常规考马斯亮蓝染色试剂盒

考马斯亮蓝染色套装使用说明货号：P1305保存：室温保存，至少一年有效。

规格：100ml+500ml产品简介：本考马斯亮蓝染色套装(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western 转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

产品内容：考马斯亮蓝染色液100ml考马斯亮蓝脱色液500ml说明书1份使用方法：1、电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。

2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染色需4小时以上。

3、染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效果会略有影响。

4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。

注意事项：1.染色时间4小时以上效果最佳。

2.脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。

3.脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。

4.脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。

或制成干胶保存。

相关试剂：P1300-500考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液PC0020BCA蛋白浓度测定试剂盒PR1400低分子量蛋白MARKERPR1700预染次高分子量蛋白MARKERI1020IPTG溶液(50mg/ml)A101030%丙烯酰胺(29:1)T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒。

蛋白质含量测定具体操作——考马斯亮蓝法（南京建成，货号：A045-2）一、实验目的：样品蛋白质的含量测定（本实验为小鼠肝组织10%的组织匀浆上清液样本）二、测定的原理：蛋白质中有-NH3+基团，当棕红色的考马斯亮蓝显色剂加入蛋白质样品中，会发生络合反应，使溶液变成蓝色，通过吸光度的测定来计算蛋白质的含量。

三、实验材料a)仪器：紫外分光光度计、涡旋混匀器、比色皿、2mlEP管、5mlEP管、标记笔、b)试剂：考马斯亮蓝试剂盒、待测样品、双蒸水四、实验步骤a)将考马斯亮蓝试剂一贮备液：双蒸水=1:4进行配置，本实验需要75ml,即取出贮备液15ml和60ml的双蒸水进行试剂一应用液的配制，备用；b)蛋白质标准品从20℃冰箱中取出，融冻，暂时放在4℃冰箱保存；c)标记好25个2ml的EP管、5mlEP管，按顺序放好；准备好200ul和1000ul的移液器枪头d)将各10%的肝组织匀浆上清液从冰箱中取出，融冻，备用；e)将10%的肝组织匀浆上清配制成1%的肝组织匀浆上清，即使用移液器移取0.1ml放于对应的2mlEP管中，分别加入0.9ml的生理盐水，使用涡旋混匀器适当混匀各个组织匀浆；f)将处理后的样品按照下面的操作表，将200ul量程的移液器调至50ul,1000ul量程的调至1000ulg)待样品和标准品加完以后，使用涡旋混匀器混匀，静置10minh)准备好比色皿，和纸i)将紫外分光光度计的波长调至595nm，双蒸水调零，测定各管的吸光度。

j)根据公式：待测样品蛋白=测定管OD值−空白管OD值标准管OD值−空白管OD值∗标准品蛋白浓度五、注意事项a)此法灵敏度高，反应后的显色液可以在2个小时之内是稳定的；b)样本的蛋白浓度必须使用生理盐水稀释至1.3g/l以下，在该范围内呈线性关系；c)考马斯亮蓝法测定组织蛋白的组织匀浆的浓度一般在0.5%-2%；d)不可用石英比色皿，可用玻璃或塑料比色皿，测完成后立即用 95%乙醇冲洗使用完比色皿，使用95乙醇立马清洗比色皿，洗去显色剂；。

考马斯亮蓝染色一产品简介：本考马斯亮蓝染色试剂盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。

观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。

本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

二保存条件：室温保存，至少一年有效。

注意事项：可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。

本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

三使用说明：1. 常规染色脱色方法：a. 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。

b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。

注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。

凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。

凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。

通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。

染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。

c. 倒出染色液。

染色液可以回收重复使用至少2-3次。

d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。

e. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。

期间更换脱色液2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。

通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。

注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。

脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。

仅供科研版本号：170313考马斯亮蓝G250染料试剂【产品组成】【保存条件】室温,避光,3个月【产品概述】Bradford法是常用的蛋白浓度检测的方法，与传统方法相比，更简单、更稳定、兼容性更好。

Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。

样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，DTT的浓度可高达5mM。

但受高浓度的去垢剂的影响明显，故在用BradfordProteinAssayKit进行蛋白定量时，需确保SDS低于0.01%，TritonX-100低于0.05%，Tween20,60,80低于0.015%，含高浓度去污剂的蛋白定量，建议采用BCAProteinAssayKit。

考马斯亮蓝G250染料试剂由考马斯亮蓝G250、乙醇、磷酸组成，用于考马斯染料结合(Bradford)分析的总蛋白测量，其特点在于对蛋白样品中可能存在的大多数盐、溶剂、缓冲液、硫醇、金属螯合剂、还原性物质等均不排斥。

检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1～20μl，在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。

【使用方法】1、稀释蛋白标准(一般为BSA5mg/ml)使其终浓度为0.5mg/ml。

注意：蛋白样品在什么溶液中，蛋白标准也应用什么溶液稀释，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释蛋白标准。

