病毒学检验

病毒学检验知到章节测试答案智慧树2023年最新山东第一医科大学绪论单元测试1.病毒是一种专性细胞内寄生的非细胞型微生物。

（）参考答案:对2.病毒的种类较多，其中可以感染细菌的病毒我们称之为（）。

参考答案:噬菌体3.病毒学检验的一般原则包括（）。

参考答案:质量控制原则;足够的硬件设施;生物安全原则;标本的采集原则4.下列属于病毒直接检测方法的是（）。

参考答案:细胞病理学检测;病毒蛋白检测;电子显微镜技术;病毒核酸检测5.下列选项中，属于病毒学检验应用范围的是（）。

参考答案:病毒性传染病的的检验与检疫;新发病毒性疾病的病原和防治研究;病毒感染和病毒性疾病的诊断;病毒变异的研究6.新发传染病多是动物源性病毒性传染病。

（）参考答案:对7.病毒的变异类型包括遗传漂变（genetic drift）和遗传转移（genetic shift）两种类型。

（）参考答案:对8.下列因素中能够影响新发传染病发生与传播的有（）。

参考答案:病毒变异;国际旅行和商务;气候变化;公共卫生投入不足9.使用分子生物学检测新病毒核算室，需要用到非序列依赖性的方法，下列属于上述方法的是（）。

参考答案:病毒宏基因组学;随机引物PCR;简并PCR;非序列依赖性单引物扩增技术第一章测试1.在细胞培养系统中，培养一代细胞需要经过四个阶段，下列不属于这这四个阶段的是（）参考答案:游离期2.细胞在冻存时要掌握的原则是（）参考答案:慢冻快融3.常作为细胞培养液的指示剂是（）参考答案:0.4％的酚红溶液4.因为细胞培养液的营养丰富，更易于发生微生物污染，如细菌、真菌、支原体等，加（）可控制支原体的污染.参考答案:卡那霉素5.实验室器材的清洗过程正确的是（）参考答案:浸泡→刷洗→酸浸→冲洗6.从组织分离的原代细胞是一群对原有组织有较好代表性的细胞，但细胞间存在异质性，即差异性。

