原始记录 026 粪大肠菌群检验原始记录表
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食品大肠菌群检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:大肠菌群检测依据:GB4789.3-2016(第二法)平板计数法,按菌落总数测定方法制备l00、10-1、10-2、10-3、10-4……稀释液。
选择2-3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种2个无菌平板,每皿1ml,同时取1ml生理盐水加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的VRBA倾注平皿,小心旋转平皿混合均匀,待琼脂凝固再加3-4mlVRBA覆盖,36±1℃培养18-24h,观察,可疑菌落分别移种BGLB肉汤管中,进行证实实验,36±1℃培养24-48h,观察,产气者记为大肠菌群阳性。
注:○+产气;+有可疑菌落;-不产气或无可疑菌落;电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:食品菌落总数检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:菌落总数检测依据:GB4789.2-2016无菌操作称(量)取样品25g或ml加入225ml的无菌生理盐水中,均质2分钟,做成1℃10样品液。
取1℃10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中,混匀,做成1℃100样品均液。
以上法制备10倍系列稀释样品均液。
选择2-3个适宜稀释度的样品均液,吸取1ml样品均液于无菌平皿内,每个稀释度做2个平皿。
同时,分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿,转动平皿使其混合均计算及结果:菌落总数(CFU/g,ml):电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:。
粪大肠菌群检验记录粪大肠菌群检查实验记录品名批号物料编码规格来源取样日期代表量检验日期报告日期检验编号检验依据1、粪大肠菌群检验记录仪器设备名称:电热恒温培养箱仪器设备型号:DHP-500生理盐水的配制:8.5g氯化钠加1000ml蒸馏水溶解待用(121℃灭菌30min)。
(1)恒温培养箱:36℃±1℃。
(2)冰箱:2℃~5℃。
(3)恒温水浴箱:46℃±1℃。
(4)天平:感量0.1g。
(5)无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
(6)无菌锥形瓶:容量500mL。
(7)无菌培养皿:直径90mm。
(8)pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
1、操作步骤(1)初发酵选择适宜的三个连续稀释度的样品匀液。
每个稀释度接种三管月桂基磺酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管接种1mL(如接种量需要超过1mL,则用双料LST肉汤)。
36℃±1℃培养24h±2h,检查倒管内是否有气泡产生或轻摇试管时是否有密集连续的细小气泡从管底逸出,如未产气则继续培养至48h±2h。
记录在24h和48h内产气的LST肉汤管数。
未产气者为粪大肠菌群阴性;对产气者,则进行复发酵试验。
(2)复发酵用接种环从所有48h±2h内发酵产气的LST肉汤管中分别取培养物1环,移种于已提前预温至45℃的EC肉汤管中。
将所有接种的EC 肉汤管放入于带盖的44.5℃±0.2℃恒温水浴箱内,水浴的水面应高于肉汤培养基液面,培养24h±2h,记录EC肉汤管的产气情况。
产气管为粪大肠菌群阳性,不产气为粪大肠菌群阴性。
(1)取225ml生理盐水于标签为1:10的300ml锥形瓶中,取9ml生理盐水于标签为1:100的50ml锥形瓶中。
(2)LST溶液的配制:取LST7.1g加水100ml(双料),溶解至透明,倒入10ml于3只标有1g的并放有聚气管的试管中; 剩余溶液加一倍水配成单料倒入标有0.01g,0.001ml的6只试管中,每只10ml,并放有聚气管(试管要求180×18mm)。