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假白喉棒状杆菌

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白喉棒状杆菌

白喉棒状杆菌

白喉棒状杆菌（corynebacterium diphtheriae）1、★生物学特点：◆细长微弯，末端膨大，排列呈V 、L等，G+，无荚膜，无鞭毛，无芽孢。

◆异染颗粒：储存的核糖核酸和多磷酸盐颗粒（鉴定）◆吕氏培养基：生长迅速，细小灰白菌落，异染颗粒(metachromatic granules)，亚碲酸钾平板，黑色菌落（鉴定）2、致病性和免疫性：主要致病物质：白喉毒素。

◆毒性强，抑制细胞蛋白质合成，引起组织坏死和病变。

◆由β-棒状杆菌噬菌体毒素基因（tox+）编码，因此，只有携带β-棒状杆菌噬菌体毒素基因的溶源性白喉棒状杆菌才能产生白喉毒素。

◆tox+基因的表达和菌体内无机铁的含量密切相关，铁含量适量时，tox+基因表达，否则不表达。

◆tox+基因可经过细菌遗传和变异传给子代，丢失、获得。

3、白喉毒素的致病机制：。

4、传染：◆飞沫或污染物经过呼吸道传播，易感者：1~5岁的儿童。

◆临床表现：引起局部炎症：假膜；全身中毒症状:心肌炎、软腭麻痹等。

◆所致疾病：急性呼吸道传染病白喉，乙类传染病。

5、免疫性：接种疫苗、隐性感染、愈后→抗病毒免疫6、微生物学检查方法：采集标本：用绵拭子在假膜边缘取材；涂片镜检：典型的白喉棒状杆菌及其异染颗粒；分离培养：吕氏血清斜面：37度培养18小时可见1mm大小、湿润、灰白色的菌落，在亚碲酸钾培养基上培养一个小时，可见1~3mm大小的黑色菌落。

◆毒力鉴定:豚鼠试验，协同凝集试验，Elek平板毒力试验7、白喉的防止原则：白百破三联疫苗。

炭疽芽孢杆菌◆致病菌中最大的革兰氏阳性菌。

1.Shape and structure：◆革兰氏阳性菌（gram positive）◆似竹节状长链◆芽孢位于菌体中央◆形成荚膜是毒力象征◆无鞭毛，无运动2.培养特性：◆需氧或者兼性厌氧，不溶血◆含NaHCO3的血琼脂平板：有毒株会形成粘液性菌落，无毒株会形成粗糙型菌落。

◆在含有0.05U/ml的青霉素液体培养基中培养，使菌体呈串珠状，有鉴别意义。

常见微生物中英文对照名称

常见微生物中英文对照名称
乳酸乳球菌乳酸亚种
Lactococcus plantarum
植物乳球菌
Lactococcus raffinolactis
棉子糖乳球菌
Leuconostoc citreum
柠檬明串珠菌
Leuconostoc lactis
乳明串珠菌
Leuconostoc mesenteroides ssp. cremoris
巨大芽胞杆菌
Bacillus pumilus
矮小芽胞杆菌
Bacillus sphaericus
球形芽胞杆菌
Bacillus subtilis
枯草芽胞杆菌
Bacillus thuringiensis
斯润金芽胞杆菌
Brevibacillus brevis(was Bacillus)
短芽孢杆菌
Brevibacterium species
栖息微球菌
Lactococcus garvieae
格氏乳球菌（加氏乳球菌）
Lactococcus lactis ssp. Cremoris
乳酸乳球菌乳脂亚种（酪链球菌）
Lactococcus lactis ssp. Hordniae
乳酸乳球菌霍氏亚种
Lactococcus lactis ssp. Lactis
Staphylococcus lentus
缓慢葡萄球菌
Staphylococcus lugdunensis
路邓葡萄球菌
Staphylococcus pasteuri
巴氏葡萄球菌
Staphylococcus saprophyticus
腐生葡萄球菌
Staphylococcus schleiferi ssp. coagulans