（）参考答案:对7.用胰蛋白酶做消化液时，浓度越大作用越强，对细胞的培养越有利。

病毒的特点：1、形体微小,能通过细菌滤器,用电子显微镜才能观察到;2、无细胞结构,其主要成分是核酸和蛋白质3、每种病毒只含有一种类型的核酸RNA或DNA4、因缺乏完整的酶系统和能源,故只能寄生于活细胞内,依靠宿主细胞的代谢系统合成蛋白质和核酸5、病毒以其基因为模板,在宿主细胞内复制出新的病毒颗粒6、为了在生物界保存其种属,病毒具备从一个宿主转移到另一个宿主的能力,并具有对敏感宿主的侵染性和复制性7、在宿主体外,能以大分子状态存在,并可长期保持其侵染能力8、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的基因组中,并能诱发潜伏感染体外细胞培养的基本条件：1、条件要求高,培养液组分复杂,需要添加血清才能满足生长需要2、避免微生物污染,需要在培养液中加入抗生素;3、体外细胞培养的基本要求主要包括细胞接种尽量选择对数期细胞接种、4、培养液营养成分、5、酸碱度能耐受的ph范围为6.6-7.8,依靠缓冲系统调节、6、气体条件细胞生长需要CO2 ,大规模培养需要有足够的氧气、7、温度最适温度为35-37;C、8、水的纯度一般要求去离子水或三蒸水、9、无菌条件等实验动物的微生物控制分类：1、普通动物,一级动物,要求不携带动物烈性传染病和人兽共患病病原2、清洁动物,二级动物,在一级动物要求上,不携带对动物危害大、对实验干扰大的病原体,外观健康,主要器官不得有组织病理学病变3、无特定病原体动物,三级动物,除普通动物、清洁动物不得携带病原体外,还要求排除潜在感染或条件致病菌的感染4、无菌动物,四级动物,要求在体内外不得检出其它生命体实验动物的遗传学分类1、近交系,指经过连续20代以上全同胞或亲子交配培育的动物品系2、封闭系,不从外界引入新的血缘,非近亲交配方式的实验动物群体3、突变系,由于遗传基因发生突变而具有某些特殊形状的动物4、杂交群动物,由不同品系杂交所产生的后代5、转基因动物,插入外源基因后能正常繁殖的动物大鼠、小鼠的采血方法1、剪尾采血,动物麻醉后,将尾端剪去约5mm,待血液流出采集,小鼠可每次采血0.1ml,大鼠约0.4ml2、眼眶后静脉丛采血,拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤固定,轻轻压迫颈部两侧,使眼球充分外凸;采血管插入眼角与眼球之间,向眼底方向刺入,切开静脉丛,血流即流入取血管;3、颈股动脉或颈股静脉采血,麻醉动物,剪去被毛,作颈静脉或劲动脉分离术后采血4、摘眼球采血,采血时,用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球凸出,右手用弯头镊子摘除眼球,迅速采集血液病毒的纯化方法：一般原则释放病毒至细胞外、去除细胞碎块、病毒悬液浓缩1、PEG浓缩法,包括直接加入法、液体浓缩法、固体浓缩法2、超过滤法3、吸附法,有凝胶吸附法、红细胞吸附法4、超速离心法中和试验及其应用是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物,使病毒与抗体相互反应,再将混合物接种到敏感的宿主体内,然后测定残存的病毒感染力的一种方法; 通常以100TCID50/单位体积或100LD50/单位体积作为标准的病毒试验浓度1、鉴定病毒、2、分析病毒抗原的性质、3、测定免疫血清的抗体效价和疫苗接种后的效果、4、测定病人血清中的抗体,用于诊断病毒性疾病鸡胚培养的优缺点优点1、组织分化程度低,病毒易于繁殖2、来源充足,其本身很少携带病毒和细菌,敏感范围广,对接种的病毒不产生抗体3、有神经血管的分布和脏器的构造缺点1、与除引起鸡胚死亡的病毒及产生痘疱的病毒外,通常不产生特异性的感染指症,必须通过另外的实验来证明病毒的存在2、鸡食入的抗生素会使某些病原体的繁殖收到抑制3、某些细菌和病毒能够从感染的鸡传递到鸡胚PCR聚合酶链反应基本反应体系和步骤反应体系：需要扩增的模板、与DNA靶序列3’末端互补的合成引物、4种三磷酸脱氧核糖核苷酸dNTP、耐热DNA聚合酶、合适的缓冲液体系;基本步骤与反应：1、变性,将反应体系混合物加热至94⁰C,维持约30~60秒,使待测双链DNA变性解链为单链模板;2、2、退火,冷却至特定的温度引物的Tm值左右,一般为45~65⁰C,一对寡糖核苷酸引物分别与正、负单链DNA序列两端互补结合;3、延伸,将温度提高至72⁰C并维持一段时间,引物在聚合酶作用下,以3´端为起点,4种dNTP 为原料,按碱基配对原则,沿5´→3´方向延伸,合成两条新DNA链;基因克隆以及基本步骤：利用酶将不同来源的DNA分子在体外进行特异性切割、重组连接、组成新的DNA重组子,导入宿主细胞,随着宿主细胞的繁殖从而得到大量自带DNA重组子或其表达产物;基本步骤：1、分离或合成目的基因2、将目的基因在体外插入载体形成重组DNA3、将重组DNA导入宿主细胞4、重组体的筛选、鉴定和分析乙肝病人血清学检测的五项指标：HBsAg表面抗原、抗-HBs表面抗体、抗-HBc核心抗体、HBeAg e抗原、抗-HBe e抗体乙肝病毒血清学检查三种主要抗体及其意义1、抗-HBe一般存在于无症状HBV携带者及活动期慢性肝炎患者中;2、抗-HBs：是HBsAg刺激机体产生的特异性中和抗体,是保护性抗体;阳性表明机体已经产生免疫力3、抗-HBc：包括抗-HBcIgM、抗-HbcIgG,前者是急性感染的重要指标,也是慢性活动肝炎的重要标志;阳性主要见于乙肝恢复期,慢性感染和既往感染;空斑形成单位PFUs试验：是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感染单位的浓度;凡是能在细胞培养物中产生CPE的病毒都可用空斑技术来测定其滴度;50%终点法：是将病毒悬浮液经一系列稀释后,接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞,将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做曲线,找出造成50%动物、鸡胚死亡或病变的终点稀释度;ID50：即是指可造成50%动物或鸡胚感染的剂量CCID50：造成50%细胞培养产生病变效应的剂量LD50：为造成50%动物或鸡胚死亡的病毒含量血凝试验HA：有些病毒和病毒表面的血凝素能引起人或某些哺乳动物的红细胞发生凝集,这就是所谓的红细胞凝集现象;当病毒数与红细胞数比值足够大时,病毒会与红细胞结合成网状,造成悬浮液沉淀或凝集血凝滴度HT：将红细胞与一系列病毒稀释液混合;造成凝血的最高稀释倍数即为血凝滴度电镜分辨率：是指分清楚两个点或两条线中心之间的最小距离的能力负染色技术：高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本,从而清楚的显示出被衬物的细节结构质粒：是存在于细菌染色体之外的、可自主复制的双链环状DNA,几乎完全裸露,易于分离纯化;核酸杂交技术：用特定标记的已知核酸序列与待测核酸进行特异性结合,形成杂交体,并体用相应的显示技术检测目标核酸的存在及其位置;Southern印迹杂交：一是将待测定核酸DNA分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物硝酸纤维素膜或尼龙膜上,即印迹blotting；二是固定于膜上的核酸与同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火,即分子杂交过程;步骤包括：1、待测核酸样品的制备与限制酶消化2、琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品3、电泳凝胶的预处理4、转膜5、探针标记6、预杂交与southern杂交7、洗膜8、放射性自显影检测;Nouthern印迹杂交：将RNA样品通过琼脂凝胶电泳进行分离,再转移到固相支持物上,用探针对其进行杂交,将具有阳性的位置与标准相对分子质量进行比较可得到RNA种类的数目、分子大小及丰度等信息;Ct值：值每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数,每个模板的Ct 值与其起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小;核酸探针：是指以研究和诊断为目的,带有标记物的已知序列的核酸片段,它能和与其互补的核酸序列杂交,用来检测特定序列核酸的DNA或RNA片段;Tm值：Tm值就是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度,Tm = 4℃G + C+ 2℃A + TCPE细胞病变效应：是病毒或接种分离标本后;细胞出现的病理性变化;不同的病毒可引起不同的细胞病变效应;干扰现象interference phenomenon：一种病毒感染细胞后,可以干扰另一种病毒在细胞内的增值;复性：变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的链又可重新结合成为双螺旋结构,这个过程称为复性;方法是缓慢冷却;。

