人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒说明书
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甘肃医药2021年40卷第6期Gansu Medical Journal ,2021,Vol.40,No.6急性心肌梗死(acute myocardial infarction ,AMI )是指由于各种原因使得冠状动脉急性闭塞,心肌血流供应中断导致局部缺血性坏死,具有发病急、病情发展迅速、死亡率高等特点[1]。
尽早进行正确的诊断和恢复心肌血流供应对于降低患者病死率、改善其预后有着极为重要的意义。
有研究报道,约1/4的AMI 患者早期无明显症状,同时约有30%的患者缺少心电图特异性表现,因此仅根据症状和心电图极易出现漏诊与误诊[2]。
心电图联合肌钙蛋白(cardiac troponin ,cTn )检测是目前临床上诊断AMI 常见的方法[1]。
心肌型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid binding protein ,H-FABP )是由132个氨基酸组成的低分子量蛋白质,其在心肌脂肪酸代谢中起作用。
当出现AMI 后,心肌细胞内H-FABP 快速释放出来,胸痛发作后1~3h 便可在血液内被检测到,对于AMI 的早期鉴别具有良好敏感性、特异性[3]。
因此,本研究对AMI 患者的心电图、H-FABP 和高敏心肌肌钙蛋白(high sensitive-cardiac troponin ,hs-cTn )水平进行了分析,评价了在早期AMI 诊断中采用心电图、H-FABP 和hs-cTnT/I 联合检测的优势。
1资料与方法1.1研究对象选择甘肃省第二人民医院2014年1月至2018年12月收治的238例胸痛患者,根据临床最终诊断结果,分为观察组(AMI 患者)57例与对照组(非AMI 患者)181例。
观察组男性31例,女性26例,年龄44~81岁,平均(59.26±3.25)岁。
对照组男性97例,女性84例,年龄43~79岁,平均(58.34±4.52)岁。
两组一般资料差异无统计学差异(P >0.05),可进行对比。
2性能指标
2.1外观检查
外观应平整,材料附着应牢固,各组份应齐全。
2.2物理检查
膜条应不小于 2.5mm;液体移行速度应不低于 10mm/min。
2.3阳性参考品符合率
对 3 份阳性参考品进行检测,检测结果为阳性。
2.4阴性参考品符合率
对 5 份阴性参考品进行检测,检测结果为阴性。
2.5灵敏度
对灵敏度参考品进行检测,检测结果为阳性。
2.6精密度
2.6.1批内精密度
取同一批次试剂,对精密度参考品进行检测,重复检测 10 次,其反应结果应呈阳性,显色均一。
2.6.2批间精密度
取三个批次试剂,对精密度参考品进行检测,各重复检测 10 次,其反应结果应呈阳性,显色均一。
2.7分析特异性
在浓度为 25ng/mL 的阳性参考品中加入血红蛋白、甘油三酯和胆固醇,使得血红蛋白浓度≤5mg/mL、甘油三酯浓度≤30mg/mL和胆固醇浓度≤5mg/mL,重复检测 3 次,检测结果应为阳性。
人Myo-DELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人Myo-D含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Myo-D水平。
用纯化的人Myo-D抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Myo-D,再与HRP标记的Myo-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Myo-D 呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Myo-D浓度。
样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
h-fabp分子量H-FABP分子量概述H-FABP是一种脂肪酸结合蛋白,其分子量约为15千道尔顿。
H-FABP是一种小分子蛋白,具有重要的生理功能和临床应用价值。
H-FABP在细胞内起着重要的运输和调节作用。
它主要存在于心肌细胞、肝脏细胞和肾脏细胞中。
H-FABP通过与游离脂肪酸结合,参与脂肪酸的摄取、转运和代谢过程。
同时,H-FABP还能够将一些信号分子转运到细胞核,参与基因表达调控。
H-FABP在心肌梗死的诊断中具有重要的临床应用价值。
心肌梗死是由于冠状动脉阻塞导致心肌缺血坏死所引起的严重疾病。
当心肌梗死发生时,心肌细胞释放出H-FABP进入血液循环。
通过检测血液中的H-FABP水平,可以早期诊断心肌梗死,有助于及时采取治疗措施,减少心肌损伤和死亡率。
H-FABP的检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫分析法(RIA)和免疫层析法等。
这些方法均可通过特异性抗体与H-FABP结合来进行检测。
ELISA是一种常用的检测方法,具有快速、灵敏和准确的特点。
除了心肌梗死的诊断,H-FABP在其他疾病中也有潜在的临床应用价值。
例如,H-FABP在肿瘤的早期诊断中具有潜力。
一些研究发现,肿瘤细胞中H-FABP的表达水平明显增加。
通过检测血液或尿液中的H-FABP水平,可以早期发现肿瘤,有助于及时治疗和提高治疗效果。
H-FABP还与一些代谢性疾病的发生和发展密切相关。
例如,糖尿病患者的血液中H-FABP水平常常升高。
通过监测H-FABP水平,可以评估糖尿病的严重程度和并发症的风险。
H-FABP是一种重要的脂肪酸结合蛋白,其分子量为15千道尔顿。
它在细胞内具有运输和调节作用,并在心肌梗死的早期诊断中具有重要的临床应用价值。
此外,H-FABP还有潜力用于肿瘤早期诊断和代谢性疾病的评估。
随着对H-FABP的研究深入,相信它将在临床医学中发挥更大的作用。
高敏肌钙蛋白和心型脂肪酸结合蛋白对急性肺栓塞患者预后的影响急性肺栓塞(Acute pulmonary embolism)是指由于肺动脉或其分支发生血栓形成或栓子的堵塞而引起的肺循环障碍,临床上表现为呼吸困难、胸痛、咯血等症状。
