原始记录 026 粪大肠菌群检验原始记录表

一乳糖发酵实验1取10ml水样接种到10ml二倍乳糖蛋白胨培养液中取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中混匀后吸取1ml即01ml水样注入到10ml乳糖蛋白胨培养液中每一稀释度接种5管
总大肠菌群检验数据原始记录
委托书编号：委托单位：
检测项目：总大肠菌群检测依据：GB/T 5750.12-2006 2.1多管发酵法
样品名称：样品数量：
样品编号：样品状态：
收样日期：检测日期：
环境温度：环境湿度：
操作方法：
一、乳糖发酵实验
1、取10ml水样接种到10ml二倍乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml (即0.1ml水样）注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水，需经常检验或每天检验一次的，可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。
培养温度
培养时间
二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
EMB
36±1°C
24h±2h
观察结果
序号
样品编号
乳糖发酵
复发酵
结果报告(MPN/100mL)
10ml
1ml
0.1ml
10ml
1ml
0.1ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
操作人：复核人：二、分来自培养：经培养24h后，将产酸产气的发酵管，分别接种于伊红美蓝平板上，36±1°C恒温培养8h-24h，观察形态，挑取数个可疑菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。

煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
大肠菌落数CFU/ml(g)
检测人：
检验日期： 年 月 日
验讫日期： 年 月 日
微生物检验原始记录
检测项目： □大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
使用仪器设备及实验环境
生化培养箱、压力蒸汽灭菌器
依据
GB4789.3
检测项目
培养基
100
10-1
10-2
10-3
10-4
空白
平板计数
结晶紫中性红胆盐琼脂
证实试验
选择的平板可疑菌落数
稀释倍数
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
煌绿乳糖胆盐肉汤、

食品中大肠菌群平板计数检验原始记录表
样品名称
样品编号
检验项目
大肠菌群平板计数法
检验日期
检验地点
□BSL-2实验室
□洁实验净室
检验依据
判定依据
检验仪器
□生化培养箱□均质器□菌落计数仪
□生物安全柜□超净台□电子天平
□恒温振荡器□冰 箱□冰 箱
检验试剂
VRBA琼脂、BGLB肉汤、磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水等。
h
稀释度
空白
2
25g(mL)样品+225mL稀释液均质（或原液直接检验）；
平板A1
平板A2
3
10倍系列稀释；
结果
平板B1
4
选2-3个适宜稀释度样品匀液；每梯度接种VRBA平板2个；
平板B2
结果
5
36±1℃，18-24h培养，计数典型和可疑菌落；
平板C1
平板C2
6
挑10个可疑菌落接种于BGLB肉汤管36±1℃，24-48h；
结果
平板D1
7
若BGLB肉汤管产气则阳性；
平板D2
结果
8
按比例记录结果，报告。
平板E1
平板E2
温度（℃）
相对湿度（％RH）
结果
证实实验比例
结果
报告
检验员： 审Βιβλιοθήκη 员：样品制备□固体和半固体样品：无菌称取25g，置于盛有225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌灭菌袋内，进行均质处理。
□液体样品：吸取25mL于样品于225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水中，混匀。
检验程序
大肠菌群计数[ CFU/g (mL ) ]
1
实验采集抽样方案来自GB4789.1；

2、检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，0.1，0.01ml甚至0.1，0.01，0.001ml，每个稀释度接种5管，每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后，取lml接种，每递增稀释一次，换用1支lml灭菌刻度吸管。
3、将接种管置36±l°C培养箱内，培养24h±2h，如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。
二、分离培养：
经培养24h后，将产酸产气的发酵管，分别接种于伊红美蓝平板上，36±1°C恒温培养8h-24h，观察形态，挑取数个可疑菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。
三、证实试验：
挑取可疑管接种乳糖蛋白胨培养液中，置于36±1°C愠温箱中培养24h ±2h，有产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在。
培养基
19
20
操作人：复核人：
培养温度
培养时间
二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
EMB
36±1°C
24h±2h
观察结果
序号
样品编号
乳糖发酵
复发酵
结果报告(MPN/100mL)
10ml
1ml
0.1ml
10ml
1ml
0.1ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9பைடு நூலகம்
10
11
12
13
14
15
16
17
18
总大肠菌群检验数据原始记录
委托书编号：委托单位：
检测项目：总大肠菌群检测依据：GB/T 5750.12-2006 2.1多管发酵法

发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
审核：
年月
日
编号： 样品名称：
检验依据：GB/T4789.3-2016 培养开始时间： 年 月 培养结束时间： 年 月
稀பைடு நூலகம்度
1
稀释度
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
2
稀释度
3
稀释度
4
稀释度
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1
2
3
5
1
2
3
1
2
3
检验员：
大肠菌群检测原始记录
批次：
日时
日时
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
恒温时间： h 恒温温度：36℃±1℃
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验

有限公司
年 月 日颁布
- -J177 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定原始记录 第 页共 页
项目编号
温度（℃）
湿度(%RH)
分析方法 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法 HJ 755-2015[检出限：20MPN/L]
仪器名称
检测仪器
恒温培养箱 恒温培养箱
压力蒸汽灭菌器
仪器型号
仪器编号
备注
葡萄球菌，粪大肠菌群阳性对照为大肠埃希氏菌，阴性对照为产气肠杆菌。
[＋阳性 －阴性]
检测：
复核：
日期：
年月日
测定样品信息[样品种类：废水 地表水 其他
]
样品编号 样品接种量 Q
ห้องสมุดไป่ตู้样品
样品包装 密封良好 其他
总大肠菌群 阳性对照 阴性对照
粪大肠菌群 样品 阳性对照 阴性对照
空白 对照
mL×5
mL×5
mL×5
MPN 值 M -
(MPN/100mL)
报告值 C -
(MPN/L)
空白对照为纯水，总大肠菌群阳性对照为大肠埃希氏菌，阴性对照为金黄色
公式：
式中：
C 100 M Q
C：水样总大肠菌群或粪大肠菌群
浓度（MPN/L）；
M：查 MPN 表得到的 MPN 值
(MPN/100mL)；
Q：实际水样最大接种量(mL)；
100：为 10×10mL,其中,10 将 MPN 值
的单位 MPN/100mL 转换为 MPN/L,
10mL 为 MPN 最大接种量。

