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弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导的KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶基因结构分析林迪;方颍;张嵘;陈功祥【摘要】目的对携带blaNDM-1和blaKPC-2的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析.方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性;特异性PCR扩增和序列测定分析碳青霉烯酶耐药基因和ESBLs耐药基因、接合试验、耐药基因周围序列分析对菌株的耐药机制进行分子水平研究.结果 4株细菌仅CF-05对阿米卡星敏感,所有菌株对其他检测药物全部耐药;PFGE 结果显示4株细菌不同源;特异性PCR扩增和序列分析显示2株(CF-35、CF-43)同时携带blaNDM-1和blaKPC-2、另2株(CF-05、CF-17)仅携带blaNDM-1,CF-35同时携带blaCTX-M-15;其中3株细菌(CF-05、CF-17、CF-43)接合成功,CF-05、CF-17接合子(CF-05-1和CF-17-1)携带blaNDM-1,CF-43获得2种接合子(CF-43-1携带blaKPC-2、CF-43-2同时携带blaNDM-1和blaKP-2);分析blaNDM-1和blaKPC-2周围序列发现,4株细菌周围序列分别与国内报道携带blaNDM-1和blaKPC-2的肺炎克雷伯菌质粒pNDM-HN380和PK048周围序列高度相似.结论在4株弗劳地枸橼酸杆菌中检测到NDM-1型碳青霉烯酶,其中2株同时携带KPC-2型碳青霉烯酶,blaNDM-1周围序列和blaKPC-2周围序列与国内已知肺炎克雷伯菌相关耐药基因周围序列高度相似.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2016(034)006【总页数】5页(P423-427)【关键词】弗劳地枸橼酸杆菌;碳青霉烯酶;NDM-1;KPC-2【作者】林迪;方颍;张嵘;陈功祥【作者单位】浙江大学医学院附属第二医院检验科,杭州310003;解放军第117医院检验科,杭州310013;浙江工业大学药学院,杭州310014;浙江大学医学院附属第二医院检验科,杭州310003;浙江大学医学院附属第二医院检验科,杭州310003【正文语种】中文【中图分类】R446.5随着碳青霉烯类药物的广泛应用和新型碳青霉烯酶的流行和传播，耐碳青霉烯类药物肠杆菌科细菌不断涌现，给临床抗感染治疗和院内感染控制带来极大挑战。
生物工程学报Chin J Biotech 2010, November 25; 26(11): 1461−1472 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@©2010 CJB, All rights reserved.人类与病原菌的军备竞赛：NDM-1耐药基因与超级细菌孙明伟1,2，郑焙文1,3，高福1,4，朱宝利11 中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 1001012 中国科学技术大学生命科学学院，合肥 2300273 中国科学院研究生院，北京 1000494 中国科学院北京生命科学研究院，北京 100101摘要:在人类历史上，每一次诸如鼠疫和肺结核病等瘟疫的大流行，都曾给人类的生存带来巨大的威胁。
抗生素的应用使人类掌握了抵抗细菌感染的锐利“武器”，但同时病原菌也通过突变和水平基因转移等方式产生了诸多耐药基因，从而获得了应对抗生素杀伤的坚固“盾牌”；于是人类又不断地开发新式抗生素“武器”来破解病原菌的耐药“盾牌”——一场“军备竞赛”愈演愈烈。
近来研究发现，携带编码NDM-1基因的耐药质粒不仅可以在细菌间转移，而且能使所在宿主菌成为可以耐受几乎全部抗生素的超级细菌。
但是，凭借着日益进步的科技和医学，以及科学的用药策略，我们一定可以再次战胜超级细菌。
关键词: NDM-1，超级细菌，军备竞赛，耐药基因Arms racing between human beings and pathogens: NDM-1 and superbugsMingwei Sun1,2, Beiwen Zheng1,3, George F. Gao1,4, and Baoli Zhu11 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China2 College of Life Sciences, University of Science and Technology of China, Hefei 230027, China3 Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China3 Beijing Institutes of Life Science, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, ChinaAbstract:Throughout human history, pandemic bacterial diseases such as the plague and tuberculosis have posed an enormous threat to human beings. The discovery of antibiotics has provided us with powerful arsenal for the defense against bacterial infections. However, bacteria are acquiring more and more resistance genes to shield off antibiotics through