人幽门螺杆菌IgG(HPIgG)酶联免疫分析(ELISA)

幽门螺杆菌的鉴定分析关键词幽门螺杆菌鉴定分析幽门螺杆菌(Hp)是从胃黏膜中分离出的幽门弯曲菌(CP)。

幽门螺杆菌在胃黏膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。

在固体培养基上生长时，除典型的形态外，有时可出现杆状或圆球状。

幽门螺杆菌是微需氧菌，环境氧要求5%～8%，在大气或绝对厌氧环境下不能生长。

细菌学检验检验人员必须第一时间与临床科室联系沟通，增加检验科与临床的沟通机会幽门螺杆菌是一种呈弧形，螺旋形或“S”形，革兰染色阴性，检验人员必须第一时间与临床科室联系沟通，增加检验科与临床的沟通机会。

微需氧菌，菌体两端钝圆，长4～5mm，直径0.5～0.7μm,有2～6根鞭毛，菌体有脂多糖，凝集素，并能分泌活性很高的脲酶，研究表明，Hp是慢性活动性胃炎的病原菌，并与消化性溃疡及胃癌关系密切。

形态学检查：将采集的胃活检标本制成薄片，染色后镜检，发现阳性标本，作出初步诊断。

Hp的染色方法很多，就各种染色法对Hp检验的敏感性，特异性等，国内外有诸多报道，其中HE染色使Hp呈淡红色，敏感性较低，常用的Gram染色法，其方法简易，且组织印片，切片均可使用，敏感性较高，但易与革兰阴性杆菌混淆，是其缺点。

Warthin-Starry镀银染色，上皮细胞核呈棕黄色，而Hp呈黑色，易于辨认；灵敏度及特异性均达95%左右，但其操作繁琐，要求技术熟练度高，价格贵，耗时长等大大限制了了其应用。

而石炭酸复红染色使Hp呈深红色，背景淡红色，易辨认，与培养法相比，特异性100%，预测值100%，敏感性也达到了92%，该法简单价廉，快速，最适宜常规应用，还有Gimenez 染色，阿的平荧光染色，间接免疫荧光检查法，无标本标记PAP染色等应用于Hp检查的报道。

分离培养：细菌培养是确诊的依据，且又能进行药敏试验，虽然敏感性较低，但特异性100%，此外细菌培养也常用于对快速诊断的评估。

Hp的pH耐受范围4～10，培养基的pH 5.5～8.5均宜生长，最适生长温度35～37℃，27℃以下不能生长，气体环境温度5% O2，10% CO2，85% N2的环境下培养3～4天，阳性率较高。

钩端螺旋体IgM/IgG抗体检测试剂盒（酶免ELISA法）钩端螺旋体病简述：钩端螺旋体病简称钩体病。

此病主要由致病性、不同血清型的钩端螺旋体所引起的一种急性的自然疫源性疾病，其传染源主要是鼠和猪是两大类。

全世界各个地区几乎都有钩端螺旋体病的存在，而东南亚地区是重疫情灾区。

被钩端螺旋体感染的患者的临床症状表现为早期有高热，全身酸痛、结膜充血、表浅淋巴结肿大等钩体毒血症状;中晚期主要有肺出血，心肌炎、黄疸，肾炎、脑膜炎等器官损害表现；当钩端螺旋体侵入人体后，可刺激机体产生特异性抗体IgM/IgG，因此可利用敏感性、特异性均高的ELISA法对已知抗原及抗原致敏的固相载体来测定。

产品简介：钩端螺旋体IgM/IgG抗体检测试剂盒采用了ELISA双抗原夹心法测定血清标本中人钩端螺旋体IgM/IgG抗体水平,适用于疑似有表浅淋巴结肿大、发热、肌肉疼痛、全身乏力、眼结检验原理：本试剂盒利用酶联免疫吸附试验的双抗原夹心法测定标本中人钩端螺旋体抗体IgM/IgG(Lep-IgM/IgG)水平。

用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入钩端螺旋体抗体IgM/IgG (Lep-IgM/IgG)，再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的钩端螺旋体抗体IgM/IgG (Lep-IgM/IgG)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人钩端螺旋体抗体IgM/IgG (Lep-IgM/IgG)浓度。

