临床检验技师临检基础知识讲解:ABO血型鉴定及交叉配血中常见错误
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ABO血型鉴定错误原因分析与质量控制方法目的总结探讨血型鉴定的影响因素。
方法对226例健康体检人群玻片法和试管法同时进行ABO血型鉴定。
结果两种方法检测结果不是完全相符,除AB 型两种方法检测结果基本一致外,其他血型(A型、B型、O型)的人數存在一定差异。
结论在血型鉴定中,如果出现正反定型结果不相符时,应找到对血型鉴定造成影响的因素,针对因素,采取措施。
标签:血型鉴定;影响因素;质量控制红细胞的两大血型抗原抗体系统是ABO血型系统和RH血型系统,这两大系统在临床输血和遗传学研究上的意义非常重要[1]。
血型鉴定正确与否是保证安全输血的前提。
生理盐水凝集法是临床最常用ABO血型鉴定方法,有玻片法和试管法两种方法。
本文主要对ABO血型鉴定中最常见出现错误原因进行分析及质量控制方法。
1 资料与方法1.1一般资料选择2014年1月~6月我院226例健康体检人群为研究对象,年龄20~28岁,平均年龄(24.3±3.7)岁。
所有研究对象均无严重的传染性疾病和血液疾病。
1.2标本采集抽取EDTA抗凝血后在2h内完成血型鉴定操作。
1.3血型试剂采用上海血液生物医药有限责任公司生产提供的ABO血型反定型用红细胞试剂盒;抗A、抗B血型鉴定单克隆抗体购置于长春博徳生物技术有限公司[2]。
1.4鉴定方法严格按照相关步骤方法进行操作。
1.5统计学方法采用SPSS11.5统计软件包进行相关数据处理,以均数±标准差(x±s)表示计量资料。
采用频数和率表示计数资料,采用χ2检验。
2 结果见表1。
由表1可以看出,两种方法对226名健康体检患者的血型检测结果基本上是一致的。
其中O型人数占比率最多,B型、A型人数次之,AB血型人数占比率最少。
除AB型血型两种方法的检测结果一致外,其他血型(A型血型,B型血型,AB型血型)的人数存在一定的差异。
3 讨论3.1红细胞方面的原因①血型检测时,因患者红细胞悬液过浓或过淡,使反应不明显,误判为阴性反应。
常见ABO血型报告错误原因分析发表时间:2011-02-17T10:33:47.683Z 来源:《中外健康文摘》2010年第35期供稿作者:刘丽云任志凤仲伟香[导读] 在此要求临床医生和护士必须严格执行查对制度,以保证临床输血安全。
刘丽云任志凤仲伟香(山东省寿光市人民医院 262700)【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)35-0210-01正确的ABO血型鉴定是临床安全输血的关键,若错误血型的血液一旦输入,则直接危及患者的生命。
我们分析了在工作中遇到的62例血型错误的原因与结果,现报告如下: 1.血型错误报告原因1.1血型测定的错误:血型检测时,因被检者红细胞悬液浓度不适当及离心速度太短,出现假阳性或假阴性结果,在此情况下,又不做反定型检测,使之在血型抗原较弱的情况下,未看到细小的凝集而造成定型报告错误。
1.2检验者工作粗心的错误:①工作时精力不集中,血液标本未编号使其张冠李戴或在填写血型结果时,因笔下误而造成血型错误。
②把ABO标准血清的“抗—A(B)”血清误认为A型(B型)血清,使之判定结果错误而造成血型报告错误。
1.3临床医生的错误:临床医生在填写输血申请单时,没有做血型检测,单凭患者自诉血型就填写而造成血型错误,或者拿错输血检验报告单,未认真核对患者信息而造成输血申请单上的血型错误。
1.4临床护士的错误:护士在抽取标本时,未认真核对患者姓名、床号等,抽错患者血样而造成血型报告错误。
1.5血站发血的错误:由于血站工作人员的失误而导致血袋上所标血型与血袋内的血液血型不符而造成血型的错误。
1.6疾病导致血型结果的错误:某些疾病可使受检者血液中含有较高的冷凝集素,而产生自凝现象,或由于疾病是患者红细胞上的抗原减弱而造成血型的检测错误。