高敏肌钙蛋白(highly sensitive troponin,hs-Tn)和心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)是临床上常用于心肌损伤的生物标志物。
本文将就高敏肌钙蛋白和心型脂肪酸结合蛋白对急性肺栓塞患者预后的影响进行综述。
研究发现,高敏肌钙蛋白是一种心肌细胞损伤的特异性指标,其水平的升高与心肌损伤程度呈正相关。
肺栓塞时,栓子堵塞了肺动脉或其分支,导致肺循环的血流下降,心肌可能受到供氧不足的影响而发生损伤。
多项研究表明,急性肺栓塞患者高敏肌钙蛋白水平的升高与预后的恶化有关。
一项回顾性研究发现,高敏肌钙蛋白水平高于正常范围的患者,在死亡率和复发率方面都明显升高。
另一项研究表明,高敏肌钙蛋白水平的升高与住院时间的延长、住院费用的增加等不良临床结果相关。
因此,高敏肌钙蛋白的检测在急性肺栓塞患者的预后评估、治疗选择和随访中具有重要的临床价值。
心型脂肪酸结合蛋白是一种小分子量的非酶蛋白质,主要存在于心肌细胞内,具有保护心肌细胞免受缺氧和氧化应激的作用。
研究表明,心型脂肪酸结合蛋白可以作为心肌缺血或损伤的早期生物标志物。
在急性肺栓塞患者中,心型脂肪酸结合蛋白的水平也与预后相关。
一项前瞻性研究发现,心型脂肪酸结合蛋白水平高于正常范围的患者,其住院死亡率和30天死亡率均明显升高。
另一项病例对照研究显示,心型脂肪酸结合蛋白水平的升高与急性肺栓塞患者的心功能受损程度和预后的恶化有关。
当前,高敏肌钙蛋白和心型脂肪酸结合蛋白主要用于急性肺栓塞患者的风险评估和预后判断。
但是,准确判断肺栓塞患者的心肌损伤程度仍然是一个难题。
人BMP-2ELISA试剂盒Human BMP-2ELISA kitCat#:EHC172尊敬的客户,感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业体外诊断试剂生产技术制造,仅供科研使用。
本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组人BMP-2浓度,具体适用样本请咨询。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。
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QuantiCyto ®EHC172Human BMP-22试剂盒组成:名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品5ng /支×2支5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支(规格见标签)1支(规格见标签)生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支(规格见标签)1支(规格见标签)酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物(TMB )6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件:未开封完整试剂盒4℃保存,请在保质期内使用。
已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋,封好口。
4℃条件下可储存1个月左右。
标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。
稀释后的标准品使用后请丢弃。
浓缩生物素化抗体浓缩液4℃可储存1个月左右,稀释后即用即弃。
浓缩酶结合物(避光)标准品&标本通用稀释液4℃条件下,可储存1个月左右。
脂肪酸结合蛋白测定一、引言脂肪酸结合蛋白(Fatty Acid Binding Protein,FABP)是一种小分子量的蛋白质,广泛存在于动物和植物细胞中。
FABP在脂肪酸的转运、代谢和信号传导等方面发挥着重要作用。
因此,FABP的测定对于研究脂肪代谢和相关疾病具有重要意义。
本文将介绍FABP的测定方法及其在临床应用中的意义。
二、FABP的分类FABP是一类小分子量的蛋白质,根据其组织来源和功能,可以分为多种类型。
目前已知的FABP主要有以下几种:1. 肝型FABP(Liver FABP,L-FABP):主要存在于肝脏和肠道上皮细胞中,参与脂肪酸的转运和代谢。
2. 心型FABP(Heart FABP,H-FABP):主要存在于心肌细胞中,参与心肌细胞内脂肪酸的转运和代谢。
3. 肌型FABP(Muscle FABP,M-FABP):主要存在于骨骼肌和心肌细胞中,参与脂肪酸的转运和代谢。
4. 脑型FABP(Brain FABP,B-FABP):主要存在于神经系统中,参与脂肪酸的转运和代谢。
5. 胆固醇结合蛋白(Cholesterol Binding Protein,CBP):主要存在于肝脏和肠道上皮细胞中,参与胆固醇的代谢和转运。
三、FABP的测定方法FABP的测定方法主要有免疫学方法和生物化学方法两种。
1. 免疫学方法免疫学方法是目前应用最广泛的FABP测定方法之一。
该方法利用特异性抗体与FABP结合,形成抗原-抗体复合物,再通过酶标记或荧光标记等方法进行检测。
免疫学方法具有灵敏度高、特异性好、操作简便等优点,但也存在一定的局限性,如受到干扰物质的影响等。
2. 生物化学方法生物化学方法是利用FABP与脂肪酸结合的特性,通过测定FABP与脂肪酸结合的程度来确定FABP的含量。
该方法具有操作简便、成本低等优点,但灵敏度较低,且受到脂肪酸浓度的影响。
四、FABP在临床应用中的意义FABP在临床应用中具有重要意义。
心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)适用范围:本试剂盒采用化学发光免疫分析法(CLIA)体外定量测定人血清或血浆中心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的含量。
1.1 包装规格96人份/盒1.2 主要组成成分表1 主要组成成分注:校准品溯源至同位素稀释质谱法,校准品(A~F)目标浓度为0、3、10、30、80、160ng/ml。
2.1 外观组分齐全、完整,液体无渗漏,微孔板包装袋无破损、漏气现象;标签应清晰,易识别。
2.2 装量液体装量应不少于标示值。
2.3 准确度在剂量反应曲线检测范围内,用已知浓度的纯品做回收试验,其回收率应在85~115%范围内。
2.4 线性在线性范围 [2.5,160]ng/ml内,剂量反应曲线相关系数(r)的绝对值应不低于0.9900。