《临床微生物学检验》第12章 棒状杆菌属

《临床微生物学检验》第12章 棒状杆菌属

对流免疫电泳
琼脂平板毒力试验-Elek平板
•体内法 ： 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验
锡克试验（Schick test） （白喉外毒素皮内试验）
调查人群在感染或预防接种后对白喉是否 产生免疫力
根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量 白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素
缺点—观察时间长、操作繁琐，不易进行 广泛测试
观察菌落 特点
吕氏血清斜面
涂片染色 生化反应 镜检
毒力试验
白喉棒状杆菌的检验程序
直接涂片染色镜检
-- 2～3张涂片→G染色、异染颗粒染色镜检 ——G +细长微弯的杆菌 一端或两端膨大呈棒状
常排列呈V、L、X等文字形 有异染颗粒 ——初报“直接涂片检出形似白喉杆菌” ——早期诊断 --用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本， 37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率
共同特点：
--大多不产生外毒素 --菌体较粗短，着色较均匀，很少有异染颗粒 --大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、
外阴、泌尿道和皮肤等处
--条件致病菌，可引起心内膜炎、菌血症、肺 炎、泌尿生殖道感染等
--鉴别——生化反应
心肌---心肌炎
白喉假膜
免疫性：
抗毒素免疫 感染后机体可获得牢固的免疫力
机体还可通过其他方式获得免疫力： 六月以下婴儿------母亲 成人---------------隐性感染、人工主动免疫
易感者： 1~5岁儿童 成人---也有可能
二、微生物学检验
分离出白喉杆菌，并证明其毒力 标本采集：
所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病
传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现
细菌------上呼吸道黏膜， 生长繁殖，产生毒素

细菌学检验-11-棒状杆菌属-4

细菌学检验-11-棒状杆菌属-4
其他
白喉假膜
此假膜在咽部与粘膜下组织紧密粘连不易 拭去。若假膜扩展至气管、支气管粘膜， 由于其上具有纤毛，假膜容易脱落气管内 而引起呼吸道阻塞窒息，早期致死的主要 原因。
外毒素致病，引起如心肌炎、软腭麻痹、 声嘶、肾上腺功能障碍等症状。约2/3患者 的心肌受损，多发生在病后2~3周，成为 白喉晚期致死的主要原因。
吕氏血清斜面：生长迅速，细小灰白菌落， 涂片染色异染颗粒
4．毒力试验
(1)琼脂平板毒力试验：
将含有20％牛血清肉汤琼脂注于平皿中 将浸有lOOu／ml抗毒素血清的滤纸条沉于琼脂内 在与滤纸条垂直方向将待检菌划线接种，同时接种
标准产毒株作为阳性对照。 37℃培养 24-48h 若菌苔两侧出现斜向外侧延伸的乳白色沉淀线，并
床单、玩具上可存活数天至数周。 – 5%石炭酸中１min、3% 来苏尔中10min
死亡。 –对青霉素、氯霉素、红霉素敏感。
二、致病性
1.致病物质--白喉毒素
产生：携带β-噬菌体白喉棒状杆菌带有编码外毒 素的tox基因，噬菌体侵入白喉棒状杆菌，在溶原 阶段tox基因即可整合到宿主染色体上，使之产生 毒素。
影响tox+基因的表达因素：(即白喉毒素的产生)与 菌体内无机铁含量密切相关。铁含量适量 (0.14μg/ml),tox+基因表达,否则铁含量高,tox+ 基因不表达。
毒素的结构：
–白喉毒素含有A和2个B 亚单位。
• B亚单位上有1个受体结合区和1个转位区，可作用 心肌和神经细胞，引起中毒性心肌炎和神经症状。
若两孔之间出现白色沉淀线，表明待检 菌为产毒菌株
此法比琼脂平板毒力试验敏感10—100倍， 适用于大批量标本的检测
(4)动物试验

