中国畜牧兽医２０ｌｏ年第３７卷第２期疾病防治・１８５・猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒２型与猪巴氏杆菌病混合感染的诊断和控制黄小波１。
刘伍梅２。
曹三杰１。
文心田１（１．四川农业大学动物医学院，动物传染病与基因芯片室，雅安６２５０１４；２．四川农业大学资源与环境学院，雅安６２５０１４）摘要：２００８年９月，四川龙泉某猪场发生以高热、呼吸困难为主要特征的高热病，经流行病学调查、临床诊断结合实验室病原学检查，确诊该疫情是由猪繁殖与呼吸综合征，猪圆环病毒２型与猪巴氏杆菌病的混合感染引起。
药敏试验结果显示，巴氏杆菌对阿米卡星、阿奇霉素、环丙沙星等药物高度敏感。
用敏感抗生素配合自家组织苗控制了本次疫情。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒；猪圆环病毒２型；巴氏杆菌；诊断，控制中图分类号：￥８５８．２８文献标识码：Ｂ文章编号：１６７卜７２３６（２０１０）０２—０１８５—０３猪高热病是养猪生产中较多发的一大类疫病，其是由多种病毒、细菌、寄生虫等病原或饲养管理差、猪群应激等因素引起的一种以猪高热为主要特征的综合征，临床上通常将其称为“高热病”、“无名高热”、“无名高热综合征”等，如２００６年较大范围发生的猪高热病，后经证实是由高致病性猪繁殖与呼吸综合征为主的多种病原混合感染引起的复杂疫情。
该病发生广、发病率高、死亡率高、治愈率低，给养猪业造成了较大的经济损失。
２００８年９月，四川龙泉某猪场发生了一起以高热、呼吸困难、跛行为主要特点的猪病，经使用多种治疗药物效果不明显，猪发病率在５０％以上，死亡率高达８０％，是一起典型的猪高热病。
为了确诊引发本次猪高热病的病因和探求有效的防制方法，笔者进行了系统的实验室病原学诊断，并采取了针对性的控制措施，取得了理想的控制效果。
１发病情况某商品猪场养殖规模为７００头，常年从周边各地购买断奶仔猪育肥。
该场平时使用政府提供的猪瘟脾淋苗进行了猪瘟免疫，但未进行其他猪病疫苗免疫。
发病前１周从周边眉山地区购进３００头断奶仔猪，断奶仔猪于购进后第３天开始发病，并迅速蔓延至全群，表现为猪皮肤发红、呼吸困难、高烧等主要特点。
已使用氟苯尼考、头孢噻呋钠、强力霉素、黄芪多糖注射液、林可霉素等多种药物治疗，效果收稿日期：２００９—０８—０３作者简介：黄小波（１９７６一），男，重庆人，博士．副教授，主要从事动物传染病教学与科研。
基金项目：教育部创新团队项目（ＩＲＴ０８４８）。
不明显，用药后能暂时控制体温，但很快反弹，送检时已死亡猪２０余头。
类似疫情附近猪场也时有发生。
２临床症状病猪精神沉郁，食欲下降或废绝，体温４１～４２℃，呼吸急促，偶有咳嗽和喘气，喜卧打堆，流清鼻涕，眼分泌物增多，被毛粗乱、消瘦，全身皮肤发红，尤以四肢末端、鼻部、尾部和腹底部明显，后期皮肤发绀，发红或发紫，便秘，呈球状，尿少而黄，部分猪后肢关节肿大，步态略显僵硬。
３剖检病变前肢腕关节关节液增多，呈淡黄色或黄色，后肢跗关节淡黄色积液，或有胶冻样渗出物及白色化脓；腹股沟淋巴结、髂下淋巴结、下颌淋巴结、肠系膜淋巴结肿大，腹股沟淋巴结呈灰白色，下颌淋巴结有出血、坏死；肠道充血、出血，胃黏膜严重出血；脾肿大、变形，边缘变薄卷起，颜色变深（紫黑色），表面有白色坏色灶；肾脏严重变形，表面有针尖大小出血点，肾髓质出血，有较多炎性液体；肝脏轻度肿大，有灰白色坏死点；肺轻度萎缩，呈花斑样，褐色、灰白色、黄色等相间，有肉变和坏死，支气管内充满白色黏稠的脓液；喉头出血，并见有多量气泡，心包积液（图１～４）。