2.5 空白限应不大于2.5ng/ml。
2.6 重复性变异系数(CV)应不大于10.0%。
2.7 批间差批间变异系数(CV)应不大于15.0%。
2.8 分析特异性测定浓度为300ng/ml人肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP),交叉反应率小于2.5%。
2.9 稳定性产品在2~8℃条件下保存有效期为12个月,取到效期产品在1个月内进行检测,检测结果应满足2.3~2.6,2.8项要求。
术语4.1 CLIA:Chemiluminescent immunoassay化学发光免疫分析4.2 H-FABP:Heart-type Fatty Acid-Binding Protein心脏型脂肪酸结合蛋白4.3 RLU:Relative Light Unit相对光单位。
心型脂肪酸结合蛋白心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白,它具有高度心脏特异性(也就是主要在心脏组织中表达)。
心肌缺血性损伤出现后,h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,6至8小时达到峰值而且血浆水平在24至30小时内恢复正常。
心脏脂肪酸结合胞质蛋白由132个氨基酸组成,分子量为15 kDa。
h-FABP基因位于染色体I上。
它是心脏最丰富的蛋白质之一。
h-FABP结合两个脂肪酸分子并参与脂肪酰基辅酶A的运输,活跃于氧化过程,从而在线粒体中产生能量。
h-FABP在生物学方面的几个特点,表明其是心肌损伤早期诊断有价值标志物:1.在心肌中高浓度;2.在细胞质中限制;3.低分子量和面积小;4.相对组织特异性;5.与心脏以外组织中CK-MB的分布相似;6.在心肌损伤后早释进入血浆和尿液。
心型脂肪酸结合蛋白检测在心血管疾病的诊断应用主要表现在三个方面:一是h-FABP与急性心肌梗死。
由于h-FABP可以早在胸痛发作后1至3小时在血液中被发现,故h-FABP能够提供最强的诊断能力,尤其是在急性缺血事件的前6小时内,有助于快速危险分层和更早预测患者预后。
另外,h-FABP的早期使用可以克服急性胸痛早期心肌肌钙蛋白检测的陷阱。
心肌肌钙蛋白在循环中越持久,可能越有助于急性心肌损伤的后期诊断。
二是h-FABP和手术后急性心肌损伤。
h-FABP用于早期检测心肌损伤还被延伸到心脏手术。
在心脏手术中松开主动脉钳夹后h-FABP血清浓度比CK-MB和TnT更早达到最高水平。
普遍认为h-FABP释放量反映心肌损伤的程度。
三是h-FABP与急性冠脉综合征(ACS)。
h-FABP在ACS发病早期可迅速释放到血液中,对于ACS的诊断具有时间优势,同时对心肌损伤具备高特异性、高灵敏度、高符合率的特点;h-FABP浓度在ACS长期预后中,可有效鉴别出AMI、心衰及不稳定心绞痛等不良事件的高危患者;h-FABP与肌钙蛋白联合检测可提高诊断敏感性,对ACS更具诊断价值。
心型脂肪酸结合蛋白和结合珠蛋白联合检测对急性冠脉综合征的诊断价值李琳;陈伟才;刘培健;何金勇;陈绮婷【摘要】目的探讨心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和结合珠蛋白(HP)联合检测对急性冠脉综合征(ACS)的诊断价值.方法纳入2014年2月~2016年1月收治的306例ACS患者和306例健康对照者,检测入院时和入院8h后(对照组除外)的血清H-FABP和HP浓度,采用t检验或卡方检验比较不同时刻H-FABP和HP的浓度和阳性率以及两指标的诊断灵敏度、特异度和准确性.结果早期ACS组(胸痛时间<6h)和中晚期ACS组(胸痛时间≥6h)的H-FABP浓度和阳性率以及HP阳性率均显著高于对照组(P<0.05),而三组间的HP浓度无显著差异(P>0.05);入院8h后,早期ACS组和中晚期ACS组的H-FABP浓度和阳性率显著降低(P<0.05),而HP浓度和阳性率显著升高(P<0.05);入院时的H-FABP和入院8h后的HP联合诊断ACS的灵敏度高达97.7%、特异度为100%、准确性为98.9%,显著高于单一指标的诊断效果(P<0.05).结论早期H-FABP和中期HP联合检测ACS的效果佳,值得临床推广应用.【期刊名称】《江西医药》【年(卷),期】2018(053)001【总页数】4页(P34-37)【关键词】心型脂肪酸结合蛋白;结合珠蛋白;急性冠脉综合征;诊断【作者】李琳;陈伟才;刘培健;何金勇;陈绮婷【作者单位】广州中医药大学顺德医院检验科,顺德 528333;广州中医药大学顺德医院核医学科,顺德 528333;广州中医药大学顺德医院心血管内科,顺德 528333;广州中医药大学顺德医院检验科,顺德 528333;广州中医药大学顺德医院检验科,顺德528333【正文语种】中文【中图分类】R543.3急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)是以冠状动脉粥样硬化斑块破裂或侵袭,继发完全或不完全闭塞性血栓形成为病理基础的一组临床综合征,包括急性ST段抬高性心肌梗死、急性非ST段抬高性心肌梗死(NSTEMI)和不稳定型心绞痛(UA)[1]。
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降低错误发生率原材料的溯源性,极其严格的生产工艺,确保试剂批次的一致性。
所有的检验都经过金标准的验证,低CV和优异的精密度,确保实验室得到正确的检测结果。