试剂盒组成：1、酶标包被板1块×96孔2、标准品0.5ml×1瓶3、标准品稀释液 1.5ml×1瓶4、酶标试剂 6 ml×1瓶5、样品稀释液 6 ml×1瓶6、显色剂A液 6 ml×1瓶7、显色剂B液 6 ml×1瓶8、终止液6ml×1瓶9、浓缩洗涤液(20ml×30倍)×1瓶10、原版说明书1份11、封板膜2片12、密封袋1个贮藏有效期：试剂盒原包装储存于2-8℃，有效期为12个月。

准确检测幽门螺杆菌的方法幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）是一种广泛存在于胃内的螺旋状细菌，它常与胃炎、胃溃疡和胃癌等胃病相关。

准确检测幽门螺杆菌是确定感染与否、评估治疗效果以及预测胃病风险的重要手段。

目前，常用的检测方法主要包括非侵入性方法和侵入性方法两种。

一、非侵入性方法：1. 大便抗原检测（Stool Antigen Test）：该检测方法通过检测大便中的幽门螺杆菌抗原来判断患者是否感染幽门螺杆菌。

这种方法操作简便，无需专业人员进行采样，对患者无痛苦，适用于大规模筛查和监测感染情况。

然而，由于抗原能在粪便中存在较长时间，该方法的敏感性和特异性相对较低。

2. 尿素呼气试验（Urea Breath Test）：该方法依赖于幽门螺杆菌的尿素酶（urease）活性，患者饮用尿素标记物，然后通过呼气检测是否有尿素酶产生的氨。

该方法简单、非侵入性且敏感性高，但需要设备支持，且在饮食、抗生素使用等方面需要严格控制。

3. 血清抗体检测（Serology Test）：该方法通过测定血清中的幽门螺杆菌特异性抗体来判断感染情况。

这种方法方便、无痛苦，可以进行大规模筛查和初步评估，但其不能区分当前或过去的感染，也无法判断感染程度，且抗体对于特定人群可能有交叉反应，导致结果有一定的误判可能性。

