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1.中药药理与临床2007标题：大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立（本实验选用高脂饲料诱导大鼠高血脂、脂肪肝，为预防脂肪肝药物的筛选提供实验模型。
）目的：建立大鼠高血脂及脂肪肝模型。
方法：SD大鼠随机分为2组，分别接受正常饲料、高脂饲料，连续3周，测定大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)、极低密度脂蛋白(VLDL—C)。
1．1动物：SD大鼠，SPF级，20只，雌雄各半，体重180—220g, 实验动物质量合格证明号：2006A1．2高脂饲料：高脂饲料由猪油(12％自制)、胆固醇(2％)、丙硫氧嘧啶(0.2％)、3号胆盐(0.5％)、普通混合饲料粉(85.3％)组成，将以上各物先人工充分混匀，再经搅拌，压成圆条状颗粒，真空包装后，经”co辐照消毒备用，由南方医科大学实验动物中心制作。
1．3方法：将大鼠随机分为正常对照组(10只)、高脂模型组(10只)，雌雄各半。
正常对照组投喂普通颗粒饲料，高脂模型组以高脂饲料替代普通饲料投喂，平均每天每只约20克左右。
动物造模3周，实验结束前1天晚上禁食，不禁水，次日上午麻醉后，腹主动脉采血，分离血清，送南方医科大学附属南方医院医学检验中心检测血脂五项。
取肝脏，称肝湿重，计算肝指数，并在肝右叶离边缘1cm处，横切一块肝组织用10％中性福尔马林固定，常规脱水，HE染色。
讨论：本文用高脂饲料成功地复制了大鼠高脂血症及脂肪肝模型，严重的肝细胞的变性可导致部分动物出现不同程度的肝细胞坏死。
高脂模型组大鼠肝脏体积增大，重量增加，质软切面油腻为奶黄色。
高脂模型组大鼠血清TG、TC、LDL—c、VLD含量都非常显著升高。
对于HDL—c所占Tc的百分率，正常对照组非常显著高于高脂模型组，虽然高脂模型组HDL —C含量明显高于正常对照组，但由于正常对照组TC含量远远低于模型对照组，故HDL —C含量必然低于模型对照组。
改良后高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝病模型的建立李玲;孙学华;李曼;周振华;高月求【期刊名称】《山西中医学院学报》【年(卷),期】2013(014)003【摘要】目的:探讨非酒精性脂肪性肝病动物模型的一种快速的建立方法.方法:将30只雄性大鼠随机分为正常组和模型组,分别喂养普通基础饲料和改良后高脂饲料10 w.比较两组大鼠血清ALT、AST、DBIL、HDL-C、LDL-C、TC和肝组织匀浆GGT、TG、GSH含量的变化及肝脏组织学变化.结果:与正常组比较,第10周时模型组大鼠血清ALT、AST、DBIL、HDL-C、LDL-C、TC、TC/HDL-C均明显升高(P<0.05);肝组织匀浆GGT、TG含量升高,GSH含量降低(P<0.05).正常组大鼠肝组织未见明显脂肪变性及炎症,模型组大鼠在小泡性脂肪变性的基础上伴随淋巴细胞浸润和灶状坏死.结论:改良后高脂饲料可加快非酒精性脂肪性肝病的造模进程,值得推广.【总页数】3页(P8-10)【作者】李玲;孙学华;李曼;周振华;高月求【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院肝炎科,上海,201203;上海中医药大学附属曙光医院肝炎科,上海,201203;上海中医药大学附属曙光医院肝炎科,上海,201203;上海中医药大学附属曙光医院肝炎科,上海,201203;上海中医药大学附属曙光医院肝炎科,上海,201203【正文语种】中文【中图分类】R575【相关文献】1.免疫损伤、应激和高脂饮食多因素所致高脂血症血瘀动物模型的建立与机理研究[J], 刘剑刚;张红霞;史大卓;董国菊2.高脂饮食诱导大鼠胰岛素抵抗非酒精性脂肪性肝病模型 [J], 潘敏;宋育林;许建明;甘惠中3.高脂诱导的非酒精性脂肪性肝病伴胰岛素抵抗大鼠模型建立方法 [J], 李国伟;张贵锋4.高脂高糖饮食结合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型的改良 [J], 蒋朝晖;吕玉晶;赵芳;朱丽英;杨国珍;潘卫5.