mutation and horizontal gene transfer. Therefore, novel antibiotics must be produced and the arms race between bacterial pathogens and antibiotics is becoming increasingly intense. Recently, researchers have found that plasmids carrying a new metallo-β-lactamase gene, bla NDM-1, and many other antibiotics resistance genes can easily spread through bacterial populations and confer recipient stains resistance to nearly all of the current antibiotics. It is a threat to the human health and a great challenge for our medical science, which we are facing. We need to find new ways to fight and win this arms racing.Keywords:NDM-1, superbugs, arms racing, resistance geneReceived:September 14, 2010; Accepted: September 27, 2010Supported by: National Natural Science Foundation of China (No. 30770060),Foundation for Innovative Research Groups of the National Natural Science Foundation of China (No. 81021003).Corresponding author: Baoli Zhu. Tel: +86-10-64807362; E-mail: zhubaoli@国家自然科学基金项目（No. 30770060），国家自然科学基金创新研究群体科学基金（No. 81021003）资助。
基金项目：广州市科技计划项目（２０１８０４０１０３７０）麦荣嘉 马丹娟 邓文喻 刘 倩 郑华仪 林鑫源 林雨诗：广东省妇幼保健院 广东广州 ５１００１０通信作者：麦荣嘉磷霉素、多粘菌素Ｂ等抗菌药物对儿童感染ＮＤＭ－１肺炎克雷伯菌的体外药敏研究麦荣嘉 马丹娟 邓文喻 刘 倩 郑华仪 林鑫源 林雨诗 【摘 要】 目的 评价磷霉素、多粘菌素Ｂ、美罗培南和氨曲南四种抗菌药物对产新德里金属β－内酰胺酶（ＮＤＭ）肺炎克雷伯菌的作用。
方法 收集广东省妇幼保健院２０１９年的儿科ＰＩＣＵ的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（ＣＲＫＰ），使用ｍＣＩＭ和ｅＣＩＭ初步筛查ＣＲＫＰ的类型，并ＰＣＲ鉴定ＮＤＭ基因序列。
同时ＰＣＲ检测ＮＤＭ－ＫＰ携带磷霉素耐药基因Ｆｏ ｓＡ。
采用浓度梯度扩散法法测定磷霉素、多粘菌素Ｂ、美罗培南和氨曲南抗菌药物以及联合对ＮＤＭ－ＫＰ的最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并计算分级抑菌浓度指数（ＦＩＣ）。
结果 根据ｍＣＩＭ和ｅＣＩＭ初步筛查以及ＰＣＲ结果，获得８株携带ＮＤＭ的肺炎克雷伯菌株。
以上８株ＮＤＭ－ＫＰ对磷霉素或多粘菌素Ｂ均敏感，而氨曲南和美罗培南均耐药。
磷霉素联合美罗培南存在协同作用，以及磷霉素联合多粘菌素Ｂ表现出部分协同作用，而其他联合方案对ＮＤＭ－ＫＰ显示无相关作用。
８株ＮＤＭ－ＫＰ均未检测出磷霉素耐药基因ＦｏｓＡ。
结论 磷霉素或多粘菌素Ｂ，对ＮＤＭ－ＫＰ有较好的抗菌效果；磷霉素联合美罗培南，以及磷霉素联合多粘菌素Ｂ对ＮＤＭ－ＫＰ具有协同作用。
【关键词】 磷霉素；分级抑菌浓度指数；新德里金属β－内酰胺酶 中图分类号：Ｒ７７１ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－３３２Ｘ．２０２１．０４．０４２ＳｔｕｄｙｏｎｖｉｔｒｏｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎａｎｄｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢｔｏｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅｉｎｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈＮＤＭ １ｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎＭＡＩＲｏｎｇｊｉａ，ＭＡＤａｎｊｕａｎ，ＤＥＮＧＷｅｎｙｕ，ＬＩＵＱｉａｎｇ，ＺＨＥＮＧＨｕａｙｉ，ＬＩＮＸｉｎｙｕａｎ，ＬＩＮＹｕｓｈｉ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎ，ｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ，ＭｅｒｏｐｅｎｅｍａｎｄａｚｔｒｅｏｎａｍｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｎＫｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅｐｒｏｄｕｃｉｎｇＮｅｗＤｅｌｈｉｍｅｔａｌｌｏ ｂｅｔａ ｌａｃｔａｍａｓｅ（ＮＤＭ ＫＰ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴｈｅｃａｒｂａｐｅｎｅｍｒｅｓｉｓｔａｎｔＫｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ（ＣＲＫＰ）ｉｎｔｈｅｐａｅｄｉａｔｒｉｃＰＩＣＵｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＭａｔｅｒｎａｌａｎｄＣｈｉｌｄＨｅａｌｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｉｎ２０１９ｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ，ａｎｄｔｈｅｔｙｐｅｓｏｆＣＲＫＰｗｅｒｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙｓｃｒｅｅｎｅｄｕｓｉｎｇｍＣＩＭａｎｄｅＣＩＭ，ａｎｄｔｈｅＮＤＭｇｅｎｅｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙＰＣＲ．Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ＴｈｅＦｏｓＡｇｅｎｅｏｆｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＰＣＲ．Ｔｈｅｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＩＣ）ｏｆｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎ，ｐｏｌｙ ｍｙｘｉｎＢ，ＭｅｒｏｐｅｎｅｍａｎｄａｚｔｒｅｏｎａｍｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｇｅｎｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｆｏｒＮＤＭ ＫＰｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒａｄｉｅｎｔｄｉｆｆｕｓｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｆｒａｃｔｉｏｎａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＦＩＣ）ｗａｓｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｍＣＩＭａｎｄｅＣＩＭａｎｄＰＣＲｒｅｓｕｌｔｓ，８ｓｔｒａｉｎｓｏｆＮＤＭ ＫＰｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ．ＦｏｓｆｏｍｙｃｉｎｏｒｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢｗｅｒｅａｌｌｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏ８ｓｔａｉｎｓｏｆＮＤＭ ＫＰ，ｗｈｉｌｅａｚｔｒｅｏｎａｍａｎｄｍｅｒｏｐｅｎｅｍｗｅｒｅａｌｌｒｅｓｉｓｔａｎｔ．ＦｏｓｆｏｍｙｃｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＭｅｒｏ ｐｅｎｅｍｓｈｏｗｅｄａｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔ，ａｎｄｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢｓｈｏｗｅｄａｐａｒｔｉａｌｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔ，ｗｈｉｌｅｏｔｈｅｒｃｏｍｂｉｎｅｄｓｃｈｅｍｅｓｓｈｏｗｅｄｎｏｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔ．ＦｏｓＡｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｅｗａｓｎｏｔｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎａｌｌ８ｓｔｒａｉｎｓｏｆＮＤＭ ＫＰ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＦｏｓｆｏｍｙｃｉｎｏｒｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢａｌｏｎｅｈａｄｂｅｔｔｅｒａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｏｎＮＤＭ ＫＰ．ＦｏｓｆｏｍｙｃｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＭｅｒｏｐｅｎｅｍａｎｄｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢｈａｄａｃｅｒｔａｉｎｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｎＮＤＭ ＫＰ． 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 Ｆｏｓｆｏｍｙｃｉｎ；ＦｒａｃｔｉｏｎａｌＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；ＮｅｗＤｅｌｈｉＭｅｔａｌｌｏ ｂｅｔａ Ｌａｃｔａｍｓ 【Ａｕｔｈｏｒ′ｓａｄｄｒｅｓｓ】 ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＭａｔｅｒｎａｌａｎｄＣｈｉｌｄＨｅａｌｔｈＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００１０，Ｃｈｉｎａ 肺炎克雷伯杆菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，ＫＰ）属革兰阴性杆菌，是人体上呼吸道和肠道的常见菌，可引起局部或全身性的感染性疾病。