123白蛋白肌酐胱抑素 CD-3 羟基丁酸 (Ranbut)果糖胺葡萄糖HbA1c 微量白蛋白游离脂肪酸(NEFA)糖尿病载脂蛋白 A-I 载脂蛋白 B 载脂蛋白 A-II 载脂蛋白 C-II 载脂蛋白 C-III 载脂蛋白 E高密度脂蛋白胆固醇 (HDL)低密度脂蛋白胆固醇 (LDL)胆固醇 (总)脂蛋白 (a)甘油三酯血脂抗链球菌溶血素 O 载脂蛋白 A-I 载脂蛋白 A-II 载脂蛋白 B 载脂蛋白 C-II 载脂蛋白 C-III 载脂蛋白 E CRP 胱抑素 C铁蛋白HbA1c 脂蛋白 (a)微量白蛋白肌红蛋白类风湿因子转铁蛋白甲状腺素运载蛋白 (前白蛋白)特定蛋白谷氨酸转氨酶 (ALT)醛缩酶碱性磷酸酶氨淀粉酶淀粉酶 (胰腺)天冬氨酸转氨酶 (AST)胆汁酸胆红素钙氯化物胆碱酯酶CK-MB CK-NAC 二氧化碳总量铜γ-谷氨酰转移酶 (γGT)谷氨酸脱氢酶 (GLDH)甘油铁乳酸乳酸脱氢酶脂肪酶镁磷钾钠总蛋白尿蛋白尿素尿酸锌4卡马西平锂苯妥英丙戊酸治疗药物监测胆红素 (总)铁蛋白谷胱甘肽过氧化物酶 (Ransel)谷胱甘肽还原酶超氧化物歧化酶 (Ransod)总抗氧化状态 (TAS)转铁蛋白尿酸抗氧化剂谷氨酸转氨酶 (ALT)白蛋白醛缩酶碱性磷酸酶氨淀粉酶天冬氨酸转氨酶 (AST)胆汁酸胆红素钙氯化物高密度脂蛋白胆固醇 (HDL)低密度脂蛋白胆固醇 (LDL)胆固醇 (总)胆碱酯酶CK-NAC 二氧化碳总量铜肌酐CRP CRP (犬)D-3 羟基丁酸 (Ranbut)铁蛋白果糖胺γ-谷氨酰转移酶 (γGT)谷氨酸脱氢酶 (GLDH)葡萄糖谷胱甘肽过氧化物酶 (Ransel)谷胱甘肽还原酶乳酸乳酸脱氢酶脂肪酶微量白蛋白游离脂肪酸(NEFA)磷钾钠超氧化物歧化酶 (Ransod)总抗氧化状态 (TAS)总蛋白甘油三酸酯尿素尿酸尿蛋白锌兽医学抗链球菌溶血素 O CRP类风湿因子快速测试/血清学超敏CRP心脏型脂肪酸结合蛋白 (H-FABP)同型半胱氨酸 (酶法)谷氨酸转氨酶 (ALT) 6 白蛋白 6醛缩酶 6碱性磷酸酶 7 氨 7淀粉酶 7抗链球菌溶血素 O 8 载脂蛋白 A-I 8载脂蛋白 A-II 8载脂蛋白 B 8载脂蛋白 C-II 9 载脂蛋白 C-III 9载脂蛋白 E 9天冬氨酸转氨酶 9胆汁酸 10 胆红素 10钙 10卡马西平 11 氯化物 11高密度脂蛋白胆固醇 (HDL) 11低密度脂蛋白胆固醇 (LDL) 11胆固醇(总) 12 胆碱酯酶 12 CK-MB 12 CK-NAC12谷胱甘肽过氧化物酶 (Ransel) 15谷胱甘肽还原酶 16 甘油 16 HbA1c 16心脏型脂肪酸结合蛋白 (H-FABP) 16同型半胱氨酸 16 D-3-羟基丁酸 17 铁 17 乳酸 17 乳酸脱氢酶 18 脂肪酶 18脂蛋白 (a) 18锂 18镁 18 微量白蛋白 19肌红蛋白 19游离脂肪酸 19苯妥英 19磷 19 钾 20类风湿因子 20钠 20超氧化物歧化酶 (Ransod) 20 总抗氧化状态 (TAS) 20总蛋白 21转铁蛋白 21 甲状腺素运载蛋白(前白蛋白) 21甘油三酯 21尿素 22尿酸 22尿蛋白 22丙戊酸 22锌 22A-Z 试剂索引二氧化碳总量 13 铜 13肌酐 13 CRP 13超敏CRP 14 胱抑素 C 14铁蛋白 14果糖胺 14γ-谷氨酰转移酶 15 谷氨酸脱氢酶 (GLDH) 15葡萄糖 1556白蛋白 (BCG)目录编号: AB38009 x 51ml 20172406853*AB80004 x 68ml 20152403589*醛缩酶 (UV 法)目录编号: AD1895 x 20ml 20172400289**CFDA谷氨酸转氨酶 (ALT)(UV) (IFCC)目录编号:AL7930 R1 7 x 100ml 20172400776*R2 3 x 60mlAL3801 R1 6 x 51ml 20152400339* R2 6 x 14mlAL8006 R1 6 x 56ml 20152400339* R2 6 x 20ml (Mod IFCC)AL8304 R1 4 x 20ml 20152400339* R2 4 x 7ml(Mod IFCC)碱性磷酸酶(DEA 法)(DGKC)目录编号: AP30710 x 10ml 20152402791*AP3803 R1 6 x 51ml 20152402791* R2 6 x 14mlAP9764 R1 7 x 38ml 20152402791*R2 7 x 11.7ml• 提供液体和冻干粉试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:16.3 - 2183U/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购7碱性磷酸酶(AMP 法)目录编号: AP3802 R1 6 x 51ml 20152402789* R2 6 x 14mlAP3877 6 x 21ml 20152402789*AP7927 R1 5 x 100ml 20152402789* R2 5 x 20mlAP8002 R1 7 x 20ml 20152402789* R2 7 x 8ml*CFDA氨(酶 UV 法)目录编号: AM101510 x 5ml (C) 20162400248* AM1054 20 x 3ml (S) 20162400248* AM3979 R1 4 x 20ml 20162400248* R2 2 x 10ml• 冻干粉试剂• 在 +2 至 +8o C 的环境下可保持稳定 3 周,在 +15 至 +25°C 的环境下可保持稳定 5 天• 测量范围:16.9 - 1180μmol/l淀粉酶(亚乙基 PNPG7)目录编号: AY3805R1 4 x 16ml 20172407015*R2 4 x 5mlAY7931 R1 6 x 50ml 20172400284* R2 4 x 18mlAY1580 20 x 5ml 20162401964*AY8335 R1 4 x 20ml 20172407015*R2 4 x 7ml• 提供液体和冻干粉试剂 • 在 +2 至 +8o C 的环境下可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:7.3 - 1245U/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购淀粉酶(胰腺)(亚乙基 PNPG7)目录编号:AY7934 R1 6 x 20ml 20172400765* R2 3 x 10ml(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: LO3998 R1 2 x 9ml 20162401084*R2 2 x 14mlLO8015 R1 2 x 8.7ml 20162401084*R2 2 x 12mlLO8305 R1 1 x 7.7ml 20162401084*R2 1 x 11.2ml载脂蛋白 A-I (免疫比浊法)目录编号: LP2116 R1 4 x 40ml (C) 20162404617*R2 4 x 17mlLP3838 R1 4 x 30ml 20172407200*R2 4 x 12ml载脂蛋白 A-II(免疫比浊法)目录编号: LP3867 R1 2 x 11ml 20162400257*R2 2 x 5ml目录编号: LP2117载脂蛋白 C-II(免疫比浊法)目录编号: LP3866 R1 2 x 11ml 20192401677*R2 2 x 5ml • 液体即用型试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:1.48 - 9.7 mg/dl• 专用Acusera质控和校准品,可供采购载脂蛋白 C-III(免疫比浊法)目录编号: LP3865 R1 2 x 11ml 20162400258*R2 2 x 5ml载脂蛋白 E(免疫比浊法)目录编号: LP3864 R1 2 x 11ml 20192401679*R2 2 x 5ml天冬氨酸转氨酶 (AST)(UV) (Mod.IFCC)目录编号:AS3804 R1 6 x 51ml 20152402855*R2 6 x 14mlAS8005 R1 6 x 56ml 20152402855*R2 6 x 20mlAS8306 R1 4 x 20ml 20152402855*R2 4 x 7mlAS1204 10 x 10ml 20152402855*胆汁酸(比色法)目录编号: BI3863 R1 2 x 18ml 20172407224*R2 2 x 8ml (第五代)• 液体即用型试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:1.47 - 150μmol/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购胆红素(总)(经改进的 Jendrassik 法)目录编号: BR23612 x 250ml 20172400766*BR243 R1 1 x 100ml (DCA)R2 2 x 100mlBR411 1 x 225ml 20162401722*总和直接胆红素钙 (CPC/AMP)目录编号: CA590 R1 1 x 100ml (S) 20162401702* R2 1 x 100mlCA7941 R1 6 x 50ml 20172400767* R2 3 x 50ml• 液体即用型试剂 • 21 天开瓶稳定性• 测量范围:0.075 - 5.67mmol/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购钙 (Arsenazo)目录编号: CA38719 x 51ml 20172407199* CA8021 4 x 68ml 20172407199*卡马西平(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: TD3416 R1 2 x 12ml 20172406860*R2 2 x 5ml氯化物(水银 (II) -硫氰酸盐)目录编号: CL16456 x 500ml 20192402027*高密度脂蛋白胆固醇 (HDL)(直接清除法)目录编号: CH2652R1 6 x 30ml 20172407198*R2 3 x 20mlCH2655 R1 6 x 78ml 20172407198* R2 3 x 52mlCH3811 R1 3 x 51ml 20172407198 R2 3 x 20mlCH8033 R1 4 x 38.2ml 20172407198R2 4 x 18.2ml低密度脂蛋白胆固醇 (LDL)(直接清除法)目录编号: CH2656R1 6 x 78ml 20172406854*R2 3 x 52mlCH3841 R1 3 x 51ml 20172406854* R2 3 x 20mlCH8032 R1 4 x 19.2ml 20172406854* R2 4 x 10.1mlCH8312 R1 4 x 20ml 20172406854R2 4 x 9ml胆固醇(总)(CHOD-PAP)目录编号: CH8019 4 x 68ml 20172407005*• 液体即用型试剂 • 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:0.22-21.7 mmol/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购胆碱酯酶(丁酰)(比色法)目录编号: CE190R1 5 x 30ml 20142405709*R2 5 x 1mlCK-MB (免疫抑制法)(UV)目录编号: CK129619 x 2.5ml 20162400876*CK7946 R1 6 x 20ml 20162404621* R2 3 x 10mlCK4043 R1 4 x 20ml 20162400918*R2 4 x 6ml• 提供液体和冻干粉试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:9.1 - 2216U/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购CK-NAC (UV DGKC)目录编号: CK3892R1 4 x 16.5ml 20152403484*R2 4 x 6.2ml (IFCC)• 液体即用型试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内 一直保持稳定• 测量范围:9.16 - 2886U/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购二氧化碳总量(酶法)目录编号: CD127 10 x 10ml (C) 20153403591*• 冻干粉试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定 • 开瓶稳定性:+10o C 下 14 天• 测量范围:0.004 - 50 mmol/l• 专用Acusera质控和校准品,可供采购铜(比色法)目录编号: CU2340 R1 5 x 20 ml (S) 20162404594*R2 1 x 30 ml • 冻干粉试剂• 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在 2 周内保持稳定• 测量范围:6.6 - 86 µmol/l肌酐(酶 UV 法)目录编号: CR2336 R1 4 x 50ml (S) 20162404060*R2 