实验一斜面培养基制作-课件

细菌的培养实验报告斜面培养基细菌的培养实验报告斜面培养基。

这个可以用于，平板培养，加盖，灭菌这几点来做吧！一般都会采取自然干燥或者是高压蒸汽灭菌等方式，但是相对来说都不是特别适合用于斜面培养。

因为这样有时候会影响到底物分布和菌落形成情况。

最好还是用高温高压灭菌法比较好一些！每个培养皿中放入四只菌种，分别注明名称，数量。

按照常规配置的酸碱度进行分装。

大多都是在经过高压灭菌后备用的。

其他就是如果选择水平仪培养箱的话，记得调整温度计读书，大概是32-35度左右吧。

当然了我们都知道细菌生长最佳温度为25-30度，并且，实际操作中，将细胞密度保持在10x10*0.3-0.5 mL 之间的最佳范围内，是提升细胞密度的关键。

所以，只需要每天进行调节即可。

把一支菌液接种至少十六支相同大小的平板上（选择菌株编号末尾是1的作为模板）。

并使之均匀混合，之后便放入培养箱中进行培养。

日常管理主要就是观察和清洁两部分。

不同培养皿需不定期更换平板位置，否则容易造成污染而导致细菌死亡。

总结下来就是消毒。

灭菌。

培养。

这三步骤。

我觉得消毒是最重要的。

也是必须做的。

希望你能采纳。

那么在开始接种之前呢？肯定就是先要对我们使用的器材设备进行消毒啦。

准备好培养皿、三角瓶等器具。

通过专业的测试温度与湿度的工具（通常是烤箱）或是其它科学仪器进行恒温恒湿的预热处理。

再将平皿装满冷却至室温的细菌悬浮液，以待正式接种。

至此细菌菌种制备完毕。

下面就是细菌菌种的分离培养环节。

首先要进行的是消毒工作。

原则上要求严格无菌操作。

才能确保实验结果的精确性。

目标菌的挑取:把从显微镜载玻片挑取出的子实体直接转接到试管斜面上，接种数量大约在10x10*0.2-0.3μm 之间。

之后便进行密封培养，第一次菌液接种应该在培养皿倒扣过夜后进行。

而后边摇晃平板，让沉降到最下层的菌膜能够被充分摇散，使之尽快达到融合状态。

继续密封培养两天。

斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。

其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。

2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。

定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。

要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。

这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。

棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。

若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。

如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。

在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。

将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。

冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。

当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。

打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。

2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。

斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。

其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。

2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。

定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。

要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。

这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。

棉塞的制作方法见下图2.图2-a 图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。

若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。

如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。

在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。

将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。

冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。

当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。

打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。

2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。

斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。

对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

2、配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。

并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。

用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

4、分装已过滤的培养基应进行分装。

如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。

如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。

分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。

一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。

每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。

5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。

堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。

棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与拇指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。

棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。

项目1 配制斜面培养基微生物同其他生物一样，需要不断从外界吸收营养物质，经过一系列的生物化学作用，获得能量并形成新的细胞物质、代谢产物，同时排出副产物及废物。

不同的微生物对营养物质的需求也不一样。

培养基就是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料，当然，除此之外，培养基也为微生物等提供合适的生长环境条件。

常用的培养基都必须满足或符合一些基本要求，包括含有作为合成细胞成分的原料、满足生化反应的条件、一定的pH等。

因此，培养基的组成和配比是否恰当对微生物等的生长、繁殖、产物的形成、提取分离工艺的选择、产品质量和产量等都有很大的影响。

优良的培养基可以充分发挥微生物细胞的生物合成能力，产生最好的效果。

1 基础知识1.1 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物1.1.1 微生物细胞的化学组成微生物营养物质的确定，主要依据细胞的化学组成及所代谢产物的化学组成。

因此，分析微生物细胞的化学组成是了解微生物营养的基础。

表1-1列出了几种微生物细胞的化学组成。

由表可知，微生物细胞含有80％左右的水分和20％左右的干物质，它主要是由碳、氢、氧、氮等元素组成，约占全部干物质的90％～97％，此外，还含有各种无机矿物质。

而在微生物细胞的干物质中，碳约占45％～55％；氮在细菌和酵母中含量较高，约占7％～13％，在霉菌中含量较低，约占5％。

一般来说，碳和氮在微生物细胞化学组成中的比例大约为5：1。

而无机矿物质约占全部干重的3％～10％，其中以磷的含量最高，大多数微生物细胞中磷的含量可达全部灰分的50％，其次是钾、镁、钙、硫、钠等，铁、锌、锰、硼、钼、硅等的含量极微。

