实验一斜面培养基制作-课件
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项目1 配制斜面培养基微生物同其他生物一样,需要不断从外界吸收营养物质,经过一系列的生物化学作用,获得能量并形成新的细胞物质、代谢产物,同时排出副产物及废物。
不同的微生物对营养物质的需求也不一样。
培养基就是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料,当然,除此之外,培养基也为微生物等提供合适的生长环境条件。
常用的培养基都必须满足或符合一些基本要求,包括含有作为合成细胞成分的原料、满足生化反应的条件、一定的pH等。
因此,培养基的组成和配比是否恰当对微生物等的生长、繁殖、产物的形成、提取分离工艺的选择、产品质量和产量等都有很大的影响。
优良的培养基可以充分发挥微生物细胞的生物合成能力,产生最好的效果。
1 基础知识1.1 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物1.1.1 微生物细胞的化学组成微生物营养物质的确定,主要依据细胞的化学组成及所代谢产物的化学组成。
因此,分析微生物细胞的化学组成是了解微生物营养的基础。
表1-1列出了几种微生物细胞的化学组成。
由表可知,微生物细胞含有80%左右的水分和20%左右的干物质,它主要是由碳、氢、氧、氮等元素组成,约占全部干物质的90%~97%,此外,还含有各种无机矿物质。
而在微生物细胞的干物质中,碳约占45%~55%;氮在细菌和酵母中含量较高,约占7%~13%,在霉菌中含量较低,约占5%。
一般来说,碳和氮在微生物细胞化学组成中的比例大约为5:1。
而无机矿物质约占全部干重的3%~10%,其中以磷的含量最高,大多数微生物细胞中磷的含量可达全部灰分的50%,其次是钾、镁、钙、硫、钠等,铁、锌、锰、硼、钼、硅等的含量极微。
1.1.2 微生物胞外代谢产物微生物在生长过程中,除利用外源营养物质合成新的细胞外,还会产生一些有机化合物分泌到微生物的体外,这些胞外代谢产物的种类繁多,且因微生物的种类而异。
因此,了解这些代谢产物的化学组成,极有助于微生物培养时的营养物质的选择和代谢产物的积累。
斜面培养基的制作方法
斜面培养基是一种常用于细菌培养的培养基。
它的特点是表面呈斜面形状,使得细菌在培养过程中能够自然地向上生长。
这样可以使得细菌在培养过程中更容易被观察和检测。
制作斜面培养基的方法如下:
1.准备所需的原料:培养基粉末、蒸馏水、烧杯、烧杯架、烧瓶、
温度计、制备烧瓶的抗菌膜。
2.将培养基粉末加入蒸馏水中,按照说明书上的比例进行配制。
一
般情况下,每克培养基粉末需要加入50-100毫升的蒸馏水。
3.将配制好的培养基倒入烧杯中,用烧杯架将烧杯放在烧瓶中。
4.用温度计测量培养基的温度,当培养基温度降到40-50°C时,放
入制备好的抗菌膜。
5.将烧瓶盖上,并在烧瓶上方用胶带粘贴一个斜面模板。
6.将烧瓶放置在37°C的恒温槽中,使培养基保持在37°C的温度
下进行培养。
7.在培养过程中,定期观察细菌的生长情况,并记录下来。
斜面培养基的制备1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。
2、配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化。
并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4、分装已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。
分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12~15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基,一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与拇指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。
项目1 配制斜面培养基微生物同其他生物一样,需要不断从外界吸收营养物质,经过一系列的生物化学作用,获得能量并形成新的细胞物质、代谢产物,同时排出副产物及废物。
不同的微生物对营养物质的需求也不一样。
培养基就是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成所需产物的营养物质和原料,当然,除此之外,培养基也为微生物等提供合适的生长环境条件。
常用的培养基都必须满足或符合一些基本要求,包括含有作为合成细胞成分的原料、满足生化反应的条件、一定的pH等。
因此,培养基的组成和配比是否恰当对微生物等的生长、繁殖、产物的形成、提取分离工艺的选择、产品质量和产量等都有很大的影响。
优良的培养基可以充分发挥微生物细胞的生物合成能力,产生最好的效果。
1 基础知识1.1 微生物细胞的化学组成及胞外代谢产物1.1.1 微生物细胞的化学组成微生物营养物质的确定,主要依据细胞的化学组成及所代谢产物的化学组成。
因此,分析微生物细胞的化学组成是了解微生物营养的基础。
表1-1列出了几种微生物细胞的化学组成。
由表可知,微生物细胞含有80%左右的水分和20%左右的干物质,它主要是由碳、氢、氧、氮等元素组成,约占全部干物质的90%~97%,此外,还含有各种无机矿物质。
而在微生物细胞的干物质中,碳约占45%~55%;氮在细菌和酵母中含量较高,约占7%~13%,在霉菌中含量较低,约占5%。
一般来说,碳和氮在微生物细胞化学组成中的比例大约为5:1。
而无机矿物质约占全部干重的3%~10%,其中以磷的含量最高,大多数微生物细胞中磷的含量可达全部灰分的50%,其次是钾、镁、钙、硫、钠等,铁、锌、锰、硼、钼、硅等的含量极微。
1.1.2 微生物胞外代谢产物微生物在生长过程中,除利用外源营养物质合成新的细胞外,还会产生一些有机化合物分泌到微生物的体外,这些胞外代谢产物的种类繁多,且因微生物的种类而异。
因此,了解这些代谢产物的化学组成,极有助于微生物培养时的营养物质的选择和代谢产物的积累。
斜面培养基菌悬液的制备方法嘿,朋友们!今天咱就来讲讲斜面培养基菌悬液的制备方法,这可是个有趣又重要的事儿呢!咱先得准备好需要的东西呀,就像战士上战场得有趁手的兵器一样。
那得有斜面培养基,这可是菌儿们的“家”呀,还有接种环,这就是咱的“小魔杖”啦。
然后呢,从保藏的斜面培养基上挑取适量的菌落,这就好比从一群小伙伴里挑出最棒的那个。
这时候可得小心点,别把那些菌儿们弄疼了呀!把挑取的菌落放到装有适量无菌生理盐水的试管里,哎呀呀,这就像是给菌儿们换了个更大的活动空间。
接下来,咱得把这个试管好好晃晃,让菌儿们在里面均匀分布,就像让它们在里面尽情跳舞一样。
可别小看这一步哦,要是晃得不匀,那可就麻烦啦!晃好之后,这菌悬液不就初步形成了嘛。
但是别急呀,这还不够完美呢!咱还得检查检查,看看这菌悬液的浓度合不合适。
如果太浓了,就像汤太咸了一样,那可不行;要是太稀了,又好像没味道的汤,也不行呀。
要是浓度不合适咋办呢?那咱就得调整调整呗。
可以再加点菌呀,或者再加点生理盐水呀,直到咱觉得满意为止。
你说这斜面培养基菌悬液的制备像不像做饭呀?得掌握好各种调料的比例,才能做出美味的菜肴。
咱这也是一样,得精心准备,才能得到好用的菌悬液呀。
想象一下,如果咱没做好这一步,后面的实验不就都受影响啦?就像盖房子没打好地基一样,那可不行呀!所以呀,咱可得认真对待,别马虎哟!反正呀,我觉得这斜面培养基菌悬液的制备虽然不难,但也得用心去做。
就像生活中的很多小事一样,看似简单,实则需要我们认真对待。
只有这样,才能把事情做好,不是吗?这就是我对斜面培养基菌悬液制备方法的理解,希望对大家有帮助呀!原创不易,请尊重原创,谢谢!。