4 x 10mlCR2337 R1 4 x 100ml (S) 20162404060*R2 4 x 20ml目录编号: CP7950 R1 7 x 20ml 20162404618*R2 2 x 12mlCRP(免疫比浊法)CRP(全范围)(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: CP3847 R1 2 x 11ml 20152400348*R2 2 x 11mlCP3849 R1 4 x 50ml 20152400348*R2 4 x 50mlCP8315 R1 4 x 10ml 20152400348*R2 4 x 10ml超敏CRP(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: CP3885 R1 2 x 11ml 20152403485*R2 2 x 11ml胱抑素 C(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: CYS4004 R1 2 x 17.6ml 20152402863*R2 2 x 6.1ml铁蛋白(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: FN3452 R1 1 x 40ml 20192401678*R2 1 x 20mlFN3453 R1 4 x 40ml 20192401678*R2 4 x 20mlFN3888 R1 3 x 20ml 20192401678*R2 3 x 11mlFN8346 R1 1 x 12.2mlR2 1 x 7.4ml 20192401678*果糖胺(酶法)目录编号: FR3133 R1 5 x 25ml 20152403689*R2 5 x 6.3mlFR4030 R1 4 x 19.8ml 20152403689*R2 4 x 6.9mlγ-谷氨酰转移酶(比色法)目录编号: GT52310 x 10ml20152400927*• 液体即用型试剂 • 当储存于 +2 至 +8o C 时,可在有效期内一直保持稳定 • 测量范围:3.9 - 1285U/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购GLDH (UV) (DGKC)目录编号: GL4418 x 6ml 20172400775*GL4425 x 100ml 20172400775*葡萄糖(GOD-PAP 法和己糖激酶法)目录编号: GL16114 x 100ml (己糖激酶法)(S) 20162402092*GL3881 4 x 50ml (己糖激酶法)20162402092* GL8038 4 x 68ml 20162400420* GL3981 4 x 20ml 20162400420*GL2614 2 x 500ml (S) 20162400420* GL2623 6 x 100ml (S) 20162400420* GL3815 9 x 51ml 20162400420* GL3816 R1 4 x 51ml 20152402802*R2 3 x 20ml (己糖激酶法)• 液体和冻干粉试剂• 在 +2 至 +8o C 的环境下可在有效期内一直保持稳定• 测量范围:0.200 - 35.5mmol/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购谷胱甘肽过氧化物酶 (Ransel)(酶法)目录编号: RS5048 x 6.5ml 20172401191*RS5058 x 10ml 20172401191GT3817 R1 6 x 51ml 20152400927* R2 6 x 14mlGT38746 x 21ml 20152400927*谷胱甘肽还原酶 (UV)目录编号: GR2368 R1 5 x 5ml 20172400300*R2 5 x 3ml甘油(GPO-PAP 法)目录编号: GY105 6 x 15ml (S) 20162400260*HbA1c (Indirect)(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: HA3830 R1 3 x 14ml 20162404632*R2 3 x 14ml心脏型脂肪酸结合蛋白 (H-FABP)(免疫比浊法)目录编号: FB4025 R1 1 x 19ml 20172407021*R2 1 x 7ml同型半胱氨酸 (酶法)目录编号: HY4036 R1 2 x 21.7ml (C)R2 2 x 4.6ml铁(Ferene 法)目录编号: SI2572 x 100ml (S) 20162400245*• 冻干粉试剂• 测量范围:0.964 - 150μmol/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购铁(亚铁嗪法)目录编号: SI3821 R1 6 x 20ml 20152402853*R2 3 x 11mlD-3-羟基丁酸 (Ranbut)(酶法)目录编号: RB1007 10 x 10ml (S) 20162404142*RB100810 x 50ml (S) 20162404142*• 冻干粉试剂• 测量范围:0.100 - 5.75 mmol/l(血清)• 专用Acusera质控和校准品,可供采购(S )试剂盒内包含标准品,且该标准品仅可供手工和半自动使用乳酸(比色法)目录编号: LC238916 x 6ml (S) 20162404061乳酸脱氢酶 L - P (LDH) (NAD)目录编号: LD3842 R1 6 x 20ml 20152402843* R2 3 x 18ml乳酸脱氢酶 P - L (UV)目录编号: LD401 20 x 3ml 20162400247*LD3818 R1 6 x 20ml 20162400247*R2 3 x 11ml • 液体和冻干粉试剂• 在 +2 至 +8o C 的环境下可在有效期内一直保持稳定 • 测量范围:42.3 - 1191U/l• 专用Acusera质控和校准品,可供采购脂肪酶(比色法)目录编号: LI3837 R1 3 x 9ml 20162404632*R2 3 x 6ml脂蛋白 (a)(免疫比浊法)目录编号: LP2757 R1 1 x 30ml 20172400769*R2 1 x 