1.1.2 微生物胞外代谢产物微生物在生长过程中，除利用外源营养物质合成新的细胞外，还会产生一些有机化合物分泌到微生物的体外，这些胞外代谢产物的种类繁多，且因微生物的种类而异。

因此，了解这些代谢产物的化学组成，极有助于微生物培养时的营养物质的选择和代谢产物的积累。

斜面培养基菌悬液的制备方法嘿，朋友们！今天咱就来讲讲斜面培养基菌悬液的制备方法，这可是个有趣又重要的事儿呢！咱先得准备好需要的东西呀，就像战士上战场得有趁手的兵器一样。

那得有斜面培养基，这可是菌儿们的“家”呀，还有接种环，这就是咱的“小魔杖”啦。

然后呢，从保藏的斜面培养基上挑取适量的菌落，这就好比从一群小伙伴里挑出最棒的那个。

这时候可得小心点，别把那些菌儿们弄疼了呀！把挑取的菌落放到装有适量无菌生理盐水的试管里，哎呀呀，这就像是给菌儿们换了个更大的活动空间。

接下来，咱得把这个试管好好晃晃，让菌儿们在里面均匀分布，就像让它们在里面尽情跳舞一样。

可别小看这一步哦，要是晃得不匀，那可就麻烦啦！晃好之后，这菌悬液不就初步形成了嘛。

但是别急呀，这还不够完美呢！咱还得检查检查，看看这菌悬液的浓度合不合适。

如果太浓了，就像汤太咸了一样，那可不行；要是太稀了，又好像没味道的汤，也不行呀。

要是浓度不合适咋办呢？那咱就得调整调整呗。

可以再加点菌呀，或者再加点生理盐水呀，直到咱觉得满意为止。

你说这斜面培养基菌悬液的制备像不像做饭呀？得掌握好各种调料的比例，才能做出美味的菜肴。

咱这也是一样，得精心准备，才能得到好用的菌悬液呀。

想象一下，如果咱没做好这一步，后面的实验不就都受影响啦？就像盖房子没打好地基一样，那可不行呀！所以呀，咱可得认真对待，别马虎哟！反正呀，我觉得这斜面培养基菌悬液的制备虽然不难，但也得用心去做。

就像生活中的很多小事一样，看似简单，实则需要我们认真对待。

只有这样，才能把事情做好，不是吗？这就是我对斜面培养基菌悬液制备方法的理解，希望对大家有帮助呀！原创不易，请尊重原创，谢谢!。

斜面培养基的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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以下是斜面培养基的操作流程：一、准备工作1. 准备所需的材料和设备，包括培养基原料、蒸馏水、三角瓶、玻璃棒、培养皿、灭菌锅等。

斜面培养基制作方法(仅供参考)1斜面培养基斜面培养基（agarslantculture-medium ）：固体培养基（solid culture medium ）的一种形式；制作时应趁热定量分装于试管内，并凝固成斜面的称为斜面培养基，用于菌种扩大转管及菌种保藏。

其制作流程图如下图1.图12操作要点倒入培养基的体积以试管1/4左右为宜，斜面的长度不超过试管的一半，一般用15 ×150mm 试管，其容量为5ml。

2.1定型棉塞将制作松紧适宜的棉塞塞进试管，然后放进鼓风的干热灭菌箱中于160℃定型2小时。

定型后切记不能立即打开干热灭苗箱，否则棉塞易燃烧。

要让其冷至100℃以下才能打开，接近室温打开更理想。

这样制作的棉塞，便于培养基分装及接种，还有利于减少污染。

棉塞的制作方法见下图2.图2-a图2-b2.2分装试管将配制好的培养基按常规方法分装试管，在此过程中切勿将培养基沾到度管上部。

若沾到上部，一是影响试管的外观，二是易污染棉塞。

如下图3.图32.3捆扎试管管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包扎。

在包装纸上标明培养基名称，制备组别和姓名、日期等。

如下图4.图42.4灭菌将手提式高压锅内的水换成干净的自来水，水按要求加入，不能过多。

将捆成把的试管立放装进高压锅的内桶中，在试管顶上放适量棉花使之成凸形，再在上面盖上一层牛皮纸，盖上盖进行高压灭菌，在灭苗放冷气的过程中，要尽量慢，以免减压过快，培养基沸腾，打湿棉塞。