2.讨论我们所调查的造成血型错误原因分类结果表明:69.4%(43/62)是由于检验者在血型鉴定检测时造成的差错,其中大部分是因工作责任心不强所致。
血型和输血红细胞AB0血型系统(一)AB0血型系统的抗原及抗体检查1.ABO血型抗原要点1:AB0抗原的遗传座位在第9号染色体的长臂3区4带,有A、B、O三个等位基因。
A和B基因对于0基因而言为显性基因,0基因为隐性基因。
父母双方如各遗传给子代一个基因,则可组成6个基因型;O0、AA、A0、BB、BO、AB;4种表现型:A、B、O、AB。
要点2:5~6周胎儿红细胞已可测出ABH抗原。
新生儿A、B抗原位点较成人少,一般在生后18个月时才能充分表现出抗原性,但抗原性也仅为成人的20%。
此外,ABH抗原频率亦随种族而不同。
所谓H抗原是形成A、B抗原的结构基础。
要点3:ABH抗原不仅存在于红细胞膜上,也可存在于白细胞、血小板及其他组织细胞上。
ABH血型特异物质存在于唾液(含量最丰富)、尿、泪液、胃液、胆汁、羊水、血清、精液、汗液、乳汁等体液中,但不存在于脑脊液。
这些可溶性抗原又被称为“血型物质”。
要点4:血型物质意义:①测定唾液血型物质,可辅助鉴定血型。
②中和AB0血型系统中的“天然抗体”,有助于检查免疫性抗体,鉴别抗体的性质。
③检查羊水可预测胎儿AB0血型等。
2.AB0系统抗体要点1:AB0系统抗体分天然抗体与免疫性抗体:天然抗体是在没有可觉察的抗原刺激下而产生的抗体,以IgM 为主,又称完全抗体或盐水抗体;也可能是由一种无觉察的免疫刺激产生而得。
免疫性抗体:有IgM、IgG、IgA,但主要是IgG。
抗A和抗B可以是IgM与IgG,甚至是IgM、IgG、IgA的混合物,但主要是IgM,而0型血清中以IgG为主。
要点2:天然抗体和免疫抗体的主要区别:(1)天然抗体能被血型物质中和,而免疫性抗体则不能;(2)天然抗体在盐水中能与相应红细胞发生肉眼可见凝集,而免疫性抗体则不能;(3)天然抗体不通过胎盘,而免疫性抗体能通过胎盘。
要点3:O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体,还含有一种抗A、B抗体。
它与A型或B型红细胞都能凝集,但当用A或B型红细胞分别吸收时,不能将其分为特异的抗A和抗B。
血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理包括:一、血型相容性检测二、ABO血型正反定型型不一致的原因分析及处理三、交叉配血中常见问题分析及处理四、意外抗体筛选的意义和检测方法五、弱D检测的的意义和检测方法一、血型相容性检测1、受血者和供血者AB0血型是否相容。
2、受血者和供血者RhD血型是否相容。
3、主次侧交叉配血是否相容。
4、受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体。
二、ABC正反定型不符的原因分析和处理(一)原因1.实验者操作技术的错误:导致假阴性的有:①未加入抗体或血清。
②未识别溶血。
③血清与红细胞比例不当④离心速度或时间不够。
⑤使用失效或错误试剂。
⑥实验结果记录或解释错误导致假阳性的有:①离心速度过大或时间过长、②使用了受到细菌污染的试剂、③试验器皿不干净、④实验结果记录或解释错误2、红细胞标本问题:①患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞,如骨髓移植患者,或非0型人接受0型红细胞②某些ABC基因变异的个体或ABC亚型红细胞,一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABC抗原太弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期的凝集反应③红细胞获得性或遗传性的异常,如