肝脏脂肪酸在高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝病模型中的代谢 [J], 陆金来;陈金联;陈明祥;洪静;陈维雄;朱金水;陈尼维因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立杨威;徐闯;陈媛媛;郑家三;张洪友;夏成【摘要】利用不同高脂饲料配方建立大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,为非酒精性脂肪肝的研究提供参考依据.大鼠饲喂单纯高脂饲料以及分别含有去氧胆酸、丙基硫氧嘧啶的高脂高胆固醇饲料,经6周的实验周期.结果显示,单纯饲喂高脂饲料大鼠(H6)呈现出显著的体重增加以及肝脏脂肪浸润.饲喂添加去氧胆酸盐的高脂饲料后大鼠肝脏胆固醇水平显著降低,但血液丙氨酸转氨酶(ALT)和丙氨酸转氨酶(AST)水平显著高于H6大鼠.丙基硫氧嘧啶介导甲状腺机能减退脂肪肝模型(HP6)组大鼠呈现前期体重生长缓慢后期的体重减轻且高的血清甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、ALT.四环素刺激下的甲状腺机能减退大鼠(HPT6)呈现严重肝脏病变以及低下肝脏脂肪蓄积和高水平的血清ALT.表明HP6大鼠存在进行性非酒精性脂肪肝的发生.而在四环素刺激下,甲状腺机能减退大鼠存在进行性肝纤维化以及肝脏疾病晚期的可能.为非酒精性脂肪肝研究提供了有力的基础数据.【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》【年(卷),期】2017(029)003【总页数】5页(P15-19)【关键词】高脂饮食;非酒精性脂肪肝;丙硫氧嘧啶;去氧胆酸盐;盐酸四环素【作者】杨威;徐闯;陈媛媛;郑家三;张洪友;夏成【作者单位】黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319;黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319【正文语种】中文【中图分类】S856.4近年来，人类脂肪肝的发病呈不断上升趋势，对人类的健康和生活质量造成严重威胁。
非酒精性脂肪肝病作为最常见的肝脏疾病之一，根据其严重程度不同可从简单的肝脏脂肪沉积到非酒精性脂肪肝炎，最后可发展为肝脏纤维以及肝硬化和肝细胞癌[1-2]。
大鼠非酒精性脂肪性肝病的SWE评估及其影响因素摘要：随着肥胖及高脂饮食等因素的日益加剧，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）已成为全球最常见的代谢性疾病之一。
本研究采用切比雪夫超声弹性成像（SWE）方法，对大鼠NAFLD进行评估，并探讨其影响因素。
结果表明，NAFLD大鼠肝脏弹性值显著低于正常对照组，不同NAFLD分级组之间也存在显著差异，SWE值与NAFLD病程呈正相关。
此外，脂代谢、肝功能指标及炎症反应指标对NAFLD大鼠SWE值也有显著影响。
本研究表明SWE技术可作为一种非侵入性、易操作的评估NAFLD大鼠肝脏纤维化的方法，并提示肝脏功能、脂代谢及炎症反应等因素在NAFLD发展过程中具有重要作用。
关键词：非酒精性脂肪性肝病，切比雪夫超声弹性成像，大鼠，病程，影响因素Introduction非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）指的是在无过量饮酒的情况下，肝脏脂肪含量增加的一类代谢性疾病。
其发病率已经超过20%，是全球最常见的代谢性疾病之一。
国内外研究表明，NAFLD与肥胖、代谢综合征、2型糖尿病等疾病密切相关，且其病理进程复杂多样，包括脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）以及肝硬化等。
Materials and methods实验对象：本研究采用160只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，分别随机分组为健康对照组和NAFLD模型组。
NAFLD 模型组采用高脂饮食喂养+二甲基亚砜（DMN）注射建立NAFLD大鼠模型。
肝脏SWE值测量：SWE使用GE Vivid-i 系列彩超装置，选择肝门水平面进行肝脏SWE值测量。
实验期结束后，检测大鼠所处的NAFLD病程及脂代谢、肝功能及炎症反应指标等。
ResultsNAFLD大鼠肝脏弹性值显著低于正常对照组，SWE值与NAFLD病程呈正相关。
不同NAFLD分级组之间也存在显著差异。
此外，脂代谢、肝功能指标及炎症反应指标对NAFLD大鼠SWE值也有显著影响。
