛋白mRNA的部分二级结构和rRNA的部分二级结构相似，当rRNA短缺时，多余的核糖体蛋白质与本身的mRNA结合，从而阻断本身的翻译，同时也阻断同一多顺反子的mRNA下游其他核糖体蛋白质编码区的翻译，使______的合成和______的合成几乎同时停止。

10、在免疫学反应中，抗原抗体反应的一般规律是______、______、______、______、______。

二、判断题11、核糖核蛋白体是核酸和蛋白质合成的场所。

抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒说明书修订日期：2015.07.13 Cat number：KGT012Store at4℃for6monthsFor Research Use Only（科研专用）一、测定原理模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统，产生超氧阴离子自由基O2—，加入电子传递物质及gress 氏显色剂，使反应体系呈现紫红色，可用分光光度计测其吸光度，当被测样本中含有O2。

抑制剂时，则比色时测定管的吸光度低于对照管的吸光度，而如果被测样本中含有产生O2。

物质时，则比色时测定管的吸光度高于对照管的吸光度，通过以维生素C做标准，可计算出被检物品对O2。

的影响能力。

二、试剂盒组份组份KGT01250assaysBuffer A 5.0mLBuffer B 5.0mLBuffer C 5.0mLBuffer D350μLBuffer D稀释液 5.0mL试剂E1支试剂F1支Vc标准品4支注意事项1．Buffer A室温较低时会有部分结晶析出，溶解后加蒸馏水稀释10倍至1×Buffer A50ml。

2．Buffer D用前用Buffer D稀释液按1︰14稀释至1×Buffer D（不可冷冻，4℃可保存2个月）。

3．试剂E配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。

4．试剂F配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。

5．显色剂配制：试剂E︰试剂F︰冰乙酸＝3︰3︰2的体积比配制，4℃避光保存（冰乙酸自备）。

6．Vc标准贮备液配制：将一支Vc标准品加蒸馏水定容至5ml（Vc标准配制后当天内使用）Vc标准品工作液（0.15mg/ml）配制：取1ml贮备液加4ml蒸馏水，5倍稀释现配现用。

Vc标准品配制后见光极易分解，配制的0.15mg/ml Vc标准品工作液需30分钟内检测。

三、操作步骤试剂测定管对照管标准管1×Buffer A （mL ） 1.01.0 1.0蒸馏水（mL ）0.050.15mg/ml Vc 标准品（mL ）0.05样品（ml ）0.05Buffer B （mL ）0.10.10.1Buffer C （mL ）0.10.10.11×Buffer D （mL ）0.10.10.1用涡旋混匀器充分混匀，置37水浴40分钟显色剂（ml ）2.02.02.010min 后倒入1cm 光径比色杯中，蒸馏水调零，波长550nm 处比色。

2022年陆军防化学院生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、在蓝细菌类囊体内存在的光合色素是______和______，在蓝细菌类囊体外表面有藻胆蛋白体，其中有______、______、______三种光合色素。

2、最大的病毒是直径为200nm的______；最小病毒之一是______，其直径仅为28nm。

3、微生物在糖酵解生成丙酮酸基础上进行的其他种类的发酵有丁二醇发酵、混合酸发酵、______发酵和______发酵等。

丁二醇发酵的主要产物是______，______发酵的主要产物是乳酸、乙酸、甲酸、乙醇。

4、配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是______。

一般而言，当C:N≥5:1时，有利于______；当C:N＜5:1时有利于______。

5、蕈菌典型肉质子实体的构造包括______、______、______、______ 和______五个主要部分。

6、微生物在能源供应方面与人类关系密切，例如______、______、______、______和______等。

7、1971年，McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。

其根据是厌氧菌缺乏______酶，一般也缺乏______酶，因此易受______等的毒害。

8、植物根际微生物对植物有害的方面有______和______等。

9、DNA分子中一种嘧啶被另一种嘌呤取代称为______。

10、补体主要有______细胞和______细胞产生，其化学成分为______，它被______激活后具补充抗体的作用。

二、判断题11、细菌的鞭毛与真菌的鞭毛在结构上差别很大，但两者在运动方式上是相同的。

（）12、病毒、类病毒和朊病毒因其是活细胞内寄生物，不能在人工培养基上培养，故属于难养菌。

（）13、在化能自养细菌中，呼吸链的递氢作用是不可逆的。

（）14、一步生长曲线是用于描述温和噬菌体生长规律的一种实验曲线。