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞,人血清抗-A、抗-B试剂可能与这些异常的红细胞反应④使用未洗涤的红细胞标本,其表面黏附的血浆或血清中含针对抗- A、抗-B试剂中染色剂或其他成分的抗体,出现假阳性反应⑤患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏(包被)自身红细胞,以至自发地发生凝集,而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致⑥红细胞表面包被IgG类抗体3、血清标本的问题:①小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集,如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。
②免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。
老年人ABC抗体减弱③4-6月龄内婴儿血清中ABC抗体阴性或很弱,一般只测正定型④血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集,如缗钱状红细胞的非特异凝集⑤血清中含抗—A、抗—B以外的其他红细胞抗体,如抗—M抗—I等。
ABO 血型鉴定实验中的问题及对策徐立峰(山东协和学院医学院济南250000)摘要本文阐述了在中学ABO 血型鉴定实验过程中会发生的实验结果与预期结果不一致的情况:一种是血型鉴定与采血机构 或医院鉴定的结果不一致;另一种是与根据父母血型或遗传规律推导出来的结果不一致。
本文分别从原因和对策两个方面进行讨论遥关键词血型遗传ABO 血型鉴定结果不一致原因及对策ABO 血型鉴定实验受到了师生的欢迎,尽管不是 中学规定的实验,但有些教师会把它作为自选实验。
ABO 血型鉴定的方法有多种,学生实验一般会采用玻片法、试管法,这两种方法便于观察红细胞凝集现象。
其中,玻片法操作简单、无需离心设备,在学生实验中 更为常用,该方法可采用人ABO 血型单克隆抗体代替 人血清ABO 血型抗体。
实验操作并不复杂,耗时也较短,但部分实验者会 出现血型鉴定结果与预期结果并不一致的状况:一种 情况是血型实验鉴定结果与采血机构或医院鉴定的结 果不一致;另一种情况是与根据父母血型或遗传规律 推导出来的结果不一致。
有些学生甚至会怀疑是否与 父母有着血缘关系,因而会产生焦虑症,影响身心健 康。
1血型鉴定与医院鉴定的结果不_致1.1原因采血机构和医院对血型的鉴定,是由专业 人员进行的,检测条件控制的非常严格,操作规范、方 法先进,并做正反定型,对正反定型不一致的疑难血型 会做进一步的检测,因而准确率远高于学生的实验。
影响学生血型鉴定实验准确性的因素一般有以下几种:(1)试剂已过有效期或保存不当而失效。
单抗是蛋白质,高温下长时间放置会因变性而失效,受微生物 污染会导致腐败变质。
(2)实验条件与方法受限。
为简化操作或缺乏相关设备和材料,加全血而不对红细胞进行洗涤,只进行 正定型不进行反定型。
玻片法由于无离心加速反应, 容易忽视较弱的凝集而导致定型错误。
不进行镜检, 靠肉眼观察为无凝集,镜检下仍有可能表现为显著凝 集。
(3)操作不规范。
抗体试剂与红细胞比例不合适,血液过多,未能被抗体试剂完全覆盖而发生凝固。
交叉配血不合格标本原因分析1.人工操作失误:在进行交叉配血时,若操作不规范或者操作人员技术不熟练,可能会导致试验结果的偏差或错误。
例如,未按照标准程序进行试验,未正确读取试验结果,或使用过期试剂等。
2.血样标本问题:血样标本质量不良也可能导致交叉配血不合格。
例如,血样保存不当导致血细胞破坏或凝集,或者血样未经适当处理导致样本不纯净。
3.抗人球蛋白试剂问题:抗人球蛋白试剂的质量也会影响交叉配血的结果。
试剂的储存条件、保质期以及使用方法都会影响试验结果的准确性。
