苹果酸脱氢酶检测试剂盒(OAA微板法)
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苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)简介:苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成苹果酸的关键酶之一,催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化,参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用,广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上,为三羧酸循环中的一种酶,由于酶的来源不同,其某些性质也不尽相同。
MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。
Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)检测原理是在弱碱条件下,以草酰乙酸(OAA)作为显色底物,OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal),每催化1分子OAA消耗1分子NADH,通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、研钵或匀浆器2、离心管或试管3、低温离心机4、比色杯5、分光光度计操作步骤(仅供参考):编号名称TE046350TStorage试剂(A): MDH Lysis buffer 250ml 4℃避光试剂(B): PMSF 1ml -20℃试剂(C): MDH Assay buffer100ml RT试剂(D): NADH 1支-20℃试剂(E): ddH2O 10ml RT使用说明书1份1、配制MDH Lysis buffer工作液:取出MDH Lysis buffer和PMSF,恢复至室温,MDHLysis buffer:PMSF按一定比例混合,混匀,即配即用,不易久置,否则白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)简介:苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase,MDH)是合成苹果酸的关键酶之一,催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化,参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用,广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上,为三羧酸循环中的一种酶,由于酶的来源不同,其某些性质也不尽相同。
MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。
Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA比色法)检测原理是在弱碱条件下,以草酰乙酸(OAA)作为显色底物,OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal),每催化1分子OAA消耗1分子NADH,通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、研钵或匀浆器2、离心管或试管3、低温离心机4、比色杯5、分光光度计操作步骤(仅供参考):编号名称TE046350TStorage试剂(A):MDH Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):PMSF1ml-20℃试剂(C):MDH Assay buffer100ml RT试剂(D):NADH1支-20℃试剂(E):ddH2O10ml RT使用说明书1份1、配制MDH Lysis buffer工作液:取出MDH Lysis buffer和PMSF,恢复至室温,MDHLysis buffer:PMSF按一定比例混合,混匀,即配即用,不易久置,否则白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
脱氢抗坏血酸(DHA)检测试剂盒(菲咯啉微板法)简介:维生素C(Vitamin C)又称L-抗坏血酸(AsA),是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。
在生物体内,维生素C是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。
Vc有L-型和D-型两种异构体,只有L-型的才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。
Leagene脱氢抗坏血酸(DHA)检测试剂盒(菲咯啉微板法)检测原理是利用还原剂将脱氢抗坏血酸还原成还原型抗坏血酸,在酸性条件下,维生素C(抗坏血酸)把三价铁离子还原成亚铁离子,后者与菲咯啉形成稳定的红色螯合物,以酶标仪检测吸光度,在一定浓度范围吸光度与抗坏血酸含量呈线性关系,从中减去样品中原有的还原型抗坏血酸含量,即得脱氢抗坏血酸含量,其优点是:1、反应稳定,不易褪色;2、操作简便;3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰,因此专一性好;4、灵敏度高。