#论著#大鼠非酒精性脂肪肝模型构建的方法探讨杨晓红1,徐富翠2,余鸿2,梅欣明2(1.泸州医学院形态学实验中心; 2.泸州医学院组胚教研室,四川泸州 646000)作者简介:杨晓红(1968),女,汉族,四川省泸州市人,助理实验师。
=摘要> 目的 建立大鼠非酒精性脂肪肝动物模型,为深入探讨非酒精性脂肪肝的发病机制及药物治疗提供实验参考。
方法 取Wista r 大鼠60只,随机分为对照组15只(常规饮食喂养),模型组45只(高脂、高胆固醇饮食组)喂养,12周后处死动物取出肝脏,经H 2E 染色、组织化学与免疫组织化学染色观察造模情况。
结果 模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,eNOS 免疫组化显示肝中央静脉和门管区内皮细胞呈强阳性。
结论 高脂、高胆固醇饮食是诱导非酒精性脂肪肝形成的重要诱因,降低其摄入是有效预防该疾病的重要措施,此外eNOS 在病变早期起到减轻肝损伤的作用。
=关键词> 非酒精性脂肪肝;高脂饮食;高胆固醇=中图分类号> R 57515 =文献标识码> AEstablishment the Model of Rat Nonalcoholic Fatty LiverY a ng Xiao 2hong 1,Xu F u 2cui 2,Y u H ong 2,Mei X in 2ming2(1.E xper emental center of Morp hology ,Luz hou Medical College,Luzhou 646000;2.Dep ar tmentof H istology and E mbr yology ,Luzhou Medical Colleg e,Luzhou 646000)=Abstract > Objective T o establish the model of rat nonalcoholic fatty liver(NAFL)and observed the originating mechanism and drug therapy of this disease.Methods 60Male SD rats were ran 2domly divided into two gr oups:control group(n=15),fed chow diet;and model group(n=45),these rats were fed high fat diet.A fter 12weeks,all rats were sacrificed,and their livers were taken for histology observation.The results were detected by basic histology,cell chemistry and immuno 2histochemistry.Results H igh fat and cholesterol diet can significantly increase nonalcoholic fatty liver ,and increas the expression of eNOS.Conclusion H igh fat and cholesterol diet were an impor 2tant factor inducing nonalcoholic fatty liver,eN OS may play an important r ole in preventing the damages of liver cell in N AFL.=KeyWor ds > nonalcoholic fatty liver;high fat;high cholesterol diet 脂肪肝是指由于多种诱因导致肝脏脂肪代谢障碍最终导致脂肪在肝内储积,且当组织脂肪含量超过肝重量的5%以上,或在组织上有1/3以上的肝细胞发生脂肪化为特征的临床综合症。
高脂饮食致大鼠脂肪肝实验模型的建立随着人们膳食结构的改变，加上缺乏运动等原因，脂肪肝的发病率逐渐增高。
目前，西方发达国家中的脂肪肝发病率为10%～24%，而我国脂肪肝发病率也成为病毒性肝炎之后的第二大肝病，上海和广州两地，脂肪肝的发病率就高达20%。
如果不及时治疗，将会进一步恶化，导致肝纤维化甚至肝硬化，严重影响人们的身体健康，给家庭和社会带来很大的负担。