若试剂不符合规范要求,或者试剂使用不当,都可能导致交叉配血结果的误差。
4.抗原抗体状况:交叉配血不合格的一个重要原因是供者和受者之间存在不相容的抗原抗体反应。
根据人类血型系统的差异,如ABO血型系统和Rh血型系统,如果供者和受者之间的血型不匹配,那么交叉配血结果可能会不合格。
5.免疫异常:一些免疫性疾病或免疫障碍患者可能存在特殊的抗体问题,导致其交叉配血结果不合格。
例如,患者可能存在自身免疫性溶血性贫血、多发性骨髓瘤等疾病,或受到免疫抑制治疗等。
6.患者抗体问题:患者可能在之前的输血或妊娠等情况下产生了特异性抗体,这些抗体与供者血液中的抗原发生反应,导致交叉配血结果不合格。
这种情况需要进行特殊的免疫学检测和配血方法,以避免血液不相容反应的发生。
7.与其他因素有关:除了以上几个主要原因外,还有其他许多因素可能导致交叉配血不合格标本的出现。
例如,药物干扰、疾病状态、体温和pH值等因素也可能影响交叉配血结果。
为了减少交叉配血不合格的风险,可以采取以下措施:1.加强操作规范和培训:对操作人员进行规范的培训,提高其技术熟练度和操作水平,确保操作流程的正确性和准确性。
2.提高质量控制:确保试剂的质量符合规定,储存和使用符合标准要求,设立质量控制指标,定期检验试剂的稳定性和准确性。
3.加强样本管理:对于血样标本的采集、保存和运输要求,严格遵循操作规范,保证样本质量达到要求。
1.分型血清方面的原因
(1)自制分型血清抗体:效价太低、亲和力不强,造成定型不准确。
(2)患者纤维蛋白原增高或为异常蛋白血症:如多发性骨髓瘤,巨球蛋白血症等,可产生缗线状假凝集。
新生儿脐血中含有华顿胶或操作中使用了质量差的玻璃管(瓶),误认其脱下的胶状硅酸盐为串钱状凝集。
(3)患者输入了高分子血浆代用品或静脉注射造影剂等药物:可引起红细胞聚集,易误认为凝集。
(4)血清中可能存在的不规则抗体:如A2和A2B型患者血清内有抗A1抗体,能凝集A1红细胞。
此外还有抗Ⅰ抗体等。
有些癌症患者(如胃癌、胰腺癌等)血中含有大量可溶性A或B物质,这些物质可中和抗血清的抗体,从而抑制反应。
造成假性不凝集。
克服的办法是红细胞先洗涤后再试验。
(5)婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲获得的血型抗体:新生儿不宜用血清作反定型。
(6)老年人血型抗体水平下降:某些免疫缺陷的人或慢性淋巴细胞白血病,遗传性无丙种球蛋白血症以及有些用了免疫抑制剂的患者,由于免疫球蛋白下降,血型抗体也下降甚至缺如。
可出现反向定型错误。
2.红细胞方面的原因
(1)用近期内输过血的患者血液做对照红细胞:此时,患者血液红细胞为混合型细胞。
(2)患者红细胞被大量抗体包被:例如某些自身免疫疾病或新生儿溶血病患者的红细胞,或红细胞悬浮于高浓度蛋白的介质中,红细胞都会自发地发生凝集。
(3)红细胞膜有遗传性或获得性异常。
(4)抗原变异:A或B的弱抗原易判为不凝集(假阴性),而由细菌引起的获得性类B 抗原易误判为阳性。
有些细菌含有乙酰基酶,能使特异性A型物质末端的N-乙酰氨基半乳糖水解成半乳糖,从而使A型获得类B抗原后易误定为AB型。
由于患白血病或某些恶性肿瘤使A或B抗原变弱。
婴儿及老年人的红细胞抗原也较青壮年为弱。
(5)血清中有高浓度血型物质:当用血清配制红细胞悬液时,血型物质则会中和分型血清中的抗体,而不再与红细胞抗原起反应。
(6)红细胞被细菌污染:细菌的酶消化了红细胞表面的唾液酸,暴露了人人都有的T 抗原,被具有抗T活性的IgM凝集。
(7)嵌合体现象:混合细胞群见于异卵双生子。
如,有98%O型红细胞,2%B型红细胞会定为O型,但血清中只有抗A抗体。
3.操作方面的原因:是最常见原因。
(1)操作器材:玻璃器皿不洁或使用了严重污染的血清、红细胞,可出现假阳性。
试管污染洗涤剂会造成假阴性。
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