4. 基因检测（Molecular Test）：该方法利用聚合酶链反应（PCR）技术，检测患者样本中的幽门螺杆菌的DNA或RNA。

这种方法灵敏度高、特异性好，可以准确检测幽门螺杆菌的存在，但需要专业实验室和设备支持，操作相对复杂。

二、侵入性方法：1. 胃镜检查（Gastroscopy）：胃镜检查是检测幽门螺杆菌的“金标准”方法之一。

通过将一根柔软的管子（胃镜）插入食管、胃到肠胃连接处，医生可以直接观察胃壁上的病变以及取样进行组织活检。

此方法准确率较高，可以判断感染情况以及对胃炎和胃溃疡等病变进行评估。

2. 组织活检（Biopsy）：在胃镜检查中，医生可通过组织活检钳采集胃黏膜组织进行检测。

幽门螺旋杆菌5种检测方法比较何周桃;谢贤和;韦红;蓝程【摘要】目的通过对5种幽门螺旋杆菌(Hp)检测方法的比较,寻求敏感性及特异性高、快速简便的Hp检测方法,促进Hp感染的早期诊断及治疗.方法对最近1个月内未使用过抗生素、质子泵抑制荆、H2受体阻滞剂等可能影响Hp检测结果的95例患者同步完成快速尿素酶试验(RUT)、细菌培养、13C-尿素呼气试验(13C-UBT)、血清学(幽门螺杆菌抗体Hp IgG)检查、Hp病理组织学检测等检查,以细菌培养、病理组织学检测中任何1项阳性为Hp感染阳性为诊断标准,比较RUT、细菌培养、13C-UBT、Hp IgG检查、Hp病理组织学检测5种检测方法检出的敏感度及特异度.结果敏感度以RUT最高(95.7%),其次为病理组织学(87.5%)、细菌培养(82.9%)、13C-UBT(78.1%),最低为Hp IgG(43.9%).特异度由高及低依次为细菌培养(96.3%)、13C-UBT(91.4%)、病理组织学(89.7%)、Hp IgG(70.4%)、RUT(65.7%).RUT检测、13C-UBT、病理组织学检测、细菌培养的敏感度与Hp IgG检潮的敏感度比较差异有统计学意义(P＜0.01),而RUT、病理组织学、细菌培养、13C-UBT检测的敏感度4者间差异无统计学意义(P>0.05).RUT检测的特异度与13C-UBT检测、病理组织学检测、细菌培养的特异度比较差异有统计学意义(P＜0.01),13C-UBT检测的特异度与Hp IgG检测的特异度相比差异有统计学意义(P＜0.01),而病理组织学、细菌培养、13C-UBT检测的特异度组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 13C-UBT检测的敏感度及特异度均较高,更能反映HP感染的变化状况,可作为临床诊断Hp的首选方法.%Objective With the comparison of five methods for Helicobacter pylorus(Hp) detection, trying to seek high, fast and simple ways in testing the sensitivity and specificity, thus to improve the early diagnosis and treatment.Methods The comparison wasmade with 95 patients who within one month had never applied antibiotics,proton pump inhibitors,H2-receptor blockers receptor which might affect the results of Hp detection.These patients finished simultaneously the detection of rapid urease test, bacteria culture, 13 C-urease breath test, Hp IgG antibody test (Hp IgG),histopathology examination.Any positive result either from bacteria culture or histopathology examination would be taken as the criteria in the diagnosis of Hp infection.The comparison data in the sensitivity and specificity from the five detecting methods were evaluated.Results The highest sensitivity was rapid urease test 95.7％,histopathology examination was ranked the second 87.5 ％, bacteria culture was 82.9％,13 C-urease breath test was 78.1％, the lowest was Hp IgG antibody test 43.9％.The comparison result of specificity from high to low was as follows: bacteria culture 96.3 ％, 13 C-urease breath 91.4 ％, histopathology examination 89.7％, Hp IgG antibody test 70.4％ ,rapid urease test 65.7％.The sensitivity of rapid urease test,13 C-urease breath test, histology examination,bacteria culture were significantly different from that of Hp IgG antibody test( P ＜0.01), while the sensitivities in rapid urease test,histopathology examination, bacteria culture,13C-urease breath test were no significant difference( P ＞0.05).The specificity of rapid urease test was significantly different from that of 13C-urease breath test,histopathology examination,bacteria culture( P ＜0.01).The specificity of 13 C-urease breath test was also different from that of Hp IgG antibody test ( P ＜ 0.01 ), while the specificities of the histopathology examination, bacteria culture, 13C-urease breath testshowed no significant difference( P ＞0.05).Conclusion The sensitivity and specificity of 13C-urease breath test are relatively higher, which shows clearly the changing status of Hp infection,and 13C-urease breath test has been regarded as the prior approach of clinical diagnosis for Hp infection.【期刊名称】《临床荟萃》【年(卷),期】2011(026)007【总页数】7页(P570-574,578,封2)【关键词】螺杆菌,幽门;诊断技术扣方法;敏感性与特异性【作者】何周桃;谢贤和;韦红;蓝程【作者单位】海南省人民医院,消化内科,海南,海口,570311;海南省人民医院,消化内科,海南,海口,570311;海南省人民医院,消化内科,海南,海口,570311;海南省人民医院,消化内科,海南,海口,570311【正文语种】中文【中图分类】R573.91982年澳大利亚学者Warren和Marshall首先从人胃黏膜中培养出幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp),并证实了Hp与胃十二指肠疾病有关,引发了胃十二指肠疾病防治策略的根本变革而获得了2005年度诺贝尔生理学/医学奖。

幽门螺旋杆菌标准值幽门螺旋杆菌是一种常见的胃肠道病原菌，也是胃癌和十二指肠溃疡的主要致病因素之一。

因此，对于幽门螺旋杆菌的检测和诊断具有重要意义。

下面是幽门螺旋杆菌检测的标准值及相关内容。

一、幽门螺旋杆菌检测标准值1. 快速尿素酶测试（RUT）：阴性2. 红细胞凝集试验（RBC）：阴性3. 呼气氢试验：正常值<20ppm4. 尿素酶链式反应（PCR）检测：阴性5. 幽门螺旋杆菌抗体检测（血清学）：血清幽门螺旋杆菌抗体IgG数值正常值<10IU/ml，IgA数值正常值<4IU/ml。