４实验室诊断４．１病毒学诊断取２头病死猪的肺、脾、淋巴结，反复剪碎，加少量ＰＢＳ液反复研磨，再反复冻融３次，１００００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ，取上清液提取病毒核酸，以ＲＴ－ＰＣＲ检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪乙型脑炎病毒，以ＰＣＲ检测猪伪狂犬病万方数据・１８６・疾病防治中国畜牧兽医２０１０年第３７卷第２期病毒、猪圆环病毒２型，结果显示，两头猪均为猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒双阳性，其他病毒检测为阴性。
图ｌ肺部轻度萎缩，里花斑样圈２支气管内有黏稠脓液图３肠系膜淋巴结肿大图４胃黏膜严重出血并有溃疡４．２细菌学诊断４．２．１触片镜检取病猪的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结切面压片，固定后革兰氏染色镜检，在肺脏和肾脏可见到少数两极染色的短小杆菌。
４．２．２细菌分离鉴定无菌取心包液、心、肝、脾、肺、肾、淋巴结接种于普通平板、兔鲜血琼脂平板和ＴＳＡ平板，３７℃培养２４ｈ，在兔鲜血琼脂平板和ＴＳＡ平板中长出细菌，菌落呈现灰白色，无溶血，经革兰氏染色为阴性，瑞士染色为两极浓染短杆菌，鉴定为巴氏杆菌。
４．２．３致病性试验挑取单个菌落接种ＴＳＢ肉汤增菌培养，取０．２ｍＬ腹腔注射２只小白鼠，均于１８ｈ死亡，表明该细菌具有较强的致病性。
４．２．４药敏试验吸取适鼍ＴＳＢ肉汤增菌培养菌液，涂布于鲜血平板，采用纸片法对菌必治、复方新诺明、庆大霉素、先锋霉素Ｖ等１２种药物进行药敏试验，于３７℃培养２４ｈ测定抑制菌圈直径大小。
根据判定标准（抑菌圈直径（ｄ）＞２０ｍｍ为极敏感；１５ｍｍ≤ｄ≤２０ｍｍ高敏；１０ｍｍ≤ｄ≤１４ｍｍ为中敏；ｄ＜１０ｍｍ为低敏感；ｄ＝０ｍｍ为不敏感），巴氏杆菌对阿奇霉素、阿米卡星、环丙沙星极敏感，对庆大霉素、诺氟沙星、恩诺沙星高敏；对强力霉素和菌必治中敏；对先锋霉素Ｖ低敏；对复方新诺明和洁霉素不敏感（表１）。
表ｌ抗生素药敏结果抗生素直径（ｍｍ）抗生索直径（ｍｍ）抗生素直径（ｍｍ）５弓形体与附红细胞体的诊断５．１弓形体的诊断取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结切面压片，经甲醇固定后，经姬姆萨染色，观察未见弓形体。
５．２附红细胞体取发热猪耳尖血液，加生理盐水后做血液推片，镜下观察未见附红细胞体。
６控制措施结合发病情况、临床症状、剖检病变和实验室检测，诊断为猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒２型与猪巴氏杆菌病的混合感染。
根据病原检测和药敏试验结果，以清热退烧、抗病毒、抗菌和增强免疫力为治疗原则，采取综合防制措施。
６．１治疗①注射用药：迅速隔离病猪，以药物组方（清开灵注射液＋环丙沙星＋ＶＣ＋ＶＢ。
＋复方柴万方数据中国畜牧兽医２０１０年第３７卷第２期疾病防治・１８７・胡注射液），按说明剂量注射，连续３～４ｄ，同时配合注射自家组织苗（选病变典型的肺、脾、淋巴结制作），仔猪４ｍＬ／头，成年猪６～８ｍＬ／头；②饲料加药：每吨饲料添加强力霉素３００ｇ、小苏打５００ｇ、黄芪多糖粉１０００ｇ，全群饲喂１周；③饮水加药：饮水中添加葡萄糖、电解多维和环丙沙星，全群猪自由饮水。
６．２加强饲养管理和卫生消毒工作①加强消毒和无害化处理：全场每天消毒２～３次，对猪舍内外进行全面的清扫消毒，猪舍内还进行空气喷雾消毒，病死猪深埋无害化处理。
②改善饲养环境，降低饲养密度，加强猪舍通风，提供足量清洁饮水，减少猪群应激。
疫情稳定后，所有从外地购进的猪补充接种猪瘟疫苗８头份。
经采取以上治疗措施后，第３天部分猪精神好转，体温下降，逐渐恢复食欲，１周后大部分病猪好转，２周后全群完全恢复正常。