药物制剂微生物检验一、概述药物制剂微生物检验是确保药品质量和安全性的重要环节。

它通过对药品制剂中微生物的种类、数量和活性进行检测和分析，确保药品符合相关法规和质量控制标准，保障公众的健康和安全。

本文将探讨药物制剂微生物检验的基本概念、检验方法和实际应用。

二、药物制剂微生物检验的基本概念药物制剂微生物检验主要包括细菌、真菌、病毒等微生物的检测。

这些微生物可能对药品质量和公众健康构成威胁。

例如，某些细菌和真菌可能会引起药品污染，而病毒则可能引发感染。

因此，进行药物制剂微生物检验是十分必要的。

三、药物制剂微生物检验的方法1、细菌学检验：通过培养、分离、鉴定细菌，检测细菌种类和数量，评估药品制剂的细菌污染程度。

2、真菌学检验：通过培养、分离、鉴定真菌，检测真菌种类和数量，评估药品制剂的真菌污染程度。

3、病毒学检验：通过检测病毒的核酸、蛋白质等成分，鉴定病毒种类和活性，评估药品制剂的病毒感染风险。

4、生物安全实验室：为了确保药物制剂微生物检验的准确性和安全性，通常需要在生物安全实验室中进行检验。

这些实验室具备特殊设备和条件，可以防止微生物外泄，保障检验人员的安全。

四、药物制剂微生物检验的实际应用1、新药研发：在新药研发过程中，药物制剂微生物检验有助于评估新药的抗菌、抗真菌和抗病毒效果，为新药的研发和优化提供依据。

2、药品质量控制：通过对药品制剂进行微生物检验，可以评估药品生产过程中的质量控制情况，确保药品符合相关法规和质量标准。

3、感染预防：通过对药品制剂进行病毒学检验，可以评估药品的抗病毒效果，为预防和治疗病毒感染提供参考。

4、公众健康保障：通过药物制剂微生物检验，可以保障公众使用的药品安全、有效，防止药品污染和病毒感染。

五、结论药物制剂微生物检验是保障药品质量和安全性的重要环节。

通过对药品制剂中微生物的种类、数量和活性进行检测和分析，可以确保药品符合相关法规和质量控制标准，保障公众的健康和安全。

未来，随着微生物检测技术的发展和药物制剂研究的深入，药物制剂微生物检验将在新药研发、药品质量控制、感染预防和公众健康保障等方面发挥更大的作用。

《病毒学检验》实验教学大纲
（供卫生检验专业使用）
一、实验教学的指导思想和教学目的
在理论学习基础之上，培养学生病毒检测的基本实验操作技能，提高实验的综合设计、分析能力。

二、实验教学的基本要求
原代细胞制备技术和细胞传代技术：了解细胞的保存方法；病毒鉴定技术：掌握血凝和血凝抑制试验鉴定病毒的原理，细胞病变的判断方法；鸡胚培养方法和鸡胚不同途径接种方法：掌握尿囊腔接种和尿液收获方法。