微生物之棒状杆菌

微生物之棒状杆菌

体着染颜色不同，称为异染颗。颗粒的主要成分是核糖核酸和多偏磷酸盐，在鉴定时有重要意义。
但当细菌衰老时异染颗粒被消耗而不明显，且细胞壁变薄易被脱色，常造成革兰染色不定，有时可
表现为在革兰阴性的菌体中见有阳性颗粒或节段。
需氧或兼性厌氧。在血平板上可生长，菌落大小1~3mm。在含有凝固血清的吕氏血清斜面 上生长迅速，涂片染色异染颗粒明显。分离培养时常用亚碲酸钾血平板作为鉴别选择培养基。 因亚碲酸钾能抑制杂菌，而白喉棒状杆菌不受影响，并能吸收亚碲酸盐使其还原为黑色的金 属碲，菌落呈黑色。白喉棒状杆菌在亚碲酸钾血平板上可形成三种不同形态特征的菌落，分 别称为重型、轻型和中间型。三型的产毒株与疾病的轻重程度无明显的对应关系，但对流行 病学分析具有一定意义。在我国以轻型多见。
C．pseudodiphtheriticum C．ulcerans C．amycolatum C．striatum C．jeikeium
C．urealyticum C．xerosis
C．pseudotuberculosis C．bovis C．renale C．pyogenes
棒状杆菌与疾病
临床疾病与症状
特异性，现将dtxR作为白喉的首选鉴定靶点，rpoB作为备选，以区分白
喉和非白喉。换句话说，只要16S显阳性，排除假阳性的结果，就认为是 棒状杆菌属的细菌，再加上dtxR和rpoB显阳性，排除假阳性结果，就说 明是白喉，如果是阴性就说明是棒状杆菌的其他种，其他种在这不进行 细致的鉴定。
第七页，共22页。
—
与C. ulcerans 交叉
C. diphtheriae C. ulcerans
tox[2,5,6, 8,9,10,12 ,13,14]
白喉毒素

白喉棒状杆菌.ppt

白喉棒状杆菌.ppt
注射白喉类毒素。 目前国内应用白喉类毒素、百 日咳菌苗、破伤风类毒素的混合制 剂 (DPT 混合疫苗，又称白百破三 联疫苗) 。
2.人工被动免疫
与白喉病人密切接触的易感 儿童应肌肉注射白喉抗毒素进行 紧急预防。 方法：立即肌注白喉抗毒素
1000-3000单位。
（二）治疗
1.抗生素的应用
青霉素、红霉素,不仅能抑制 白喉棒状杆菌的感染，也能预防恢 复期带菌者的出现。
专性需氧 营养要求较高 , 血琼脂和巧 克力色琼脂平板上均不能生长
※
鲍-金 ( Bordet-Gengou, B-G) 培养基，内含
血液、甘油和马铃薯。
菌落特征：3-5天，形成细小、光滑、隆起、有珠
光色泽的菌落，周围有不明显的溶血环。
Ⅰ相菌有毒力，新分离的菌株有荚膜和菌毛，为光滑 型,称为Ⅰ相菌。
首选红霉素首选红霉素对治疗反应对治疗反应迟缓的患者迟缓的患者可合用利福可合用利福平等其他药平等其他药第四节百日咳鲍特菌bordetellapertussis生物学性状革兰染色阴性短小杆菌两端浓染单个或成对短链排列光滑型菌株有荚膜血琼脂和巧克力色琼脂平板上均不能生长bordetgengoubg培养基内含血液甘油和马铃薯
(2)特点：进程曲折，发展缓慢，直到20世纪30年代情况才发生变 化。
3．交通通讯变化的影响 (1)新式交通促进了经济发展，改变了人们的通讯手段和 ，出行 方式转变了人们的思想观念。
(2)交通近代化使中国同世界的联系大大增强，使异地传输更为便 捷。
(3)促进了中国的经济与社会发展，也使人们的生活 多。姿多彩
第七节 棒状杆菌属--ຫໍສະໝຸດ 喉棒状 杆菌------引起人类白喉的病原菌
一、生物学性状
1. 形态与染色