本实验旨在探讨脂肪肝模型的复制方法，为进一步研究脂肪肝发病机理提供一种较好的动物模型。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 高脂饲料配方胆固醇（批号：F***-*****）、脱氧胆酸钠（批号：F***-*****）、吐温80（批号：F***-*****）、1-2丙二醇（批号：F***-*****）均为分析纯，够自西格玛奥德里奇上海贸易有限公司；丙赛优（批号：0300，上海朝晖药业有限公司）；猪油自制。
1.1.2 脂肪乳的配制按12.%吐温80、10%1-2丙二醇、0.%丙基硫氧嘧啶、1%猪油、1%脱氧胆酸钠、%胆固醇的比例配制。
先将猪油30g 放在200ml的烧杯中，放在磁力搅拌器上加热至40℃水浴中融化，加入10g胆固醇、1g研细的丙基硫氧嘧啶，充分搅匀，加入适量吐温不断搅拌直至乳化现象产生，制成油相。
另一烧瓶中加入30ml蒸馏水和1-2丙二醇20ml，加热至60℃，然后加入胆盐2g溶解，制成水相。
将两个烧杯液体充分混匀即可成为稳定的脂肪乳剂，使用时37℃水浴融。
1.1.3 普通饲料玉米面3.4%，白面29.%，麸皮12.%，豆粉12%，鱼粉8%，酵母粉2%。
1.1.4 试剂盒G、C测定试剂盒（北京福瑞生物工程公司）；AS、AL考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
1. 2 方法雄性清洁级Wistar 大鼠28只（SCXK吉-*****-0004），体重（200±10）g。
随机抽取8只作为对照组，用生理盐水灌胃每日1次，3 d后腹腔静脉抽血行血脂四项及肝功能检测、肝重测定以及肝脏病理检查。
高脂饮食诱导肥胖与肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立目的：利用高脂、高能饲料建立肥胖与肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模
型。
方法：140只雄性SD大鼠，体质量100±10g。
随机抽取20只作为正常对照组，喂食普通饲料；剩余120只用于模型建立，喂食高脂、高能饲料。
结果：O-N与OR-N组大鼠在喂养期间体重差距逐渐增大，至8w末，O-N组体重显著高于OR-N组及正常对照组（P <0.01）；两组ALT、TG均显著升高（P <0.05），而O-N组大鼠血清TC、TG显著高于OR-N组（P <0.05）；两组肝重量、脂肪重量及脂体比、肝指数均显著升高，O-N组肝重量、脂肪重量及体重均显著高于OR-N组（P <0.05，0.01），但肝指数、脂体比间未见显著差异；O-N组、OR-N 组肝细胞内弥散大量脂肪空泡。
结论：成功用高脂、高能饲料建立肥胖与肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模型，与人类发病特征相似，为肥胖与非酒精性脂肪的研究提供更有针对性的动物模型。
标签：肥胖抵抗；非酒精性脂肪肝；大鼠；动物模型
近年来，我国非酒精性脂肪肝（NAFL）的发病率呈上升趋势，特别是由于饮食结构的不合理引起的肥胖与NAFL的相关性，已成为人们关注的热点。
但在非酒精性脂肪肝动物模型建立的研究中发现，同一品系、同一批大鼠饲用相同的高脂饲料，其中部分发生肥胖，部分不发生肥胖，前者被称为肥胖傾向（obesity prone，OP），而后者被称为肥胖抵抗（obesity resistance，OR）[1]，具体机制尚不十分清楚。
为深入研究NAFLD的发病机制及肥胖与NAFLD的关系，建立符合人类自然发病规律的动物模型极为重要。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物：清洁级雄性SD大鼠140只，体重（100g±10g），由第四军医大学实验动物中心提供。
1.1.2 饲料主要成分：（1）高脂高能饲料：基础饲料78.9%、胆固醇1%、胆酸盐0.1%、蛋黄粉10%、猪油10%，能量密度为20.75 kJ/g；（2）基础饲料为实验动物标准饲料，能量密度为14.56 kJ/g。
饲料均购自于第四军医大学实验动物中心。
1.2 实验方法
1.2.1 动物分组与饲养：实验前大鼠称重，随机抽取20只，作为正常对照组，剩余120只用于制备肥胖与肥胖抵抗型大鼠NAFL模型。
两组分别喂食普通饲料及高脂、高能饲料，连续8w后，按体重分为肥胖（O-N组）及肥胖抵抗组（OR-N 组）。
8w内动态观察大鼠的一般情况、体质量变化，8w末每组随机取8只，禁食12小时后眼球后静脉丛取血，制备血清待测，结束后处死，取出肾周、睾周
脂肪垫称重，肝脏称重并观察病理形态变化。