2、将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20μl加到96孔板的蛋白标准孔中，加蛋白标准稀释液补足至20μl。

3、加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加标准品稀释液至20μl。

4、各孔加入200μl考马斯亮蓝G250染料试剂，室温放置3～5min。

5、酶标仪测定595nm波长处的吸光值，560~610nm之间的波长也可。

6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

【注意事项】1、待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也应溶解于什么样的稀释液中，否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************碧云天网站微信公众号网址：考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)产品编号产品名称包装P0017A 考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法) 1盒产品简介：本考马斯亮蓝染色试剂盒(Coomassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。

观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。

本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

包装清单：产品编号产品名称包装P0017A-1 考马斯亮蓝染色液100mlP0017A-2 考马斯亮蓝染色脱色液500ml—说明书1份保存条件：室温保存，至少一年有效。

注意事项：可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。

本染色液和脱色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：1.常规染色脱色方法：a.电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。

b.置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。

注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。

凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。

凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。

通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。

5×考马斯亮蓝G-250(蛋白定量用)货号：PC0015规格：100mL/500mL保存：开封使用后请密封保存，本试剂盒自订购之日起九个月内有效。

产品简介：考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm 变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。

Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween20,60,80低于0.06%。

自备试剂：PBS、BSA标准品(5mg/ml)操作说明：一．微孔酶标仪法1.完全溶解蛋白标准品，取10ul，稀释至250ul，使终浓度为0.2mg/ml。

待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。

但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

2.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。

3.将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。

4.将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。

由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。

6.用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。

7.根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

二．分光光度计法如无酶标仪，染色反应可在离心管中进行，反应液混匀后加入比色皿中，使用分光光度计测定吸光值。

Bradford法蛋⽩定量试剂盒使⽤说明书使⽤说明书◆Bradford法蛋⽩定量试剂盒◆⽬录号1902◆使⽤⼿册◆实验室使⽤，仅⽤于体外Bradford法蛋⽩定量试剂盒⽬录号：1902⽬录编号包装单位190201 250次190202 1000次190203 2500次试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存250次1000次2500次蛋⽩标准（5mg/mlBSA）-20℃0.5ml 1ml 3mlBradford染⾊液4℃50ml 200ml 500ml本产品收到后按照上⾯指⽰温度存放各成份，⾄少九个⽉内有效。

蛋⽩标准长期保存-20℃放置，常温运输。

产品介绍：Bradford法蛋⽩定量试剂盒是在世界上常⽤的蛋⽩浓度检测⽅法之⼀Bradford法基础上（考马斯亮蓝结合显⾊法）改进⽽成。

当Bradford染⾊液（考马斯亮蓝）和蛋⽩在酸性条件下结合时，最⼤吸光值波长⽴刻由465 nm转移⾄595nm，同时颜⾊由褐⾊转为蓝⾊，通过测定吸光值⼤⼩并对照标准蛋⽩的吸光值，推算出蛋⽩浓度。

产品特点：1.灵敏度⾼，检测浓度下限达到25µg/ml，最⼩检测蛋⽩量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。

2.检测速度极快，10-20个样品只需不⾜10分钟即可完成。

3.在50-1000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。

注意事项：1.Bradford染⾊液含有刺激性或者腐蚀性化合物，操作时要戴乳胶⼿套，避免沾染⽪肤，眼睛和⾐服。

若沾染⽪肤、眼睛时，要⽤⼤量清⽔或者⽣理盐⽔冲洗。

2.Bradford染⾊液中考马斯亮蓝易聚集成团，每次使⽤前请颠倒6-8次并且竖直抓住瓶⼝做⽔平划圈动作，旋转瓶中液体，帮助充分混匀，但不可以上下振荡混匀。

3.低温会降低Bradford染⾊液的敏感度，因此每次使⽤前应该使Bradford染⾊液回复到室温。

仅仅将需要的Bradford染⾊液复温，可以减少复温时间。

爱必信WB彩色凝胶试剂盒上新啦！
让您的WB实验多姿多彩
蛋白免疫印迹实验（Western Blot）实验大家肯定都不陌生，要想做出好看的条带，从制胶开始就不容半点马虎。

WB制胶可谓实验室新手的必修课了，想想小编我在当初实验室的时候，就没少帮师兄师姐配置WB凝胶，泛黄的配方表小编还记忆犹新。

WB凝胶配
方表
说起WB凝胶配置，小编可有一肚子苦水要倒，第一个让人头疼的一点就是多种溶液都需要计算量取，每次调移液器就要调半天。

还有各种试剂的保存条件也不一样，配胶之前还需要从冰箱，室温柜子里分别拿出不同的溶液。

这还不算，最容易出问题的促凝剂APS，需要新鲜配置，4度保存不能超过一周，关键是粉末还特容易吸水，打开后需要密封保存。

小编之前就踩过一次坑，APS粉末吸水结块，称量配置后的APS含量不够，凝胶凝结不好，整个WB实验条带跑的七扭八歪。

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