优选棒状杆菌属

成棒状 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 无鞭毛、无芽胞 排列不规则，呈栅栏状 白喉棒状杆菌——致病菌 类白喉棒状杆菌——条件致病菌
第一节 白喉棒状杆菌
C.diphtheriae
一、临床意义 致病物质
(一)白喉外毒素
毒力强，130ng/kg可使人死亡 抗原性强
编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬菌体
心肌---心肌炎
白喉假膜
免疫性：
抗毒素免疫 感染后机体可获得牢固的免疫力
机体还可通过其他方式获得免疫力： 六月以下婴儿------母亲 成人---------------隐性感染、人工主动免疫
易感者： 1~5岁儿童 成人---也有可能
二、微生物学检验
分离出白喉杆菌，并证明其毒力 标本采集：
分泌物 双份血清 如不能及时检验，标本浸于无菌生理盐水 或15%甘油生理盐水保存
患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等
直接涂片 染色镜检 （单染或 G 染色+ 异染颗粒 染色）
吕氏血清斜 面35℃12～ 18h
涂片染色 镜检(G 染色和异 染颗粒染 色）
亚碲酸钾 BAP、 35℃24～48h
BAP35℃ 16 ～ 18h
作用机制：
A亚单位可使细胞延伸因 子-2（EF-2）灭活，影响 蛋白质的合成 作用特点：
毒性作用大，1分子能杀 一个细胞
作用于多种细胞，心肌、 神经细胞均有毒素受体
肿瘤细胞对此毒素敏感
（二）索状因子
细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线 粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化
（三）K抗原
--细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 --抗吞噬 --有利于细菌在黏膜表面的定植
所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病
传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染 临床表现

白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序

白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序IDENTIFICATION OF CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE , CORYNEBACTERIUM ULCERANS AND CORNYNEBACTERIUM PSEUDOTUBERCULOSISISSUE NO :2 ISSUE DATE:03.02.06 ISSUED BY :Standards Unit, Evaluations andStandars LaboratoryTranslated Copy :复旦大学附属中山医院临床微生物中心本操作规程应当和Health Protection Agency的其它sop文件一起使用Email:hyacinth911@Page no: 1 of 9索引索引 (2)修订程序 (3)本文件主要内容 (4)介绍 (4)毒素特征鉴定原则1 安全事项 (6)2 目标菌株 (6)3 鉴定 (7)4 报告 (9)5 参考资料(略)ISSUE NO :2 ISSUE DATE:03.02.06 ISSUED BY :Standards Unit, Evaluations andStandars LaboratoryTranslated Copy :复旦大学附属中山医院临床微生物中心本操作规程应当和Health Protection Agency的其它sop文件一起使用Email:hyacinth911@Page no: 2 of 9修订程序本文件检索标号BSOP ID 2本文件标题白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序每一标准操作程序都有一个独立的修订记录.当前本文件的修订记录列在本页. 每一份调整文件都由实验室的校对人员来更新.修订数/ 日期废弃的发行号插入的发行号页码涉及的章节修订2/03/02/2006 1.1 2 7811章节1章节3.3章节6从DH Green Book参考表格内的试验步骤增加联系方式ISSUE NO :2 ISSUE DATE:03.02.06 ISSUED BY :Standards Unit, Evaluations andStandars LaboratoryTranslated Copy :复旦大学附属中山医院临床微生物中心本操作规程应当和Health Protection Agency的其它sop文件一起使用Email:hyacinth911@Page no: 3 of 9白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序文件主要内容:本sop介绍如何把咽喉、皮肤和其它部位的分离出来的棒状杆菌属鉴定到白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌种水平。

白喉棒状杆菌

索状因子cord factor：细菌表面的毒性糖脂
疾病
白喉（急性呼吸道传染病，乙类传染病）diphtheria:An acute infectious disease caused by the bacillus Corynebacterium diphtheriae, characterized by the production of a systemic toxin and the formation of a false membrane on the lining of the mucous membrane of the throat and other respiratory passages, causing difficulty in breathing, high fever, and weakness. The toxin is particularly harmful to the tissues of the heart and central nervous system.
应用：检查机体对白喉的免疫力，预防接种前的筛选与接种后效果观察流行病学调查
传染源
传染源:病人及带菌者，通过飞沫或接触传播
白喉棒状杆菌学名Biblioteka C.diphtheriae
种属
白喉棒状杆菌是棒状杆菌属(Corynebacterium)的一类。棒状杆菌属于放线菌，含有短链分枝菌酸。白喉棒状杆菌是致病菌。而类白喉杆菌（diphtheroid bacilli）=假白喉棒状杆菌(C.pseudodiphtheriticum)多为条件致病菌
气体
需氧或兼性需氧
菌落
吕氏培养基上生长迅速，形成细小、灰白色、湿润、圆形突起的菌落。在含0.03%-0.04%亚碲酸钾血琼脂培养基上能使其呈还原为元素碲，使得菌落呈黑色