1.2.2 肥胖与肥胖抵抗判定标准：体重大于正常对照组平均体重+1.96倍标准差的为O-N组，体重小于正常对照组平均体重+1.0倍标准差的为OR-N组[1，2]。
1.2.3 观察指标及测定方法：（1）一般情况：实验期间，每周称大鼠体质量1次，并观察毛色、食欲、行动、粪便、对外界刺激的反应情况；（2）病理组织学检查：肉眼观察大鼠肝脏大体变化，并作病理切片HE染色，光镜下观察大鼠肝脏脂肪变性情况。
（3）血清生化指标：8周末每组随机取8只大鼠，禁食12 h 后眼球后静脉丛取血，制备血清。
采用日立7600-020型全自动生化分析仪检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、总胆固醇（TC）、总三酰甘油（TG）（4）生理学指标观察：肝指数（liver index）=肝脏重量（g）/体重（g）×100%；脂体比（%）=[睾周脂肪量（g）+肾周脂肪量（g）]/体重（g）×100%。
1.3 统计分析
所有数据以计量资料以表示，应用SPSS 11.0软件包进行统计分析。
组间差异采用方差分析进行处理。
P＜0.05差异有显著性，P＜0.01差异非常显著。
2 结果
2.1 一般特征
与正常组大鼠比较，造模组大鼠饮水和尿量均明显增多，有些大鼠大便稀软，排泄物异味重，体毛光亮度减退，毛色偏黄，活动减少。
2.2 大鼠体质量变化
每周称大鼠体质量，动态观察其体质量间的改变情况（表1）。
挑出O-N组体质量增加最多的20只和OR-N组体质量增加最少的20只，作为观察对象，发现不同时间点的体质量间的差别具有统计学意义（P＜0.01）；多样本均数的两两比较，结果显示从第5周开始，O-N组体质量明显升高，第6周开始O-N组与OR-N组和正常对照组之间均有显著性差异（P＜0.05），OR-N组与正常对照组间无显著性差异。
2.4 对体脂含量及脂体比的影响
肉眼观察，8w处死的正常对照组大鼠肝脏颜色呈暗红；O-N组和OR-N组肝脏体积增大，包膜稍紧张，边缘圆顿，局部呈奶黄色，有油腻感；光镜下，正常组大鼠肝脏组织结构完整，基本无异常情况，O-N组和OR-N组可见弥散性肝细胞空泡变性，未见炎性变、坏死灶及肝纤维化，肝细胞肿胀明显，胞质内充满大量脂肪空泡。
根据《非酒精性脂肪肝诊断标准》，确定非酒精性脂肪肝模型建立成功。
3 讨论
本实验采用了高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠模型的方法，8周后大鼠血清生化检查大鼠TG、ALT水平明显高于正常组，肝指数升高，病理形态上形成脂肪肝，表明成功复制实验性大鼠非酒精性脂肪肝模型。
但在实验期间，每周称大鼠体质量，动态观察其体质量间的改变情况，发现从第5周开始，O-N组体质量明显升高，第6周开始O-N组与OR-N组和正常对照组之间均有显著性差异，OR-N组与正常对照组间无显著性差异。
提示同样喂食高脂、高能饲料，大鼠的体重出现明显分化。
在实验中发现26只SD大鼠喂高脂饲料18周后，其中有12只成为DIO-R 大鼠[4]。
本实验在非酒精性脂肪肝模型造模过程中也发现了这一现象，造模成功后，O-N组大鼠为67只（55.8%），OR-N组为24只（20%）。
在以往的研究中，往往忽略了肥胖抵抗的现象，或将体重过低的动物放弃，本实验将肥胖与肥胖抵抗发生的规律与非酒精性脂肪的建立相结合，利用其模型建立中均需高能、高脂饲料诱导的特性，成功地将非酒精性脂肪肝大鼠模型，在体重的差异上进行分类，从而建立肥胖与肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝大鼠模型。
该模型建立的成功，将有助于深入研究肥胖与非酒精性脂肪肝发生的关系及调控机制，并使研究更加有针对性，为寻找有效地防治措施提供实验依据。
参考文献
[1] Levin BE，Triscari J，Sullivan AC.Altered sympathetic activity during development of diet-induced obesity in rats[J].Am J Physio1，1983，244（3）：R347-355.
[2] 王舒然，麻微微，赵丹，王国秀，蔺威鸣. 高脂饮食诱导肥胖与肥胖抵抗动物模型建立[J]. 中国公共卫生，2007，7（23）：774-775.
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[4]王从容，谭健，杨锡让.高脂饲料诱发大鼠肥胖模型的建立及间接推测体脂法[J].北京体育大学学报，1994，17（3）：20-23.。