四、根据证实为大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群的最可能数。
初发酵（月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤，）支）
产气管数（支）
复发酵(煌绿乳糖胆盐
肉汤，
37℃，,48h)
产气管数（支）
10-1
10-2
10-3
检验结果
（MPN/100g）
检验人：复核人：
大肠菌群检验检验原始记录
样品名称
明胶
样品编号
样品状态
生产日期
检验依据
GB4789.3-2010
检验日期
大肠菌群检验过程：
1、称取样品25g样品放入盛有225ml灭菌的生理盐水中，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。
2、初发酵试验：大肠菌群每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内产气情况。如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。
三、复发酵试验：（大肠菌群的测定）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。

大肠菌群检验原始记录（MPN法，2016版）
检验单位
xxxx公司 检验室
检验员
张xx
检验日期
2022-xx-xx至2022-xx-xx
环境条件
温度xx℃，相对湿度（RH）xx%
检验依据
GB4789.2-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数》第一法
检验编号
20220606xxx
样品名称
xxxx
样品批次
2022xxxx
仪器设备及耗材：
天平：(xxxx)洁净工作台: (xxxx)培养箱:ຫໍສະໝຸດ (xxxx)培养基及试剂：
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）：xxxx配制日期2022/xx/xx
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）：xxxx配制日期2022/xx/xx
磷酸盐缓冲液：xxxx配制日期2022/xx/xx
-
阴性
报告人
报告日期
复核人
复核日期
将以上 LST置于 36.0 ±1℃，培养24h±2h（2022/xx/xxxx时~2022/xx/xxxx时），观察导气管内是否有气泡产生。如产气，进行证实实验，如未产气继续培养至48h±2h（2022/xx/xxxx时~2022/xx/xxxx时），产气，进行复发酵实验，不产气报告结果为阴性。
4.证实试验（接种BGLB）
实验过程：
1.样品处理和稀释：
1.1如需要，使用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸将样品调整pH在6.5~7.5之间。
1.2 制备样品稀释液
无菌操作，称取/吸取 25g（mL）样品，加入到 225mL 无菌磷酸盐缓冲液中均质（混匀），制成 1:10 样品匀液。吸取1:10样品匀液1mL，沿试管壁注入盛有9mL无菌磷酸盐缓冲液的试管中， 涡旋混匀，制成1:100的样品匀液。根据对样品污染情况的估计，按上述操作将样品稀释至所需浓度。

微生物检验原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程：
培养基
100
10—1
10—2
10—3
10—4
空白
cfu/ml（g）
平板计数琼脂培养基
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
微生物检验原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称样品编号样品状态和来自性生产单位型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程：
1、配制200mL平板计数琼脂培养基于250mL三角烧瓶中，配制0.85%的生理盐水300mL,分别吸取9mL生理盐水置于2个试管中，将三角瓶、试管加塞棉塞，用报纸包好。
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
MPN/ml（g）
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
主检：检验日期：年月日验讫日期：年月日
6、选择样品匀液10-1、10-2、10-3，分别吸取1ml加入无菌平皿内，分别吸取1mL稀释液（无菌生理盐水）加入平皿内做空白。
7、将15-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养就倾注平板内，并转动平皿，使其混合均匀，待琼脂凝固后将平皿翻转。
8、将平皿于36±1℃的生化培养箱内培养48h±2h,计数。
培养基
100
10—1

从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管内，36℃±1℃培养24-48h，观察产气情况
。凡是BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
操作依据
GB4789.3-2010
稀释倍数
a-10倍
b-100倍
c灭菌生理盐水对照
/6.1
VRBA平板
操作依据 GB4789.3-2010
检验日期：
2016 年 月 日
采样依据 GB4789.12010/4.1、 4.2.1二级 采样方案 (n、c、m值 5、0、0)
10的均匀稀释液，编号a 灭菌生理盐水，编号c做
、b2、c1。向上述5个平 ，依次置于36℃±1℃培
养24-48h，观察产气情况
操作依据 B4789.3-2010
/6.1 操作依据 B4789.3-2010
/8.2 操作依据 B4789.3-2010
/8.3
实试验及观察结果 依据
B4789.3-2010 /8.4
肠菌群数的计算 据GB4789.3-2010
/8.5 数据修约依据 789.来自-2010/7.2报告依据 B4789.3-2010
/8.5
培养基）
年月日
。用灭菌吸管取1mla，加入9ml灭菌生理盐水中，混合均匀做成1:100的均匀稀释液，编号b。取1ml灭菌生理盐水，编号c做
为空白对照。
从a、b、c液中，分别前后2次，各吸取1ml移液到2个灭菌平皿中，平皿编号分别为a1、a2、b1、b2、c1。向上述5个平
皿中分别注入凉至46℃的VRBA15ml，混匀待VRBA凝固后，再加3mlVRBA覆盖平板表层，翻转平板后，依次置于36℃±1℃培 养箱中，培养20h。