棒状杆菌属


3.化告。 4.溃疡棒状杆菌可引起渗出性咽炎或 其他组织感染。
5.假结核棒状杆菌主要引起家畜的慢性
病，偶尔可引起人类的淋巴结炎、肺
炎等疾病。
6.溶血棒状杆菌可引起咽炎和皮肤溃疡 病。偶尔咽部感染很像门喉，包括粘
膜分泌物和扁桃体周围脓肿。
本群细菌形态与白喉棒状杆菌相似，
无异染颗粒或不明显。不分解尿素。
不液化明胶。能分解葡萄糖、麦芽糖、
蔗糖，不分解淀粉，触酶常阴性。
对万古霉素敏感，对头孢菌素类及氨
基糖甙类抗生素也敏感。
1. 假白喉棒状杆菌寄居于人类鼻咽部。可引 起心瓣膜修复术后的心内膜炎及肾移植病 人致死性尿道感染。
2. 结膜干燥棒状杆菌为人类眼结膜、鼻咽部 粘膜或皮肤的正常菌群，可引起心瓣膜置 换术后的心内膜炎，也可引起外伤后深部 组织感染。
4．毒力试验
(1)琼脂平板毒力试验：
将含有20％牛血清肉汤琼脂注于平皿中，将 浸有lOOu／ml抗毒素血清的滤纸条沉于琼脂 内，在与滤纸条垂直方向将待检菌划线接种， 同时接种标准产毒株作为阳性对照。37℃培 养 24—48h，若菌苔两侧出现斜向外侧延伸 的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株 的沉淀线相吻合，则为产毒株。
7.杰克群棒状杆菌为常见的医院内感染菌,是人
类皮肤正常菌群。从血液、组织、脑脊液、
腹腔液、泌尿生殖道和伤口感染等处分离培
养出的类白喉样菌群，统称J-K群。大多数感
染发生于颗粒细胞缺乏症、心脏手术病人，
而且常与应用静脉导管有关。
(五)免疫力检测
致敏红细胞凝集试验，取待检者血清 0.1ml在微量血凝板上作倍比稀释， 然后滴加外毒素致敏血细胞。经振
荡后置37℃ 1 h 后观察结果，敏感
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二、微生物特性
1.G-一端呈棒状,无荚膜无鞭毛，不形 成芽胞。菌体着色不均匀，用Neisser 法染色，出现深染的颗粒,与菌体颜色 不同为异染颗粒，主要成分是核糖核酸 和多偏磷酸盐，有鉴定意义。
2.需氧或兼性厌氧菌。在血平板上长出12mm、不透明的S型菌落。分离培养时常用鉴别 选择培养基含0.03％-0.04％亚碲酸钾的血平 板。亚碲酸钾能抑制杂菌，且白喉杆菌能吸收 亚碲酸钾使其还原为元素碲，菌落呈黑色。
一、临床意义
存在于患者鼻咽腔粘膜。传染源为患者 及带菌者，随飞沫或污染的物品传播， 感染后在鼻咽部繁殖,产生外毒素致病， 引起局部炎症,形成灰白色膜状物，称为 假膜。若伪膜脱落气管内，即可致呼吸 道阻塞窒息，成为致死原因。本菌不侵 人血流，但外毒素吸收入血造成毒血症。
白喉毒素具有强烈细胞毒作用，含有分 子量分别为24和39kD的A、B两个片段。 毒素活性位于A片段，由B片段携带转运 细胞内。白喉毒素对组织有选择性亲和 力，常侵人心肌及外周神经，故临床上 常有心肌炎和软腭麻痹等症状。病后有 高度免疫性。
(五)免疫力检测
致敏红细胞凝集试验，取待检者血清 0.1ml在微量血凝板上作倍比稀释， 然后滴加外毒素致敏血细胞。经振 荡后置37℃ 1 h 后观察结果，敏感 度可达10-4单位。
第二节 其他棒状杆菌
除白喉棒状杆菌外，在鼻腔、咽喉部、外耳 道、眼结膜、外阴和皮肤等处可见一些类似 白喉棒状杆菌的细菌，统称为类白喉棒状杆 菌。