７小结与讨论发热是指猪体在“内生性致热原”的刺激下引起调节性体温升高的一种防御适应性反应，发热是许多疾病尤其是传染病和炎症性疾病过程中最常伴发的一种临床症状，引起猪发生高热的病毒性疾病常有猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪圆环病毒２型，细菌性疾病常有巴氏杆菌病、猪传染性胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌病、猪链球菌病、大肠杆菌病、沙门氏菌病及弓形体病、附红细胞体病等，猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒常是引起高热病的原发性病原。
临床上遇到以高热为特征的复杂猪病，首先要进行科学诊断，清楚发病原因后，再采取针对性控制，以减少治疗误区和降低治疗成本。
猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒是两种较严重的可引起猪免疫抑制的病毒，均可破坏猪群的免疫系统，导致大量细菌的继发感染，使猪群死亡率大大增加。
目前控制两种疫病的疫苗效果并不理想，因此本次采取控制措施时制作了自家组织苗，配合敏感抗生素进行控制，证明具有较明显的控制效果。
在治疗高热病中，合理使用清开灵等中药，可清热解毒，化痰通络，醒神开窍，有利于病猪的治疗，同时合理使用ＶＢ，、ＶＣ，具有很好的辅助治疗作用。
同时，在猪群治疗过程中降低饲养密度，加强护理等措施也非常重要。
为防止和减少猪高热病造成的损失，一定要树立“管重于防，防重于治，综合防制”的疫病控制理念，高度重视和做好以下综合性防制措施：①加强饲养管理，减少猪群应激，尽量做到各生产环节的“全进全出”。
②高度重视猪场的环境控制，减少病原横向传播几率；③切实将猪场的生物安全落到实处，坚持严格的隔离、消毒、杀虫、灭鼠、灭蝇，防止飞鸟，杜绝外来人员参观访问等制度；④搞好重大猪病的免疫预防和免疫监测，许多养殖户对当前猪病的整体形式不够了解，许多只重视猪瘟免疫，而尚未对猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征等疫病的防制引起重视，同时对免疫监测的重要性认识不够。
⑤可在疫病多发阶段，适当辅助药物预防。
瘤胃纤维分解茵对钙离子需要量的研究Ｍ．Ｓ．Ｍｏｒａｌｅｓ等著康海英摘译臧长江校摘要：产琥珀酸丝状杆菌、黄色瘤胃球菌和白色瘤胃球菌３种主要的瘤胃优势纤维分解菌表现出对Ｃａ２＋的需要。
本试验评价了Ｃａ２＋在纤维分解菌生长和纤维素降解中的作用。
采用最大生长量或生长率、降解度和延滞时间为评价标准确定Ｃａ２十的需要量。
除了产琥珀酸丝状杆菌Ａ３ｃ，其它菌群在无Ｃｄ＋的培养基中重复接种都不能生长。
随着纤维二糖培养基中Ｃａ”浓度的增加，产琥珀酸丝状杆菌Ａ３ｃ的生长速率加快，滞后时间减慢，而产琥珀酸丝状杆菌￥８５的最大生长量和生长率都有所增加。
瘤胃球菌在纤维二糖培养基中以上检测指标都没有变化。
在以纤维素作为唯一底物的培养基中，两种产琥珀酸丝状杆菌都表现出对Ｃａ２＋的绝对需要。
菌株Ａ３ｃ的需要量为０．３６～０．４２ｍｇ／ｋｇ，菌株￥８５的需要量大于０．６４ｍｇ／ｋｇ。
当Ｃａ２＋浓度增加时，所有瘤胃球菌菌株对纤维素的降解率都增加，然而，瘤胃球菌在无Ｃａ”存在的培养基中与产琥珀酸丝状杆菌添加Ｃａ”对纤维素的降解率相似。
虽然瘤胃球菌组成中可能需要Ｃａ２＋以降解纤维素，但本研究中没有得到证明。
尽管Ｃａ２＋在黄色瘤胃球菌降解纤维素中作用还不知道，但有可能与纤维素酶的分泌和活化有关。
根据对瘤胃中Ｃａ２＋浓度的报道，体内这种菌可能不会出现Ｃａ２＋缺乏。
关键词：Ｃａ２＋的需要量；纤维分解菌；瘤胃（原栽：ＪＤａｉｒｙＳｃｉ，２００９，９２：５０７９—５０９１．ｄｏｉ：１０．３１６８／ｊｄｓ．２００９—２１３０）万方数据。