每组4人。

三、实验教材
卫生部规划教材《病毒学检验》第一版（李洪源主编，北京：人民卫生出版社，2006年）。

四、实验考核
实验成绩：实验教学过程成绩、实验报告成绩和操作考试分别占30%、30%和40%。

五、实验项目表。

乙肝患者病毒学检验的临床意义摘要】目的:探讨对乙肝患者实施病毒学检验的临床价值。

方法:将我院2014年12月-2015年12月收治的乙肝患者500例作为本次研究的实验对象。

针对所有患者临床展开病毒血清学检测，对所有乙肝患者的临床检测结果进行分析。

结果：对所有乙肝患者完成临床检测后发现，乙肝病毒表面抗原指标呈现为阳性的患者共包括424例，比例为84.80%；乙肝病毒表面抗体指标呈现为阳性的患者共包括76例，比例为15.20%；乙肝病毒核心抗体呈现为阳性的患者362例，比例为72.40%；乙肝病毒e抗体呈现为阳性的患者263例，比例为52.60%；乙肝病毒e抗原呈现为阳性的患者210例，比例为42.00%。

结论:针对乙肝患者，临床在实施疾病检查以及诊断的过程中有效实施病毒学检验，最终可以获得显著的诊断效果，并且表现出明显的准确性以及合理性，最终获得良好的乙肝疾病预防以及治疗效果。

【关键词】乙肝；病毒学检验；临床意义对于乙肝疾病如果未经及时治疗，伴随着患者疾病情况的严重，患者较易出现肝细胞受损、肝细胞坏死以及炎症的现象，严重的情况下会导致患者出现肝癌、肝硬化以及肝纤维化的现象。

进而对人们的身心健康以及生命安全造成严重威胁。

为了探讨对乙肝患者实施病毒学检验的临床意义，本文主要将我院2014年12月-2015年12月收治的乙肝患者500例作为本次研究的实验对象。

针对所有患者临床展开病毒血清学检测，具体检测结果分析报告如下。

1、资料与方法1.1一般资料将我院2014年12月-2015年12月收治的乙肝患者500例作为本次研究的实验对象。

其中男321例，女179例；年龄分布为19岁-63岁，平均年龄为（35.9±5.6）岁。

1.2 方法针对所有乙肝患者临床均实施病毒学检测。

在患者住院后的次日清晨，要求乙肝患者在空腹状态下对患者实施血液采集【1】。

为了确保临床检查结果始终准确，在准备对患者实施血液采集前，要求患者需要确保具有充足的睡眠，并且不服用任何药物进行干预，禁止患者饮酒以及吸烟，在饮食方面确保清淡【2】。

病毒学检验在乙型肝炎患者中实施效果评价1. 引言1.1 背景乙型肝炎是一种由乙型肝炎病毒（HBV）引起的传染性肝炎，全球范围内乙型肝炎的流行情况仍然较为严重，成为全球性公共卫生问题。

根据世界卫生组织的数据，全球约有2亿人感染乙型肝炎病毒，其中约有3500万人患有慢性乙型肝炎。

乙型肝炎对患者身体健康造成严重影响，甚至可能导致肝硬化、肝细胞癌等严重并发症的发生。

病毒学检验在乙型肝炎患者的诊断和治疗中发挥着重要作用。

通过检测患者的血清标志物、病毒DNA或RNA等指标，能够及时发现病毒的存在并评估感染的程度，从而指导医师进行个体化的治疗方案。

在乙型肝炎患者中对病毒学检验的实施效果评价仍然存在争议，有的研究认为其能够有效地指导治疗，提高治疗效果；而另一些研究则认为其在临床实践中并未显示出明显的优势。

本研究旨在对乙型肝炎患者中病毒学检验的实施效果进行评价，探讨其在临床实践中的意义及未来的发展方向。

通过本研究的开展，有望为乙型肝炎的诊断和治疗提供更为科学的依据，促进患者的康复和生活质量的提高。

1.2 研究目的本研究旨在评价病毒学检验在乙型肝炎患者中的实施效果，探讨其在临床应用中的价值和意义。

通过对乙型肝炎病毒的检测与监测，旨在提高疾病的诊断准确性和治疗效果，促进患者的康复和生活质量。

具体研究目的包括：评估病毒学检验在乙型肝炎患者中的准确性和敏感性；分析病毒学检验对乙型肝炎患者诊断和治疗的指导作用；探讨病毒学检验在乙型肝炎患者管理中的优势和不足；总结病毒学检验在乙型肝炎患者中的实施效果，为临床实践提供科学依据和决策支持。

通过本研究的深入探讨和分析，旨在为改进乙型肝炎的诊断和治疗策略提供新思路和方法，提升患者的预后效果，为临床实践和医疗服务提供更科学的指导和支持。

1.3 意义乙型肝炎是一种由乙型肝炎病毒引起的疾病，全球范围内有数亿人感染该病毒。

乙型肝炎病毒感染可能导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌等严重后果，对人类健康构成严重威胁。