二、幽门螺旋杆菌检测方法1. 快速尿素酶测试（RUT）：该方法利用特定酶判定幽门螺旋杆菌存在的方法，需要从胃部粘膜分泌物中采集样本进行检测。

2. 红细胞凝集试验（RBC）：该方法通过测定幽门螺旋杆菌抗体处理红细胞的凝集能力来判定幽门螺旋杆菌是否存在。

3. 呼气氢试验：该方法是一种无创检测方法，通过检测呼气气体中氢气浓度的变化来判断幽门螺旋杆菌的存在。

4. 尿素酶链式反应（PCR）检测：该方法是一种高度敏感和特异性的分子生物学检测方法，能够快速准确地检测幽门螺旋杆菌。

5. 幽门螺旋杆菌抗体检测（血清学）：该方法通过检测血清中的IgG 和IgA抗体来判断幽门螺旋杆菌的感染情况。

三、幽门螺旋杆菌感染的症状常见的幽门螺旋杆菌感染症状包括：1. 腹痛和不适感。

2. 消化不良和胃灼热。

3. 恶心和呕吐。

4. 食欲下降和体重减轻。

5. 腹泻和便秘。

四、幽门螺旋杆菌感染的危害1. 导致胃炎和胃溃疡，甚至胃癌的发生。

2. 导致恶心、呕吐、腹泻等症状，严重者可能导致水分和电解质的失衡。

3. 幽门螺旋杆菌感染也与其他疾病如心血管疾病、胆囊炎、关节炎等有关。

五、幽门螺旋杆菌感染的预防和治疗1. 加强个人卫生，避免食用不洁食物和饮水。

2. 定期进行消化系统检查，避免病情进一步恶化。

3. 采用幽门螺旋杆菌治疗方案进行治疗，包括抗生素、质子泵抑制剂、降酸药等。

人幽门螺杆菌IgG （HP IgG ）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于检测人血清，血浆中幽门螺杆菌IgG（HP IgG水平，感染人的血液学诊断。

实验原理：本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA ）测定标本中人幽门螺杆菌IgG（HP IgG）。

用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中幽门螺杆菌IgG（HP IgG）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（0D值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人幽门螺杆菌IgG（HP IgG）的存在与否。

样本处理及要求：1•血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转份）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转份）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4 。

用液氮迅速冷冻保存备用。

酶联免疫吸附测定法（ELISA）1.定义 (3)2.原理 (3)2.1抗原抗体反应 (3)2.2免疫测定在临床检验中的应用 (5)3.ELISA的类型 (5)3.1双抗体夹心法测抗原： (6)3.2双抗原夹心法测抗体 (6)3.3间接法测抗体 (6)3.4竞争法测抗体 (7)3.5竞争性测抗原 (7)3.6捕获包被法测抗体 (7)3.7ABS-ELISA法 (8)4.ELISA试剂的组成 (9)4.1固相载体： (9)4.2包被的方式 (9)4.3包被用抗原：天然抗原、重组抗原、合成多肽抗原。

(10)4.4包被的条件： (10)4.5洗涤液： (10)4.7酶的催化性； (11)4.8结合物的制备 (11)4.9结合物的保存 (12)4.10酶的底物 (12)4.11酶反应终止液 (12)4.12参考标准品 (13)4.13加样： (13)4.14保温 (13)4.15保温方式： (13)4.16室温温育的反应 (13)4.17洗涤 (14)4.18显色 (14)4.19比色 (14)4.20酶标比色仪 (15)4.21结果判定 (15)4.22定量测定 (16)4.23ELISA的操作要点 (16)1.定义酶联免疫吸附测定法（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），简称ELISA，采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，对受检物质进行定性或定量分析的一种检测方法。

2.原理采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，可对受检物质的定性或定量分析。

2.1抗原抗体反应2.1.1可逆性抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：Ag+Ab→Ag·Ab抗体的亲和力（affinity），可以用平衡常数K表示：K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]，Ag·Ab 的解离程度与K值有关。

幽门螺旋杆菌感染4种检测方法的评价幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori）是一种常见的胃炎和胃溃疡的致病菌。

准确诊断幽门螺旋杆菌感染对于选择合适的治疗方法非常重要。

目前常用的幽门螺旋杆菌感染的检测方法主要有尿素呼气试验、血清抗体检测、尿素酶联免疫吸附法（ELISA）和组织生物学检测方法。

以下是对这四种方法进行评价的1200字以上的论述。

尿素呼气试验是一种常用的非侵入性检测方法，它通过测定患者呼出的气体中的尿素分解产物（碳13标记的二氧化碳）来判断幽门螺旋杆菌感染。

尿素呼气试验的优点是方便、简单、无创伤，并且准确率较高。

尿素呼气试验也可以用于检测治疗后的幽门螺旋杆菌感染的复发情况。

然而，尿素呼气试验的缺点是费用较高，需要专门的设备，并且需要患者具备呼气能力，适用性有一定限制。

血清抗体检测是一种常用的血清学检测方法，通过检测患者血液中的幽门螺旋杆菌特异性抗体（如IgG、IgM、IgA）来判断感染情况。

血清抗体检测的优点是操作简单，样本采集方便，并且可以同时检测多种感染标志物。

同时，血清抗体检测也具有较好的经济性，可以广泛应用于各种医疗机构。

然而，血清抗体检测的缺点是检测结果受到感染时间的影响，在治疗后的一段时间内，血清抗体水平可能仍然高于正常范围，因此不适合用于评估治疗的效果。

尿素酶联免疫吸附法（ELISA）是一种常用的组织学检测方法，通过检测患者尿液样本中的幽门螺旋杆菌尿素酶（urease）的活性来判断感染情况。

尿素ELISA的优点是准确率高，敏感性和特异性较好，同时具有较好的经济性。

尿素ELISA还可以应用于监测治疗效果和判断幽门螺旋杆菌感染的恢复情况。

然而，尿素ELISA的缺点是需要患者具备尿液收集的能力，并且在一些特殊情况下，尿素ELISA的结果可能会受到其他物质的干扰。

组织生物学检测方法是一种常用的侵入性检测方法，通过对消化道黏膜组织取样进行组织学检查或者病原学培养来判断感染情况。

血清抗幽门螺杆菌IgG抗体、胃蛋白酶原水平与胃癌发病的相关性分析曹雪源;贾志芳;马洪喜;所剑;李洋;姜晶【摘要】目的研究长春地区人群血清抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp) IgG 抗体、胃蛋白酶原水平和胃癌发病的相关性,为胃癌的防治研究提供依据和流行病学资料.方法选择2008年10月至2011年2月吉林大学第一医院明确诊断的450例原发性胃癌患者作为病例组,选择同时期体检中心1072例健康体检者作为对照组.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中Hp IgG抗体、胃蛋白酶原Ⅰ(PGI)和Ⅱ(PGII)的水平,确定Hp菌感染和萎缩性胃炎的发生状况.以PGI≤82.3 μg/L,同时PGI/PGII≤6.05作为萎缩性胃炎的诊断标准.结果胃癌组与对照组相比,Hp感染阳性率明显增高(69.1% vs.52.4%,χ2=36.1,P<0.001).胃癌组中血清PGI水平与对照组比较无显著差异(93.2 vs.88.9 μg/L,P＜0.001),而PGII浓度显著升高(15.9 vs.11.3 μg/L,P<0.001),同时PGI/PGII比值明显降低(5.4 vs.7.8,P<0.001).胃癌组中患萎缩性胃炎的比例明显高于对照组(31.4% vs.10.4%,P<0.001).多因素回归分析显示:在调整年龄和性别因素后,Hp感染和萎缩性胃炎均为胃癌发病的独立危险因素.结论本研究对象人群中Hp感染率,尤其是青年胃癌患者中Hp感染率仍然较高,Hp感染和萎缩性胃炎是胃癌发病的危险因素.与PGI相比,血清PGII浓度和PGI/PGII比值可能成为胃癌筛选的潜在血清学标志物.%Objective The aim of this study was to explore the distribution of Helicobacter pylori (H. pylori) in fection in heath controls and gastric cancer patients and their role of gastric carcinogenesis in Jilin province. Methods From October 2008 to February 2011, a total of 450 pathohistologically confirmed gastric cancer patients hospitalizing for surgical operation at First Hospital of JilinUniversity and 1 072 healthy controls attending the physical examination center, were included. The serum IgG anti- H. pylori titers and levels of pepsinogen I (PGI) and II (PGII) of the subjects were tested using ELISA kits. Results The rate of positive H. pylori IgG titers was higher in gastric cancer groups than that in healthy control groups (69. 5% vs. 52. 4% , P＜0. 001). The atrophic gastritis was more likely to be diagnosed in gastric cancer groups than those in the control groups (31. 4% vs. 10. 4% , P＜(0. 001). More subjects in gastric cancer groups had higher levels of PGII (15. 9 vs.11. 3, P＜0. 001) and lower ratio of PGI /PGII (5. 4 vs. 7. 8, P＜0. 001) than those in the control groups. In addition, multivariate logistic analysis suggested that H. pylori infection and atrophic gastritis were independent risk factor of gastric cancer. Conclusion The results indicating that the prevalence rate of H. pylori infection was remains high in Jolin province, especially for young patients of gastric cancer. The study also confirmed that both H. pylori infection and atrophic gastritis were linked to the risk of gastric carcinogenesis. Furthermore, compared to PGI, serum PGII concentration and ratio of PGI/PGII potential may become biomarkers for screening of H. pylori- infected gastric disease.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2012(016)006【总页数】3页(P1026-1028)【关键词】幽门螺杆菌;胃癌;胃蛋白酶原;血清学【作者】曹雪源;贾志芳;马洪喜;所剑;李洋;姜晶【作者单位】吉林大学第一医院,胃结直肠外科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院,临床流行病学研究中心,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院,病理诊断中心,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院,胃结直肠外科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院,临床流行病学研究中心,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院,临床流行病学研究中心,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R735.2幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）在胃癌的发病中起重要作用，检测血清抗Hp IgG抗体对胃癌筛查和早期诊断具有积极意义。