冷气放彻底后，待压力达到灭苗要求时，稳压一定时间（培养基种类不同，灭苗时间要求不一样）。

当达到灭菌时间后、最好让压力自然下降至零时再打开高压锅。

打开高压锅时，移去试管上面的牛皮纸和棉花，然后盖上锅盖，并使锅留一条缝隙，让锅内余热烘干棉塞。

2.5摆斜面试管内的凝聚水主要是高温游离水在培养基凝固过程中遇外界温差过大形成的凝结水和摆放斜面时没有足够的热量烘干棉塞上的水分所致，要摆出高质量的斜面试管，必须在培养基凝固过程中避免温差过大，让其缓慢降温，使高温施离水被培养基所吸收，摆出的斜面才不会出现湿棉塞。

斜面培养基的制作方法斜面培养基相对和并列的概念是：平面培养基、高层培养基。

固体培养基倒在培养皿内，凝固成平面的称为平板培养基，用于菌种分离及研究菌类的某些特性；分装在试管内，直立凝固而制成的称为高层培养基，这样接入菌种后虽然发育的面小了一点，但培养基的厚度增大，营养丰富，时间长些也不容易干燥、开裂，常用于保存菌种。

1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，zui后补足所需水分。

对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。

并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

2、调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。

用纱布过滤时，zui好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

4、分装已过滤的培养基应进行分装。

如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。

如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。

分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。

一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。

每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。

5、加棉塞分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。

堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。

棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

一、实验目的1. 掌握斜面培养基的制备方法。

2. 了解斜面培养基在微生物培养中的应用。

3. 熟悉斜面培养基的接种方法。

二、实验原理斜面培养基是一种固体培养基，其主要成分是琼脂。

琼脂是一种天然的多糖，具有良好的生物相容性和生物降解性，可以提供微生物生长所需的营养物质。

斜面培养基在微生物培养中主要用于菌种扩大、纯化和保藏。

三、实验材料1. 琼脂：2.0g2. 蒸馏水：100mL3. pH试纸4. 灭菌锅5. 灭菌接种环6. 微生物培养箱7. 试管四、实验步骤1. 配制培养基：称取2.0g琼脂，加入100mL蒸馏水，搅拌均匀后煮沸，使琼脂完全溶解。

用pH试纸测试培养基的pH值，如不符合要求，可用10%HCl或10%NaOH 进行调节。

2. 灭菌：将配制好的培养基分装到试管中，每管约10mL。

将试管口用棉花塞住，放入灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌，压力为0.11MPa，灭菌时间为15分钟。

3. 冷却：将灭菌后的试管取出，待培养基冷却至约60℃时，进行斜面接种。

4. 接种：用灭菌接种环挑取适量菌种，从培养基底部向上划一道直线，然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上。

5. 培养：将接种后的试管放入微生物培养箱中，培养温度为37℃，培养时间为24小时。

五、实验结果与分析1. 成功制备斜面培养基，培养基呈透明状，表面光滑。

2. 接种后的斜面培养基上出现了明显的菌落，说明菌种已成功接种。

3. 通过观察菌落形态、颜色和生长速度，可以初步判断菌种的特征。

六、实验总结1. 本实验成功制备了斜面培养基，并掌握了斜面培养基的接种方法。

2. 斜面培养基在微生物培养中具有重要作用，可以用于菌种扩大、纯化和保藏。

3. 在进行斜面培养基实验时，应注意以下几点：a. 培养基的配制要准确，避免误差；b. 灭菌过程要严格，确保培养基的无菌性；c. 接种时要避免污染，保证菌种的纯度。

七、实验反思1. 在本实验中，我掌握了斜面培养基的制备方法，提高了自己的实验技能。