本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、蒸馏水2、无水乙醇3、研钵或匀浆器4、离心管或试管5、比色杯6、分光光度计编号名称TC2040100TStorage试剂(A): 抗坏血酸标准(250μg/ml) 2ml4℃避光试剂(B): 组织匀浆液(5×) 500ml RT 避光试剂(C): DHA还原液200ml -20℃试剂(D): NaOH溶液100ml RT试剂(E): 酸性缓冲液3ml RT试剂(F): AsA Assay buffer 3ml RT 避光试剂(G): 菲咯啉显色液6ml 4℃避光使用说明书1份操作步骤(仅供参考):1、稀释组织匀浆液:组织匀浆液:蒸馏水稀释,获得组织匀浆液,待用。
2、制备AsA提取液:取待测材料如青菜、水果、松针等,清洗擦干,准确称量,加入研磨器内。
加入少量组织匀浆液,研磨碎,留取上清,再次用组织匀浆液研磨,最后一并倒入离心管,补充组织匀浆液充分混匀后,离心,留取上清液即为AsA提取液。
天冬氨酸氨基转移酶AST紫外苹果酸脱氢酶法作业指导书1、前言试验名称:天冬氨酸氨基转移酶测定,英文名称:AST,方法:紫外苹果酸脱氢酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室,目的是指导工作人员正确的在科华KHB450全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的天冬氨酸氨基转移酶活力,以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中天冬氨酸氨基转移酶的活力。
天冬氨酸氨基转移酶广泛分布于人体,而在心、肝、骨骼肌、肾和细胞内有较高浓度,这些组织的损伤或疾病,如心肌梗塞、肝坏死、肝硬化和肌营养不良等症均会引起血清或血浆中AST水平的升高。
2、测定原理本试验测定原理以IFCC推荐的方法为基础,实验分两步进行测定原理如下:a、样本中的AST催化L-天冬氨酸和α-氧代戊二酸氨基转换,生成草酰乙酸和L-谷氨酸。
b、在NADH和苹果酸脱氢酶(MDH)存在下,草酰乙酸被还原为L-苹果酸,同时NADH被氧化为NAD+,从而合340nm处的光吸收值下降,通过监测340nm处光吸收值下降的速率,可以测定ALT的活力。
c、样本中内源性丙柄酸的干扰可由试剂中LDH在初始孵育期内快速完全地消除,不会干扰测定。
L-天冬氨酸+α-氧代戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸MDH L-乳酸+ NAD+草酰乙酸+NADH+H+3、试剂试剂生产商:上海科华公司。
剂型:液体双试剂。
包装量:R1:4*40ml R2:4*20ml注册号:沪食药监械(准)字2010第2400060号。
生产许可证号:沪药管械生产许20030916号。
基本成份:试剂1:L-天冬氨酸300mmol/l乳酸脱氢酶﹥1365u/lNADH0.27mmol/lTris缓冲液88mmol/lEDTA 5.0mmol/l试剂2:苹果酸脱氢酶(MDH)﹥1365u/lTris缓冲液88mmol/lα-氧代戊二酸36mmol/lEDTA 5.0mmol/l储存条件和有效期:试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
苹果酸脱氢酶(MDH)提取液简介:苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase,MDH)是合成苹果酸的关键酶之一,催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化,参与众多生理代谢途径如TCA 循环C 4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH 在植物的生长发育中发挥着重要作用,广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上,为三羧酸循环中的一种酶,由于酶的来源不同,其某些性质也不尽相同。
MDH 在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
Leagene 苹果酸脱氢酶(MDH)提取液主要用于裂解植物组织,提取样品中的苹果酸脱氢酶。
该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、蒸馏水2、离心管或试管3、匀浆器或研钵4、低温离心机操作步骤(仅供参考):1、取植物组织清洗干净,切碎。
2、配制苹果酸脱氢酶提取工作液:取出苹果酸脱氢酶提取液和PMSF,恢复至室温,混合,混匀,即配即用,不易久置,否则蛋白酶抑制剂PMSF 的效率会有所下降。
3、加入预冷的苹果酸脱氢酶提取工作液,冰浴情况下充分匀浆或研磨。
4、离心,留取上清液即为苹果酸脱氢酶粗提液,保存,用于苹果酸脱氢酶的检测或其他用途。
计算:组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100%编号名称CS0431Storage 试剂(A):苹果酸脱氢酶提取液500ml4℃避光试剂(B):PMSF1ml 4℃使用说明书1份注意事项:1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20-80℃。
2、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
3、所测样本的值高于标准曲线的上限,应用苹果酸脱氢酶提取工作液稀释样品后重新测定。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:编号名称CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)CS0001ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032Masson三色染色液DF0135多聚甲醛溶液(4%PFA)NR0001DEPC处理水(0.1%)PS0013RIPA裂解液(强)TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。
脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC1245规格:100T/96S产品内容:提取液:液体110mL×1瓶,室温保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,室温保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
临用前加入5mL蒸馏水充分溶解。
标准品:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
临用前加入5.743mL蒸馏水充分溶解;吸取0.1mL上述溶液,加入0.9mL蒸馏水,混匀,即为0.1μmol/mL DHA。
产品说明:AsA作为植物细胞一个重要生理指标,其AsA的含量、氧化还原状态(AsA/DHA比率)及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。
DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物体内,与抗坏血酸共同组成氧化还原系统,具有电子受体的作用。
DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。
自备仪器和用品:低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样品中DHA提取:称取约0.1g样品,加提取液1mL,冰上充分研磨,16000g4℃离心20min,取上清液待测。
二、DHA测定操作:1.紫外分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到265nm,蒸馏水调零。
2.试剂一在25℃水浴锅中预热30min以上。
3.标准管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL标准液、160μL预热的试剂一和20μL试剂二,迅速混匀后于265nm比色,记录10s和130s的吸光值,分别为A1,A2,△A标准管=A2-A1。
4.测定管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL上清液、160μL预热的试剂一和20μL试剂二,迅速混匀后于265nm比色,记录10s和130s的吸光值,分别为A3,A4,△A测定管=A4-A3。
酶法检测试剂盒举例5个酶法检测试剂盒是一种用于测定特定物质或分子在生物样本中的含量或活性的工具。
它们通常由一系列试剂和材料组成,可以通过酶反应来测量目标物质的浓度或活性。
以下是五个常见的酶法检测试剂盒的举例:1. 葡萄糖酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒:G6PD是一种关键的酶,参与细胞内葡萄糖代谢过程中NADPH的产生。
G6PD缺乏会导致溶血性贫血等疾病。
G6PD检测试剂盒可用于测定血液样本中G6PD活性水平,从而帮助诊断和监测相关疾病。
2. 脯氨酸氧化酶(PAO)检测试剂盒:PAO是一种参与氨基酸代谢的重要酶,可以将脯氨酸转化为丙酮酸和亚硝胺。
PAO检测试剂盒可用于测定尿液中PAO活性水平,从而评估肾功能和相关代谢紊乱。
3. 乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒:LDH是一种广泛存在于各种组织和细胞中的酶,参与乳酸代谢过程。
LDH检测试剂盒可用于测定血液、尿液或其他体液中LDH活性水平,从而帮助诊断和监测心肌梗死、肝病、恶性肿瘤等疾病。
4. 超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒:SOD是一种抗氧化酶,能够清除细胞内的超氧阴离子自由基。
SOD 检测试剂盒可用于测定血液或组织样本中SOD活性水平,从而评估抗氧化能力和相关疾病的风险。
5. 淀粉酶(AMY)检测试剂盒:AMY是一种参与淀粉消化的消化酶,能够将淀粉分解为葡萄糖。
AMY检测试剂盒可用于测定食物样本或消化系统分泌物中AMY活性水平,从而评估消化功能和相关消化系统疾病。
以上是五个常见的酶法检测试剂盒的举例。
这些测试剂盒在医学、生物学研究和临床诊断中起着重要的作用,帮助我们了解生物样本中特定物质或分子的含量或活性水平,从而为疾病诊断、治疗和监测提供有力支持。
小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,组织匀浆及相关液体样本中苹果酸脱氢酶(MDH)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)水平。
用纯化的小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入苹果酸脱氢酶(MDH),再与HRP标记的苹果酸脱氢酶(MDH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的苹果酸脱氢酶(MDH)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:135 U/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA微板法)
简介:
苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成苹果酸的关键酶之一,催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化,参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用,广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上,为三羧酸循环中的一种酶,由于酶的来源不同,其某些性质也不尽相同。
MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。
根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。
Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA微板法)检测原理是在弱碱条件下,以草酰乙酸(OAA)作为显色底物,OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal),每催化1分子OAA消耗1分子NADH,通过分光光度比色法(酶标仪)测定处吸光度的变化,计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、研钵或匀浆器
2、离心管或试管
3、低温离心机
4、96孔板
5、酶标仪
操作步骤(仅供参考):编号
名称TE0461
100T
Storage
试剂(A): MDH Lysis buffer 250ml 4℃避光试剂(B): PMSF 1ml -20℃
试剂(C): MDH Assay buffer20ml RT
试剂(D): NADH 1支-20℃
试剂(E): ddH2O 10ml RT
使用说明书1份
1、配制MDH Lysis buffer工作液:取出MDH Lysis buffer和PMSF,恢复至室温,MDH
Lysis buffer:PMSF按一定的比例混合,混匀,即配即用,不易久置,否则蛋白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
2、准备样品:
①植物样品:取植物组织(根系)清洗干净,切碎,植物组织:MDH Lysis buffer工作液按一定比例,加入预冷的MDH Lysis buffer工作液,冰浴情况下充分匀浆或研磨。
,离心,留取上清液即为苹果酸脱氢酶粗提液。
短期4℃保存待用,长期-20℃冻存待用。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,-20℃冻存,用于苹果酸脱氢酶的检测。
③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用MDH Lysis buffer工作液进行适当匀浆,离心,取上清液,-20℃冻存,用于苹果酸脱氢酶的检测。
④高活性样品:如果样品中含有较高活性的苹果酸脱氢酶,可以使用MDH Lysis buffer 工作液进行恰当的稀释。
3、配制NADH工作液:取出NADH,恢复至室温,准确溶解于ddH2O,混匀,4℃预冷
备用。
-20℃保存1W有效。
注意:该NADH工作液为过量。
4、MDH加样:按照下表设置对照孔(备选,一般可以不设对照孔)、测定孔,溶液应按照
顺序依次加入,并注意避免产生气泡。
如果样品中的苹果酸脱氢酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行孔。
加入物(μl) 对照孔(备选) 测定孔
MDH Lysis buffer工作液 5 —
待测样品— 5
MDH Assay buffer 180 180
5、MDH测定:加入NADH工作液,立即以酶标仪测定吸光度(记为A0)并同时计时,每
隔30s测定一次处吸光度,其中至1min时吸光度记为A1,记录其变化。
Leagene建议加入NADH工作液后立即检测,加样时间越短越好,其反应基本在1-3min内,其后反应趋于平缓。
注意:该反应系统是利用速率变化,求得相应OD的变化,进而推算出NADH的消耗速率,再进一步推算出苹果酸脱氢酶的量。
因此加入NADH工作液立即计时很重要,每次检测指标不宜过多,否则有可能由于操作时间有差异进而导致结果偏差。
计算:
苹果酸脱氢酶活性:每分钟NADH氧化吸光度变化0.01为1个酶活力单位。
组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100%
液体样品MDH(U/ml·min)=ΔA/(0.01×t×0.005)
式中:ΔA=A0−A1
0.01=每分钟NADH氧化吸光度变化0.01为1个酶活力单位
t=1=检测时间(min)
0.005=待测样品体积(ml)
组织样品MDH(U/g·min)=ΔA/(0.01×t×W)
式中:ΔA=A0−A1
0.01=每分钟NADH氧化吸光度变化0.01为1个酶活力单位
t=1=检测时间(min)
W=待测样品鲜重或干重(g)
注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20-80℃。
2、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
3、如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑分光光度计的最小检
测体积。
4、该反应系统是利用速率变化,求得相应OD的变化,进而推算出NADH的消耗速率,
再进一步推算出苹果酸脱氢酶的量。
因此加入NADH工作液立即计时很重要,每
次检测指标不宜过多,否则有可能由于操作时间有差异进而导致结果偏差。
5、酶液的稀释度应尽量控制在A340/min下降范围在0.1-0.2之间,以便减少实验误差。
6、ΔA为反应最初1min内340nm处吸光度变化的绝对量,如有必要可减去对照液最初
1min的吸光度变化量。
7、所测样本的浓度过高,应用MDH Lysis buffer工作液稀释样品后重新测定。
有效期:6个月有效。
相关:
编号名称
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。