15mlLP3403 R1 1 x 10ml 20172400769R2 1 x 6ml锂 (比色法)目录编号: LM4005 R1 2 x 18.3mlR2 2 x 6.5ml20162401522*镁(二甲苯胺蓝法)目录编号: MG3880 6 x 20ml 20182400422*MG8326 2 x 16ml 20182400422*1819微量白蛋白(免疫比浊法)目录编号: MA2426 R1 1 x 60ml (C) 20162404591* R2 1 x 7mlMA3828 R1 6 x 20ml 20162401401* R2 3 x 8ml肌红蛋白(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: MY2127 R1 1 x 9.5ml 20172400294*R2 1 x 4.5ml游离脂肪酸(NEFA)(比色法)目录编号: FA115R1 3 x 10ml (C)20162404622*R2 3 x 20ml苯妥英(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: TD3409 R1 2 x 17ml 20172406849*R2 2 x 6ml磷(无机)(UV)目录编号: PH1016300ml (S) 20192402028* PH3872 6 x 20ml 20192402028*PH8048 R1 6 x 68ml 20192402028*R2 6 x 40.3ml• 液体即用型试剂• 当储存于 +15 至 +25o C 时,可在有效期内一直保持稳定 • 测量范围:0.065 - 10mmol/l(血清/血浆)• 专用Acusera质控和校准品,可供采购*CFDA20钾 (UV)目录编号: PT3852 R1 3 x 20ml 20172400781*R2 3 x 9mlPT8329 R1 4 x 10ml 20172400781*R2 4 x 6ml• 冻干粉试剂 • 在 +2 至 +8 o C 的环境下可保持稳定 7 天• 测量范围:0.8 - 10mmol/l • 专用Acusera质控和校准品,可供采购类风湿因子(乳胶增强免疫比浊法)目录编号: RF3836 R1 2 x 20ml 20162402303*R2 2 x 8mlRF7980 R1 2 x 15ml 20162404062* R2 1 x 10mlRF8063 R1 2 x 8.7ml 20162404062*R2 2 x 4.5ml RF8345 R1 1 x 11.7mlR2 1 x 5.7ml 20162402303*钠(酶法)目录编号: NA3851R1 3 x 20ml 20172400770*R2 3 x 9mlNA8327 R1 4 x 10ml 20172400770*R2 4 x 6ml总抗氧化状态 (TAS)(比色法)目录编号: NX23325 x 10ml (S) 20172400764*超氧化物歧化酶 (Ransod)(比色法)目录编号: SD1255 x 20ml (S) 20172400278*• 冻干粉试剂• 在 +2 至 +8o C 的环境下可保持稳定 10 天 • 专用Acusera质控和校准品,可供采购(S) 试剂盒内包含标准品,且该标准品仅可供手动和半自动使用。
心型脂肪酸结合蛋白指南1. 引言心型脂肪酸结合蛋白(FABP)是一类重要的蛋白质家族,它在细胞内负责运输和调节脂质代谢。
本指南将详细介绍心型脂肪酸结合蛋白的特点、功能以及相关研究进展。
2. 心型脂肪酸结合蛋白的特点心型脂肪酸结合蛋白是一类小分子量的蛋白质,约为14-15kDa。
它们主要存在于细胞质中,但也可在细胞核、线粒体等细胞亚结构中发现。
心型脂肪酸结合蛋白具有以下特点:•高度保守性:心型脂肪酸结合蛋白在不同物种中具有高度保守性,表明其在生物体内发挥重要功能。
•结构稳定:心型脂肪酸结合蛋白的结构稳定,能够保护结合的脂质分子免受降解和氧化的影响。
•亲水性:心型脂肪酸结合蛋白具有亲水性,能够与细胞内的水分子形成稳定的络合物。
3. 心型脂肪酸结合蛋白的功能心型脂肪酸结合蛋白在细胞内具有多种重要功能,包括:3.1 脂质运输心型脂肪酸结合蛋白能够结合游离脂肪酸,将其从细胞膜或内质网中运输到线粒体等细胞亚结构中,参与脂肪酸的β氧化代谢。
心型脂肪酸结合蛋白通过与脂质的结合,保护脂质分子免受氧化和降解的影响,从而维持细胞内脂质的平衡。
3.2 信号转导心型脂肪酸结合蛋白在细胞内还参与信号转导过程。
它们能够结合一些信号分子,如细胞因子、激素等,调节细胞内的代谢和生理功能。
心型脂肪酸结合蛋白通过与信号分子的结合,介导信号传递,参与调控细胞的生长、分化和凋亡等过程。
3.3 肿瘤相关近年来的研究表明,心型脂肪酸结合蛋白在肿瘤的发生和发展中扮演重要角色。
它们参与调节肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,对肿瘤的恶性程度和预后有一定的影响。
心型脂肪酸结合蛋白可能成为肿瘤治疗和预防的潜在靶点。
4. 心型脂肪酸结合蛋白的研究进展4.1 结构与功能研究通过对心型脂肪酸结合蛋白的结构与功能进行研究,可以深入了解其与脂质的相互作用机制,揭示其在细胞内的作用方式。
研究人员利用X射线晶体学、核磁共振等技术手段解析了心型脂肪酸结合蛋白的三维结构,进一步研究其与脂质的结合模式和结合亲和力。
H-FABP 使用说明书【全体的注意事项】1.本品只限用于体外诊断。
2.诊断结果要结合其他相关检查结果或临床症状进行判断。
3.不能保证使用说明记载以外的使用方法。
4.仔细阅读检测装置的使用说明书后进行操作。
5.因本品含有防腐剂叠氮化钠(0.1%以下),如果不慎吸入口中或与眼、皮肤和衣物接触,请立刻采取用大量清水冲洗等应急措施,必要时要到医院进行治疗。
【形状,构造等(试剂盒的构成)】1.反应缓冲液BSA 其他2.乳胶凝集试剂抗人心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体(鼠)乳胶颗粒1次检测使用量为0.01~0.12mL【使用目的】检测血清或血浆中的人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)。
【检测原理】本品以乳胶凝集法为原理。
样本中(血清或血浆)的H-FABP可与吸附在乳胶颗粒上的抗体产生抗原抗体的凝集反应,形成抗原抗体复合物,其浊度的变化通过测定特定波长的吸光度值,即可算出样本中H-FABP的含量。