幽门螺杆菌感染的诊断方法及评价徐采朴一、幽门螺杆菌的分离培养方法自从Marshall及Warren 1982年首先由人胃粘膜分离培养幽门螺杆菌（Hp）以来，因其结果呆靠，已被认为是诊断Hp的“金标准”，用以评估其他诊断方法及体外试验。

1.标本收集与转送胃镜活检胃窦粘膜后应立即在培养平板上划线分离或置于转送基内，及早（最好小时内）进行分离培养。

2.将2－3块胃粘膜组织放在灭菌河沙中，加菌水研磨，以1000r/min离心3分钟，取上液再以35r/min离心20分钟，除上液，取沉淀物接种于含脑心的改良 SKirrow血琼脂平板上，置微氧环境（5％O2，80％N2，8％CO2，7％H2），湿度较充分的玻缸中，370C培养3－4天。

对可疑菌落（0.5-1.0mm大小的扁平菌落）作涂片染色和4种生化试验。

凡革兰染色阴性、菌形典型、且角酶、氧化酶、尿素酶等试验吴现阳性，而马尿酸钠水解试验吴阴性者，确诊为Hp。

凡7天培养仍无可疑菌落生长者为阴性。

3．Hp分离培养法是诊断研究的一基基本技术，但由于技术要求高、操作繁琐，时间长且阳性率不很高，敏感性70－92％，特异性100％，有胃镜取材之苦，故不列为临床诊断常规，而作为评价新的诊断方法、药物根除效果及体外筛检抗菌药物之用（体外药物敏感试验）。

二、组织学检查方法组织学检查亦被认为是诊断Hp的“金标准”，其敏感性93－99％，特异性96－99％，常用方法有：1.Warthin Starry 银染色法被认为是经典的方法，Hp呈黄色，菌体由于有银沉着而显增大，容易识别，敏感性及特异性均高，达95％左右，但技术度要求高，操作繁琐，价格刘而费时，有被取代之趋。

2．改良Giemsa染色法组织切片脱蜡，充分复水后，直接入2％Giemsa染液中30分钟后洗去染液，用100％乙醇脱水。

Hp呈紫红色，形态清晰易于辨认，效果与银染相似，甚至更好，并且操作简便，价廉省时，易于一般医院普及。