菌落分为三型：①重型为不溶血、不规则、有 条纹。②轻型为β溶血、光泽、凸起。③中间 型为不溶血的小菌落，外形在重型和轻型之间。
三、微生物检验
1.标本采集 从假膜边缘采集分泌物，立即 送检。
2.标本革兰和异染颗粒染色镜检。如发现G+ 棒状杆菌，且有异染颗粒，可作“直接涂片 检出形似白喉棒状杆菌”的初步报告，为临 床早期诊断提供依据。
(4)动物试验
采用家兔皮内试验法。取待检菌的 48h肉汤培养液O．2ml，注射在去毛 的一侧体壁皮内，5h后注射500U白喉 抗毒素血清，30min后再次注射同样 的培养液于动物去毛的另一侧体壁皮 内作为对照。经24—72h后，若注射 抗毒素前接种培养液的部位发生红肿 与坏死，而对照部位不发生任何变化， 则说明待检菌株具有毒力。
4.溃疡棒状杆菌可引起渗出性咽炎或 其他组织感染。
5.假结核棒状杆菌主要引起家畜的慢性 病，偶尔可引起人类的淋巴结炎、肺 炎等疾病。
6.溶血棒状杆菌可引起咽炎和皮肤溃疡 病。偶尔咽部感染很像门喉，包括粘 膜分泌物和扁桃体周围脓肿。
7.杰克群棒状杆菌为常见的医院内感染菌,是人 类皮肤正常菌群。从血液、组织、脑脊液、 腹腔液、泌尿生殖道和伤口感染等处分离培 养出的类白喉样菌群，统称J-K群。大多数感 染发生于颗粒细胞缺乏症、心脏手术病人， 而且常与应用静脉导管有关。
对万古霉素敏感，对头孢菌素类及氨 基糖甙类抗生素也敏感。
1.假白喉棒状杆菌寄居于人类鼻咽部。可引 起心瓣膜修复术后的心内膜炎及肾移植病 人致死性尿道感染。
2.结膜干燥棒状杆菌为人类眼结膜、鼻咽部 粘膜或皮肤的正常菌群，可引起心瓣膜置 换术后的心内膜炎，也可引起外伤后深部 组织感染。
3.化脓棒状杆菌常可从牛、羊和猪的 化脓性损伤中分离到，人类感染已 有报告。
(2)SPA协同凝集试验
将白喉抗毒素IgG吸附在SPA上，加入待 检菌培养物，若有白喉毒素，则它可与 SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。此法 简易快速。
(3)对流电泳：
将已知白喉抗毒素和待检菌培养液 分置琼脂板两孔之中，电泳30min后， 若两孔之间出现白色沉淀线，表明 待检菌为产毒菌株。此法比琼脂平 板毒力试验敏感 10—100倍，适用于 大批量标本的检测。
一般无致病性或仅能引起混合感染。近年来， 由于使用免疫抑制剂和现代化检查手段，如 心导管术等，使这些条件致病菌可致医院内 感染，引起组织和血行感染，包括菌血症、 心内膜炎、骨髓炎等。
本群细菌形态与白喉棒状杆菌相似， 无异染颗粒或不明显。不分解尿素。 不液化明胶。能分解葡萄糖、麦芽糖、 蔗糖，不分解淀粉，触酶常阴性。
3.分离培养 将标本接种于亚碲酸血琼脂平 板,37℃培养18—24h后,呈现1mm、黑色或灰 黑色特点的典型菌落。
ห้องสมุดไป่ตู้
4．毒力试验
(1)琼脂平板毒力试验：
将含有20％牛血清肉汤琼脂注于平皿中，将 浸有lOOu／ml抗毒素血清的滤纸条沉于琼脂 内，在与滤纸条垂直方向将待检菌划线接种， 同时接种标准产毒株作为阳性对照。37℃培 养 24—48h，若菌苔两侧出现斜向外侧延伸 的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株 的沉淀线相吻合，则为产毒株。