【操作上的注意事项】1.检测样本的性质,采集方法(1)样本可使用血清或血浆。
(2)样本在2~8℃可保存1周,-80℃以下可保存1个月。
(3)冷冻后解冻的样本只限1次使用。
2. 干扰物质关于干扰物质,在不超过以下物质的记载的浓度范围时,对H-FABP的检测不产生影响。
(1)游离胆红素・・・・・19.10mg/dL(2)结合胆红素・・・・・19.40mg/dL(3)血红蛋白・・・・・・483mg/dL(4)血清呈乳白色混浊・・1530FTU(5)类风湿因子・・・・・500IU/mL【用法・用量(操作方法)】1.试剂及试液的制作方法(1)反应缓冲液 :直接使用。
(2)乳胶凝集试剂 :直接使用。
2.样本的制作(1)采血后通过常用的方法制作血清或血浆。
(2)样本在2~8℃可保存1周,-80℃以下可保存1个月。
(3)冷冻后解冻的样本只限1次使用。
3.操作方法东京贸易株式会社生产自动分析装置:TMS1024(以下称为TMS1024)所使用的检测操作方法(1)吸取样本(4μL)及反应缓冲液(100μL)分别注入到比色管中,在37℃保持200秒。
心脏型脂肪酸结合蛋白一,FABP的生物学特性脂肪酸结合蛋白( FABP) 是一组多源性的小分子细胞内蛋白质,分子量14 ~ 15 kDa,。
目前已发现的FABP有9种类型,其中心脏型FABP (H —FABP)较特异地存在于心肌组织中,红骨骼肌、主动脉壁的平滑肌细胞、内皮细胞、胃腺体的壁细胞和睾丸间质细胞中亦有,少量存在于肾脏、白骨骼肌、肾上腺、脑,但肝脏、脂肪组织内无H—FABP分布【1】。
FABP 在骨骼肌中的含量是其在心肌中含量的1 /10。
心脏中的FABP 称心型脂肪酸结合蛋白。
H-FABP 具有稳定的细胞内半衰期,约2 ~ 3天。
人心脏每克湿重中含0. 5 mg FABP,占胞质蛋白的15%。
生理情况下,血浆或细胞间液不存在H-FABP,细胞质的浓度比血中浓度高2 ×105 倍。
健康人群的血浆含有少量H-FABP,是由骨髂肌损伤连续释放引起,年龄、性别、昼夜节律可显著影响H-FABP浓度。
因为男性肌肉较多,所以男性浓度高于女性,H-FABP 大部分经肾清除,故随着年龄的增长,肾功能下降,血H-FABP 浓度逐渐升高,此外,和肌红蛋白一样,年老、锻炼会增加H-FABP 浓度。
二,临床应用1.诊断急性冠脉综合征H-FABP 血浆释放特点与肌红蛋白( myoglobin,Mb) 相同,但HFABP在心肌细胞内的含量高于Mb,而在血浆内的含量远低于Mb。
因此,当心肌损伤后,血浆H-FABP迅速升高超正常上限,比Mb 和肌钙蛋白来得快,因而更有诊断价值。
近年来众多研究表明血清H-FABP 能识别超急期急性心肌梗死,特别是胸痛发病6 h 内的患者,对决定是否住院、冠状动脉造影、介入治疗有很大帮助。
陶日新等【2】就研究了cTnI和h-FABP诊断心梗的比较,结果证实:对于胸痛发作6h内的AMI患者,H—FABP的诊断敏感性最高,达到78.26%。
而在胸痛发作超过6h的AMI患者中,cTnI检测的诊断敏感性有显著的上升,均达到了93.33%,所以可以对AMI进行确诊。
急性心肌梗死中的心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的检测
何广武;姜惠君
【期刊名称】《医学理论与实践》
【年(卷),期】2004(17)12
【摘要】目的:在确诊急性心肌梗死时,确定H-FABP最佳检测时间.方法:通过检测各个时间段心肌梗死患者血清中H-FABP的浓度,确立检测最佳时间.结果:心肌梗死患者胸痛3h后, H-FABP浓度显著升高;胸痛6h后,H-FABP浓度达到最大值.结论:患者胸痛3h后,H-FABP浓度可以提供给临床医生进行诊断,而且具有较高的灵敏性和特异性.
【总页数】2页(P1370-1371)
【作者】何广武;姜惠君
【作者单位】南京医科大学药学院,江苏省南京市,210029;南京医科大学药学院,江苏省南京市,210029
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.心型脂肪酸结合蛋白与肌红蛋白联合检测在急性心肌梗死早期诊断中的价值 [J], 胡娟玉;李礼
2.床旁快速检测心型脂肪酸结合蛋白在老年急性心肌梗死早期诊断中的价值 [J], 宋乐;邓至;姚晨玲;胡予;童朝阳
3.心型脂肪酸结合蛋白与高敏肌钙蛋白T联合检测在急性心肌梗死早期诊断中的价
值 [J], 陈东豪;廖序东
4.血清缺血修饰白蛋白与心型脂肪酸结合蛋白联合检测在急性心肌梗死患者中的临床应用价值 [J], 张蕾;黄丽敏;廖国平
5.心型脂肪酸结合蛋白和钙卫蛋白联合检测在ST段抬高型急性心肌梗死中的应用价值 [J], 朱家平;严能兵
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人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
厦门慧嘉生物科技有限公司
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)水平。
用纯化的人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP),再与HRP标记的H-FABP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)浓度。
试剂盒组成:
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/
分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备
用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上
进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为900ng/L,600ng/L ,300ng/L,150ng/L,75ng/L)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
0.312 ng/ml-20 ng/ml
灵敏度:
0.078 ng/ml
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2..有效期:6个月。